Научная статья на тему 'Определение содержания ксеноэстрогена 4-нонилфенола в водах Амурского залива (Японское море)'

Определение содержания ксеноэстрогена 4-нонилфенола в водах Амурского залива (Японское море) Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
206
37
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
КСЕНОЭСТРОГЕНЫ / 4-НОНИЛФЕНОЛ / АМУРСКИЙ ЗАЛИВ / ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ / БУХТА ЗОЛОТОЙ РОГ / ХENOESTROGEN / 4-NONYLPHENOL / AMUR BAY / GOLDEN HORN BAY / LIQUID CHROMATOGRAPHY

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Петрова Александра Сергеевна, Черняев Андрей Павлович

Методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии проведена оценка содержания 4-нонилфенола в водах Амурского залива и прилегающих акваторий. Исследование проводили в теплый период 2008 г. на 7 станциях. Показано, что содержание общих фенолов находится в интервале от 0,8 до 17,0 мкг/л, а 4-нонилфенола от значения ниже пределов обнаружения до 1,24 мкг/л. Максимальное значение зафиксировано в устье р. Объяснения. Существующие концентрации 4-нонилфенола в водах Амурского залива не способны оказывать негативное влияние на гидробионтов. В бухте Золотой Рог и р. Объяснения содержание 4-нонилфенола находится на субкритическом уровне.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Петрова Александра Сергеевна, Черняев Андрей Павлович

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Determination of the xenoestrogen 4-nonylphenol content in the water from the Amur Bay (Japan Sea)

The 4-nonylphenol concentration in the water samples from the Amur Bay and adjacent area is determined by the method of reversed phase high performance liquid chromatography. The samples were taken at 7 sites in spring and fall of 2008. They had the range of total phenol content 0.8-17.0 µg/l, and the range of 4-nonylphenol content from the minimal detection limit to 1.24 µg/l with the highest concentration at the mouth of Ob'yasneniya River (Golden Horn Bay). Generally, the concentrations of 4-nonylphenol in the Amur Bay are too low for negative influence on marine organisms, but they are on subcritical level in the adjacent Golden Horn Bay.

Текст научной работы на тему «Определение содержания ксеноэстрогена 4-нонилфенола в водах Амурского залива (Японское море)»

2009

Известия ТИНРО

Том 157

УДК 577.1+543.544

А.С. Петрова1, А.П. Черняев2*

1 Дальневосточный государственный университет, 690600, г. Владивосток, ул. Октябрьская, 27;

2 Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр, 690091, г. Владивосток, пер. Шевченко, 4

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ КСЕНОЭСТРОГЕНА 4-НОНИЛФЕНОЛА В ВОДАХ АМУРСКОГО ЗАЛИВА (ЯПОНСКОЕ МОРЕ)

Методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии проведена оценка содержания 4-нонилфенола в водах Амурского залива и прилегающих акваторий. Исследование проводили в теплый период 2008 г. на 7 станциях. Показано, что содержание общих фенолов находится в интервале от 0,8 до 17,0 мкг/л, а 4-нонилфенола — от значения ниже пределов обнаружения до 1,24 мкг/л. Максимальное значение зафиксировано в устье р. Объяснения. Существующие концентрации 4-нонилфенола в водах Амурского залива не способны оказывать негативное влияние на гидробионтов. В бухте Золотой Рог и р. Объяснения содержание 4-нонилфенола находится на субкритическом уровне.

Ключевые слова: ксеноэстрогены, 4-нонилфенол, Амурский залив, жидкостная хроматография, бухта Золотой Рог.

Petrova A.S., Chernyaev A.P. Determination of the xenoestrogen 4-nonylphe-nol content in the water from the Amur Bay (Japan Sea) // Izv. TINRO. — 2009. — Vol. 157. — P. 168-174.

