CC BY
53
УДК 615.074-322
Т.С. серебрянская, Г.Г. Николаева
определение состава фенольных соединений полиэкстракта сухого методом вэжх
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
С помощью высокоэффективного жидкостного хроматографа (ВЭЖХ) был установлен качественный и количественный состав фенольных соединений полиэкстракта сухого, обладающего нейропротекторным. действием.
Ключевые слова: растительное нейропротекторное средство, состав фенольных соединений
DEFiNiTioN oF STRucTuRE oF pHENoLic coNNEcTioNS poLYExTRAcT DRY by method hplc
T.S. Serebryanskaya, G.G. Nikolayeva
Institute of the general and experimental biology of the SB of the RAS (Ulan-Ude)
HPLC method, established, qualitative and quantitative structure of phenolic connections of a polyextract dry, havingneuroprotective action.
Key words: vegetative neuroprotective action means, structure of phenolic connections
Нами разработана композиция из девяти лекарственных растений, обладающая нейропротекторным действием. В ее состав вошли астрагал перепончатый Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge, боярышник кроваво-красный Crataegus sanguinea Pall., календула лекарственная Calendula officinalis L., облепиха крушиновидная Hippophae rhamnoides L., солодка уральская Glycyrrhiza ura-lensis Fisch., солянка холмовая Salsola collina Pall., черника обыкновенная Vaccinium myrtillus L., шиповник собачий Rosa canina L., шлемник байкальский Scutellaria baicalensis Georgi.
По данным обзора литературы все перечисленные растения в своем составе содержат большое количество биологически активных веществ, в том числе флавоноидов [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11].
Флавоноиды являются одной из самых распространенных групп фенольных соединений. Благодаря высокой биологической активности, обусловленной отсутствием в молекуле активных фенольных и карбонильных групп, они подвергаются различным биохимическим изменениям и принимают участие в ряде биологических процессов. Рекомендовано применение пищевых полифенольных антиоксидантов, в том числе и флавоноидов, для торможения свободнорадикальных реакций при злокачественном росте, облучении и старении [7].
Из композиции был получен полиэкстракт сухой.
Целью настоящей работы являлось определение качественного и количественного состава фенольных соединений полиэкстракта сухого.
методика
Изучение качественного состава фенольных соединений экстракта композиции сухого проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы GILSTON, модель 305, Франция;
инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 ША с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы МиШСМот для Windows.
В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка размером 4,6 х 250 мм Кромасил С18, размер частиц 5 микрон.
В качестве подвижной фазы метанол — вода — фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400 : 600 : 5. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 120 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора GILSTON UV/VIS, модель 151, при длине волны 254 нм.
Для исследования: около 0,6000 г (точная навеска) экстракта композиции сухого помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 20 мл 70% спирта этилового, помещали в ультразвуковую баню и перемешивали при температуре 50 °С в течение 15 минут. Объем раствора доводили до метки тем же растворителем (исследуемый раствор).
Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения в 70% спирте этиловом: рутина, кверце-тина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, коричной кислоты, цикориевой кислоты, гиперозида, геспередина, апигенина, феруловой кислоты, изоферуловой кислоты, вицеина, витек-сина, неохлорогеновой кислоты, робинина, диги-дрокверцитина, катехина, ориентина, байкалина, кислоты глицирризиновой, танина, кумарина.
По 20 мкл исследуемого раствора и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали по приведенной методике.
результаты
Результаты проведенных исследований приведены в таблице 1 и на рисунке 1.
