CC BY
10
© Коллектив авторов, 2022
Альшевская А.А.1, Жукова Ю.В.1, Лопатникова Ю.А.1, Сенникова Ю.А.2, Шкаруба Н.С.1, Чумасова О.А.1, Сизиков А.Э.1, Непомнящих В.М.1, Демина Д.В.1, Сенников С.В.1
Однонаправленные и разнонаправленные изменения в экспрессии мембраносвязанных рецепторов к ФНО на иммунокомпетентных клетках при ревматоидном артрите и бронхиальной астме
1 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии» Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, 630099, г. Новосибирск, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 630091, г. Новосибирск, Российская Федерация
Резюме
Введение. ФНО обеспечивает контроль воспалительных процессов в норме и при развитии ревматоидного артрита (РА) и бронхиальной астмы (БА). Важными механизмами регуляции действия цитокина являются изменение коэкспрессии и плотности экспрессии рецепторов (ТОТК! и Т№К2), отражающие чувствительность клеток к действию медиатора и тип ответа клетки. Вопрос выявления уровней экспрессии рецепторов, критически важных для формирования необратимых изменений иммунной системы при развитии и хронизации заболеваний, остается открытым.
Цель исследования - сопоставление параметров экспрессии и коэкспрессии ТОТШ и ЮТК2 на иммунокомпетентных клетках при РА и БА по сравнению с показателями здоровых доноров и выявление характерных комбинаций изменения параметров при хронических воспалительных иммуноопосредованных заболеваниях.
Материал и методы. Определение экспрессии и коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО на мононуклеарных клетках здоровых доноров и пациентов с РА и БА производилось методом многоцветной проточной цитометрии. Для выявления характерных изменений в показателях при патологии использовался логистический регрессионный анализ.
Результаты. Было выявлено 3 паттерна изменения экспрессии и коэкспрессии рецепторов при заболеваниях. Для 23 показателей были продемонстрированы значимые изменения в сторону повышения уровней экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО как при РА, так и при БА, и для 16 показателей - в сторону снижения, соответственно. 6 параметров, включающих процентное содержание ТОТШ+ТОТК^-клеток в популяциях СБ4+, СВ4+СБ45КЛ+, СБ8+; процентное содержание ТОТШ+ТОТК^-клеток в популяциях СБ19+, СБ8+СБ45К0+ и число рецепторов ТОТШ на клетках СБ4+/СБ45К0+ показали наиболее выраженные изменения, связанные с патологическими состояниями.
Заключение. Проведенное исследование позволило установить общие тренды и характерные комбинации отличий в изменении экспрессии рецепторов к ФНО при иммуно-опосредованных заболеваниях различной этиологии, а также установить определенные уровни экспрессии, ассоциированные со значимым повышением риска наличия БА и РА.
Ключевые слова: ФНО; ТОТМ; ТЫРЯ2; плотность экспрессии рецепторов; уровень экспрессии рецепторов; ревматоидный артрит; бронхиальная астма
Статья получена 10.10.2022. Принята в печать 17.11.2022.
Для цитирования: Альшевская А. А., Жукова Ю.В., Лопатникова Ю.А., Сенникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Чумасова О.А., Сизиков А.Э., Непомнящих В.М., Демина Д.В., Сенников С.В. Однонаправленные и разнонаправленные изменения в экспрессии мембраносвязанных рецепторов к ФНО на иммунокомпетентных клетках при ревматоидном артрите и бронхиальной астме. Иммунология. 2022; 43 (6): 632-642. Б01: Шр§:/Мог о^/10.33029/0206-4952-2022-43-6-632-642
Финансирование. Исследование выполнено в рамках темы госзадания «Изучение показателей экспрессии рецепторов цитокинов и их лигандов в формировании функциональных свойств и типа реагирования клеточных популяций различного генеза в норме и при патологии», номер Госрегистрации в ЕГИСУ НИОКТР 122011800353-4.
Для корреспонденции
Сенников Сергей Витальевич -доктор медицинских наук, профессор, заведующий лабораторией молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: sennikovsv@gmail.com https://orcid.org/0000-0002-7366-7768
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Альшевская А.А., Лопатникова Ю.А., Сенников С.В.; сбор и обработка материала - Сенникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Чумасова О.А., Сизиков А.Э., Непомнящих В.М., Демина Д.В.; статистическая обработка данных - Альшевская А.А., Жукова Ю.В., Лопатни-кова Ю.А.; написание текста - Альшевская А.А., Жукова Ю.В., Лопатникова Ю.А.; редактирование - Сенников С.В., утверждение окончательного варианта статьи - Сенников С.В.; ответственность за целостность всех частей статьи - Жукова Ю.В.
Alshevskaya A.A.1, Zhukova Yu.V.1, Lopatnikova Yu.A.1, Sennikova Yu.A.2, Shkaruba N.S.1, Chumasova O.A.1, Sizikov A.E.1, Nepomnyashchikh V.M.1, Demina D.V.1, Sennikov S.V.1
Unidirectional and multidirectional changes in the expression of membrane-bound TNF receptors on immunocompetent cells in rheumatoid arthritis and bronchial asthma
1 Research Institute of Fundamental and Clinical Immunology of the Ministry of Science and High Education of Russian Federation, 630099, Novosibirsk, Russian Federation
2 Novosibirsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation, 630091, Novosibirsk, Russian Federation
Abstract
Introduction. TNF provides control over inflammatory processes in normal conditions and in the development of rheumatoid arthritis (RA) and bronchial asthma (BA). Important regulatory mechanisms are changes in coexpression and expression density of receptors (TNFR1 and TNFR2), which reflect the sensitivity of cells to the action of a mediator and the type of cell response. The question of identifying the expression levels of receptors that are critical for the formation of irreversible changes in the immune system during the development and chronicity of diseases remains open.
Aim of the study was to compare the parameters of expression and coexpression of type 1 and type 2 receptors to TNF on immunocompetent cells in RA and BA patients compared with those of healthy donors and to identify characteristic patterns of parameter changes in chronic inflammatory immune-mediated diseases.
Material and methods. The expression and coexpression of TNFR1 and TNFR2 was determined on mononuclear cells of healthy donors and patients with RA and BA using multicolor flow cytometry. Logistic regression analysis was performed to identify characteristic changes in pathology.
Results. 3 patterns of changes in the expression and co-expression of receptors in diseases have been identified. For 23 indicators, significant changes were demonstrated towards an increase in the levels of expression and co-expression of TNF receptors in both RA and BA, and for 16 indicators - towards a decrease, respectively. 6 parameters had the greatest diagnostic significance, including percent of TNFR1+TNFR2--cells in CD4+, CD4+/CD45RA+, CD8+ populations; percent of TNFR1+TNFR2+-cells in CD19+, CD8+CD45R0+ populations; and number of TNFR1 on CD4+/CD45R0+-cells.
Conclusion. The study made it possible to establish general trends and characteristic patterns of differences in changes in the expression of TNF receptors in immune-mediated diseases of various etiologies, as well as to establish certain levels of expression associated with a significant increase in the risk of bronchial asthma and rheumatoid arthritis.
