CC BY
8
УДК в14.72;«15.285.7]-073.524
В. Г. Атабекян, В. П. Палямова
ПРИМЕНЕНИЕ ДИТИЗОНА ДЛЯ ФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИНЕБА В ВОЗДУШНОЙ СРЕДЕ
Бронницкая геолого-геохимическая экспедиция Института минералогии, геохимии и кристаллохимии редких элементов Московской области
Для борьбы с ложными мучнисторосными грибками, поражающими плодово-ягодные культуры, наиболее эффективны производные дитиокарбаминовой кислоты (К. А. Гар). Очень распространенным препаратом этой группы является цинеб.
В литературе описаны методы фотометрического определения цинеба по дитиокарбаминовой группе (Н. А. Крылова; М. А. Клисенко и М. Ш. Векштейн), однако они групповые, так как днтиокарбаминовая группа характерна для многих ядохимикатов, что не позволяет судить о количестве индивидуального вещества. Кроме того, эти методы недостаточно чувствительны.
Для количественного определения цинеба мы использовали реакцию с дитизоном в щелочной среде рН 12,5— 13,5. Чувствительность определения 0,5 мкг в анализируемом объеме. Метод неспецифичен в присутствии ионов цинка. Применяемые реактивы и растворители должны быть очищенными и высушенными.
Пробу отбирали протягиванием исследуемого воздуха со скоростью 5 л/мин через укрепленный в патроне аэрозольный фильтр АФА-В-10 или АФА-В-18. Для анализа брали 25--30 л воздуха. Фильтр переносили в химический стакан и промывали 5 мл 0,5 % раствора гидроксида калия. В калориметрическую пробирку из химически устой-
чивого стекла переносили 3 мл полученного раствора, добавляли 0,2 мл 0,01 % раствора дитизона в ацетоне и 3 мл хлороформа. Через 2—3 мин содержимое пробирки энергично встряхивали. Спустя 5—7 мин окрашенный раствор фотометрировали при длине волны 530 нм и толщине слоя 1 см. Фотометрировать окраску можно и визуально по стандартной шкале, которую готовили с содержанием цинеба 0, 0,5, 1, 3, 5, 8, 10 мкг и т. д.
Поскольку своевременный контроль за чистотой окружающей среды является одной из актуальных задач, предложенный метод можно рекомендовать работникам промышлеино-санитарной службы для оценки гигиенического состояния атмосферного воздуха.
Литература. Гар К. А. Химические средства борьбы с вредителями и болезнями сельскохозяйственных культур. М., 1970, с. 94—95.
Клисенко М. А., Векштейн М. Ш. — В кн.: Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М., 1977, с. 238—241.
Крылова H.A. — Гиг. и сан., 1972, № 3, с. 62—64.
Поступила 12.02.81
Краткие сообщения
УДК ем.777:574.635:574.64:646.76
А. Т. Стародубова, В. М. Бондаренко О ВЛИЯНИИ СОЛЕЙ ХРОМА НА МИКРОМИЦЕТЫ
Актюбннский медицинский институт и Павлодарская городская санэпидстанция
В настоящей работе приведены данные о воздействии Сгв+ и Сг3+ на плесневые и дрожжевые грибки, которые наряду с бактериями могут участвовать в самоочищении водоемов и других биологических процессах. В работе использовано 145 штаммов различных плесневых грибков: 50 Aspergillus flavus Link., 2 А. ochraceus Wilh., 10 А. fumigatus Fres., 8 A. nidulans Eidam., 15 A. niger Tiegh., 5 A. terreus Thom., 3 A. albus Bain et Sart., 1 Aspergillus sp., 29 Penicillium sp., 19 Fusarium sp., 1 Cladosporium herbarum, 1 Mucor mucedo, I Stemphylium ilicis Tengwall. Указанные штаммы выделены из зерновых продуктов Павлодарской области. Штамм Candida albicans № 25 выделен от больного дисбактериозом кишечника®. В качестве плотной использовали среду Чапека, в качеств жидкой — среду Сабуро. Методика получения градиента концентра-
2 Авторы выражают благодарность сотрудник-у лаборатории санитарно-пищевой микологии Казахского фи-
лиала Института питания канд. мед. наук Л. М. Фадеевой за окончательную идентификацию микромицетов, использованных в данной работе.
