CC BY
19УДК 613.165:618.14-006:616.517
Синицын Б. Ф.
ОБНАРУЖЕНИЕ АНАЛОГА ИНФЕКЦИОННЫХ ПРИОННЫХ БЕЛКОВ ПРИ ПСОРИАЗЕ В ОБЪЯСНЕНИИ ВЫСОКОГО РИСКА ФОТОКАНЦЕРОГЕНЕЗА ПРИ ИНТЕНСИВНОЙ ИНСОЛЯЦИИ
ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», Медицинская академия имени С. И. Георгиевского,
г. Симферополь
Sinitsyn B. F.
IDETECTION OF INFECTIOUS PRION PROTEINS ANALOGUE IN PSORIASISWHILE EXPLAINING THE HIGH RISK OF HOTOCARCINOGENESIS WHEN INTENSE INSOLATION
V. I. Vernadsky Crimean Federal University, Medical Academy named after S. I. Georgievsky
РЕЗЮМЕ
Ультрафиолетовый спектр солнечного излучения вносит наиболее существенный вклад в увеличение заболеваемости, связанной с онкопатологией кожи, а риск меланомы значительно возрастает после спорадической интенсивной инсоляции до солнечного ожога. При этом, по данным литературы, риск фотоканцерогенеза в очагах воспаления при обыкновенном псориазе практически отсутствует, несмотря на интенсивную инсоляцию и ультрафиолетовое облучение, назначаемых с лечебной целью. Следовательно, актуально выяснение причин этих явлений. Поскольку и псориаз, и онкопатология относятся к гиперпролиферативным заболеваниям, то при формулировании рабочей гипотезы использована логика обоснования виротерапии рака: деструкция малиг-низированных эпидермоцитов, усиливающаяся аутоиммунными реакциями, обусловлена инфекционным агентом, обладающим тропизмом к клеткам с повышенной пролиферативной активностью, а при псориазе таким агентом является его возбудитель, антигены которого до настоящего времени не обнаружены вероятно потому, что будучи аналогом инфекционных прионных белков, он обладает антигенным родством с нормальными эпидермальными белками, но отличаются от них устойчивостью к пищеварительным ферментам. При опоре на эту гипотезу из структур нативных псориатических сквамозных элементов солюбилизирован пепсином псориатический антиген, который определен иммунопреципитацией в агаре по Оухтерлони как идентичный одному из белков эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом. Однако, как и инфекционные прионные белки, он отличается от антигенно-родственного ему белка устойчивостью к пепсину. Механизмы деструкции клеток псориатическим антигеном выражаются в экспрессии из их структур аутоантигенов, ведущей к аутоиммунным реакциям и элиминации эпидермоцитов с повышенной пролиферативной активностью, чем и объясняется низкий риск фотоканцерогенеза в очагах псориатического воспаления. При этом в структурах эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, не обнаруживается используемым методом аналог инфекционных прионных белков и наблюдается повышение риска фотоканцерогенеза.
Ключевые слова: интенсивная инсоляция, высокий риск фотоканцерогенеза, псориаз, аналог прионных белков, низкий риск фотоканцерогенеза.
SUMMARY
The ultraviolet spectrum of solar radiation affects the sickness rate incensement associated with oncopathology of the skin, and the risk of melanoma rises significantly after sporadic intensive insolation to the stage of sunburn. Along with that, according to the literature, the risk of photocarcinogenesis in the foci of inflammation in ordinary psoriasis is almost absent, despite intense insolation and ultraviolet irradiation, appointed with a therapeutic purpose. Therefore, it is important to find out the causes of these phenomena. Since both psoriasis and oncopathology are hyperproliferative disorders, logic justification of cancer virotherapy is used when formulating a working hypothesis: destruction of malignant epidermocytes, increasing with autoimmune reactions, caused by an infectious agent having a tropism for cells with increased proliferative activity, and in psoriasis this agent is its pathogen, antigens of which have not yet been found, probably because being an analogue of an infectious prion, it possesses antigenic relatedness to normal epidermal proteins, but differs by resistance to digestive enzymes. Having based on this hypothesis, psoriatic antigen is solubilized by pepsin from the structures of native psoriatic squamous elements, which is determined by immunoprecipitation in agar (The Ouchterlony Technique) as identical to one of the epidermal proteins torn away in the region of intense insolation in people who do not have psoriasis. However, it differs from the antigenically related protein by the resistance to pepsin like infectious prion proteins. Mechanisms of cell destruction by the psoriatic antigen are in expression of autoantigens from their structures leading to autoimmune reactions and elimination of epidermocytes with increased proliferative activity, which explains the low risk of photocarcinogenesis in the lesions of psoriatic inflammation. At the same time, in the structures of the epidermis, which is rejected in the region of intense insolation in people who do not suffer from psoriasis, an analogue of infectious prion proteins is not detected by the method used and an increased risk of photocarcinogenesis is observed. Key words: intense insolation, high risk of photocarcinogenesis, psoriasis, prion proteins analogue, low risk of photocarcinogenesis.