Keywords: TNF; TNFR1; TNFR2; receptor expression density; receptor expression level; rheumatoid arthritis; bronchial asthma
Received 10.10.2022. Accepted 17.11.2022.
For citation: Alshevskaya A.A., Zhukova Yu.V., Lopatnikova Yu.A., Sennikova Yu.A., Shkaruba N.S., Chumasova O.A., Sizikov A.E., Nepomnyashchikh V.M., Demina D.V., Sennikov S.V. Unidirectional and multidirectional changes in the expression of membrane-bound TNF receptors on immunocompetent cells in rheumatoid arthritis and bronchial asthma. Immunologiya. 2022; 43 (6): 632-42. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-6-632-642 (in Russian)
For correspondence
Sergey V. Sennikov -MD, PhD, Professor, Head of Laboratory of Molecular Immunology, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: sennikovsv@gmail.com https://orcid.org/0000-0002-7366-7768
Funding. The work was performed within a state task «The study of expression indicators of cytokine receptors and their ligands in the formation of functional properties and the type of response of cell populations of various genesis in normal and pathological conditions» registration number in USAIS RDTCW 122011800353-4.
Conflict of interests. The authors declare no conflict of interests.
Authors' contribution. The concept and design of the study - Alshevskaya A.A., Lopatnikova Yu.A., Sennikov S.V.; data collection and processing of material - Sennikova Yu.A., Shkaruba N.S., Chumasova O.A., Sizikov A.E., Nepom-nyashchikh V.M., Demina D.V.; statistical data processing - Alshevskaya A.A., Zhukova Yu.V., Lopatnikova Yu.A.; text writing - Alshevskaya A.A., Zhukova Yu.V., Lopatnikova Yu.A.; editing - Sennikov S.V., approval of the final version of the article - Sennikov S.V.; responsibility for the integrity of all parts of the article - Zhukova Yu.V.
Введение
Воспаление является важнейшей составляющей частью иммунитета и регулируется многими факторами. Одним из таких регулирующих звеньев является ци-токиновая сеть, где фактор некроза опухоли а (ФНО) играет ключевую роль в обеспечении корректной работы и реагирования на разные типы стимулов. ФНО обеспечивает контроль воспалительных процессов при различных заболеваниях [1].
Действие цитокина основано на внутриклеточной передаче сигналов, опосредованных специфическими рецепторами 2 типов - ТОТШ и Т№К2. В зависимости от преобладающих физиологических обстоятельств сигнальные пути ТОТЯШ могут приводить к индукции выживания клеток, а также способны вызывать гибель клеток. Показано, что 2 рецептора не только могут независимо функционировать, но и влиять друг на друга посредством перекрестных реакций между различными сигнальными путями. Сложность этого перекрестного взаимодействия зависит от различной кинетики передачи сигналов между ТОТЯ! и Т№К2, с помощью которой может поддерживаться тонкий баланс между выживанием клеток и апоптозом [2].
Важными механизмами регуляции действия ци-токина служат изменения коэкспрессии и плотности экспрессии рецепторов. Этот механизм участвует в контроле иммунного ответа, может оказывать влияние на течение заболеваний (онкологических, аутоиммунных, воспалительных) и на эффективность проводимой терапии [3]. Уровни экспрессии рецепторов относятся к определяющим факторам чувствительности клеток к действию медиатора и типам ответа клетки, что показано для рецепторов ингибиторных молекул, к которым относятся в том числе рецепторы ФНО [4]. Однако именно для ФНО уровни экспрессии рецепторов, определяющие изменения типа взаимодействия или активируемых сигнальных путей, в настоящее время не установлены. Дифференциальное взаимодействие ФНО с его двумя рецепторами, ТОТШ и ТОТК2, на им-мунокомпетентных клетках лежит в основе различных функций цитокина в гомеостатических и патологических процессах [4, 5], создавая предпосылки для более глубокого изучения механизмов этого взаимодействия.
В предыдущих исследованиях было показано, что при различных иммуноопосредованных заболеваниях определяется уникальный для данного заболевания профиль экспрессии рецепторов [6, 7], а также с помо-
щью одно- и многофакторного регрессионного анализа и математического моделирования были разработаны формулы для диагностики ревматоидного артрита (РА) и бронхиальной астмы (БА), что подтверждает практическую значимость изучаемых показателей и их связь с заболеваниями.
Установление уровней экспрессии, определяющих переключение между проапоптотическими и проли-феративными сигнальными путями, необходимо для прогнозирования функционального ответа клеток на действие цитокина, требует сравнения и сопоставления показателей, значимо изменяющихся при иммунопатологических состояниях разной этиологии. В связи с этим цель данного исследования - сопоставление параметров экспрессии и коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО на иммунокомпетентных клетках при РА и БА по сравнению с соответствующими показателями здоровых доноров, а также выявление комбинации параметров, для которых характерны однонаправленные и разнонаправленные изменения при хроническом иммунном воспалении различной этиологии (аутоиммунной и аллергической).
Материал и методы
Объект исследования. Для оценки уровня коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО использовались образцы цельной крови пациентов с БА и пациентов с РА, проходящих лечение в отделении аллергологии и отделении ревматологии Клиники иммунопатологии НИИФКИ (г. Новосибирск), а также условно здоровых доноров. Доноры и пациенты дали информированное согласие на участие в исследовании и использование персональных данных. Исследование соответствует положениям Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации в ред. 2013 г. (WMA Declaration of Helsinki - Ethical Principles for Medical Research Involving Human Subjects). Протокол исследования был утвержден локальным этическим комитетом НИИФКИ (протокол № 131 от 12 мая 2021 г.).
В исследование были включены 46 условно здоровых доноров в возрасте 18-77 лет, 22 пациента с БА в возрасте 22-70 лет и 61 пациент с РА в возрасте 2283 года. Исходная демографическая и клиническая характеристика участников исследования и распределение по терапии представлены в табл. 1.
Венозную кровь забирали натощак из локтевой вены в стерильных условиях по 6 мл в вакуумные пробирки
Таблица 1. Демографические и клинические характеристики исследуемых групп пациентов и условно здоровых доноров
Параметр Условно здоровые доноры (n = 46) Пациенты с БА (n = 22) Пациенты с РА (n = 61)
Пол: женский/мужской, п (%) 30 (65,2 %)/16 (34,8 %) 16 (72,7 %)/6 (27,3 %) 52 (85,2 %)/9 (14,8 %)
Возраст, годы, медиана (ИКР) 36,5 (30 : 54) 46,5 (38 : 52) 56 (45 : 65)
Длительность заболевания, годы, медиана (ИКР) - 8,5 (3 : 16) 8 (5 : 17)
Степень активности и тяжести заболевания
Легкая форма БА, низкая активность РА (ОФВ, > 80 % для БА, БЛ828 < 3,2 для РА) - 4 (18,1 %) 12 (19,7 %)
Средняя форма БА, средняя активность РА (ОФВ1 60-80 % для БА, БЛ828 3,2-5,1 для РА) - 10 (45,5 %) 24 (39,3 %)
Тяжелая форма БА, высокая активность РА (ОФВ1 < 60 % для БА, БЛ828 > 5,1 для РА) - 8 (36,4 %) 25 (41 %)
Примечание. БА - бронхиальная астма; РА - ревматоидный артрит; ИКР - межквартшьный интервал; ОФВ - объем форсированного выдоха.
c антикоагулянтом K3-EDTA (Vacuette, Greiner Bio-One GmbH, Austria). Пробоподготовку проводили с помощью лизирующего буфера BD FACS Lysing Solution (кат. номер 349202; BD, США) согласно инструкции производителя.
