Определение частот мутаций в гене муковисцидоза, обуславливающих восстановление функции повреждённого белка антибиотиками аминогликозидного ряда Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Определение частот мутаций в гене муковисцидоза, обуславливающих восстановление функции повреждённого белка антибиотиками аминогликозидного ряда

Зобкова Г.Ю.

ФГБОУДПО РМАНПО Минздрава России, Москва, Россия

Введение

Муковисцидоз — одно из наиболее частых аутосомно-рецессивных заболеваний с полиорганным поражением, характеризующееся нарушениями в гене CFTR, кодирующем одноимённый белок — трансмембранный регулятор муковисцидоза. Он находится в выводных протоках желез внешней секреции и отвечает за транспорт электролитов. При нарушениях структуры белка увеличивается вязкость секрета и развивается благоприятная среда для роста и размножения патогенной микрофлоры. Поэтому при лечении больных муковисцидозом антибиотики являются незаменимым компонентом терапии. Однако, было установлено, что антибиотики амингликозидного ряда, в частности гентамицин, выполняют не только свою непосредственную роль в борьбе с инфекцией, но и могут частично восстанавливать функцию повреждённого белка при мутациях 1 класса (нонесенс-мутации) в особенности при мутации W1282X [1]. Как выяснилось в ряде исследований, эффект гентамицина связан с частичной супрессией стоп-кодонов. В настоящее время в большинстве случаев, диагноз муковисцидоз выставляется по результатам неонатального скрининга на муковисцидоз, который включает 4 этапа: выявление иммунореактивного трипсина (ИРТ) в высушенном пятне крови, повторный ИРТ, пото-вый тест и ДНК-диагностику, при этом только первые 3 пункта являются обязательными [2]. Таким образом, ДНК диагностика проводится не всем детям.

Цель

Определить частоты пациентов, потенциально отвечающих на терапию гентамицином как препаратом, помогающим восстанавливать функцию повреждённого белка.

Материалы и методы

В исследовании участвовали 202 ребенка с клиническим диагнозом муковисцидоз и наблюдавшиеся в ФГБУ «РДКБ» Минздрава России в 2015—2017 гг. Для диагностики была использована периферическая кровь. Полученные образцы ДНК сразу использовали для генотипирования или хранили при —20 °С. Молекуляр-но-генетический анализ включал в себя определение 24 наиболее значимых на территории РФ мутаций ассоциированных с муковисцидозом: F508del, L138ins, G542X, E92K, W1282X, R117H, N1303K, 604insA, 2143delT, 621 + 1G>T, 2184insA, S1196X, 3849 + 10kbC>T, 3821delT, dele 2,3 (21kb), 3667insTCAA, R334W, 1677delTA, 394delTT, 2183AA>G, R553X, 2789+5G>A, K598ins, 3944delGT [3].

Результаты

В результате генотипирования было выявлено 342 патогенные аллели, 6 из которых были ассоциированы с мутацией W1282X, у пяти пациентов соответственно. У двух пациентов из них была найдена лишь одна мутация. Генотипы пациентов с W1282X были распределены следующим образом: W1282X/? (вторая мутация не найдена), W1282X/? (вторая мутация не найдена), W1282X/F508del? W1282X/W1282X, W1282X/1677delTA.

Заключение

Таким образом, у пяти пациентов из 202 (2,5 %) терапия гентамицином может улучшить клиническое проявление заболевания. Однако следует помнить о побочных эффектах препарата и применять его с осто-

рожностью. Генотипирование пациентов с муковисцидозом может не только помочь в установлении диагноза и проведении пренатальной диагностики при дальнейшем деторождении, но может повлиять на выбор тактики при лечении пациента.

Литература

1. Linde L., Boelz S., Nissim-Rafinia M., Oren Y.S., Wilschanski M., Yaacov Y. et al. Nonsense-mediated mRNA decay affects nonsense transcript levels and governs response of cystic fibrosis patients to gentamicin. J. Clin. Invest. 2007, 117: 683—692.

2. Баранова А.А. Федеральные клинические рекомендации по оказанию медицинской помощи детям с кистозным фиброзом (муковисцидозом). 2015, 54 с.

3. Петрова Н.В. Молекулярно-генетические и клинико-генотипические особенности муковисцидоза в российских популяциях [диссертация]. Москва; 2009, 141 с.