CC BY
47Вестник фармации № 1 (31) 2006
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
Л.И.Покачайло, В.Е.Селицкий, И.В.Дудорева, О.В.Прудникович, Н.В.Ридевская, Е.В.Свихнушина
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СЕЛЕНА В ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВАХ МЕТОДОМ АТОМНОАБСОРБЦИОННОЙ СПЕКТРОМЕТРИИ
Производственное республиканское унитарное предприятие «Минскинтеркапс»
Разработана методика определения селена атомно-абсорбционной спекто-метрией с использованием атомноабсорбционного спектрометра, оборудованного лампой с полым катодом, и воздушно-ацетиленового пламени, измеряющего интенсивность светопоглаще-ния испытуемых и градуировочных растворов при резонансной длине волны селена 196,0 нм.
Селен (от греч. Selene - Луна; лат. Selenium) - химический элемент VI группы периодической системы, относящийся к халькогенам. В настоящее время он достаточно хорошо изучен и применяется ряд модификаций этого вещества: селен серый (y-Se, «металлический»), красный (a-Se-оранжево-красный, P-Se - темно-красный, y-Se - красный), стекловидный черный, аморфный красный, аморфный кубический и др. [1].
В фармацевтической практике для производства лекарственных средств используется селен серый.
УП «Минскинтеркапс» производит и реализует на территории Республики Беларусь, а также в других странах лекарственное средство Антиоксикапс с селеном в мягких желатиновых капсулах, применяемое в качестве источника витаминов - антиоксидантов и селена. Введение в Анти-оксикапс микроэлемента селена усиливает антиоксидантные свойства лекарственного средства, в частности витаминов С и Е. В организме селен стимулирует адаптацион-
ные компенсаторные механизмы, блокирует токсическое действие тяжелых металлов и защищает от свободных радикалов клетки печени. Селен, как и витамин Е, замедляет процесс старения, препятствует распространению в организме вирусов и развитию вторичных инфекций у больных. В настоящее время селен рассматривают как один из перспективных антиканцерогенных факторов. Следует отметить, что в отличие от ряда витаминных средств, содержащих достаточно токсичную форму 6-валентного селена (натрия селенит), Анти-оксикапс с селеном содержит физиологически более приемлемый органически связанный дрожжевой селен.
Для количественного определения селена в лекарственных средствах и биологических жидкостях используются различные методы: титриметрия, гравиметрия, спектрофотометрия, спектрофлуори-метрия, газовая хроматография с изотопным разбавлением и др. [2, 3, 4].
В соответствии с ФС РБ 0634-05 «Капсулы «Антиоксикапс с селеном» количественное содержание селена определяется УФ-спектрофотометрическим методом. Однако используемый метод длителен, требует сложной пробоподготовки.
Целью настоящего исследования явилась разработка методики определения селена атомно-абсорбционным методом с использованием атомно-абсорбционного спектрометра, оборудованного лампой с полым катодом, и воздушноацетиленового пламени, по интенсивности светопоглощения испытуемых и градуировочных растворов при резонансной длине волны селена 196,0 нм.
МЕТОДИКА
Около 1,00 г (точная навеска) содержимого капсул помещают в термостойкую коническую колбу вместимостью
100,00 мл. Добавляют 5 мл кислоты азотной концентрированной (ОСЧ) и 2 мл раствора водорода пероксида концентрированного (х.ч.), закрывают пробкой. Быстро помещают колбу на «ледяную» баню до
полного охлаждения и оставляют на 12 ч. Через 12 ч содержимое колбы упаривают до 1 мл на плитке, сначала повышая температуру до (60-70)°С и выдерживая при этой температуре в течение 15-20 мин, затем повышая температуру до (95-100)°С.
Смесь охлаждают, прибавляют 5 мл кислоты хлористоводородной концентрированной (ОСЧ) и кипятят на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 15-20 мин. Охлажденную смесь фильтруют через фильтр «синяя лента», тщательно промывают фильтр водой очищенной, и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100,00 мл. Доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают.