Проточная цитометрия. Оценка фенотипических характеристик проводилась с помощью проточной ци-тометрии на цитофлуориметре FACSVerse (BD, США) с использованием моноклональных антител (BioLegend, USA): CD3-V421, CD19-FITC, CD8-APC/Cy7, CD5-APC-Cy7, CD14-Pe/Cy7, CD25-FITC, CD127-APC/Cy7, CD45R0-FITC, CD45RA-PacificBlue, CD4 Pe/Cy7. Параметры экспрессии и коэкспрессии TNFR1 и TNFR2 оценивали с использованием антител TNFRI-PE, TNFRII-PE, TNFRI-APC, TNFRII-APC (R&D Systems, USA). Обработка данных и расчет показателей интенсивности флуоресценции производились с использованием программного обеспечения FacsDiva (BD, США).
Для расчета числовых показателей количества рецепторов на клетках использовался модифицированный протокол, разработанный в лаборатории молекулярной иммунологии [6] на основе коммерческого набора BD QuantiBRITE PE (BD Biosciences, США). Для одновременного определения количества рецепторов ФНОа 1-го и 2-го типов на различных типах клеток (TNFR1+TNFR2--, TNFR1+TNFR2+-, TNFR1-TNFR2+-и TNFR1-TNFR2--фракциях в каждой субпопуляции) проводили двойное мечение парных образцов парами антител (TNFR1-PE + TNFR2-APC и TNFR2-PE + TNFR1-APC). После цитометрического анализа количество рецепторов 1-го типа (для фракций TNFR1+TNFR2-и TNFR1+TNFR2+) подсчитывали в пробирках с TNFR1-PE и TNFR2-APC. Количество рецепторов 2-го типа (для фракций TNFR1-TNFR2+ и TNFR1+TNFR2+) рассчитывали в пробирках с TNFR2-PE и TNFR1-APC. Процентное содержание каждой фракции определяли как среднее значение между двумя образцами.
Статистическая обработка. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного обеспечения STATISTICA 7.0 (StatSoft, США).
Данные для количественных показателей представлены в виде медианы и межквартильного интервала (ИКР), сравнение независимых выборок с определением статистической значимости отличий проводилось с использованием непараметрического дисперсионного рангового критерия Краскела-Уоллиса с множественным сравнением медиан. Однофакторный логистический регрессионный анализ риска наличия РА и БА проводился на основе сравнения показателей экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО при данных патологиях по сравнению с показателями условно здоровых доноров. Расчет отношения шансов (ОШ) и 95 % доверительного интервала (ДИ) для параметров экспрессии производился для процентных показателей в перерасчете на изменение, равное 1 %, и для показателей среднего количества рецепторов в перерасчете на изменение, равное 1000 рецепторов. Дополнительно для сравнительной оценки значимости изменений в уровне экспрессии выделенных параметров рассчитывались скорректированные показатели ОШ для изменения процента клеток, равного 5 %.
Результаты
Отбор параметров для проведения однофакторного логистического регрессионного анализа
В анализ были включены параметры экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО на 12 субпопуляциях иммунокомпетентных клеток: общий пул СБ19+-В-лимфоцитов, общий пул СБ14+-моноцитов, общий пул СБ3+-Т-лимфоцитов, хелперные СБ4+-Т-клетки, активированные хелперные СБ4+СБ25+-Т-клетки, наивные хелперные СБ4+СБ45КЛ+-Т-клетки, хелперные СВ4+СБ45К0+-Т-клетки памяти, цитотоксические СБ8+-Т-клетки, активированные цитотоксические СВ8+СБ25+-Т-клетки, наивные цитотоксические СВ8+СБ45КЛ+-Т-клетки, цитотоксические СБ8+СБ45К0+-Т-клетки памяти, регуляторные СБ4+СБ25Ь1®ьСВ1271о--Т-клетки.
Для каждой из 12 исследуемых субпопуляций в одно-факторный анализ включали 6 параметров процентного
Таблица 2. Однофакторный регрессионный анализ параметров экспрессии и коэкспрессии ЮТЯШ, разнонаправленно измененных при иммунопатологических заболеваниях различной этиологии и ассоциированных с наличием ревматоидного артрита (РА) и бронхиальной астмы (БА)
Популяция Параметр Ревматоидный артрит Бронхиальная астма
ОШ (2,5 % : 97,5 %) Р ОШ (2,5% : 97,5%) Р
В-клетки
СБ19+ Процентное содержание двойных позитивных (Т№,Я1+Т№Ш+) клеток 1,046 (1,013 : 1,085) 0,009 0,931 (0,863 : 0,986) 0,031
Цитотоксические Т-клетки
СБ8+СБ45Я0+ Процентное содержание двойных позитивных (Т№,Я1+Т№Ш+) клеток 1,052 (1,026 : 1,084) < 0,001 0,873 (0,776 : 0,948) 0,007
Примечание. Здесь и в табл. 3-4 - расчет отношения шансов (ОШ) и доверительного интервала (ДИ) для параметров экспрессии производился для процентного содержания в перерасчете на изменение, равное 1 %, и для среднего количества рецепторов в перерасчете на изменение, равное 1000 рецепторов.
содержания клеток с различной коэкспрессией рецепторов на них и 6 параметров рассчитанного количества рецепторов на клетках. Было установлено, что для каждой патологии характерен набор параметров, статистически значимо ассоциированных с наличием данной нозологии. При этом было выделено 3 группы параметров по направлению их изменений в сравнении с показателями условно здоровых доноров: разнонаправленно изменяющиеся параметры (снижающиеся при БА и повышающиеся при РА), однонаправленно снижающиеся при РА и БА параметры и однонаправленно повышающиеся при РА и БА параметры. Данные комбинации параметров были выделены для установления общих трендов в изменениях рецепторов ФНО при иммуноопосредо-ванных заболеваниях различных типов.
