CC BY
54
УДК 616.71 - 018.44 - 002 - 092.4:615.28 Лукьяненко Д.Н.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОГО РАЗВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТА «ОКТЕНИСЕПТ» ДЛЯ ВНУТРИСУСТАВНОГО ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТА В РАСТУЩЕМ ОРГАНИЗМЕ
Днепропетровская государственная медицинская академия
Актуальным является вопрос выбора антисептика, не оказывающего патологического воздействия на ткани опорно-двигательного аппарата. Проведен эксперимент с целью определения безопасной для организма концентрации препарата «Октенисепт», которая не влечет за собой дегенеративо-воспалительных изменений тканей сустава, включая костную, на 40 неполовоззрелых двухмесячных белых лабораторных крысах. В работе использованы гистологический, морфометрический и статистический методы. Установлено, что препарат не обладает токсическим действием на компоненты сустава, оптимальным является разведение препарата 1:4.
Ключевые слова: октенисепт, растущий организм, метаэпифизарный остеомиелит, дети, суставы.
В костно-гнойной хирургии особое значение имеет местное использование антисептических препаратов, в частности, их внутрисуставное введение при метаэпифизарном остеомиелите у детей.
Вопрос оптимального выбора антисептика, который не оказывал бы патологического воздействия на ткани опорно-двигательного аппарата в растущем организме, инактивируя при этом патогенную микрофлору, остается актуальным и в наши дни в связи с появлением устойчивых штаммов микроорганизмов, микстинфекциями. Препарат «Октенисепт», основным действующим веществом которого является октенидина дигидрохло-рид, эффективно воздействует на патогенную флору в очагах инфекции.
Задачей исследования является определение концентрации препарата «Октенисепт», которая не вызывая изменений тканей сустава в растущем организме, воздействует при этом на патогенную флору.
Цель исследования
Определение безопасной для организма концентрации препарата, которая не влечет за собой дегенеративных воспалительных изменений тканей сустава, включая костную, что даст нам возможность применить его при гнойно-воспалительных заболеваниях опорно-двигательного аппарата и, в частности, при ме-таэпифизарном остеомиелите, у детей.
Материалы и методы исследования
Влияние на ткани коленного сустава препарата «Октенисепт» в различных разведениях изучали в эксперименте на 40 неполовозрелых 2-месячных белых лабораторных крысах (живая масса 150+20 г).
Эксперименты на животных проводили в соответствии с требованиями «Европейской конвенции защиты позвоночных животных, которые используются в экспериментальных и других целях», а также Закона Украины [5].
Проведено 3 серии экспериментов (по 5 животных на срок наблюдения):
1 серия - (контроль) однократная промывка коленного сустава водой для инъекций;
2 серия - (опыт) однократная промывка коленного сустава раствором «Октенисепт» в раз-
ведении 1:4 (1 часть препарата, 4 части воды для инъекций);
3 серия - (опыт) однократная промывка коленного сустава раствором «Октенисепт» в разведении 1:3 (1 часть препарата, 3 части воды для инъекций).
Раствор вводили в сустав (под надколенник) шприцом в количестве 0,5 мл, произведя укол с наружной стороны сустава, а с внутренней стороны в сустав была введена трубка (срезанная часть инъекционной иглы, аналогичного диаметра, длиной - 5 мм) для выведения раствора из сустава. Таким образом, моделировалось промывание сустава при пункции из двух точек.
В качестве дополнительного контроля использовали суставы пяти интактных крыс, аналогичного возраста и веса.
Эвтаназию животных осуществляли путем передозировки (ингаляционно) диэтилового эфира через 6 и 12 часов после промывки сустава «Октенисептом».
В 3-й серии экспериментов коленный сустав крыс был дополнительно исследован через 24 часа.
В работе использованы гистологические методы для качественной оценки состояния суставного хряща суставных поверхностей мыщелков бедренной и большеберцовой костей, менисков и надколенника, а также состояние капсулы сустава. Был применен морфометрический метод для оценки плотности клеток по территории суставного хряща а также толщины синовиального слоя капсулы сустава.
Для гистологических исследований выделяли коленные суставы опытных и контрольных крыс и вели их обработку по стандартным гистологическим методам [1, 4]: фиксация в 10 % растворе нейтрального формалина, декальцинация в 5 % растворе азотной кислоты, обезвоживание в растворах этилового спирта возрастающей крепости (от 60° до 96°), а также в растворе смеси этилового спирта с диэтиловым ефиром (1:1), уплотнение в густом целлоине с парами хлороформа и заключение в целлоидин.