5,00 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью
100,00 мл, доводят объем раствора 5% раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают (испытуемый раствор).
Параллельно проводят контрольный опыт. Для этого в термостойкую коническую колбу вместимостью 100,00 мл помещают 5 мл кислоты азотной концентрированной (о.с.ч.), 2 мл раствора водорода пероксида концентрированного (х.ч.) и закрывают пробкой. Быстро помещают колбу на «ледяную» баню до полного охлаждения и оставляют на 12 ч. Через 12 ч содержимое колбы упаривают до 1 мл на плитке, сначала повышая температуру до (60-70)°С и выдерживая при этой температуре в течение 15-20 мин, затем повышая температуру до (95-100)°С. Смесь охлаждают, прибавляют 5 мл кислоты хлористоводородной концентрированной (о. с.ч.) и кипятят на водяной бане с обратным холодильником при температуре (95-100)°С в течение 15-20 мин. Охлаждают до комнатной температуры. Смесь фильтруют через фильтр «синяя лента», тщательно промывают фильтр водой очищенной, и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100,00 мл. Доводят объем раствора до метки водой очищенной и перемешивают (контрольный раствор).
Измеряют оптическую плотность градуировочных, испытуемого и контрольного растворов при длине волны
196,0 нм с помощью атомноабсорбционного спектрометра SOLAAR M6, GE 650212 (Великобритания), снабженного гидридным генератором SOLAAR VP90, лампой с полым катодом на селен, стандартной открытой кварцевой абсорбционной кюветой TERMO ELEMENTAL. Разогревание кюветы производят воздушно-ацетиленовым пламенем, в качестве инертного газа-носителя используют аргон. Для обеспечения работы гидридного генератора SOLAAR VP90 используют 0,5 % раствор натрия боргид-рида в 0,1 % растворе натрия гидроксида.
В качестве раствора сравнения используют 5% раствор кислоты хлористоводородной.
На основании полученных результатов строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс - концентрацию селена в мкг/л соответствующего градуировочного раствора, а по оси ординат -значения оптической плотности растворов.
Массу селена (m) в одной капсуле в миллиграммах вычисляют по формуле:
(C, •100 - C 0) • 100 • b
X =------5-------------,
g • 1000•1000
где
С1 - концентрация селена в испытуемом растворе, определенная с помощью градуировочного графика, мкг/л;
С0 - концентрация селена в контрольном растворе, определенная с помощью градуировочного графика, мкг/л;
b - средняя масса содержимого капсул в миллиграммах;
g - масса навески содержимого капсул в миллиграммах.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ
1. Приготовление стандартного раствора селена. 1,0 мл ГСО состава водного раствора ионов селена (ГСО 7340-96) с концентрацией 1 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100,00 мл, дово-
дят объем раствора 5% раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают.
10,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью
100.00 мл, доводят объем раствора 5% раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают.
2. Приготовление градуировочных растворов. Из стандартного раствора селена отбирают пипеткой 1,00 мл, 2,00 мл и
5.00 мл, помещают в мерные колбы вместимостью 100,00 мл, доводят объем каждого из растворов 5% раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают.
Экспериментальные данные, полученные
В результате получают серию растворов со следующими концентрациями: 10,0; 20,0 и 50,0 мкг селена в 1 л.
3. Приготовление 0,5% раствора натрия боргидрида в 0,1% растворе натрия гидроксида. 2,5 г натрия боргидрида растворяют в 0,1% растворе натрия гидроксида в колбе вместимостью 500 мл, доводят до метки 0,1 % раствором натрия гидроксида и перемешивают.
Раствор используют свежеприготовленным.
Экспериментальные данные, полученные при количественном определении селена, представлены в таблице 1.