Таблица 1
Результаты исследования фенольных соединений экстракта композиции сухого методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии
Время удерживания, мин Высота, mV Площадь, mV *сек ФО Концентрация, % Название
3,435 560,12 9189,52 1,000 11,94 танин
3,999 511,90 11334,17 1,000 14,72 галловая кислота
5,196 73,09 3131,39 1,000 4,07 хлорогеновая кислота
6,314 33,41 1315,81 1,000 1,71 кофейная кислота
6,889 33,73 805,52 1,000 1,05 цикориевая кислота
7,320 31,20 1455,45 1,000 1,89 ферулловая кислота
8,792 47,13 2455,48 1,000 3,19 рутин
10,670 60,42 4482,99 1,000 5,82 неизвестно
11,610 27,46 1281,09 1,000 1,66 неизвестно
13,170 22,65 1755,71 1,000 2,28 байкалин
14,100 22,99 1022,59 1,000 1,33 лютеолин-7-гликозид
16,580 43,81 4005,60 1,000 5,20 гиперозид
18,110 9,41 466,41 1,000 0,61 лютеолин
19,910 12,50 919,22 1,000 1,19 витексин
20,770 13,46 899,65 1,000 1,17 глицеризиновая кислота
22,330 10,22 991,97 1,000 1,29 байкалеин
25,920 11,42 993,63 1,000 1,29 кверцетин
29,290 150,05 1690,51 1,000 2,20 дигидрокверцетин
36,810 11,94 1695,09 1,000 2,20 неизвестно
32,820 12,20 13218,61 1,000 17,17 кумарин
41,180 3,43 757,17 1,000 0,61 неизвестно
42,770 1,19 98,04 1,000 0,13 неизвестно
44,740 1,27 137,20 1,000 0,18 неизвестно
48,180 1,75 254,66 1,000 0,33 неизвестно
51,040 2,54 292,22 1,000 0,38 неизвестно
54,800 8,60 957,88 1,000 1,24 неизвестно
57,780 3,89 423,62 1,000 0,55 кемпферол
61,110 7,18 705,18 1,000 0,92 неизвестно
66,910 24,15 3074,04 1,000 3,99 апигенин
76,290 32,62 4001,33 1,000 5,20 нарингенин
83,900 1,43 214,53 1,000 0,28 неизвестно
104,400 16,36 2495,13 1,000 3,24 неизвестно
93,310 2,85 472,84 1,000 0,98 неизвестно
109,100 1806,38 76994,25 0,050 100,00
выводы
В результате проведенной работы установлено, что в полиэкстракте сухом содержатся танин; галловая, хлорогеновая, кофейная, цикориевая, ферулловая, глицеризиновая кислоты; кумарин; гиперозид, рутин, байкалин, байкалеин, лютео-лин, лютеолин-7-гликозид, витексин, кверцетин, дигидрокверцетин, кемпферол, апигенин, нарин-генин. Наибольшее количество составляют: танин
— 11,94 %, галловая кислота — 14,72 %, кумарин
- 17,17 %.
литература
1. Атлас лекарственных растений / под общ. ред. В.А. Быкова. — М., 2006. — 351 с.
2. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. — СПб. : СпецЛит, 2004. — 765 с.
шУ
600-
500-
Рис. 1. Хроматограмма ВЭЖХ экстракта композиции сухого.
3. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: Учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева. — СПб. : СпецЛит, 2006. — 845 с.
4. Лекарственные растения. Справочное пособие / под ред. Н.И. Гринкевич. — М. : Высшая школа, 1991. — 397 с.
5. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири / В.Г. Минаева. — Новосибирск : Наука, Сибирское отделение, 1991. — 431 с.
6. Почему растения лечат / М.Я. Ловкова [и др.]. — М. : Наука, 1990. — 256 с.
7. Растительные лекарственные средства / Н.П. Максютина [и др.]. — Киев : Здоровье, 1985. — 280 с.
8. Растительные ресурсы СССР // Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Ну!гапдеасеае — На1огадасеае. — Л. : Наука, 1987. — С. 119—120
9. Телятьев В.В. Полезные растения Центральной Сибири / В.В. Телятьев. — Иркутск: Восточно-Сибирское книжное издательство, 1987. — 400 с.
10. Хайдаев Ц. Лекарственные растения в тибетской медицине / Ц. Хайдаев, Б. Алтанчимэг, Т.С. Варламова. — Улан-Батор, 1985. — 390 с.
11. Шретер А.И. Лекарственная флора Советского Дальнего Востока / А.И. Шретер. — М. : Медицина, 1975. — 328 с.
Сведения об авторах:
Серебрянская Татьяна Степановна - аспирант ИОЭБ СО РАН, лаб. мед.-биол. исследований, 670047, г. Улан-Удэ, ул. М. Сахьяновой, д. 6. Сот. тел. 8-9025-620091
Николаева Галина Григорьевна - ведущий научный сотрудник, д.фарм.н., профессор, ИОЭБ СО РАН, лаб. мед.-биол. исследований, 670047, г Улан-Удэ, ул. М. Сахьяновой, д. 6. Сот тел. 8-9021-654347