The 4-nonylphenol concentration in the water samples from the Amur Bay and adjacent area is determined by the method of reversed phase high performance liquid chromatography. The samples were taken at 7 sites in spring and fall of 2008. They had the range of total phenol content 0.8-17.0 pg/l, and the range of 4-nonylphenol content from the minimal detection limit to 1.24 pg/l with the highest concentration at the mouth of Ob'yasneniya River (Golden Horn Bay). Generally, the concentrations of 4-nonylphenol in the Amur Bay are too low for negative influence on marine organisms, but they are on subcritical level in the adjacent Golden Horn Bay.

Key words: хenoestrogen, 4-nonylphenol, Amur Bay, Golden Horn Bay, liquid chromatography.

Введение

Ксеноэстрогены (гормоноподобные ксенобиотики) — вещества антропогенного происхождения, имитирующие, в силу идентичности пространственного строения, природные гормоны (рис. 1).

* Петрова Александра Сергеевна, аспирантка, e-mail: [email protected]; Черняев Андрей Павлович, кандидат химических наук, старший научный сотрудник, e-mail: [email protected].

Рис. 1. Пространственно-структурная схожесть 17^-эстрадиола и 4-нонилфенола (Soto, Sonnenschein, 1995)

Fig. 1. Spatial and structural similarity of 4-nonylphenol and 17-ß-estradiol (Soto, Sonnenschein, 1995)

Одно из веществ, проявляющих ксеноэстрогенные свойства, — 4-нонилфе-нол, относящийся к алкилфенолам. Нонилфенол широко используется во многих сферах жизни современного общества: в сельском хозяйстве — при производстве пестицидов, в пищевой промышленности — при изготовлении тары и упаковок, в медицине — при синтезе ноноксинола-9 (действующее вещество контрацептивов). Кроме этого, он применяется для получения фенолформальдегидных смол, в производстве ингибиторов коррозии, красителей и химических стабилизаторов (Grayson, 1978). Основными путями поступления нонилфенола в окружающую среду являются промышленные и бытовые сбросы сточных вод, в которых он присутствует в форме полиэтоксилатов. В ходе биологической очистки сточных вод полиэтоксилаты нонилфенола частично преобразуются в стойкий и токсичный 4-нонилфенол. Довольно высокие концентрации 4-нонилфенола обнаруживаются в сточных водах целлюлозно-бумажного производства. Кроме того, 4-нонилфенол, как и многие другие алкилфенолы, используется, ввиду высокой стабильности и превосходных чистящих, эмульгирующих свойств (Chemical M arket Reporter, 2001), для изготовления неионогенных поверхностно-активных веществ.

Даже небольшие количества алкилфенолов, накопившись в среде до критической концентрации, способны изменять нормальный ход биохимических процессов клетки, вносить искажение в сигналы, передаваемые гормонами (McMaster et al., 1991; Henley, Korach, 2006). В зависимости от свойств агента изменения в репродуктивной системе живых организмов носят различный характер: замедление созревания органов размножения (Soverchia et al., 2005), уменьшение размеров гонад, снижение содержания тестостерона и эстрадиола (Montserrat et al., 2004), появление в нормальной популяции гермафродитов (Howell et al., 1980). 4-нонилфенол, как и все ксеноэстрогены, нарушает нормальное формирование эмбриона и процесс воспроизводства живых организмов, в том числе и человека.

Большое количество исследований (Staples et al., 2004) показывает, что 4-нонилфенол токсичен для рыб (ЛК50* = 0,017 - 3,000 мг/л) (рис. 2). Беспозвоночные и морские водоросли также чувствительны к его воздействию (ЛК50 находится в интервалах соответственно 0,021-3,000 и 0,027-2,500 мг/л). Действие 4-нонилфенола на млекопитающих (крыс) приводит к уменьшению прироста массы тела, кровоизлиянию в печени и нарушениям в центральной нервной системе (ЛД50* = 1,3 г/кг) (Servos, 1999).

ЛК50 (ЛД50) — летальная концентрация (доза), при которой погибает 50 % осо-

бей из экспериментальной группы.