Различные виды кожного рака и меланом занимают в структуре онкологической заболеваемости человека ведущее место, составляя в среднем 20 случаев на 100000 населения в год. При этом ультрафиолетовый спектр (далее - УФС) солнечного излучения является наиболее существенным фактором риска онкопатологии кожи [1], которую состав-
ляют в 10,6% случаев - меланома, в 25,8% случаев - сквамозный плоскоклеточный рак и в 63,6% случаев - базальноклеточная карцинома. Онкологическая заболеваемость кожи, возникающая в связи с солнечным излучением, растет в годовом исчислении на 10,6% [2], а, в отличие от базальноклеточной карциномы и плоскоклеточного рака, возникнове-
ние которых связывается с кумулятивным эффектом при хроническом воздействии солнечного излучения, риск меланомы возрастает после интенсивной спорадической инсоляции до солнечного ожога [3].
В связи с этим обращается внимание на обыкновенный псориаз, в очагах воспаления при котором не зарегистрировано появления злокачественного роста, несмотря на широкое использование в его лечении инсоляции и ультрафиолетового излучения (далее - УФИ) искусственных источников. При этом надо иметь в виду, что, в связи с фототерапией больных псориазом, доза УФИ, получаемая ими, превышает ту, которую получают в повседневности люди, не болеющие псориазом [4, 5]. Это явление находят труднообъяснимым, поскольку эпидермо-циты в очаге псориатического воспаления имеют признаки, совпадающие с таковыми при злокачественном росте - аномальная гиперпролиферация, нарушение созревания и низкая иммуногенность их структур, что, тем не менее, не способствует реализации канцерогенеза после инсоляция и ультрафиолетового облучения (далее - УФО), применяемых при псориазе с лечебной целью [4, 6, 7, 8]. Более того, при разработке методов фототерапии псориаза предусматривается интенсивная инсоляция и УФО непосредственно очагов псориатического воспаления и защита сопредельных ему участков кожи для профилактики явлений, связанных с фотоканцерогенезом [9]. При этом описаны лишь единичные случаи выявления доброкачественных бородавчатых образований при обыкновенном псориазе [10] и описан только один случай возникновения мела-номы в очаге поражения при пустулезном псориазе [11].
Предположительное объяснение этому явлению может состоять в том, что и псориаз, и онкопато-логию относят к гиперпролиферативным заболеваниям [4, 6, 7, 8, 12]. Однако, в отличие от онкологических заболеваний, при псориазе развиваются аутоиммунные реакции [13], с участием которых в ходе интенсивной десквамации отторгаются как псориатические эпидермоциты, так и те, которые вовлечены в фотоканцерогенез, поскольку и те, и другие обладают свойствами, характерными для гиперпролиферативных заболеваний. На рациональность этой гипотезы указывает, например, описанный в литературе случай спонтанной регрессии меланомы и ее метастазов при обострении псориаза, что объясняется развитием при псориазе аутоиммунных реакций, ассоциирующихся с HLA-CW6 [14].
В связи с этим необходимо отметить, что интенсивная десквамация эпидермиса наблюдается и после инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом, но обусловленная апоп-тозом и некрозом эпидермоцитов, что наблюдается через 48-72 часа после экспозиции солнечному излучению в верхних слоях эпидермиса [15]. При
этом, в нижележащих слоях эпидермиса, как и в очагах псориатического воспаления, наблюдается гиперпролиферация эпидермоцитов, являющаяся реакцией эпидермиса на его повреждение [16]. Однако, как отмечалось выше [3], после интенсивной спорадической инсоляции до солнечного ожога риск меланомы возрастает, а в области псо-риатического воспаления такой риск практически отсутствует. Следовательно, в отличие от воспаления в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, в организации очага псори-атического воспаления задействован неизвестный фактор, вызывающий деструкцию и элиминацию как псориатических эпидермоцитов, так и вовлекаемых в фотоканцерогенез. В связи с этим привлекает внимание литература, в которой обоснование виротерапии злокачественных новообразований проводится в связи со случаями регрессии опухоли и ее метастазов при заражении некоторыми вирусными инфекционными заболеваниями, возбудители которых вызывают деструкцию клетки опухоли, а онкоцитопатогенное действие вирусов усиливается развивающимися аутоиммунными реакциями [17]. Поскольку псориаз, как и онкопатология, относится к гиперпролиферативным заболеваниям, то допустимо полагать, что, как и при случаях, используемых для обоснования виротерапии, деструкция псориатических эпидермоцитов и развивающиеся в связи с ней аутоиммунные реакции обусловлены инфекционным агентом, являющимся причиной возникновения аутоиммунных реакций при псориазе.