Срезы (6-10 мкм) изготавливали на санном микротоме "Reichert", окрашивали гематоксилином Вейгерта и эозином, а также пикрофуксином
по Ван-Гизон для дифференцированного выявления коллагеновых волокон [1]. Для характеристики состояния гликозаминогликанов (ГАГ) по метахромазии использовали окраску толуиди-новым синим при рН 2,5. Показатели рефракции ГАГ и коллагена (после окраски пикросириусом красным) определяли в поляризованном свете -микроскоп «Polmy-A» [3].
Окрашенные срезы анализировали в микроскопах MICROSS, „Axiostar plus", а также в поляризационном - „Polmy-A". Фотографировали препараты с помощью цифровой фотокамеры Canon EOS-300D. Оценку тканей сустава проводили при микроскопическом описании структурной организации суставного хряща и капсулы сустава.
Морфометрические исследования выполняли для сравнительного анализа клеточного состава, подсчитывая количество хондроцитов (по всей территории суставного покрытия обеих костей) в семи полях зрения каждой кости (т.е. n = 10). Ширину синовиального слоя определяли с обеих сторон сустава, произведя 5 измерений на каждый сустав. Для выполнения измерений использовали окуляр-микрометр МОВ-1-15х по методу Г.Г. Автандилова [2].
Полученные цифровые показатели были обработаны методами вариационной статистики с использованием t-критерия Стъюдента (прикладной пакет STATISTICA 5.11 for Windows). Уровень достоверности принят 95%.
Результаты исследования.
При исследовании препаратов коленного сустава интактных крыс в поляризованном свете после окраски толуидиновым-синим выявлялась яркая метахромазия в межтерриториальном матриксе некальцифицированного хряща, а также двулучепреломление (рефракция), составляющее - 22,3+1,4 нм. В поверхностной зоне метахромазия и яркость рефракции были низкими.
Характеристики тканей коленного сустава интактных животных были использованы для сравнительного анализа с суставами животных, которые подвергались манипуляциям.
При макроскопическом исследовании через 6 и 12 часов после промывания сустава контрольных животных водой для инъекций, используемой для разведения препарата «Октенисепт», патологических изменений в суставе не выявлено.
При микроскопическом исследовании в световом микроскопе через 6 часов после промывки сустава выявлено, что суставной хрящ, покрывающий мыщелки бедренной и большебер-цовой костей, сохраняет характерную структурную организацию.
Плотность клеток по территории суставного покрытия в некальцифицированном хряще вы-
сокая. В кальцифицированном хряще капсулы хондроцитов расширены. Хондроциты, располагающиеся в капсулах, имеют плотные гипер-хромные ядра. Плотность клеток по территории суставных поверхностей бедренной и больше-берцовой костей составляет 135,9+21,6 нм, что не отличается (р>0,05) от показателей интактных животных.
При исследовании суставного хряща в поляризованном свете выявлялась яркая метахро-мазия ГАГ во всех зонах некальцифицированного хряща. Аналогичной была и топография проявления рефракции ГАГ, однако наиболее яркой она была в территориальном матриксе клеток некальцифицированного хряща - промежуточная зона. В среднем, по территории суставного хряща, ее величина составляла 21,9+1,6 нм, и не отличалась от выявленного у интактных животных (р>0,05).
При исследовании капсулы сустава выявлено, что синовиальный слой имеет признаки асептического воспаления, возникшего как реакция на нарушение замкнутости сустава и введение воды в сустав.
По истечении 12 часов после промывки сустава в контрольной группе животных суставной хрящ мыщелков бедренной и большеберцовой костей, а также надколенника и менисков не имел патологических изменений.
При исследовании ГАГ суставных хрящей мыщелков большеберцовой и бедренной костей нарушений в организации матрикса не отмечено. ГАГ были относительно равномерно распределены в матриксе суставных хрящей. Максимальная яркость метахромазии была в капсулах клеток - в перицеллюлярном матриксе. Величина рефракции составила - 20,5+1,5 нм, что не отличалось от предыдущих показателей интактных, контрольных и первых опытных животных. При поляризационно-оптическом исследовании коллагена также не было отмечено отклонений рефракции в матриксе суставного хряща, как от интактных, так и от контрольных животных, после промывки сустава водой через 6 часов после начала эксперимента.