Рис. 2. Хроническая токсичность 4-нонилфенола для морских организмов (Staples et al., 2004)

Fig. 2. Chronic toxicity of 4-nonylphenol for marine organisms (Staples et al., 2004)

Содержание 4-нонилфенола в водах рек, озер и прибрежных морских акваторий исследовалось ранее (Ying et al., 2002). Концентрации 4-нонилфенола в природных водах Испании варьируют от значений ниже уровня определения до довольно высокой концентрации — 0,644 мг/л (Sole et al., 2000). В Южной Корее в водах р. Хан (Han) было обнаружено до 187,6 нг/л 4-нонилфенола (Donghao Li et al., 2004), а в водах оз. Шива (Shihwa Lake) — 17,4-1533,1 нг/л (Zhengyan Li et al., 2004). В Канаде содержание 4-нонилфенола в водах рек варьирует от 0,14 до 55,3 мкг/л (Bеrryman et al., 2004). По классификации, разработанной Baronti (2000), поверхностные воды с содержанием нонилфенола менее 0,001 мг/л относятся к слабозагрязненным, 0,001-0,010 мг/л — загрязненным, более 0,010 мг/л — сильнозагрязненным.

Использование бытовых моющих средств на основе нонилфенола запрещено или ограничено в большинстве развитых стран. В соответствии с российским законодательством (Постановление Правительства РФ № 251 от 24.03.2000) и Конвенцией МАРПОЛ 73/78 сброс нонилфенола в морскую среду в исключительной экономической зоне РФ запрещен. Нонилфенол внесен в "Бюллетень Российского регистра потенциально опасных химических и биологических веществ" (http://spohv.ru), однако в Российской Федерации ПДК для 4-нонилфе-нола не установлено.

Цель настоящей работы — определение содержания 4-нонилфенола в водах Амурского залива и прилегающих акваторий.

Материалы и методы

Для определения содержания алкилфенолов в водных образцах наиболее часто используется жидкостная хроматография (Anghel et al., 1994; Careri et al., 2001) с предварительным их извлечением и концентрированием методами жидкостной (Wickbold, 1972; Lee, 1999) и твердофазной экстракции (Ahel, Giger, 1985; Chalaux et al., 1994).

Определение массовой концентрации общих фенолов проводили флуори-метрическим методом на анализаторе жидкости "Флюорат-02М" с предварительным извлечением их из морской воды бутилацетатом и реэкстракцией в водный раствор гидроксида натрия. 4-нонилфенол определяли на жидкостном хроматографе "Shimadzu" LC-10 ADvp (Япония), оснащенном флуоресцентным детектором и диодной матрицей, аналитическая колонка Discovery С18 (25,0 см х 0,46 см). Элю-ент: ацетонитрил — вода (в объемных процентах) — 90 : 10. Элюирование проводили в изократическом режиме, скорость подачи элюента — 0,5 мл/мин. Про-

ба отбиралась автосемплером, элюент перед входом в хроматографическую систему дегазировали. Все реактивы имели марку "ос.ч", стандарт 4-нонилфенола — фирмы "Lancаster", степень чистоты > 98 %.

Для экстракции были взяты пробы объемом 1 л (в трех параллелях). В качестве экстрагента использовали дихлорметан. Экстрагент объемом 20 мл добавляли к пробе, затем анализируемую пробу тщательно перемешивали, после чего переносили в делительную воронку. Отделив органический слой, пробу повторно экстрагировали тем же объемом дихлорметана. Полученные экстракты сушили над безводным сульфатом натрия и упаривали досуха на роторном испарителе при пониженном давлении. Полученные остатки перерастворяли в 1 мл ацетонитрила.

Определили минимально детектируемые количества 4-нонилфенола для двух детекторов: диодной матрицы и флуоресцентного, они составили соответственно 18,2 и 1,0 нг/мл. Таким образом, установлено, что при анализе использование флуоресцентного детектора предпочтительнее.