Однако попытки выявления специфических для псориаза антигенов, то есть антигенов неизвестного инфекционного агента, обладающего чужерод-ностью, не увенчалась успехом при использовании иммунных сывороток, а также с помощью панели моноклональных антител [18]. Тем не менее, существуют возбудители инфекционных заболеваний, которые, не обладая чужеродностью в связи с антигенным родством с нормальными белками клеток, отличаются от них устойчивостью к пищеварительным ферментам. Это - инфекционные прион-ные белки, которые открыты как возбудители ряда нейродегенеративных заболеваний [19, 20]. В связи с этим можно предположить, что возбудителем псориаза является неизвестный инфекционный белок, который, в отличие от инфекционных прионных белков, являющихся возбудителями нейродегенера-тивных заболеваний, обладает тропизмом к эпидермису с высокой пролиферативной активностью, вызывая псориатическое воспаление. А его аналогии с инфекционными прионными белками выражаются в свойствах - как и прионы он обладает антигенным родством с нормальными белками целевых для него тканей, но в отличие от них устойчив к гидролитическому действию пищеварительных ферментов, что предопределяет алиментарный путь заражения.
При опоре на рабочую гипотезу в предыдущих исследованиях из структур псориатических сква-мозных элементов, после их обработки детергентом, с помощью ацидин-пепсина солюбилизирован антиген, который определен в двойной радиальной иммунодиффузии по Оухтерлони как идентичный антигену супернатанта гомогената эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом. Оказалось, что с его присутствием в структурах эпидермоцитов очагов псориатического воспаления эпидермальные антигены, в норме определяемые за пределами структур, отторгаемых эпидермоцитов, выявляются в их структурах, будучи соединенными с ними пептидными связями и в комплексе с естественными эпидермальными аутоантигенами эпидермальные антигены оказываются за пределами этих структур. Тем самым создаются условия, способствующие взаимодействию эпидермальных аутоантигенов с антигенпредставляющими клетками и развитию аутоиммунных реакций, участвующих в отторжении эпидермоцитов в ходе характерной для псориаза десквамации. В связи с этим, солюбилизируемый пепсином из структур псориатических сквамозных элементов псориатический антиген, при опоре на логику обоснования инфекционной теории аутоиммунных болезней Р. М. Хаитова, Г. А. Игнатьевой и И. Г. Сидорович [20], может рассматриваться как причинный для аутоиммунных реакций при псориазе вероятно экзогенного происхождения [21].
Подтверждением этому служит тот факт, что устойчивый к пепсину антиген не определялся используемым методом в пепсиновых гидролизатах структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, и не наблюдается экспрессия из этих структур аутоантигенов. А это, в свою очередь, сочетается с уменьшенным количеством фиксированных к структурам эпидермоцитов, отторгаемых в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, IgG-, IgA- и IgM-аутоантител, при сравнении со структурами псориатических сквамозных элементов [21].
Солюбилизация псориатического антигена из структур псориатических сквамозных элементов пепсином свидетельствует об его устойчивости к этому пищеварительному ферменту и, следовательно, по этому качеству он проявляет себя как аналог инфекционных прионных белков. А низкий риск фотоканцерогенеза в очагах воспаления при обыкновенном псориазе гипотетически можно рассматривать как следствие инфекционного процесса, характер развития которого аналогичен тому, который может наблюдаться при некоторых инфекционных заболеваниях, сопровождающихся элиминацией малигнизированных клеток [17].
Однако для того, чтобы получить дополнительные подтверждения связи низкого риска фотокан-
церогенеза в очагах псориатического воспаления с развитием инфекционного процесса, вызываемого носителем псориатического антигена, необходимо солюбилизировать его пепсином из структур натив-ных псориатических сквамозных элементов, то есть в условиях, приближенных к таковым in vivo, поскольку при этом он будет преципитироваться в том комплексе антигенов, который имеет место при его поступлении в организм человека алиментарным путем. Вместе с тем необходимо выявление аналогий в свойствах инфекционных прионных белков и псориатического антигена, солюбилизирующегося in vivo из структур псориатических сквамозных элементов, которая, исходя из рабочей гипотезы, может состоять в следующем. Псориатический антиген обладает антигенным родством с белком эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом, но отличается от антигенно родственного ему белка устойчивостью к пищеварительному ферменту. Вместе с тем не исключено, что внедрение псо-риатического антигена в структуры эпидермоцитов сопровождается вытеснением из них антигенно родственных ему нормальных белков и, следовательно, они могут быть обнаружены за пределами структур псориатических сквамозных элементов, то есть среди растворимых белков в супернатантах их гомогенатов.