При макроскопическом исследовании суставного хряща суставов животных через 6 часов после промывки «Октенисептом» (в разведении 1:4) отличительных особенностей от таковых контрольной серии, в которой животным вводили воду для инъекций, используемую для разведения «Октенисепта», не выявлено.
При микроскопическом исследовании суставного хряща мыщелков бедренной и большебер-цовой костей не выявлено дегенеративных и деструктивных нарушений в клетках и матриксе. Изменений в структуре менисков, а также суставном хряще надколенника не было установлено. Они имели характерную для нормы орга-
низацию.
При постановке реакции на ГАГ яркая мета-хромазия обнаруживалась в капсулах клеток и межтерриториальном матриксе промежуточной зоны. В поверхностной зоне метахромазия была несколько ниже. Однако в целом, по распределению метахромазии матрикс суставного хряща сохранял характеристики, типичные для контрольной группы животных. Показатели рефракции ГАГ также не отличались ни от контроля, ни от интактных животных (р>0,05) и составляли - 22,4+1,7 нм. Распределение коллагена было относительно равномерное.
В кальцифицирующемся суставном хряще капсулы с хондроцитами были расширены. Хон-дроциты, располагающиеся в таких капсулах, имели пикнотичные ядра.
Подлежащая субхондральная кость была без признаков нарушений структурной организации.
При исследовании капсул суставов выявлено, что синовиальный слой утолщен и отечен, особенно в области заворота капсулы. В глубоких отделах капсулы фиброзный слой был без патологических нарушений.
При макроскопическом исследовании сустава через 12 часов после промывки сустава «Окте-нисептом» патологических нарушений не выявлено. Отек в суставе и околосуставных тканях отсутствует. Суставной хрящ блестящий, без признаков дегенерации.
При микроскопическом исследовании суставного хряща патологических нарушений не выявлено. Суставной хрящ по структурной организации не отличается от такового у животных контрольной группы.
Яркая метахромазия обнаруживавалась в капсулах хондроцитов, в основном в центральных отделах некальцифицированного суставного хряща. Топография метахромазии ГАГ и рефракции коллагена не отличалась от интактных и контрольных животных. Рефракция ГАГ не отличалась от показателей у интактных животных и животных предыдущих контрольной и первой опытной серий (20,1 + 1,5 нм).
Капсула сустава практически не имела патологических изменений. Синовиальный слой был узкий, признаки отека отсутствовали.
Таким образом, через 12 часов реактивных и деструктивных нарушений в капсуле сустава не наблюдается. В других компонентах сустава (мениски, надколенник, суставные поверхности мыщелков) изменений структурной организации не выявлено.
В опытной серии животных, через 6 часов после промывки сустава в разведении «Октенисеп-та» 1:3 при макроскопическом исследовании сустав не увеличен в объеме, что свидетельствует об отсутствии отека. Суставной хрящ без признаков патологических нарушений, блестящий.
При исследовании в световом микроскопе суставной хрящ мыщелков бедренной и больше-берцовой костей на основном протяжении сохранял характерную структурную организацию - в поверхностной зоне располагались удлиненные хондроциты с плотными ядрами. Однако обращало внимание отсутствие на отдельных участках клеток, а также появление «клеток-теней» - с лизированными ядрами.
На основной территории некальцифициро-ванного хряща плотность хондроцитов высокая. Клетки этой зоны имели характерную структурную организацию. Лишь в краевых отделах сустава (области введения и оттока препарата) суставной хрящ был со слабо выраженными реактивными нарушениями. В поверхностной зоне обнаруживались «клетки-тени» и небольшие бесклеточные участки. Вероятно, под действием препарата «Октенисепт» нарушаются тинктори-альные свойства клеток и они утрачивают способность воспринимать краситель.
У животных данной серии экспериментов отмечено значительное снижение метахромазии и рефракции ГАГ в поверхностной зоне. Однако на остальной территории суставного хряща топография и яркость метахромазии не отличалась от животных предыдущей серий и интактных животных (19,3 + 1,4 нм). Нарушений рефракции коллагена по территории суставных хрящей не было установлено.
Не выявлено деструктивных и дистрофических изменений и в кальцифицирующемся хряще, а также субхондральной кости.
