CC BY
57
УДК 615.322:582.794.1:547.587.06:543.544.5.068.7
ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ДУДНИКА ОБЫКНОВЕННОГО (ANGELICA ARCHANGELIGA L.), ВЫРАЩЕННОГО В УСЛОВИЯХ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА
Э.Р. Григорян
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
e-mail: shpitzbaum@mail.ru
Статья посвященна изучению дудника обыкновеного (Angelica archangelica). В работе изложены результаты исследования фенольных соединений дудника обыкновенного. Впервые в подземных органах дудника обыкновенного идентифицированы хлорогеновая, галловая, цикориевая, феруловая и эллаго-вая кислоты, умбеллиферон, танин, рутин, эпикатехин, дику-марин.
Ключевые слова: дудник обыкновенный, фенольные соединения, ВЭЖХ.
Введение. Виды большого рода Angelica (дудник), несомненно, представляют интерес для медицинского использования, так как обладают широким спектром фармакологической активности (мочегонной, желчегонной, отхаркивающей, противовоспалительной) благодаря богатому комплексу биологически активных веществ [1, 2, 3, 4]. Сборный вид A. archangelica (д. обыкновенный) включен в Европейскую и Британскую фармакопеи [6,7,8]. В России в настоящее время разрешен только как гомеопатическое средство, хотя входил в отечественные фармакопеи I -VI изданий [5].
Объектом исследования явились подземные органы A. archangelica, собранные в период цветения июль - август 2009-2010 гг. в окрестностях г. Кисловодска (Ставропольский край).
Цель — изучение фенольных соединений подземных органов дудника обыкновенного.
Методика исследования. Изучение качественного состава фенольных соединений проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Gilston», модель 305, Франция, инжектор ручной работы, модель «Rheodyne» 7125 (США), с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для «Windows».
Корневища и корни измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм. Для получения исследуемого извлечения 10,0 г измельченного сырья помещали в колбу вместимостью 250 мл, прибавляли 50 мл спирта этилового 70%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили тем же растворителем до метки 10 мл полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили 70% спиртом этиловым до метки.
Параллельно готовили серию 0,05% растворов стандартных образцов в 70% спирте этиловом: изосалипурпозида, рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, коричной кислоты, гиперозида, гесперидина, апигенина, арбутина, феруловой кислоты, изофе-руловой, виценина, витексина, 4-оксикумарина, скополетина, салициловой кислоты, неохлорогеновой кислоты, эллаговой кислоты, робинина, дикумарина, кумарина, ум-беллиферона, дигидрокверцетина, катехина, ориентина.
20 мкл исследуемого извлечения и раствора сравнения вводили в хроматограф и проводили анализ по выше приведенной методике.
В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка PLATINUM EPS C 18 100 А 4,6x250 мм, с размером частиц 5 мкм. Подвижная фаза: метанол-вода-кислота фосфорная концентрированная в соотношении 400 : 600 : 5. Анализ проводили при комнатной температуре. Продолжительность анализа 70 мин. Детектирование осуществляли с помощью УФ-детектора «Gilston» UV/VIS, модель 151, при длине волны 254 нм.
Идентификацию веществ фенольной природы проводили путем сопоставления времен удерживания пиков, полученных на хроматограмме, с временами удерживания стандартных растворов.
Результаты и обсуждения.
Таблица
Результаты идентификации фенольных соединений в водно-спиртовом извлечении корневищ и корней дудника обыкновенного
№ Время, мин Высота, mV Площадь, mV-сек ФО Содержание, % Название
1 2,875 499,30 3025,17 1,000 3,50 метанол
2 2,918 509,14 4308,90 1,000 4,99 умбеллиферон
3 3,217 193,39 1233,05 1,000 1,43 неидент.
4 3,309 1118,43 7371,75 1,000 8,54 галловая кислота
5 4,079 32,71 737,26 1,000 0,85 танин
6 4,526 34,02 1119,70 1,000 1,30 хлорогеновая кислота
7 5,095 30,05 913,52 1,000 1,06 эпикатехин
8 5,529 29,33 723,77 1,000 0,84 дикумарин
9 6,005 29,31 613,26 1,000 0,71 цикориевая кислота
10 6,279 31,63 1126,73 1,000 1,31 неидент.
11 7,016 32,83 2142,74 1,000 2,48 феруловая кислота
12 8,748 35,39 1681,55 1,000 1,95 неидент.
13 9,146 37,72 1195,42 1,000 1,38 неидент.
14 11,06 78,30 7401,31 1,000 8,57 рутин
15 11,94 39,88 2417,00 1,000 2,80 неидент.
16 16,97 3,14 188,77 1,000 0,22 эллаговая кислота
17 19,43 202,01 11527,44 1,000 13,35 неидент.
18 25,8 31,03 2301,62 1,000 2,67 неидент.
19 40,48 72,13 4562,73 1,000 5,29 неидент.
20 45,85 219,04 14547,77 1,000 16,85 неидент.
21 48,72 118,34 10466,09 1,000 12,12 неидент.
22 58,07 37,05 3170,17 1,000 3,67 неидент.
23 61,46 38,80 3104,01 1,000 3,60 неидент.
24 65,01 5,31 440,40 1,000 0,51 неидент.
Рис. Хроматограмма водно-спиртового извлечения из корневищ и корней дудника обыкновенного
Вывод. Экспериментально в подземных органах дудника обыкновенного установлено наличие 24 соединений, из которых идентифицированы хлорогеновая кислота, умбеллиферон, галловая кислота, танин, рутин, эпикатехин, дикумарин, цикорие-вая кислота, феруловая и эллаговая кислоты. Доминирующими в количественном отношении являются: галловая кислота (8,54%), рутин (8,57%).
Полученные результаты необходимы для последующей разработки методики количественного определения данной группы БАВ в сырье дудника обыкновенного.
Литература
1. Киселева, Т. Л. Гомеопатическая фармация // Т.Л. Киселева, А.А. Карпеев. - М.: Из-во ФНКЭЦ ТМДЛ Росздрава, 2005. - 438 с.
2. Ona Nivinskiene, Rita Butkiene and Danuie Mockute. Changes in chemical composition of essential oil of Angelica archangelica L. // Chemija (Vilnius), 2003/ Т. 14, Nr.1
3. Григорян, Э. Р. Антибактериальное действие дудника обыкновенного // Научная жизнь. - 2010. - 5 с.
4. Zhu X. F. and Zhang H. X. // Химия природных соединений. - 2004. - № 6. - С. 494.
5. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. - СПб.: СпецЛит , 2010. - 407 с.
6. European Pharmacopoeia. - 6 th ed. - 2008 - CD - ROM version.
7. British Herbal Pharmacopoeia 1996. - Published by British Herbal Medicine Association, 1996. - 212 p.
8. British Pharmacopeia 2008- CD - ROM version.
INVESTIGATION OF PHENOLIC COMPLEX ANGELICA ORDINARY [ANGELICA ARCHANGELISA L.) GROWN IN THE NORTH CAUCASUS
E.R. GRIGORYAN
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
e-mail: shpitzbaum@mail.ru
Article dedicated to the study of Angelicae ordinary (Angelica archangelica). The paper presents the results of studies of the phenolic compounds of angelica usual. First established by chlorogenic acid, umbelliferone, gallic acid, tannin, rutin, epicatechin, bishy-droxycoumarin, chicory acid, ferulic and ellagic acid.
Key words: angelica ordinary phenolic compounds, HPLC.