Цель исследования: выявление аналогий в свойствах инфекционных прионных белков и носителя псориатического антигена, с которым ассоциируется низкий риск фотоканцерогенеза при псориазе.
Задачи исследования
1. Солюбилизация из структур нативных псо-риатических сквамозных элементов ацидин-пеп-сином в изотонический раствор натрия хлорида носителя псориатического антигена и выявление антигенно родственных ему белков в эпидермисе, отторгаемом в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, и среди растворимых белков псориатических сквамозных элементов.
2. Определение чувствительности антигенно родственных белков к гидролитическому действию ацидин-пепсина.
Материалы и методы
Поскольку согласно рабочей гипотезе возбудитель псориаза в составе структур эпидермоцитов, отторгаемых в очагах псориатического воспаления, поступает в организм человека алиментарным путем, то исследованы псориатические сквамозные элементы десяти больных обыкновенным распространенным псориазом. В качестве объекта сравнения использован эпидермис, отторгаемый в области интенсивной инсоляции у восьми человек, не болеющих псориазом, поскольку риск возникновения меланомы повышается при интенсивной инсоляции до солнечного ожога [3].
При решении первой задачи к одному грамму
сквамозных элементов до 10 миллилитров приливался изотонический раствор №С1. Взвесь замораживалась и гомогенизировалась растиранием со стеклом в фарфоровой ступке пестиком, а затем центрифугировалась при 1500 g 20 минут. Суперна-танты гомогенатов использовались в работе. Плотные осадки отмывались изотоническим раствором №С1, затем к ним до 10 миллилитров приливался изотонический раствор №С1, а в полученной смеси растворялись 2 таблетки ацидин-пепсина. После суток инкубации при 37°С рН растворов доводился до 8 гидрокарбонатом натрия и полученные гидро-лизаты использовались в работе. В супернатантах и в пепсиновых гидролизатах структур сквамозных элементов определялись антигены и их идентичность методом двойной радиальной иммунодиф-фузии в агаре по Оухтерлони [23]. Для этого была получена преципитирующая антисыворотка путем иммунизации кроликов структурами псориатиче-ских сквамозных элементов с полным адъювантом Фрейнда. На стекла со стороной 60 миллиметров в объеме 6 миллилитров разливался 3% агар Дифко, который расплавлялся в изотоническом растворе №С1 в кипящей водяной бане. После застывания в агаре вырезались лунки пробойником с диаметром 13 мм. В центральную лунку вносилось 0,3 миллилитра антисыворотки, а в расположенные вокруг лунки вносились исследуемые ингредиенты по 0,1 миллилитра. После трех суток инкубации агар отмывался сменяемым изотоническим раствором №С1, затем дистиллированной водой, высушивался, а линии преципитации окрашивались кислотным сине-черным.
При решении второй задачи пепсиновому гидролизу подвергались не только структуры сквамозных элементов, то есть оказывающиеся в осадке после центрифугирования их гомогенатов, но и суперна-танты их гомогенатов. Для этого в 5 миллилитрах супернатантов гомогенатов сквамозных элементов растворялась одна таблетка ацидин-пепсина и, после суток инкубации при 37°С, рН растворов доводился до 8 гидрокарбонатом натрия, а полученные пепсиновые гидролизаты использовались в работе. В остальном исследование проводилось аналогично тому, как описано выше.
Результаты исследований
В результате решения первой задачи оказалось следующее (Рисунок 1).
В пепсиновых гидролизатах структур псориати-ческих сквамозных элементов преципитируются антигены с образованием двух линий (Рисунок 1, линии преципитации между лунками А и 1). Дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов структур псориатических сквамозных элементов (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 1) без образования шпоры соединяется с дальней от лунки с антисывороткой линией пре-
ципитации супернатантов гомогенатов сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 2), что говорит об их полной идентичности. В свою очередь, эта дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации супернатантов гомогенатов сква-мозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, не имеет продолжения в зону преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов структур сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, зона преципитации антигенов между лунками А и 3).
Рисунок 1. Двойная радиальная иммунодиффузия в агаре по Оухтерлони. Лунка А -антипсориатическая сыворотка. Лунка 1 - субстрат, полученный из клеточных структур псориатиче-ских сквамозных элементов пепсиновым гидролизом. Лунка 2 - супернатант гомогенатов эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом. Лунка 3 - субстрат, полученный пепсиновым гидролизом структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом. Лунка 4 - супернатант гомогенатов псориатических сквамозных элементов.
Вместе с тем дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации антигенов пепсиновых гидро-лизатов структур псориатических сквамозных элементов (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 1) без образования шпоры соединяется с дальней от лунки с антисывороткой линией преципитации антигена суперна-тантов гомогенатов сквамозных элементов области псориатического воспаления, что говорит об их полной идентичности (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 4). В свою очередь, эта дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации антигена супернатантов гомогенатов сквамозных элементов области псориатического воспаления не имеет продолжения в зону преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов структур сквамозных элементов области интенсив-
ной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, зона преципитации антигенов между лунками А и 3).