«Клетки тени» обнаружены и в краевых отделах менисков. На остальной территории мениска клетки сохраняли характерное строение.
Воспалительные проявления были зафиксированы в синовиальной оболочке сустава. В краевых отделах она была утолщена за счет отека, сино-виоциты разобщены. Между ними выявляются макрофагальные клетки с плотной цитоплазмой, что свидетельствует об активизации фагоцитарной активности. Отмечаются также лимфоциты, которые располагаются, как между клетками синовиальной оболочки, так и субсиновиально, формируя небольшие скопления.
Через 12 часов после промывки сустава при микроскопическом исследовании в суставном хряще сохранялись единичные лизированные клетки в поверхностной зоне суставного хряща. Однако количество их было меньше, чем у животных на предыдущий срок наблюдения, что свидетельствует о восстановлении способности клеток к сорбции красителя.
В медиальном и латеральном менисках и надколеннике изменений в структурной организации не наблюдалось.
В капсуле сустава сохранялись признаки воспалительного процесса, однако менее выра-
женные, чем в предыдущем сроке исследования. В синовиальной мембране, наряду с сино-виоцитами, выявлялись единичные лимфоциты и макрофаги. Синовиоциты имели базофильную цитоплазму, что указывает на присутствие в ней продуктов биосинтеза гиалуронатов.
В связи с выявленными реактивными изменениями в синовиальной оболочке коленных суставов животных данной серии экспериментов, а также резким снижением метахромазии ГАГ в поверхностной зоне суставного хряща мыщелков бедренной и большеберцовой костей через 6 часов после промывки сустава была поставлена дополнительная серия, в которой срок наблюдения был увеличен до 24 часов.
Анализ структурной организации суставных
хрящей мыщелков обеих костей коленного сустава, надколенника и менисков не выявил в них дистрофических и деструктивных нарушений. Мета-хромазия ГАГ в поверхностной зоне и по территории некальцифицированного хряща была яркой и по значениям рефракции не отличалась ни от ин-тактных животных, ни от контроля (21,7 + 1,8 нм). Синовиальная оболочка капсулы была представлена одним-двумя слоями крупных синовиоцитов, отдельные из которых имели выраженно базо-фильную цитоплазму как отражение восстановительного процесса, направленного на выработку синовиальной жидкости. Деструктивных и реактивных изменений в капсуле сустава на данный срок не было обнаружено.
Таблица 1.
Морфометрические показатели коленного сустава крыс
Группы животных Толщина синовиального слоя капсулы сустава (мкм) п=15 Количество хондроцитов в поле зрения п=30 Рефракция ГАГ (нм) п=30
Интактные крысы 7,9 + 0,4 125,7 + 17,8 22,3 + 1,4
Контрольные животные 6 часов после промывки 9,5 + 0,6 Р<0,05 131,3 + 21,5 Р>0,05 21,9 + 1,6 Р>0,05
12 часов после промывки 8,6 + 0,7 Р>0,05 Р1>0,05 129,5 + 19,2 Р>0,05 Р1>0,05 20,5 + 1,5 Р>0,05 Р1>0,05
Опыт (Октенисепт 1:4) 6 часов после промывки 11,9 + 1,1 Р<0,01 Р1>0,05 116,4 + 18,1 Р>0,05 Р1>0,05 22,4 + 1,7 Р>0,05 Р1>0,05
Опыт (Октенисепт 1:4) 12 часов после промывки 9,3 + 0,8 Р>0,05 Р2>0,05 118,5 + 20,8 Р>0,05 Р2>0,05 20,1 + 1,5 Р>0,05 Р2>0,05
Опыт (Октенисепт 1:3) 6 часов после промывки 12,9 + 1,4 Р<0,001 Р1<0,05 113,7 + 16,3 Р>0,05 Р1>0,05 19,3 + 1,4 Р>0,05 Р1>0,05
Опыт (Октенисепт 1:3) 12 часов после промывки 10,2 + 1,3 Р<0,05 Р2>0,05 123,6 + 15,5 Р>0,05 Р2>0,05 19,8 + 1,5 Р>0,05 Р2>0,05
Опыт (Октенисепт 1:3) 24 часа после промывки 8,9 + 0,6 Р>0,05 Р2>0,05 121,9 + 18,4 Р>0,05 Р2>0,05 21,6 + 1,7 Р>0,05 Р2>0,05
Р - отличия от показателей интактных животных.