45-
и 40-
0
1 35"
0)
3 30-
Я
я
И 250)
5
8 20-
и
§ 15-
и
я 10-
о
6
С 5-
0
р= 0,03
р= 0,013
р<0,001
р= 0,049 Т р <0,001
р <0,001
Процентное содержание двойных Процентное содержание двойных позитивных -клеток позитивных -клеток
среди CD19+-В-лимфоцитов среди CD8+CD45R0+-Т-лимфоцитов
□ Условно здоровые доноры В Пациенты с РА □ Пациенты с БА
Рис. 1. Процентное содержание двойных позитивных Т№'КЛ+Т№'Я2+-клеток, разнонаправленно различающееся у пациентов с бронхиальной астмой (БА) и ревматоидным артритом (РА) по сравнению с условно здоровыми донорами Параметры экспрессии и коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО, повышение экспрессии которых ассоциировано с наличием РА и БА.
Параметры экспрессии и коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО, изменяющиеся разнонаправленно при разных типах хронического иммунного воспаления
Было установлено, что из 144 исследованных параметров только два изменяются разнонаправленно при разных типах иммунноопосредованных хронических воспалительных заболеваний: процентное содержание двойных позитивных Т№К1+ТМРК2+-клеток среди СБ19+-В-лимфоцитов и процентное содержание двойных позитивных Т№К1+ТМРК2+-клеток среди цито-токсических СВ8+СБ45К0+-Т-клеток памяти (табл. 2, рис. 1).
Уменьшение процентного содержания двойных позитивных ТОТЯ1 +Т№К2+-клеток среди СБ19+-В-лимфоцитов по сравнению с нормативными показателями здоровых доноров на каждые 5 % ассоциировано с повышением риска БА в 1,430 (95% ДИ 1,0732,089, р = 0,031) раза, а повышение данного показателя на каждые 5 % ассоциировано с повышением риска РА в 1,252 (95% ДИ 1,067-1,504, р = 0,009) раза. Уменьшение процентного содержания двойных позитивных Т№Ш+ТЫРК2+-клеток среди СБ8+СБ45К0+-цитотоксических Т-клеток памяти по сравнению с нормативными показателями здоровых доноров на каждые 5 % ассоциировано с повышением риска БА в 1,972 раз (95% ДИ 1,306-3,554, р = 0,007), а повышение данного показателя на каждые 5 % ассоциировано с повышением риска РА в 1,288 раз (95% ДИ 1,1371,497, р < 0,001).
Для 23 параметров экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО было продемонстрировано, что наличие хронического воспалительного иммуноопосре-дованного заболевания вне зависимости от этиологии значимо ассоциировано с повышением процентного содержания клеток с рецепторами или плотности рецепторов на них (табл. 3). При этом для 3 субпопуляций клеток было установлено, что увеличение процентного
Таблица 3. Однофакторный регрессионный анализ параметров экспрессии и коэкспрессии TNFR1/2, однонаправленно повышенных при иммунопатологических заболеваниях различной этиологии и ассоциированных с ревматоидным артритом (РА ) и бронхиальной астмой (БА)
Популяция Параметр Ревматоидный артрит Бронхиальная астма
ОШ (2,5 % : 97,5 %) Р ОШ (2,5 % : 97,5 %) Р
Моноциты
CD14+ Общее процентное содержание TNFRl^-клеток 1,018 (1,003 : 1,034) 0,018 1,046 (1,024 : 1,072) < 0,001
CD14+ Процентное содержание клеток, экспрессирующих хотя бы один из типов рецепторов 1,022 (1,001 : 1,046) 0,043 0,941 (0,885 : 0,98) 0,015
B-клетки
CD19+ Процентное содержание Т№^1+Т№Ш--клеток 1,179 (1,099 : 1,281) < 0,001 1,105 (1,046 : 1,185) 0,001
Т-клетки (общий пул)
CD3+ Число рецепторов 2-го типа на TNFR1 -Т№^2+-клетках 2,046 (1,195 : 3,963) 0,019 2,912 (1,684 : 6,828) 0,002
CD3+ Среднее число рецепторов 2-го типа 1,799 (1,119 : 3,202) 0,028 2,457 (1,494 : 5,145) 0,004
Хелперные Т-клетки
CD4+ Процентное содержание Т№^1+Т№Ш--клеток 1,279 (1,119 : 1,502) 0,001 1,466 (1,203 : 2,126) 0,007
CD4+ Общее процентное содержание Т№^1+-клеток 1,052 (1,023 : 1,085) 0,001 1,081 (1,042 : 1,132) < 0,001
CD4+/ CD25+ Процентное содержание Т№^1+Т№^2--клеток 1,143 (1,029 : 1,308) 0,029 1,41 (1,197 : 1,894) 0,002
CD4+/ CD25+ Общее процентное содержание Т№^1+-клеток 1,039 (1,017 : 1,063) 0,001 1,088 (1,05 : 1,143)) < 0,001
CD4+/ CD25+ Процентное содержание двойных позитивных (TNFR1+TNFR2+) клеток 1,035 (1,013 : 1,06) 0,003 1,033 (1,003 : 1,065) 0,033
CD4+/ CD45R0+ Общее процентное содержание TNFR1+-клеток 1,073 (1,041 : 1,113) < 0,001 1,116 (1,07 : 1,183) < 0,001
CD4/ CD45RA+ Процентное содержание Т№^1+Т№Ш--клеток 1,385 (1,231 : 1,602) < 0,001 1,251 (1,113 : 1,48) 0,002
Цитотоксические Т-клетки
CD8+ Процентное содержание ТМРЮ+ТМРЯ2--клеток 1,300 (1,161 : 1,494) < 0,001 1,192 (1,084 : 1,366) 0,002
CD8+ Общее процентное содержание ТМРЯ1+-клеток 1,067 (1,040 : 1,100) < 0,001 1,063 (1,032 : 1,103) < 0,001
CD8+ Процентное содержание двойных позитивных (ТЫРЮ+Т№Ш+) клеток 1,058 (1,028 : 1,094) < 0,001 1,039 (1,012 : 1,072) 0,008
CD8+/ CD25+ Процентное содержание ТМРЮ+ТМРЯ2--клеток 1,144 (1,066 : 1,244) 0,001 1,196 (1,111 : 1,333) < 0,001
CD8+/ CD25+ Общее процентное содержание ТМРЯ1+-клеток 1,023 (1,007 : 1,04) 0,006 1,023 (1,003 : 1,046) 0,026
CD8+/ CD45R0+ Общее процентное содержание ТМРЯ1+-клеток 1,056 (1,029 : 1,087) < 0,001 1,146 (1,085 : 1,246) < 0,001
CD8+/ CD45R0+ Число рецепторов 2-го типа на ТЫРЮ -ТМРЯ2+-клетках 1,048 (1,014 : 1,09) 0,01 1,12 (1,055 : 1,201) 0,001
CD8+/ CD45R0+ Среднее число рецепторов 2-го типа 1,047 (1,012 : 1,09) 0,014 1,12 (1,055 : 1,201) 0,001
CD8+/ CD45R0+ Число рецепторов 2-го типа на двойных позитивных клетках 1,047 (1,011 : 1,091) 0,018 1,092 (1,035 : 1,161) 0,002
CD8+/ CD45RA+ Общее процентное содержание ТЫБЯ1+-клеток 1,075 (1,044 : 1,112) < 0,001 1,102 (1,059 : 1,161) < 0,001
CD8+/ CD45RA+ Процентное содержание клеток, экспрессирующих хотя бы одного из типов рецепторов 1,022 (1,001 : 1,046) 0,02 1,045 (1,012 : 1,087) 0,015
Повышение при РА и БА
1
Процентное содержание
среди СЭ4+, CD4+CD45RA+, ОЭ8+
Снижение при РА и повышение при БА
Снижение при РА и БА
Процентное содержание
-I-
Т№МТ№К2+
1
среди CD19+, CD8+CD45R0+
Рис. 2. Показатели экспрессии мембраносвязанных рецепторов на субпопуляциях иммунокомпетентных клеток, изменения в которых ассоциированы с повышенным риском наличия иммуноопосредованных воспалительных заболеваний
содержания ТОТШ+ТОТК^-клеток на 5 % значимо ассоциировано с повышением риска воспалительного заболевания в 2 раза и более:
• повышение процентного содержания ТОТШ+ТОТК^-клеток среди общего пула хелпер-ных Т-лимфоцитов на 5 % ассоциировано с увеличением риска РА в 3,423 раза (95% ДИ 1,7547,645, р = 0,001) и с увеличением риска БА 6,741 раза (95% ДИ 2,520-43,433, р = 0,007);
• повышение процентного содержания ТОТШ+ТОТК^-клеток среди наивных хелпер-ных Т-лимфоцитов на 5 % ассоциировано с увеличением риска РА в 5,067 раз (95% ДИ 2,82710,552, р < 0,001) и с увеличением риска БА в 3,064 раза (95% ДИ 1,708-7,101, р = 0,002);
• повышение процентного содержания ТМБШ+ТМБ^^клеток среди общего пула цито-токсических Т-лимфоцитов на 5% ассоциировано с увеличением риска наличия РА в 3,713 (95% ДИ 2,109-7,443, р < 0,001) раза и с увеличением риска наличия БА в 2,404 раза (95% ДИ 1,4974,756, р = 0,002).
