CC BY
13
I
SCIENCE TIME
I
ОПТИМИЗАЦИЯ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ГИДРОКСОКОБАЛАМИНА
Абдуллаева Нилуфар Кахрамоновна, Хусаинова Райхона Ашрафовна, Пшеничнов Егор Александрович, Кондрашева Ксения Валентиновна, Ташкентский фармацевтический институт, г. Ташкент, Республика Узбекистан
E-mail: abdullayevd@mail.ru
Аннотация. Широкое применение в последние десятилетия препаратов на основе метилкобаламина и гидроксокобаламина - метаболитов цианокобаламина - обусловлено их более выраженным терапевтическим действием. Химически активные вещества вступают в биохимические процессы жизнедеятельности организма без предварительных метаболических превращений [1].
Однако высокая реакционная способность этих веществ ставит перед специалистами задачу поиска оптимальной лекарственной формы с минимальным количеством стабилизаторов и консервантов, которая позволит сохранить лечебный эффект метаболита витамина В12.
Цель: окончательный подбор режима лиофилизации препарата, содержащего гироксокобаламин.
Материалы и методы исследования:
В работе были использованы образцы коммерчески доступных субстанций гидроксокобаламина хлорида производства «Apex Medichem Ltd.» (Индия), D-маннитола производства «Shandong Tianli Pharm. Co. Ltd.» (Китай), химические реактивы фирмы «Sigma-Aldrich» (США) и «Hi-Media» (Индия).
Подготовка образцов к замораживанию: растворы разливали по 1 мл в стеклянные флаконы вместимостью 5 мл (класс стекла: НС-1) производства «Neo-Tech-Plast» (Республика Узбекистан). Лиофилизацию образцов и укупорку флаконов с лиофилизатом бромбутиловыми пробками с комбинированными алюминиевыми колпачками производили на автоматизированном конвейерном оборудовании «Tofflon» (Китай).
Испытания физико-химических свойств готового препарата и количественное определение действующего вещества проводили в химической лаборатории Отдела контроля качества фармацевтического завода СП «Jurabek Laboratories» (Республика Узбекистан) в соответствии с требованиями Европейской Фармакопеи [2].
»
61
1 SCIENCE TIME 1
Количественное определение гидроксокобаламина проводили методом ВЭЖХ на приборе «Agilent Technologies» (Германия).
Результаты:
Согласно EurPh. 9.0 гидроксокобаламин (ГКБ) умеренно растворим в воде (1:10-30) [2] и практически нерастворим в ряде органических растворителей [3], применяемых для лиофилизации. Учитывая вышесказанное, а также то, что разрабатываемый препарат планируется выпускать в форме лиофилизата для приготовления инъекционного раствора, в качестве пригодного растворителя выбрана вода для инъекций.
В предыдущих исследованиях [4] было установлено, что наиболее подходящим вспомогательным компонентом для улучшения растворимости ГКБ является криопротектор D-маннитол, вводимый в концентрации 0,080 г/фл. Изучение влияния режимов замораживания (быстрый и медленный) испытуемых растворов показало, что данный параметр не оказывает существенного влияния на качество готового лиофилизата.
В продолжении исследований были подобраны окончательные оптимальные режимы лиофильной сушки препарата на основе ГКБ с учетом дальнейшего масштабирования технологии. Для этого изучали влияние режимов нагрева растворов в процессе лиофильной сушки на показатели качества готового лиофилизата.
Было апробировано 4 режима с разной скоростью нагрева при давлении 0,01 мбар. Для каждого режима использовали 5 серий препарата, содержащего ГБК и D-маннитол по 5 образцов в каждой серии, используя технологические схемы, указанные в таблице 1.
По окончании лиофильной сушки вакуум в лиофильной камере гасили стерильным воздухом, пропущенным через фильтр MF-Millipore с размером пор 0,22 мкм. Флаконы с лиофилизатом гидроксокобаламина доставали с полки и укупоривали стерильными бромбутиловыми пробками.
Таблица 1
Схемы нагрева растворов гидроксокобаламина хлорида с криопротектором при лиофилизации
Температура, °C Режим лиофилизации и скорость нагрева полки лиофильной сушилки (°С/ч)
№ 1 № 2 № 3 № 4
-50 Выдержка в течение 5 часов при давлении 0,01 мбар
от -50 до -10 5 10 2 5
от -10 до 0 2 5
от 0 до +20 5 5 5 5
+20 Выдержка в течение 5 часов при давлении 0,01 мбар
Общее время лиофилизации, ч 27 20 39 24
»
62
1 SCIENCE TIME 1
В результате проведенных исследований показатели качества всех исследуемых образцов соответствовали нормам для инъекционных лекарственных форм. Количественное содержание гидроксокобаламина значительно не менялось и варьировало в пределах от 9,92±0,02 до 9,96±0,02 мг/ фл.
Учитывая полученные результаты, а также высокие энергозатраты, сопровождающие технологический процесс, в целях экономии электроэнергии, режим № 2 был признан наиболее целесообразным для лиофилизации гидроксокобаламина.
В результате серии экспериментов по подбору оптимальных условий лиофилизации растворов ГКБ, выбран режим со следующими параметрами:
Замораживание: охлаждение за 1 ч до -25 °C, далее за 1 ч - до -35 °C, за 1 ч - до -45 °C, и за 1 ч - до -50 °C. Последующая выдержка препарата при данной температуре в течение 5 ч [4].
Нагрев: от -50 °С до -10 °С со скоростью 10 °С/ч. От -10 °С до 0 °С со скоростью 5 °С/ч, а от 0 °С до +20 °С со скоростью 5 °С/ч. Последующая выдержка препарата при данной температуре в течение 5 ч. Вывод:
Подобран оптимальный режим лиофилизации препарата на основе гидроксокобаламина с и D-маннитолом в качестве криопротектора.
Литература:
1. Hall CA, Begley JA, Green-Colligan PD. The availability of therapeutic hydroxocobalamin to cell. Blood. Feb, 63(2), 335-41. 1984.
2. European Pharmacopoeia (Eur.Ph.) 9.0 Edition.
3. URL: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Hydroxocobalamin#section=Solubility
4. Abdullaeva N.K., Pshenichnov E.A., Kondrasheva K.V. Optimization of technological parameters for the preparation of a lyophilized hydroxycobalamin dosage form. Glob. J. Med. Med. Sci. Dec. 2019, Vol. 7(9), 538-540.