Р1 - отличия от показателей контрольных животных, через
Р2 - отличия от показателей контрольных животных, через
Итак, промывка сустава «Октенисептом» в разведении 1:3 вызывала реактивные изменения в синовиальной оболочке коленного сустава, которые обнаружилась через 6 и 12 час после промывки сустава.
Морфометрические исследования тканей сустава.
Для объективизации проведенного описательного морфологического исследования коленных суставов крыс в условиях их промывки препаратом «Октенисепт» в различных разведениях, а также для сравнительной количественной оценки изменений в тканях суставов, был проведен морфометрический анализ показателей, вариабельность которых была отмечена при качественном морфологическом исследовании.
Полученные результаты представлены в таблице 1.
6 часов после промывки сустава.
12 часов после промывки сустава.
Необходимо отметить, что при использовании «Октенисепта» в разведении 1:3 через 6 часов в поверхностных зонах суставных хрящей, а также в краевых отделах менисков были отмечены единичные «клетки-тени», а также выявлялись небольшие территории, в которых хонд-роциты отсутствовали.
При анализе рефракции ГАГ, измеряемой по территории некальцифицированных суставных хрящей, было установлено, что их показатели в сериях экспериментов (контроль и обе опытные группы) также достоверно не отличались. Не было установлено отличий и по сравнению с ин-тактными животными. Однако необходимо отметить, что в группе животных, в которой суставы животных промывали «Октенисептом» в разведении 1:3, через 6 часов после манипуляции метахромазия и рефракция ГАГ в поверхностной зоне суставных хрящей практически отсут-
ствовали. Однако, на последующие сроки исследования - через 12 и 24 часа - эти показатели восстанавливались.
Реактивные и воспалительные изменения, выраженные в разной степени, были отмечены в синовиальном слое капсулы сустава животных, практически у животных всех опытных и контрольной групп. Однако при измерении толщины синовиального слоя, что может служить показателем присутствия в ней воспалительных изменений, достоверные отличия, относительно интактных животных, были выявлены не у всех групп животных. Достоверные отличия наблюдались у животных первой (через 6 часов после промывки сустава) контрольной группы, где показатели толщины синовиального слоя, по отношению к интактным животным, были выше на 16,8 %. Толщина капсулы была достоверно выше показателей капсулы интактных животных и в коленных суставах животных опытных групп. Так, в группе животных, где сустав промывали «Октенисептом» в разведении 1:4, толщина капсулы была больше на 33,6 %, в группе животных с промывкой сустава «Октенисептом» в разведении 1:3 через 6 часов, показатели толщины капсулы были выше (относительно интактных животных) на 38,8 %, а через 12 часов - на 22,5 %. Толщина капсулы у животных данной опытной группы через 6 часов после промывки сустава была достоверно выше (на 26,4 %) и при сравнении с животными контрольной группы аналогичного времени.
Через 24 часа толщина капсулы у животных данной опытной группы не отличалась от ин-тактных животных.
Таким образом, после проведения исследования на 40 белых лабораторных крысах по изучению действия на ткани коленного сустава препарата «Октенисепт», используемого в различных разведениях при промывке сустава, при анализе влияния препарата «Октенисепт» в разведении 1:4 изменения в тканях сустава носили реактивный характер и были аналогичны таковым при введении в полость сустава воды для инъекций (контрольная серия). Слабо выраженный воспалительный ответ синовиальной мембраны на введение в сустав, как воды, так и «Октенисеп-та», был связан с нарушением целостности капсулы сустава, вымыванием из полости сустава синовиальной жидкости и присутствием жидкости, не имеющей вязкости и не характерной для сустава - воды. При этом разведении выявлен-
Реферат
ВИЗНАЧЕННЯ ОПТИМАЛЬНОГО РОЗВЕДЕННЯ ПРЕПАРАТУ «ОКТЕН1СЕПТ» ДЛЯ ВНУТР1ШНЬОСУГЛОБОВОГО ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТУ В ЗРОСТАЮЧОМУ ОРГАН1ЗМ1 Лукьяненко Д.Н.
Ключовi слова: октенюепт, зростаючий организм, метаепiфiзарний остео1^елгг, дгги, суглоби.