Параметры экспрессии и коэкспрессии рецепторов 1-го и 2-го типа к ФНО, снижение которых ассоциировано с наличием РА и БА
Для 18 параметров экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО было продемонстрировано, что наличие хронического воспалительного иммуноопосре-дованного заболевания вне зависимости от этиологии значимо ассоциировано со снижением процента клеток с рецепторами или плотности рецепторов на них (табл. 4). При этом для среднего числа рецепторов 1-го типа на двойных позитивных клетках в популяции наивных Т-хелперных клеток было установлено, что уменьшение плотности экспрессии на 1000 рецепторов на клетку значимо ассоциировано с повышением риска наличия РА в 3,472 раза (95 % ДИ 1,585-9,615, р = 0,007) и с увеличением риска наличия БА в 2,012 раза (95% ДИ 1,439-3,322, р = 0,001).
Обсуждение
Проведенное исследование позволило установить 3 комбинации параметров экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО, характерных для длительно протекающих воспалительных процессов: параметры одно-направленно усиливающейся экспрессии, параметры однонаправленно снижающейся экспрессии и параметры разнонаправленно изменяющейся экспрессии.
Наибольшей диагностической значимостью обладали 6 параметров, включающих однонаправленные изменение на 5 % для ТОТШ+ТОТК^-клеток в популяциях СБ4+, СВ4+/СБ45КЛ+, СБ8+ и изменение на 1000 молекул для ТОТШ на СБ4+/СБ45К0+-клетках. Для каждого параметра показана ассоциация с повышением риска патологии в 2 и более раза (р < 0,05), а также разнонаправленные изменение на 5 % для доли ТОТШ+ТОТК^-клеток в популяциях СБ19+-и СБ8+СБ45К0+-клеток (р < 0,05) (рис. 2).
Было показано, что только 2 параметра изменяются разнонаправленно при БА и РА - это процентное содержание двойных позитивных (ТЫРК1+ТЫРК2+) клеток в популяциях СБ19+-В-лимфоцитов и цитотоксических СБ8+СБ45К0+-Т-клеток памяти.
В-клетки составляют, по разным данным, от 8,5 до 15 % лейкоцитов периферической крови и включают множество подтипов, выполняющих различные функции. Эти клетки играют в организме ключевые роли в процессах представления антигена, секреции провос-палительных цитокинов, антител и активации Т-клеток. При РА происходит активация В-клеток и потеря иммунной толерантности к собственным антигенам [8]. В нашем исследовании показано, что процентное содержание двойных позитивных Т№Ш+ТКРК2+СВ19+-клеток при РА выше, чем у пациентов с БА.
Цитотоксические клетки памяти в среднем составляют 20 % от всех мононуклеарных клеток. При РА их количество в периферической крови увеличено вдвое, а в синовиальной жидкости более чем в 3 раза [9]. Мы показали, что при РА процентное содержание двойных позитивных клеток этой субпопуляции выше по сравнению с соответствующими показателями здоровых доноров. Роль и функциональные особенности клеток, коэкспрессирующих оба типа рецепторов к ФНО, в настоящее время не изучены, однако существуют работы, где авторы предполагают, что одновременная экспрессия двух типов рецепторов на клетках повышает их чувствительность к ФНО [10].
Таким образом, наше исследование позволило выделить субпопуляции иммунокомпетентных клеток, которые активно участвуют в патогенезе РА и при этом демонстрируют наибольшие изменения экспрессии рецепторов к ФНО. Важным отличительным аспектом является противоположная направленность данных изменений при БА.