Таблица 1
N п/п Метод УФ - спектрофотометрии Метод атомно-абсорбционной спектрометрии
Найдено, Метрологические Найдено, Метрологические
мг / капс характеристики мг/капс характеристики
1 0,0279 £=5, х = 0,0318, 0,0317 £=5, х = 0,0329,
2 0,0299 Б2=1,45-10-5, 0,0349 82=6,58-10"6,
3 0,0335 Б=3,81-10-3, 0,0366 8=2,56-10"3,
4 0,0362 ДХ=9,78-10-3 0,0320 ДХ=6,59-10"3
5 0,0276 0,0293
6 0,0355 0,0329
Метрологические характеристики среднего результата, полученного при определении количественного содержания селена двумя методами приведены в таблице 2.
Таблица 2
Метрологические характеристики среднего результата (определение количественного ______________содержания селена методами УФ - спектрофотометрии и АСС)______________
Метод N п/п Найдено, х ± ДХ 8к, % Б (Р,^, Г2)табл Бэксп.
1 0,0318±0,0098 11,90 5,05 2,20
2 0,0329±0,0066 7,78
Для сравнения воспроизводимости двух методов анализа с оценками дисперсии Б21 и Б22 (причем Б21 > Б22) вычисляли критерий Фишера Б:
о 2
F = -4- = 2,20 О 2
Т.к. Б< Б (Р,/1,/2>габл., то различие
2 2
значений Б 1 и Б 2 статистически незначительно.
В связи с тем, что в результате измерений одной и той же величины (количественное содержание селена в капсулах Антиоксикапс с селеном) получены две выборки объемом Й1 и П2, причем X 1 Ф х 2, необходимо проверить статистическую достоверность гипотезы х 1 = х 2.
Таблица 3
Данные по сравнению средних результатов__________________________
N n/n n х S2 S S2P Sp t(P, /) табл. T Аэксп.
1 6 0,0318 1,12 • 10-5 3,35 • 10-3 3,73 • 10-6 1,93 • 10-3 2,23 0,60
2 6 0,0329
_ _Т.К. 1эксп.< t(P, /)табл , ТО ГИПОТеЗа
х i= х 2 не противоречит экспериментальным данным.
Т.е. средние результаты определения количественного содержания селена, полученные методами 1 и 2, статистических различий не имеют.
Таким образом, для определения количественного содержания селена возможно использование УФ-спектрофото-метрии и атомноабсорбцион-ного метода.
SUMMARY Pokachaylo L.I., Selitsky V.E., Dudoreva I.V., Prudnikovich O.V., Ridevskaya N.V., Svikhnushina E.V.
DETERMINATION OF SELENIUM IN MEDICINES USING THE METHOD OF ATOMIC ABSORPTION SPECTROMETRY Test method for Selenium identification is based on atomic absorption spectrometry. Apparatus: Atomic absorption spectrometer equipped with hallow cathode lamp, hydride generator and air-acetylene flame.
Purpose: To measure absorbance intensity of test and calibration solutions at wave-length
196.0 nm for Selenium absorption pathway.
ЛИТЕРАТУРА
1. Количественное определение селена в лекарственном средстве «Антиоки-скапс с селеном» / А.И. Бондаренко, А.А. Филанович, Н.В. Ридевская и др. // Вестник фармации. - 2001. - № 3 - 4. - с. 15-20.
2. Иванкова А.Н., Блюм Н.А. Определение селена с 3,3'-диаминобензидином // Заводская лаборатория. - 1961. - № 27. -С. 371.
3. Крешков А.П. Основы аналитической химии. Кн.2. Количественный анализ. - М.: Гос. научно-технич. изд-во хим. литры, 1961. - 552 с.
4. Гадаскина И.Д., Гадаскина Н.Д., Филов В. А. Определение промышленных неорганических ядов в организме. - М.: Медицина. - 1975. - С. 172-181.
5. ФС РБ 0634-05 Капсулы «Антиок-сикапс с селеном».