Актуальним е питання вибору антисептика, що не викликае патолопчного впливу на тканини опор-но-рухового апарату. Проведено експеримент з метою визначення безпечноТ для оргашзму концент-рацп препарату «Октенюепт», котра не призводить до дегенеративо-запальних змш тканин суглобу, включаючи кюткову, на 40 двохмюячних бтих статевонезртих лабораторних щурах. В робот1 викори-стовували пстолопчний, морфометричний та статистичний методи. Встановлено, що препарат не
ные воспалительные проявления в синовиальной мембране носили реактивный характер, воспаление не прогрессировало, и к 12 часам после обработки сустава - затухало.
В присутствии большей концентрации препарата (разведение «Октенисепта» в соотношении 1:3), в суставе через 6 часов после введения выявлялись более выраженные изменения как в суставном хряще, так и в капсуле сустава по сравнению с предыдущей серией, в которой применяли «Октенисепт» в разведении 1:4. По истечению 12 часов изменения в суставном хряще и синовиальном слое капсулы сустава уменьшались, однако слабо выраженные признаки реактивного синовита сохранялись.
Для анализа структурной организации синовиальной оболочки капсулы, в которой были зафиксированы изменения через 12 часов после промывки сустава препаратом «Октенисепт» в разведении 1:3 была поставлена дополнительная серия экспериментов, в которой анализ тканей сустава проведен через 24 часа после промывки. Было установлено, что на этот срок в синовиальном слое капсулы сустава и суставных хрящах мыщелков бедренной и больше-берцовой костей структурных изменений не наблюдалось.
Выводы. На основании полученных результатов, препарат «Октенисепт» не обладает дегенеративно-деструктивным и токсическим действием на суставной хрящ и синовиальную оболочку сустава, а также другие компоненты сустава. Использование препарата в разведении 1:4 не вызывает воспалительных изменений в тканях суставов растущих лабораторных животных, что позволяет нам применить препарат в этой концентрации при лечении гнойно-воспалительных заболеваний опорно-двигательного аппарата в растущем организме.
Литература
1. Саркисов Д.С. Микроскопическая техника: Руководство / Д.С.Саркисов, Ю.Л.Перова. - М. : Медицина, 1996. - 544 с.
2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство / Ав-тандилов Г.Г. - М. : Медицина, 1990. - 384 с.
3. Керн М. Принципы поляризационно-оптического анализа в изучении соединительной ткани / М.Керн, Л.Модиш, Н.В.Дедух [и др.] // Архив анат., гистол. и эмбриол. - 1985. - Т.88, №6. - С. 512.
4
Некачалов В.В. Патология костей и суставов. Руководство / Некачалов В.В. - СПб. : Сотис, 2000. - 288 с.
5. бвропейська конвенц1я про захист хребетних тварин, що вико-ристовуються для дослщних та шших наукових цтей. Страсбург, 18 березня 1986 року : офщшний переклад [Електронний ресурс] / Верховна Рада УкраТни. - Офщ. веб-сайт. - (М1жнаро-дний документ Ради бвропи). - Режим доступу до документа: http://zakon.rada.gov.ua/cgi-Ыn/laws/mam.cgmreg=994_137
здiйснюe токсичного впливу на компоненти суглобу, оптимальним е розведення препарату 1:4.
Summary
DETERMINING OF OPTIMAL CONCENTRATION OF " OCTENISEPT " MEDICATION FOR INTRA-ARTICULAR INTRODUCTION IN
CHILDREN
Lukyanenko D.N.
Keywords: octenisept, growing organism, osteomyelitis metaepiphysarius, children, joints.
The problem of choice of the most effective antiseptic that doesn't affect tissues of the musculoskeletal system is still being urgent. Therefore, this experiment is aimed to define safe concentration of "Octenisept" medication which doesn't result in degenerative and inflammatory changes in joint and bone tissues. The experiment has been carried out on 40 e two month aged non-pubertal white laboratory rats. We have used histological, morphometric and statistical methods. It has been found out the medicine doesn't have any toxic effect on the joint components. The optimal concentration of the medicine is 1:4.
УДК 612.176+616.126+611.018.74+612.452 Лучко 1.М.