Процентное содержание двойных позитивных ™рК1+™рК2+-клеток среди СБ19+- и СБ8+СБ45К0+-клеток у пациентов с БА было ниже по сравнению с пациентами с РА. Это может быть объяснено тем, что
Таблица 4. Однофакторный регрессионный анализ параметров экспрессии и коэкспрессии ТОТРШ, однонаправленно сниженных при иммунопатологических заболеваниях различной этиологии и ассоциированных с наличием ревматоидного артрита (РА) и бронхиальной астмы (БА)
Популяция Параметр Ревматоидный артрит Бронхиальная астма
ОШ (2,5 % : 97,5 %) p value ОШ (2,5 % : 97,5 %) Р
Моноциты
CD14+ Число рецепторов 1-го типа на двойных позитивных клетках 0,977 (0,953 : 0,993) 0,025 0,428 (0,181 : 0,792) 0,027
CD14+ Число рецепторов 2-го типа на двойных позитивных клетках 0,963 (0,934 : 0,986) 0,007 0,17 (0,053 : 0,369) < 0,001
B-клетки
CD19+ Процентное содержание ТМРР1-ТМРР2+-клеток 0,946 (0,922 : 0,967) < 0,001 0,92 (0,873 : 0,956) < 0,001
CD19+ Общее процентное содержание ТКБЯ2+-клеток 0,97 (0,953 : 0,986) < 0,001 0,938 (0,905 : 0,964) < 0,001
CD19+ Среднее число рецепторов 2-го типа 0,918 (0,828 : 0,981) 0,049 0,798 (0,622 : 0,957) 0,045
CD19+ Процентное содержание клеток, экспрессирующих хотя бы одного из типов рецепторов 0,975 (0,956 : 0,993) 0,008 0,955 (0,929 : 0,976) < 0,001
Хелперные Т-клетки
CD4+ Число рецепторов 1-го типа на двойных позитивных клетках 0,412 (0,229 : 0,663) 0,001 0,685 (0,501 : 0,834) 0,003
CD4+/ CD25+ Процентное содержание Т^РМОТ^-клеток 0,970 (0,949 : 0,99) 0,004 0,845 (0,738 : 0,914) 0,001
CD4+/ CD45R0+ Среднее число рецепторов 1-го типа 0,324 (0,179 : 0,498) < 0,001 0,501 (0,285 : 0,728) 0,003
CD4+/ CD45R0+ Число рецепторов 1-го типа на двойных позитивных клетках 0,367 (0,224 : 0,535) < 0,001 0,554 (0,349 : 0,77) 0,003
CD4+/ CD45R0+ Процентное содержание Т^РМОТ^-клеток 0,969 (0,948 : 0,988) 0,002 0,900 (0,838 : 0,942) < 0,001
CD4+/ CD45RA+ Число рецепторов 1-го типа на двойных позитивных клетках 0,288 (0,104 : 0,631) 0,007 0,497 (0,301 : 0,695) 0,001
CD4+/ CD45RA+ Число рецепторов 2-го типа на двойных позитивных клетках 0,791 (0,671 : 0,899) 0,002 0,657 (0,43 : 0,87) 0,018
Цитотоксические Т-клетки
CD8+ Процентное содержание TNFR1-TNFR2+-raeTOK 0,966 (0,941 : 0,99) 0,008 0,907 (0,849 : 0,953) 0,001
CD8+/ CD25+ Процентное содержание Т№^1-Т№Ш+-клеток 0,977 (0,958 : 0,994) 0,013 0,948 (0,91 : 0,98) 0,004
CD8+/ CD45R0+ Процентное содержание Т№^1-Т№Ш+-клеток 0,971 (0,95 : 0,991) 0,006 0,941 (0,901 : 0,974) 0,002
данные субпопуляции хотя и принимают участие в развитии БА, но ведущая роль принадлежит субпопуляциям Т- хелперов [11, 12].
Для 23 показателей экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО были установлены значимые изменения в сторону повышения уровней как при РА, так и при БА. Среди однонаправленно повышенных показателей экспрессии Т№Р1/2, 14 относились к рецептору 1-го типа.
В исследованиях показано, что через Т№Р1 активируются провоспалительный путь и путь клеточной гибели, которые в свою очередь активируют воспаление и запускают апоптоз. Также известно, что рецептор
ФНО 1-го типа может принимать участие в аутокринной регуляции продукции ФНО. Показано, что стимуляция нативными лигандами Т№Р1 ФНО и лимфотоксином-а (ЬТа) приводит к рекрутированию связанного с Т№Р1 домена смерти (ТРАЭБ) и чрезмерной активации №-кВ, которая связана с несколькими аутоиммунными заболеваниями, такими как РА, системная красная волчанка, системная склеродермия и т. п. [13]. Таким образом, изменение экспрессии Т№Р1 является важным регуляторным механизмом и связано с патогенезом заболеваний.
Только 5 показателей однонаправленно повышенной экспрессии относились к рецептору ФНО 2-го типа,
что согласуется с данными других исследований, показывающих, что при РА и БА имеет место более высокая экспрессия TNFR1 [14]. Также было показано, что взаимодействие ФНО-TNFR2 играет решающую роль в активации, размножении, функционировании и фено-типической стабильности клеток. Однако в некоторых исследованиях показано переключение сигнальных путей от TNFR2 на провоспалительные [15].
Самое большое число однонаправленных изменений в сторону повышенной экспрессии было характерно для цитотоксических Т-клеток памяти. Клетки памяти являются основными компонентами, обеспечивающими иммунную защиту при ответных иммунных реакциях. Они характеризуются более длительной выживаемостью, более сильными и быстрыми ответами на повторную провокацию [16]. Эти клетки играют важную роль в патогенезе как РА [9], так и БА [17]. Увеличение их количества ассоциировано с переходом воспаления в хроническую стадию, а также связано с тяжестью течения заболевания и резистентностью к кортикостеро-идам. Наше исследование позволило выявить данные клетки как субпопуляцию, демонстрирующую наибольшие изменения показателей экспрессии и коэкспрессии рецепторов к ФНО, активно связанную с патогенезом РА и БА.
Суммарно 16 показателей экспрессии и коэкспрессии были снижены как при РА, так и при БА. При этом 5 показателей относятся к TNFR1, 10 - к TNFR2, 1 - к наличию хотя бы одного типа рецепторов на клетках (проде-
■ Литература
1. Varfolomeev E., Vucic D. Intracellular regulation of TNF activity in health and disease. Cytokine. 2018; 101: 26-32. DOI: https://doi. org/10.1016/j.cyto.2016.08.035
2. Fotin-Mleczek M., Henkler F., Samel D., Reichwein M., Hausser A., Parmryd I., Scheurich P., Schmid J.A., Wajant H. Apoptotic crosstalk of TNF receptors: TNF-R2-induces depletion of TRAF2 and IAP proteins and accelerates TNF-R1-dependent activation of caspase-8. J. Cell Sci. 2002; 115 (pt 13): 2757-70. DOI: https://doi.org/10.1242/jcs.115. 13.2757
3. Qu Y., Zhao G., Li H. Forward and reverse signaling mediated by transmembrane tumor necrosis factor-alpha and TNF receptor 2: potential roles in an immunosuppressive tumor microenvironment. Front. Immunol. 2017; 8: 1675-82. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2017. 01675
4. Сенников С.В., Альшевская А.А., Жукова Ю.В., Беломест-нова И.А., Караулов А.В., Лопатникова Ю.А. Плотность экспрессии рецепторов к иммунорегуляторным медиаторам как модулирующий компонент биологических эффектов медиаторов на клетку (часть 2). Медицинская иммунология. 2019; 21 (3): 379-96. DOI: https://doi. org/10.15789/1563-0625-2019-3-379-396
5. Liu X., Xie X., Ren Y., Shao Z., Zhang N., Li L., Ding X., Zhang L. The role of necroptosis in disease and treatment. MedComm 2021; 2 (4): 730-55. DOI: https://doi.org/10.1002/mco2.108
6. Alshevskaya A., Lopatnikova J., Zhukova J., Chumasova O., Shka-ruba N., Sizikov A., Evsegneeva I., Gladkikh V., Karaulov A., Senni-kov S.V. Co-Expression profile of TNF membrane-bound receptors type 1 and 2 in rheumatoid arthritis on immunocompetent cells subsets. Int. J. Mol. Sci. 2019; 21 (1): 288-301. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms 21010288
7. Alshevskaya A., Zhukova J., Kireev F., Lopatnikova J., Evsegneeva I., Demina D., Nepomniashchikch V., Gladkikh V., Karaulov A., Sennikov S. Redistribution of TNF receptor 1 and 2 expression on immune cells in patients with bronchial asthma. Cells. 2022; 11 (11): 1736-49. DOI: https://doi.org/10.3390/cells11111736
монстрирован для СБ19+-В-лимфоцитов) и ни одного -к одновременному наличию обоих типов рецепторов.