Таким образом, в структурах псориатических сквамозных элементов присутствует антиген (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 1), который отсутствует в структурах эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, зона преципитации антигенов между лунками А и 3). Следовательно, преципитируемый с образованием этой линии носитель антигена можно отнести к псориатическо-му, поскольку его присутствие в структурах псориа-тических сквамозных элементов ассоциируется, как показали предыдущие исследования [21], с деструкцией псориатических эпидермоцитов, выражающейся в экспрессии из этих структур аутоантигенов и развитием, в связи с этим, аутоиммунных реакций, углубляющих деструкцию эпидермоцитов.
При этом нечетко выраженная ближняя к лунке с антисывороткой линия преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов структур псориатиче-ских сквамозных элементов (Рисунок 1, ближняя к лунке А линия преципитации между лунками А и 1) с образованием шпоры соединяется с ближней к лунке с антисывороткой линией преципитации антигена супернатанта гомогената сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, ближняя к лунке А линия преципитации между лунками А и 2), что говорит об их частичной идентичности. В свою очередь эта ближняя к лунке с антисывороткой линия преципитации антигена супернатанта гомогената сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, без образования шпоры соединяется с дальней от лунки с антисывороткой линией преципитации антигена пепсинового гидролизата структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 3), что говорит об их полной идентичности. В свою очередь, эта дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации антигена пепсинового гидроли-зата структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, не имеет продолжения в зону преципитации антигенов супернатантов гомогенатов псориатиче-ских сквамозных элементов (Рисунок 1, линии преципитации антигенов между лунками А и 4).
Вместе с тем, нечетко выраженная ближняя к лунке с антисывороткой линия преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов структур псориати-ческих сквамозных элементов (Рисунок 1, ближняя к лунке А линия преципитации между лунками А и 1) не имеет продолжения в зону преципитации антигенов супернатантов гомогенатов псориатиче-
ских сквамозных элементов (Рисунок 1, линии преципитации между лунками А и 4).
При этом, ближняя к лунке с антисывороткой линия преципитации антигенов пепсиновых гидро-лизатов структур сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, ближняя к лунке А линия преципитации между лунками А и 4), не имеет продолжения ни в зону преципитации антигенов супер-натантов гомогенатов сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, линии преципитации между лунками А и 2), ни в зону преципитации суперна-тантов гомогенатов псориатических сквамозных элементов (Рисунок 1, линии преципитации между лунками А и 4). Следовательно, преципитируемый с образованием этой линии антиген не имеет отношения ни к антигенам, определяемым в псори-атических сквамозных элементах, ни к антигенам, определяемым в сквамозных элементах области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом.
Необходимо подчеркнуть, что носители антигенов, преципитируемые в пепсиновых гидролизатах структур сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, линии преципитации между лунками А и 3), и идентичные им антигены не участвуют в деструкции эпидермоцитов поскольку с их присутствием в структурах эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, не ассоциируется экспрессия из этих структур аутоантигенов [21].
При решении второй задачи пепсиновому гидролизу подвергнуты белки супернатантов гомогенатов исследуемых сквамозных элементов (Рисунок 2) с тем, чтобы показать, что идентичные псориати-ческому антигену белки, преципитируемые в этих субстратах, отличаются от него чувствительностью к пепсину.
Оказалось, что в пепсиновых гидролизатах структур псориатических сквамозных элементов дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации псориатического антигена (Рисунок 2, дальняя от лунки А линия преципитации между лунками А и 1), с появлением которого ассоциируется развитие аутоиммунных реакций при псориазе [21], не имеет продолжения в зону преципитации антигенов пепсинового гидролизата супернатантов гомогенатов псориатических сквамозных элементов (Рисунок 2, зона преципитации антигенов между лунками А и 4) и в зону преципитации антигенов пепсинового гидролизата супернатантов гомогенатов эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, зона преципитации антигенов между лунками А и 2).
В связи с этим преципитируемый с ее образованием носитель псориатического антигена выглядит
как индивидуальная в антигенном отношении форма.
' - — ----- -..... -ч
2 3)
№ j
Рисунок 2. Двойная радиальная иммунодиффузия в агаре по Оухтерлони. Лунка В - антипсориатическая сыворотка. Лунка 1 - субстрат, полученный из клеточных структур псориатических сквамозных элементов пепсиновым гидролизом. Лунка 2 - пепсиновый гидролизат супернатантов гомогенатов эпидермиса, отторгаемого в области солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом. Лунка 3 - пепсиновый гидролизат супернатантов го-могенатов эпидермиса, отторгаемого в области солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом. Лунка 4 - пепсиновый гидро-дизат супернатантов гомогенатов псориатических сквамозных элементов.