Места отбора проб: станция № 1 располагалась в прибрежной зоне Амурского залива в районе Спортивной гавани, № 2 — в бухте Золотой Рог, станция № 3 — устье р. Объяснения, № 4 — южнее устья р. Кедровой, № 5, 6, 7 — в центральной части Амурского залива (рис. 3).

^ \ ^ 6 4P / <f Г ,-> J3оло- А- S / 2

У , о 5 о С 1 / ! уа fj

43"|-1-1-1-1--1-1-^- " Г-'-'-'-^-^-^-

131.6 131.7 131.8 131.9

Рис. 3. Карта-схема района работ: 1-7 — номера станций

Fig. 3. Scheme of sampling: 1-7 — stations' numbers

Отбор проб воды проводили весной и осенью 2008 г. Пробы отбирали в стеклянные бутыли объемом 5 л, которые предварительно ополаскивали дистиллированной водой и дважды исследуемой водой непосредственно перед отбором.

Результаты и их обсуждение

На диаграмме (рис. 4) видно, что из исследуемых акваторий наименее загрязнены общими фенолами и 4-нонилфенолом центральная часть и западное побережье Амурского залива. Восточное побережье в плане загрязнения относительно благополучно, а наиболее загрязненными являются бухта Золотой Рог и р. Объяснения.

Воды зал. Петра Великого загрязняются сбросами недостаточно очищенных хозяйственно-бытовых стоков населенных пунктов и сточных вод промышлен-

171

ных предприятий. Основными загрязнителями являются предприятия электроэнергетики, коммунального хозяйства, химической промышленности, машиностроения и металлообработки.

18 16 -14 12

1 10

ш о

8 6 4 2 0

0,44

1

Q

н/о - не обнаружено (концентрация ниже 0,001 мкг/л)

1,24 1,5 ■

1 1 0,8 н/о I н/о I н/о -1 н/о

2

3

5

6

7

4

Станции

□ Массовая концентрация общих фенолов □ Массовая концентрация 4-нонилфенола

17

14

9

Рис. 4. Содержание фенолов в водах Амурского залива и прилегающих акваторий

Fig. 4. Content of phenols in the waters of the Amur Bay and adjacent area

В течение года в воды Амурского залива и прилегающие акватории происходит сброс большого количества сточных вод. По статистическим данным (форма 2ТП-Водхоз), в Амурский залив поступает 46332,96 тыс. м3/год, в бухту Золотой Рог — 23480,27 тыс. м3/год, из них 8222,83 тыс. м3/год со стоком р. Объяснения. Все сбрасываемые сточные воды отнесены к категории "загрязненные, без очистки", в их состав входят такие загрязняющие вещества, как нефтеугле-водороды (29,90 т/год), фенолы (2,96 т/год), синтетические поверхностно-активные вещества (86,37 т/год) и др.

В результате проведенных исследований установлено, что содержание 4-нонилфенола в районе восточного побережья Амурского залива (Спортивная гавань) составляет 0,435 мкг/л. Одним из возможных источников поступления 4-нонилфенола является картонная фабрика, расположенная в г. Уссурийск, постоянно сбрасывающая сточные воды в р. Раздольную. Дополнительными источниками загрязнения могут служить промышленные стоки некоторых других производств, а также хозяйственно-бытовые стоки. Воды р. Раздольной по результатам комплексной оценки в 2003 г. отнесены к "очень грязным", ПДК (предельно допустимая концентрация) по фенолам в ней превышалась до 6 раз. Эта река поставляет в Амурский залив загрязняющих веществ в 26-28 раз больше, чем все промышленно-бытовые городские стоки Владивостока. Течение несет воды р. Раздольной вдоль восточного побережья, что объясняет наличие в районе Спортивной гавани относительно небольших концентраций 4-нонилфенола.