Снижение экспрессии рецепторов ФНО сможет быть связано с шеддингом молекул с мембраны клеток, а регистрация сниженной экспрессии может быть обусловлена образованием изоформ рецепторов с измененной структурой через механизм альтернативного сплайсинга [18]. Самое большое число однонаправленных изменений в сторону сниженной экспрессии обнаружено в популяции СБ 19+-В-клеток. Известно, что при РА В-лимфоциты ответственны за развитие воспалительного процесса, выделение ревматоидного фактора и прогрессирование заболевания [9]. Снижение экспрессии рецепторов к ФНО может происходить компенсаторно в ответ на повышение уровня ФНО в крови, поэтому можно предположить, что полученные нами данные связаны именно с шеддингом рецепторов с поверхности клеток для нейтрализации.
Заключение
Для заболеваний разной этиологии были установлены комбинации однонаправленно и разнонаправленно изменяющихся параметров экспрессии и коэкспрессии рецепторов разных типов к ФНО, продемонстрирована значимость изменений уровня экспрессии. Дальнейшее изучение регуляции в системе ФНО и его рецепторов необходимо для расширения фундаментальных представлений о патогенезе иммуноопосредованных заболеваний и разработке более эффективных подходов к их терапии.
8. Rawlings D.J., Metzler G., Wray-Dutra M., Jackson S.W. Altered B cell signalling in autoimmunity. Nat. Rev. Immunol. 2017; 17 (7): 421-36. DOI: https://doi.org/10.1038/nri.2017.24
9. Lin Y.J., Anzaghe M., Schülke S. Update on the pathomechanism, diagnosis, and treatment options for rheumatoid arthritis. Cells. 2020; 9 (4): 880-923. DOI: https://doi.org/10.3390/cells9040880
10. Wajant H., Siegmund D. TNFR1 and TNFR2 in the control of the life and death balance of macrophages. Front. Cell Dev. Biol. 2019; 7: 91-105. DOI: https://doi.org/10.3389/fcell.2019.00091
11. Li H., Wang H., Sokulsky L., Liu S., Yang R., Liu X, Zhou L., Li J., Huang C., Li F., Lei X., Jia H., Cheng J., Li F., Yang M., Zhang G. Single-cell transcriptomic analysis reveals key immune cell phenotypes in the lungs of patients with asthma exacerbation. J. Allergy. Clin. Immunol. 2021; 147 (3): 941-54. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaci.2020. 09.032
12. Талаев В.Ю., Воронина Е.В., Светлова М.В., Заиченко И.Е., Ба-байкина О.Н. Эффекты взаимодействия циркулирующих CD4+CCR6+-Т-клеток с В-лимфоцитами. Иммунология. 2022; 43 (3): 266-76. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-3-266-276
13. Blüml S., Scheinecker C., Smolen J.S., Redlich K. Targeting TNF receptors in rheumatoid arthritis. Int. Immunol. 2012; 24 (5): 275-81. DOI: https://doi.org/10.1093/intimm/dxs047
14. Brenner D., Blaser H., Mak T.W. Regulation of tumor necrosis factor signalling: live or let die. Nat. Rev. Immunol. 2015; 15 (6): 362-74. DOI: https://doi.org/10.1038/nri3834
15. Lo C.H., Huber E.C., Sachs J.N. Conformational states of TNFR1 as a molecular switch for receptor function. Protein Sci. 2020; 29 (6): 1401-15. DOI: https://doi.org/10.1002/pro.3829
16. Yan F., Du R., Wei F., Zhao H., Yu J., Wang C., Zhan Z., Ding T., Ren X., Chen X., Li H. Expression of TNFR2 by regulatory T cells in peripheral blood is correlated with clinical pathology of lung cancer patients. Cancer Immunol. Immunother. 2015; 64 (11): 1475-85. DOI: https://doi.org/10.1007/s00262-015-1751-z
17. Wang L., Netto KG., Zhou L., Liu X., Wang M., Zhang G., Foster P.S., Li F., Yang M. Single-cell transcriptomic analysis reveals
the immune landscape of lung in steroid-resistant asthma exacerbation. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2021; 118 (2): e2005590118. DOI: https://doi. org/10.1073/pnas.2005590118
■ References
1. Varfolomeev E., Vucic D. Intracellular regulation of TNF activity in health and disease. Cytokine. 2018; 101: 26-32. DOI: https://doi. org/10.1016/j.cyto.2016.08.035
2. Fotin-Mleczek M., Henkler F., Samel D., Reichwein M., Hausser A., Parmryd I., Scheurich P., Schmid J.A., Wajant H. Apoptotic crosstalk of TNF receptors: TNF-R2-induces depletion of TRAF2 and IAP proteins and accelerates TNF-R1-dependent activation of caspase-8. J. Cell Sci. 2002; 115 (pt 13): 2757-70. DOI: https://doi.org/10.1242/jcs.115.13. 2757
3. Qu Y., Zhao G., Li H. Forward and reverse signaling mediated by transmembrane tumor necrosis factor-alpha and TNF receptor 2: potential roles in an immunosuppressive tumor microenvironment. Front. Immunol. 2017; 8: 1675-82. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2017. 01675
4. Sennikov S.V., Al'shevskaya A.A., Zhukova Yu.V., Belomest-nova I.A., Karaulov A.V., Lopatnikova Yu.A. Expression density of receptors for immunoregulatory mediators as a modulatory component of biological effects of mediators upon cells (part 2). Meditsinskaya immu-nologiya. 2019; 21 (3): 379-96. DOI: https://doi.org/10.15789/1563-0625-2019-3-379-396 (in Russian)
5. Liu X., Xie X., Ren Y., Shao Z., Zhang N., Li L., Ding X., Zhang L. The role of necroptosis in disease and treatment. MedComm 2021; 2 (4): 730-55. DOI: https://doi.org/10.1002/mco2.108
6. Alshevskaya A., Lopatnikova J., Zhukova J., Chumasova O., Shka-ruba N., Sizikov A., Evsegneeva I., Gladkikh V., Karaulov A., Sennikov S.V. Co-Expression profile of TNF membrane-bound receptors type 1 and 2 in rheumatoid arthritis on immunocompetent cells subsets. Int. J. Mol. Sci. 2019; 21 (1): 288-301. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms21010288
7. Alshevskaya A., Zhukova J., Kireev F., Lopatnikova J., Evsegneeva I., Demina D., Nepomniashchikch V., Gladkikh V., Karaulov A., Sen-nikov S. Redistribution of TNF receptor 1 and 2 expression on immune cells in patients with bronchial asthma. Cells. 2022; 11 (11): 1736-49. DOI: https://doi.org/10.3390/cells11111736
8. Rawlings D.J., Metzler G., Wray-Dutra M., Jackson S.W. Altered B cell signalling in autoimmunity. Nat. Rev. Immunol. 2017; 17 (7): 421-36. DOI: https://doi.org/10.1038/nri.2017.24
Сведения об авторах
Альшевская Алина Анатольевна - канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: alkkina@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-7307-4524
Жукова Юлия Владимировна - канд. мед. наук, лаборант-исследователь лаб. молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: zhukova1982@rambler.ru https://orcid.org/0000-0002-2287-0918
Лопатникова Юлия Анатольевна - канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаб молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: lopatnikova_j_a@ngs.ru https://orcid.org/0000-0003-0089-5054