Что касается антигенов пепсиновых гидролизатах структур сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, то они вновь преципитируются с образованием двух линий (Рисунок 2, линии преципитации антигена между лунками А и 3). При этом дальняя от лунки с антисывороткой линия преципитации антигена без образования шпоры переходит в линии преципитации антигенов пепсиновых гидролизатов суперна-тантов гомогенатов исследуемых сквамозных элементов (Рисунок 2, линия преципитации антигена между лунками А и 3, переходящая без образования шпоры в линию преципитации между лунками А и 2 и в линию преципитации между лунками А и 4). Которые, в свою очередь, с образованием шпоры переходят в нечетко выраженную ближнюю к лунке с антисывороткой линию преципитации антигена пепсиновых гидролизатов структур псориатических сквамозных элементов (Рисунок 2, ближняя к лунке А линия преципитации между лунками А и 4).
Обсуждение результатов исследований
Как следует из результатов исследований, представленных во втором рисунке, в условиях, приближенных к таковым in vivo, из структур эпидермиса, отторгаемого в области псориатического воспаления, солюбилизируется носитель псориатическо-го антигена, преципитируемый в том комплексе антигенов, в котором он поступает из желудочно-кишечного тракта в организм человека. Об этом
свидетельствует его преципитация в отдельной, самостоятельной в антигенном отношении форме после пепсинового гидролиза всех исследуемых субстратов (Рисунок 2, дальняя от лунки А линии преципитации между лунками А и 1). О его принадлежности к носителю псориатического антигена свидетельствует то, что аналогичный антиген не со-любилизируется пепсином из структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 2, линии преципитации между лунками А и 1). А о его принадлежности к причинному для аутоиммунных реакций при псориазе антигену свидетельствует, то, что, как следует из предыдущих исследований [21], с присутствием этого антигена в структурах псориатических сквамозных элементов ассоциируется экспрессия из этих структур естественных эпи-дермальных аутоантигенов, что является условием для их взаимодействия с антигенпредставляющими клетками. Этому взаимодействию способствует, как следует из литературы [24], и то, что базальная мембрана у больных псориазом не создает полноценный барьер для антигенов между дермой и эпи-дермисам.
Вместе с тем, как следует из первого рисунка, псо-риатический антиген идентичен одному из белков супернатантов гомогенатов эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации псориатического антигена между лунками А и 1 без образования шпоры переходит в дальнюю от лунки А линию преципитации антигенов супернатантов гомогенатов сквамозных элементов, отторгаемых в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, преципитируемых между лунками А и 2). Из этого следует, что локализующийся в структурах псориатических сквамозных элементов псориатический антиген идентичен одному из антигенов, который локализуется только за пределами структур эпидермиса, отторгаемого в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, который, как следует из второго рисунка, в отличие от псориатического антигена, чувствителен к гидролитическому действию пепсина. Об этом свидетельствует его исчезновение после пепсинового гидролиза супернатантов гомогенатов сквамозных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом (Рисунок 2, дальняя от лунки А линии преципитации псориатического антигена между лунками А и 1 уже не имеет продолжения в зону преципитации антигенов супернатантов гомогенатов сквамозных элементов, отторгаемых в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, преципитируемых между лунками А и 2) То есть псориатический антиген, будучи антигенно родственным одному из белков, локализующемуся за пределами структур сквамоз-
ных элементов области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, отличается от него устойчивостью к пепсину. Следовательно, псориа-тический антиген может рассматриваться как некоторый аналог инфекционных прионных белков, которые, как известно [19, 21], обладают антигенным родством с нормальными прионными белками, но отличаются от них устойчивостью к пищеварительным ферментам.
При этом, как следует из первого рисунка, носитель псориатического антигена идентичен одному из белков супернатантов гомогенатов псориатиче-ских сквамозных элементов (Рисунок 1, дальняя от лунки А линия преципитации псориатического антигена между лунками А и 1 без образования шпоры переходит в дальнюю от лунки А линию преципитации антигенов супернатантов гомогена-тов сквамозных элементов, отторгаемых в области интенсивной инсоляции у людей, не болеющих псориазом, преципитируемых между лунками А и 2), который, как следует из второго рисунка, в отличие от псориатического антигена, чувствителен к пепсиновому гидролизу (Рисунок 2, дальняя от лунки А линии преципитации псориатического антигена между лунками А и 1 уже не имеет продолжения в зону преципитации антигенов супернатантов го-могенатов сквамозных элементов, отторгаемых в области псориатического воспаления, преципити-руемых между лунками А и 2). Следовательно, псо-риатический антиген, внедряясь в структуры эпи-дермоцитов, вытесняет из этих структур антигенно родственный ему нормальный эпидермальный белок и в комплексе с естественными эпидермаль-
Литература/References
1. Yao K., Chen H., Liu K., Langfald A., Yang G., Zhang Y., Yu D. H., Kim M. O., Lee M. H., Li H.., Bae K. B., Kim H. G., Ma W. Y., Bode A. M., Dong Z., Dong Z. Kaempferol targets RSK2 and MSK1 to suppress UV radiation-induced skin cancer. Cancer Prev Res (Phila). 2014 Sep;7(9):958-67. doi: 10.1158/1940-6207.CAPR-14-0126. Epub 2014 Jul 3.