В центральной части Амурского залива и в районе западного побережья содержание 4-нонилфенола находится ниже предела обнаружения. Вероятно, это обусловлено большой площадью, глубиной залива и системой поверхностных и подводных циркуляционных течений (Лоция ..., 1972), благодаря которым происходит значительное разбавление загрязненных вод, а также удаленностью источников эмиссии 4-нонилфенола.

Содержание 4-нонилфенола в бухте Золотой Рог составляет 1,22 мкг/л. Специфика данной бухты в том, что она является одной из староосвоенных и поэтому наиболее подвержена влиянию городских стоков. В бухту поступают сточные воды городской канализации. Огромное негативное воздействие оказывают городские порты и судоремонтные заводы, сбрасывающие в воду технические масла, топливо и хозяйственно-бытовые стоки. Существенный вклад в загрязнение бухты вносит р. Объяснения, в водах которой содержание 4-нонилфе-нола составляет 1,235 мкг/л. Одним из основных источников загрязнения им, вероятнее всего, является ТЭЦ-2. С электростанции в реку без специальной очистки поступает огромное количество сточных вод от охлаждения и продувочных вод из систем обратного водоснабжения, зачастую загрязненных компонентами трансформаторных масел. Известно, что многие составные части материалов трансформаторов изготавливаются из фенолформальдегидных смол, содержащих 4-нонилфенол. Замена трансформаторов и их разрушение приводит к неконтролируемому попаданию токсичных компонентов в окружающую среду. Несмотря на то что замасленные и замазученные воды проходят грубую очистку с последующим отстаиванием в приемной емкости и нефтеловушке и тонкую очистку в двухслойном механическом и угольном фильтрах, содержание масел в сточных водах составляет 0,5-1,0 мкг/л.

Заключение

Существующие концентрации 4-нонилфенола в водах Амурского залива не способны оказывать существенное негативное влияние на эндокринную систему гидробионтов, а тем более вызывать их гибель. По приведенной выше классификации воды Амурского залива можно отнести к слабозагрязненным. В бухте Золотой Рог и р. Объяснения содержание 4-нонилфенола находится на критическом уровне и способно вызвать изменения в структуре сообществ морских организмов.

Гидробионты являются одним из основных звеньев в пищевой цепочке, по которой токсиканты попадают в организм человека. Таким образом, сложившаяся ситуация предопределяет необходимость проведения полноценных мониторинговых работ, выявление и классификацию источников загрязнения веществами, проявляющими ксеноэстрогенный эффект.

Список литературы

Бюллетень Российского регистра потенциально опасных химических и биологических веществ. http://spohv.ru.

Лоция Японского моря. — Л. : МО СССР, Гл. упр. навигации и океанографии, 1972. — Ч. 1. — 288 с.

Ahel M., Giger W. Determination of alkylphenols and alkylphenol mono- and diethoxy-lates in environmental samples by high-performance liquid chromatography // Anal. Chem. — 1985. — № 57. — P. 1577-1583.

Anghel D.F., Balcan M., Voicu A., Elian M. Analysis of alkylphenol-based nonionic surfactants by high-performance liquid-chromatography // J. of Chromatography A. — 1994. — Vol. 668. — P. 375-383.

Baronti C. Monitoring natural and synthetic estrogens at activated sludge sewage treatment plants and in a receiving river water // Environmental Science and Technology. — 2000. — Vol. 34. — P. 5059-5066.

Berryman D., Houde F., DeBlois C., O'Shea M. Nonylphenolic compounds in drinking and surface waters downstream of treated textile and pulp and paper effluents: a survey and preliminary assessment of their potential effects on public health and aquatic life // Chemosphere. — 2004. — Vol. 56. — P. 247-255.

Careri M., Elviri L., Mangia A. Development and validation of a method using online solid-phase extraction and liquid chromatography with ultraviolet detection for the

determination of bisphenol A, octylphenol, and nonylphenol in groundwater // J. of AOAC International. — 2001. — Vol. 84. — P. 1383-1392.