18. Ren P., Lu L., Cai S., Chen J., Lin W., Han F. Alternative splicing: a new cause and potential therapeutic target in autoimmune disease. Front. Immunol. 2021; 12: 713540. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.713540
9. Lin Y.J., Anzaghe M., Schulke S. Update on the pathomechanism, diagnosis, and treatment options for rheumatoid arthritis. Cells. 2020; 9 (4): 880-923. DOI: https://doi.org/10.3390/cells9040880
10. Wajant H., Siegmund D. TNFR1 and TNFR2 in the control of the life and death balance of macrophages. Front. Cell Dev. Biol. 2019; 7: 91-105. DOI: https://doi.org/10.3389/fcell.2019.00091
11. Li H., Wang H., Sokulsky L., Liu S., Yang R., Liu X, Zhou L., Li J., Huang C., Li F., Lei X., Jia H., Cheng J., Li F., Yang M., Zhang G. Single-cell transcriptomic analysis reveals key immune cell phenotypes in the lungs of patients with asthma exacerbation. J. Allergy. Clin. Immunol. 2021; 147 (3): 941-54. DOI: https://doi.org/10.1016/jjaci.2020.09.032
12. Talayev V.Yu., Voronina E.V., Svetlova M.V., Zaichenko I.Ye., Babaykina O.N. Effects of interaction between circulating CD4+ CCR6+ T cells and B-lymphocytes. Immunologiya. 2022; 43 (3): 266-76. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-3-266-276 (in Russian)
13. Bluml S., Scheinecker C., Smolen J.S., Redlich K. Targeting TNF receptors in rheumatoid arthritis. Int. Immunol. 2012; 24 (5): 275-81. DOI: https://doi.org/10.1093/intimm/dxs047
14. Brenner D., Blaser H., Mak T.W. Regulation of tumor necrosis factor signalling: live or let die. Nat. Rev. Immunol. 2015; 15 (6): 362-74. DOI: https://doi.org/10.1038/nri3834
15. Lo C.H., Huber E.C., Sachs J.N. Conformational states of TNFR1 as a molecular switch for receptor function. Protein Sci. 2020; 29 (6): 1401-15. DOI: https://doi.org/10.1002/pro.3829
16. Yan F., Du R., Wei F., Zhao H., Yu J., Wang C., Zhan Z., Ding T., Ren X., Chen X., Li H. Expression of TNFR2 by regulatory T cells in peripheral blood is correlated with clinical pathology of lung cancer patients. Cancer Immunol. Immunother. 2015; 64 (11): 1475-85. DOI: https://doi. org/10.1007/s00262-015-1751-z
17. Wang L., Netto KG., Zhou L., Liu X., Wang M., Zhang G., Foster P.S., Li F., Yang M. Single-cell transcriptomic analysis reveals the immune landscape of lung in steroid-resistant asthma exacerbation. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2021; 118 (2): e2005590118. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.2005590118
18. Ren P., Lu L., Cai S., Chen J., Lin W., Han F. Alternative splicing: a new cause and potential therapeutic target in autoimmune disease. Front. Immunol. 2021; 12: 713540. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.713540
Authors' information
Alina A. Alshevskaya - PhD, Senior Researcher of the Molecular Immunology Lab., RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: alkkina@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-7307-4524
Julia V. Zhukova - MD, PhD, Research Assistant of the Molecular Immunology Lab., RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: zhukova1982@rambler.ru https://orcid.org/0000-0002-2287-0918
Julia A. Lopatnikova - PhD, Senior Researcher of the Molecular Immunology Lab., RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: lopatnikova_j_a@ngs.ru https://orcid.org/0000-0003-0089-5054
Сенникова Юлия Ллександровна - канд. мед. наук, доц. каф. клинической иммунологии лечебного факультета ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: sennikova-y@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-3296-1290
Шкаруба Надежда Сергеевна - канд. мед. наук, врач ревматолог отд. ревматологии клиники иммунопатологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: sen-nadezhda@yandex.ru https://orcid.org/0000-0001-7676-6166
Чумасова Оксана Александровна - канд. мед. наук, врач ревматолог отд. ревматологии клиники иммунопатологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: chumoks@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-3797-6392
Сизиков Алексей Эдуардович - канд. мед. наук, зав. отд. ревматологии клиники иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: depaidici@online.nsk.su https://orcid.org/0000-0002-7213-7482
Непомнящих Вера Макаровна - врач аллерголог-иммунолог отд. аллергологии клиники иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: niiki_imm@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-8050-1280
Демина Дарья Владимировна - канд. мед. наук, зав. отд. аллергологии клиники иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация E-mail: immunology@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-0342-5368
Сенников Сергей Витальевич - д-р мед. наук, проф., зав. лаб. молекулярной иммунологии ФГБНУ НИИФКИ Минобрнауки России, Новосибирск, Российская Федерация
E-mail: sennikovsv@gmail.com https://orcid.org/0000-0002-7366-7768
Julia A. Sennikova - PhD, Assistant Prof. of the Clinical Immunology Dept., Faculty of Medicine, NSMU of the MOH of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: sennikova-y@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-3296-1290
Nadezhda S. Shkaruba - PhD, Physician of the Rheumatology Dept. of Immunopathology clinics, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: sen-nadezhda@yandex.ru https://orcid.org/0000-0001-7676-6166
Oksana A. Chumasova - PhD, Physician of the Rheumatology Dept. of Immunopathology clinics, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: chumoks@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-3797-6392
Alexey E. Sizikov - PhD, Head of the Rheumatology Dept. of Immunopathology clinics, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: depaidici@online.nsk.su https://orcid.org/0000-0002-7213-7482
Vera M. Nepomnyashchikh - Physician of the Allergology Dept. of Immunopathology clinics, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: niiki_imm@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-8050-1280
Daria V. Demina - PhD, Head of the Allergology Dept. of Immunopathology clinics, RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: immunology@mail.ru https://orcid.org/ 0000-0002-0342-5368
Sergey V. Sennikov - MD, PhD, Prof., Head of the Molecular Immunology Lab., RIFCI of the MSHE of Russia, Novosibirsk, Russian Federation E-mail: sennikovsv@gmail.com https://orcid.org/ 0000-0002-7366-7768