2. Pinedo-Vega J. L., Castaneda-Löpez R., Davila-Rangel J. I., Mireles-Garcia F., RiosMartinez C., Löpez-Saucedo A. [Skin cancer incidence in Zacatecas]. Rev Med Inst Mex Seguro Soc. 2014 May-Jun; 52(3):282-9. [Article in Spanish]
3. Wu S., Cho E., Li W. Q., Weinstock M. A., Han J., Qureshi A. A. History of Severe Sunburn and Risk of Skin Cancer Among Women and Men in 2 Prospective Cohort Studies. Am J Epidemiol. 2016; 183(9):824-33. doi: 10.1093/aje/kwv282. Epub 2016 Apr 3.
4. Nickoloff B. J. Creation of psoriaticplaques: the ultimate tumor suppressor pathway: A new model for an ancient T-cell-mediated skin disease: Viewpoint. J. Cutan. Pathol. 2001;28(2):57-64.
5. Suomela S., Elomaa O., Skoog T., Ala-aho R., Jeskanen L., Pärssinen J., Latonen L., Grénman R., Kere J., Kähäri V. M., Saarialho-Kere U.. CCHCR1 is up-regulated in skin cancer and associated with EGFR expression. PLoS One. 2009; 4(6):e6030. doi: 10.1371/journal.pone.0006030.
6. Leyssens C., Verlinden L., Verstuyf A. The future of vitamin D analogs. Front Physiol. 2014 Apr 3; (5):122. doi: 10.3389/ fphys.2014.00122. eCollection 2014.
7. Raica M., Cimpean A. M., Ribatti D. Angiogenesis in pre-malignant conditionsю. Eur J Cancer. 2009; 45(11):1924-34.
ными аутоантигенами, как показали предыдущие исследования [21], оказывается за пределами этих структур.
Сам факт экспрессии эпидермальных аутоанти-генов из структур псориатических эпидермоцитов [21] свидетельствует об их деструкции. Следовательно, при псориазе развиваются события, аналогичные тем, которые наблюдаемы в некоторых случаях при инфекционных заболеваниях, сопровождающихся элиминацией малигнизированных клеток [17], - носитель псориатического антигена, обладая тропизмом к клеткам с аномально высокой пролиферацией, вызывает деструкцию и псориа-тических, и малигнизированных эпидермоцитов. А его цитопатогенное действие усиливается, как следует из наших предыдущих исследований [21] и из литературы [13], развивающимися, в связи с деструкцией, аутоиммунными реакциями.
Таким образом, поскольку и псориаз, и онкопато-логия относятся к гиперпролиферативным заболеваниям, то можно заключить, что с присутствием псориатического антигена в структурах эпидермо-цитов, обладающего некоторыми свойствами инфе-ционного прионного белка и поэтому являющегося его аналогом, связан низкий уровень риска мелано-мы и другой онкопатологии кожи в очагах псориа-тического воспаления. А при отсутствии носителя антигена со свойствами инфекционного прионного белка в структурах эпидермоцитов, отторгаемых в области интенсивной инсоляции до солнечного ожога у людей, не болеющих псориазом, наблюдается высокий риск меланомы и другой онкопатоло-гии кожи.
doi: 10.1016/j.ejca.2009.04.007. Epub 2009 May 4.
8. Shi G., Sohn K. C., Li Z., Choi D. K., Park Y. M., Kim J. H., Fan Y. M., Nam Y. H., Kim S., Im M., Lee Y., Seo Y. J., Kim C. D., Lee J. H. Expression and functional role of Sox9 in human epidermal keratinocytes. 2013;8(1):54355. doi: 10.1371/ journal.pone.0054355. Epub 2013 Jan 18.
9. Werfel T., Holiangu F., Niemann K. H., Schmerling O., Lüllau F., Zedler A., Sträter H. D., Niebuhr M. Digital ultraviolet (UV) therapy - a novel therapeutical approach for the targeted treatment of psoriasis vulgaris. Br J Dermatol. 2015; 172(3):746-53. doi: 10.1111/bjd.13464. [Epub ahead of print].