Chalaux N., Bayona J.M., Albaiges J. Determination of nonylphenols as pentaflu-orobenzyl derivatives by capillary gas-chromatography with electron-capture and mass-spec-trometric detection in environmental matrices // J. of Chromatography A. — 1994. — Vol. 686. — P. 275-281.

Chemical Market Reporter. Chemical profile: Nonylphenol. July 9, 2001. http:// www.aperc.org/nonylphenol.pdf.

Donghao Li, Minseon Kim, Won Joon Shim et al. Seasonal flux of nonylphenol in Han River, Korea // Chemosphere. — 2004. — Vol. 56. — P. 1-6.

Grayson M. Alkylphenols // Encyclopedia of Chemical Technology. — N.Y. : John Wiley and Sons, 1978. — Vol. 2. — P. 72-96.

Henley D.V., Korach K.S. Endocrine-disrupting chemicals use distinct mechanisms of action to modulate endocrine system function // Endocrinology. — 2006. — Vol. 147. — P. 25-32.

Howell W.M., Black D.A., Bortone S.A. Abnormal expression of secondary sex characters in a population of mosquitofish, Gambusia Affinis holbrooki: evidence for environmental-induced masculinization // Copeia. — 1980. — Vol. 4. — P. 676-681.

Lee H.B. Review of analytical methods for the determination of nonylphenol and related compounds in environmental samples // Water Qual. Res. J. Canada. — 1999. — Vol. 34, № 1. — P. 3-35.

McMaster M.E., Van der Kraak G.J., Port C.B. Changes in gepatic mixed-function oxygenase activity, plasma steroid levels and age at maturity of a white sucker population on exposed to blooched craft pulp mill effluent // Aquatic Toxicol. — 1991. — Vol. 21. — P. 199-218.

Montserrat N., Gonzalez A., Mendez E. et al. Effects of follicle stimulating hormone on estradiol-17 ß production and P-450 aromatase (CYP19) activity and mRNA expression in brown trout vitellogenic ovarian follicles in vitro // General and Comparative Endocrinology. — 2004. — Vol. 137. — P. 123-131.

Servos M.R. Review of the aquatic toxicity, estrogenic responses and bioaccumulation of alkylphenols and alkylphenols polyethoxylates // Water Qual. Res. J. Canada. — 1999. — Vol. 34, № 1. — P. 123-177.

Sole M., de Alda M.J.L., Castillo M. et al. Estrogenicity determination in sewage treatment plants and surface waters from the Catalonian area (NE Spain) // Environmental Science and Technology. — 2000. — Vol. 34. — P. 5076-5083.

Soto A.M., Sonnenschein C. The E-Screen assay as a tool to identify estrogens: an update on estrogenic environmental pollutants // Environmental Health Perspectives. — 1995. — Vol. 103. — P. 113-122.

Soverchia L., Ruggeri B., Palermo F. et al. Modulation of vitellogenin synthesis through estrogen receptor beta-1 in goldfish (Carassius auratus) juveniles exposed to 17-b estradiol and nonylphenol // Toxicology and Applied Pharmacology. — 2005. — Vol. 209. — P. 236-243.

Staples C., Mihaich E., Carbone J. et al. A weight of evidence analysis of the chronic ecotoxicity of nonylphenol ethoxylates, nonylphenol ether carboxylates, and non-ylphenol // Human Ecol. Risk Assessm. — 2004. — Vol. 10. — P. 999-1017.

Wickbold R. Determination of nonionic surfactants in river and waste water // J. of Cromatographic Science. — 1972. — № 9. — P. 17-77.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Ying G.G., William B., Kookana R. Environmental fate of alkylphenols and alky-lphenol ethoxylates // Environment International. — 2002. — Vol. 28. — P. 215-226.

Zhengyan Li, Donghao Li, Jae-Ryoung Oh, Jong-Geel Je. Seasonal and spatial distribution of nonylphenol in Shihwa Lake, Korea // Chemosphere. — 2004. — Vol. 56. — P. 611-618.

Поступила в редакцию 23.01.09 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.