CC BY
111
УДК 615.322:582.998.1:[547.814.5.06:543.544.5.068.7]
ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ЗОЛОТАРНИКА
КАВКАЗСКОГО ISOLIDAGO CAUCASICA KEM.-NATH.]
В.В. ФЕДОТОВА В.А. ЧЕЛОМБИТЬКО
В статье представлены результаты исследования поли-фенольных соединений травы золотарника кавказского. Впервые в сырье идентифицированны рутин, умбеллиферон, виценин, эскулетин, дигидрокумарин, геспередин, галловая кислота, ци-кориевая кислота, хлорогеновая кислота, кофейная кислота. Ключевые слова: золотарник кавказский, полифеноль-ные соединения,
Пятигорская государственная фармацевтическая академия e-mail: [email protected]
ВЭЖХ.
Введение. Сырье видов рода золотарник (Solidago) широко используется в ми-ровой медицинской практике. Применение лекарственных средств из этих видов свя-зано с выраженным диуретическим действием, увеличением почечного кровотока, а также гломерулярной фильтрации без потери натрия и хлоридов [1]. Сухой экстракт золотарника канадского входит в препарат «Марелин» (Украина), применяемый в качестве спазмолитического, диуретического и противовоспалительного средства при лечении и профилактике оксалатного и уратного уролитиаза, а также в состав препа-рата «Простанорм» (Россия), рекомендуемого при простатите. Сухой экстракт золо-тарника обыкновенного входит в состав препарата «Фитодолор» (Германия), противовоспалительная активность которого сопоставима с таковой индометацина [2]. Наше внимание привлек неизученный эндем Кавказа - золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.-Nath.), всестороннее исследование которого поможет расши-рить сырьевую базу используемых видов золотарника новым отечественным видом. Золотарник кавказский - это многолетнее травянистое растение из семейства астровые (Asteraceae) высотой до 70 см с мелкими желтыми цветками, собранными в колосовидное соцветие. Его отличительными морфологическими признаками являют-ся 2-, 3-рядная обвертка, корзинки 15-20 мм шириной, цветоносы корзинок обычно без прицветников, размер метелок 10-40 см [3]. Объектом исследования являлась высушенная измельченная трава з. кавказско-го, собранная во время цветения в субальпийской зоне в Даутском ущелье Карачаево-Черкесской Республики в августе 2011 г. Цель работы -изучение фенольных соединений травы золотарника кавказ-ского.
Экспериментальная часть. Изучение качественного состава фенольных со-единений травы з. кавказского проводили на высокоэффективном жидкостном хрома-тографе фирмы «GILSTON», модель 305, Франция; инжектор ручной, модель RHEO-DYNE 7125 США с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для «Windows». В качестве неподвижной фазы была использована металлическая колонка раз-мером 4,6х250 мм KROMASIL C18, размер частиц 5 микрон. В качестве подвижной фазы метанол : вода : кислота фосфорная (400:600:5). Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента
0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 60 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора «GILSTON» UV/VIS модель 151, при длине волны 254 нм и 360 нм.
Для исследования траву з. кавказского измельчали до размера частиц, прохо-дящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм по (ГОСТ 214-83). Около 3,0 г измель-ченного сырья помещали в колбу вместимостью 150 мл, прибавляли по 40 мл спирта этилового 70%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей во-дяной бане в течение 1 часа с момента закипания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объемом 50 мл и доводили спиртом этиловым 70% до метки (исследуемый раствор). Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения в 70% спирте этило-вом: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида, галловой кислоты, ко-фейной кислоты, хлорогеновой кислоты, гиперозида, геспередина,
апигенина, кемп-ферола, виценина, феруловой кислоты, цикориевой кислоты, умбеллиферона, дигид-рокумарина, скополетина, эскулетина, кумарина, дикумарина, дигидрокверцитина, катехина, эпикатехина. По 20 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения вводили в хромато-граф и хроматографировали в выше приведенных условиях. Результаты представлены в таблице и на рисунке.
Таблица
Результаты идентификации фенольных соединений травы золотарника (извлечение 70% спиртом этиловым)
№ Время, мин. Высота, шУ Площадь, шУ-сек ФО Содержание, % Название
1. 3-134 854.03 15087.31 1,000 18.31 галловая к-та
2. 3-573 265.57 6651.66 1,000 8.07 неидент.
3. 4-279 359.04 12752.60 1,000 15.48 умбеллиферр он
4. 5-756 71.12 1995.22 1,000 2.42 цикориевая к-та
5. 6-149 62.67 1780.40 1,000 2.16 хлорогеновая к-та
6. 6-902 77.82 2532.05 1,000 3.07 виценин
7. 7-319 56.51 1666.60 1,000 2.02 неидент.