10. Carnero L., González-Pérez R., Arrue I., Soloeta R. Multiple warts appearing exclusively on psoriasis plaques. Actas Dermosifiliogr. 2011; 102(10):835-6. [Article in Spanish] doi: 10.1016/j.ad.2011.05.013. Epub 2011 Jul 27.
11. Friedman K. J. Mаlignant melanoma and squamous cell carcinoma in a patient treated forsevere pustular psoriasis. J Dermatol Surg Oncol. 1986; 12(12):1290-1294.
12. Voss K. E., Bollag R. J., Fussell N., By C., Sheehan D. J., Bollag W. B. Abnormal aquaporin-3 protein expression in hyperproliferative skin disorders. Arch Dermatol Res. 2011; 303(8): 591-600. doi: 10.1007/s00403-011-1136-x. Epub 2011 Mar 13.
13. Raut A. S., Prabhu R. H., Patravale V. B. Psoriasis clinical implications and treatment: a review. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 2013; 30(3):183-216.
14. Pérez Ramírez S., Parra V., Avilés Izquierdo J. A., Vicario J. L., Martín M., Márquez-Rodas I. Metastatic melanoma with spontaneous regression, psoriasis and HLA-Cw6: case report and a hypothesis to explore. Tumori. 2014; 100(4):144-7. doi:
10.1700/1636.17932.
15. Agache P. G., Quencez E. II meccanismo dell'eritema solare. Asma, allerg., immunopatol. 1989; 76:64.
16. Bohringer D., Stein E. H., Bohringer D., Stein E. H., Hautige Bedeutung der SUP-Erfahrunosbericht. Akt. Dermatol. 1974; 6(5):255-63.
17. Hiroshi Fukuhara, Yasushi Ino and Tomoki Todo.. Oncolytic virus therapy: A new era of cancer treatment at dawn. Cancer Sci. 2016; 107(10):1373-9.
18. Juhlin L., Scheynius A., Klareskog L. Immunohistochemical reactivity of monoclonal antibodies generated after immunization of mice with cells from a psoriatic lesion. Acta Dermatovenerol.1989; 69(2):93-100.
19. Prusiner S. B., Colling J., Palmer M. S. Cell biology and transgenic models of prion diseasis. - In: Prion diseasis. Oxf. Univ. Press. 1997. 130-162.
20. Зуев В. А., Завалишин И. А., Ройхель В. М. Прионные болезни человека и животных. М.: Медицина. 1999. 192 с. [Zuev V. A., Zavalishin I. A., Roykhel' V. M. Prionnye bolezni cheloveka i zhivotnykh. Moscow: Meditsina; 1999. 192 p. (in Russian)]
21. Синицын Б. Ф. Риск фотоканцерогенеза и различия в ме-
ханизмах запуска аутоиммунных реакций при интенсивной инсоляции и псориазе (от иммунопатологии псориаза к иммунотерапии рака). В кн.: Акутина С. И., ред. Избранные вопросы современной науки. Часть XX. М.: Перо; 1916: 192-224. [Sinitsyn B. F. Risk fotokantserogeneza i razlichiya v mekhanizmakh zapuska autoimmunnykh reaktsiy pri intensivnoy insolyatsii i psoriaze (ot immunopatologii psoriaza k immunoterapii raka. In: Akutina S. I. Izbrannye voprosy sovremennoy nauki). In: Akutina S. I., ed. Selected issues of modern science. Part XX. Moscow: Pero; 2016: 192-224 (in Russian)]
22. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Г. Иммунология. М.: Медицина. 2000. 430 с. [Khaitov R. M., Ignat'eva G. A., Sidorovich I. G. Immunologiya. Moscow: Meditsina; 2000. 430 р. (in Russian)]
23. Берзовски Дж. А., Берковер А. Дж. Взаимодействие антиген-антитело. В кн.: У Пол., ред. Иммунология. Т. 3. Пер. с англ. Т. Н. Власик. М.: Мир; 1989; 5-88. [Berzofski Dzh. A. Berkover A. Dzh. Vzaimodeystvie antigen-antitelo. In: Paul W. E., ed. Immunology. Moscow: Mir; 1989; 3: 5-88 (in Russian)]
24. Weddell A. G. A note on psoriatic skin. J. Investing Derm. 1964; 42(1):171-2.
Сведения об авторах
Синицын Борис Федорович - кандидат медицинских наук, доцент кафедры инфекционных болезней Медицинской академии имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295051, Симферополь, е-тай: dr.boris.sinitsyn@gmail.com.
Поступила 11.05.2017
Received 11.05.2017
Конфликт интересов. Авторы данной статьи заявляют об отсутствии конфликта интересов, финансовой или какой-либо другой поддержки, о которой необходимо сообщить.
Conflict of interest.
The authors of this article confirmed financial or any other support with should be reported.