АКТИВН1СТЬ СИМПАТО-АДРЕНАПОВО1 I ПРОСТАГПАНДИНОВО1 СИСТЕМ ТА СТУПШЬ УРАЖЕННЯ ЕНДО-ТЕЛ1Ю ЕНДОКАРДА ЩУР1В ПРИ ГОСТРОМУ СТРЕС1 Р1ЗНО1 ТРИВАЛОСТ1
1вано-Франшський нацюнальний медичний уыверситету
Метою роботи було вивчення стану ендотел{ю ендокарда шлуночтв щур{в у взаемозв'язку i3 pi-внями катехолам^в та деяких простагландитв у кpовi при dii гострого емоцтно-больового стресу одно- i тригодинног тривалост1. Вм^т катехолам^в визначали радюферментним методом за допомогою стандартних набоpiв «Катехола» (Чехiя). Для визначення концентрацп простагландитв використовували стандартт тест-системи фipми «Clinical Assays» (США) i реагенти 1нституту iзотопiв (Угоршина) (радюферментний метод). Стан ендотелю ендокарда вивчали за допомогою свтловог мтроскопп, аналiзуючи мазки-вiдбитки з макропрепарат1в шлуночтв. Встановлено, що стресовий вплив призводить до збшьшення активностi симпато-адреналовог та простагландиновог систем i проявляешься вираженим тдвищенням концентрацп в кpовi катехолам^в i простагландитв клаЫв Е2, F2a i I2. Збшьшення вм^ту простагландитв знаходиться у прямш залежностi вiд тpивалостi дп стресора. Шдсилення синтезу та видi-лення в кров катехолам^в, ят, як вiдомо, волод^ть патоендотелютропним ефектом, супро-воджуеться пошкодженням ендошелiоцитiв ендокарда шлуночтв та гх злущенням. Вираже-тсть процесу десквамаци ■катин зростае iз збтьшенням часу стрес-реакцп. Якщо тсля одно-годинного стресу мае м^це незначне збшьшення кiлькостi злущених ендотелiоцитiв, то тсля тригодинного впливу цей показник зростае в декшька pазiв. Шдвищення активностi простагландиновог системи мае, очевидно, захисний характер i обмежуе пошкоджуючу дю на серцево-судинну систему в стресових ситуащях тдвищеног концентрацп катехолам^в.
Ключов1 слова: стрес, ендокард, ендотелм, катехоламши, простагландини.
Вступ
Сьогодн очевидним е той факт, що в оргаш-зацп стрес-реакцп штегративну i домшуючу роль в^фграе центральна нервова система, зокрема первинна ланка нейрогуморальноТ регуляцп, яка виконуе роль пускового мехашзму - симпато-адреналова система (САС). Центральне мюце при цьому належить ппоталамусу, осктьки його багаточисельн нервовi кл^ини зв'язан зi вама вщдтами ЦНС. Основними гормонами, як видн ляються при стрес-реакци i через як реалiзуеть-ся пошкоджуючий вплив стресора на серцево-судинну систему, в тому чи^ i ТТ ендотелш, е катехоламши (КА) [2, 3, 5, 6]. З шшого боку, е дат про те, що при гострому емоцшному стрес змшюеться також синтез i вивтьнення деяких простагландитв (ПГ), як володшть цитопротек-тивною дiею [4, 5]. Одним iз найбтьш важливих та фiзiологiчно активних ПГ е простациклш (ПГ12), який синтезуеться ендотелiем та прояв-ляе вазодилататорний i антиагрегантний ефекти [4, 9, 11].
Незважаючи на те, що вивченню впливу стресових факторiв на серцево-судинну систему присвячено велику ктькють дослщжень, л^ера-турн дан про стан ендотелiальноТ вистелки се-рця у взаемозв'язку iз активнютю симпатоадре-наловоТ та простагландиновоТ систем при дм гострого стресу е дуже обмеженими.
Мета дослвдженн Метою роботи було вивчити стан ендотелш ендокарда шлуночкв щурiв у взаемозв'язку iз вмiстом в кровi КА (адреналшу, норадреналiну i дофамiну) та деяких Пг (Е2, F2a, 12) при дм гострого емоцiйно-больового стресу (ЕБС) рiзноТ тривалостi.
Матерiал i методи дослiдженн
Дослiдження проводили на 26 бтих безпоро-дних щурах-самцях масою 180-240 г, якi були розподтеы на три групи: 1-а - контрольна група, 2-а - щури, якi пiддавалися дiТ одногодинного ЕБС, 3-я - тварини, що зазнавали впливу триго-динного ЕБС. Для моделювання ЕБС викорис-