8. 8-342 109.40 3457.71 1,000 1.85 эскулетин
9. 8-831 101.51 5165.78 1,000 6.27 кофейная к-та
10. 10-53 39.02 1793.60 1,000 2.18 дигидрокума рин
11. 11-55 22.04 629.28 1,000 0.76 неидент.
12. 12 21.71 895.42 1,000 1.09 неидент.
13. 13-28 97.81 5526.00 1,000 6.71 неидент.
14. 14-82 61.46 2343.52 1,000 2.84 геспередин
15. 15-46 72.81 3931.26 1,000 4.77 рутин
16. 17-19 12.87 1055.40 1,000 1.28 неидент.
17. 18-84 10.74 1079.62 1,000 1.31 неидент.
18. 22-61 147.57 11556.81 1,000 14.03 неидент.
19. 27-43 6.70 735.19 1,000 0.89 неидент.
20. 29-46 4.62 478.47 1,000 0.58 неидент.
21. 34-92 10.95 1438.89 1,000 1.75 неидент.
22. 41-51 2.35 791.85 1,000 0.96 неидент.
23. 46-94 3.42 500.03 1,000 0.61 неидент.
24. 52-33 2.38 472.73 1,000 0.57 неидент
200'
Л
Ui'2
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 мин
Рис. ВЭЖХ водно-спиртового извлечения из травы золотарника кавказского (детектирование при
длине волны 254 нм)
Рис. ВЭЖХ водно-спиртового извлечения из травы золотарника кавказского (детектирование при длине волны 254 нм)
Количественное определение фенольных соединений в пересчете на рутин в траве золотарника кавказского методом ВЭЖХ. Для исследования траву золотарника кавказского измельчали до размера час-тиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм по (ГОСТ 214-83). Около 3,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу вместимо-стью 150 мл, прибавляли по 40 мл спирта этилового 70%, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента заки-пания спиртоводной смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бу-мажный фильтр в мерную колбу объемом 50 мл и доводили спиртом этиловым 70% до метки (исследуемый раствор). Параллельно готовили раствор РСО рутина в 70% спирте этиловом. Для этого около 0,020 г (точная навеска) рутина помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл прибавляли 20 мл спирта этилового 70 % перемешивали до растворения и доводили объем до метки тем же растворителем (РСО). По 20 мкл исследуемого раствора и раствора РСО вводили в хроматограф и хро-матографировали по выше приведенной методике. Расчет количественного содержания рутина производили методом абсолютной калибровки с помощью компьютерной программы «Мультихром» для «Windows» и с помощью формулы: Х % = Sис.xСx50xl00хl00 Ser.x 25Х ах 100- W) где: S ис. - площадь пика рутина в исследуемом растворе; S ст. - площадь пика стандартного раствора РСО рутина; Х % -концентрация рутина в %; С - концентрация РСО рутина в г; а - навеска сырья в г; W - потеря в массе при высушивании в %. В результате установлено, что количественное содержание фенольных соедине-ний в пересчете на рутин в траве з. кавказского составляет 1,85 %. Вывод. Впервые установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся 24 фенольных соединения, из которых идентифицированы рутин, умбеллиферон, ви-ценин, эскулетин, дигидрокумарин, геспередин, галловая кислота, цикориевая кисло-та, хлорогеновая кислота, кофейная кислота. Количественное содержание фенольных соединений в пересчете на рутин составляет 1,85%.
Литература
1. Попова, Н.В. Лекарственные растения мировой флоры / Н.В. Попова, В.И. Литвиненко. -
Харьков, 2008. - 510 с.
2. Okpanyi, S.N. Antiinflammatory, analgesic and antipyretic activities of dried extract op Po-pulus
tremula, Solidago virgaurea and Flaxinus excelsior / S.N. Okpanyi, M. Arens-Correl // Eur. J. Pharmacol.
- 1990. - Vol. 183, № 6. - P. 2276-2277.
3. Флора СССР: в 30 т. / под ред. В.Л. Комарова. - М. ; Л.: Изд-во Академии наук СССР, 1961. - Т.25.
- 630 с.
THE STUDY OF PHENOLIC COMPOUNDS OF GOLDENROD СAUCASIAN (SOLIDAGO CAUCASICA KEM.-NATH.]
V.V. FEDOTOVA VA CHELOMBITKO The paper presents the results of the study of
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy e- polyphenolic com-pounds of Solidago caucasica
mail: [email protected] Kem.-Nath. For the first time in the row grass of
Solidago caucasica Kem.-Nath. identified rutin, umbelliferone , vitsenin , esculetin , digidrokumarin , gesperedin, gallic acid , chicory acid, chlorogenic acid, caffeic acid . Key words: Solidago caucasica Kem.-Nath., polyphenolic com-pounds, HPLC.