Одной из глобальных проблем современности является охрана внешней среды. Загрязнителями ее могут быть отходы производства, содержащие ноны тяжелых металлов и металлоидов (мышьяка, бария, кадмия, хрома, фтора, свинца, ртути, селена, ванадия), которые, по данным ВОЗ (1968), оказывают канцерогенное, тератогенное и токсическое действие.
В детоксикации этих соединений, в частности солей Сг'+, видная роль принадлежит микроорганизмам, которые переводят ионы Сг20' в менее токсическую форму Сг3+ (С. В. Яковлев и соавт., В. И. Романенко и В. Н. Ко-реньков). Однако большие концентрации Сг0+(2-10-3 и выше)1 подавляют уже процессы не только биологической очистки, но и детоксикации.
Нами установлено, что токсическое воздействие солей Сг'+ на бактерии проявляется уже при наличии в среде свободных ионов СгО?-.
1 Все дозы хрома, указанные в статье, даны в грамм-атомах на 1 л.
Рис. 1. Влияние солей Cr01 на
плесневые грибки. а—в — Stemphylium ilicis *ft 288. г — Fusarium секции sporotrichells Aft 15; д—а — Aspergillus (lavus Link К 108; а — Mucor muccdo Nt 314. Cr'+ в виде К»Сг,0», доза 10 r-атома хрома на
1 л среды Чапека. Инкубация 55 дней при 25 °С. а — об. 10, ок. «гомаль» 3; б — и — об. 90, ок. «гомаль» 3. иммерсии.
ций Сг'+ и Сг3+ в дозах от Ю-1 до Ю-4 описана ранее. Реакция с дифеннлкарбазидом на наличие свободных ионов СгС>4~ была положительной в концентрациях солей Сге+ Ю-3 и выше. Недельные культуры плесневых грибков и дрожжей Candida albicans, выращенных на жидкой среде Сабуро, тщательно эмульгировали и засевали на разлитую в чашки плотную среду Чапека с добавлением хрома и без него с помощью штампа-релликатора или пипеткой. Посевы инкубировали при 25 °С до 60 сут. Наблюдение за ростом культур проводили с помощью стереомик-роскопа МБС-1. Для выявления и фотографированияневи-димого глазом роста культур проводили микроскопию агаровых пластинок. Микрофотографии сделаны в едином масштабе на микроскопе МБИ-1 в фазовом контрасте с применением установки МНФ-10. Объектив 90 с иммерсией, окуляр типа «гомаль» 3, освещение от установки ОИ-19. Ряд снимков выполнен с объективом 10.
В результате проведенных исследований установлено, что соли Сг'+ в концентрации Ю-4 не оказывали влияния на рост всех изученных штаммов плесневых грибков и дрожжей Candida albicans, поскольку при этой дозе бихромата свободные ионы CrOj- в среде отсутствовали. Соли Сг,+ в концентрациях, обусловливающих положительную качественную реакцию с дифеннлкарбазидом на наличие свободных ионов Сг04(10-3), сильно тормозящими рост всех плесневых грибков и дрожжей Candida albicans. Токсическое действие дозы Сгв+ Ю-3 на все плесневые грибки выражалось в замедлении темпов роста и формирования мицелиальных трубок, снижении способности к формированию конидиеносцев и конидисспор у всех штаммов Pénicillium sp., A. flavus, niger, albus, ochraceus, nidulans, terreus, fumigatus, Fusarium sp., Stemphylium ilicis № 288 и в полной редукции спорообразования у Cladosporium herbarum, образования споран-гиеносцев и спорангиоспор у Mucor mucedo № 314. Так, если в контроле уже на 3-й сутки в культуре A. flavus № 108 число конидиальных головок в одном поле зрения при объективе 10 трудно поддавалось счету (их было не менее 1000), а каждая головка была усеяна огромным количеством конидиоспор, то в дозе Сг*+ Ю-3 в те же сроки инкубации на одно поле зрения приходилось не более од-
ной головки с небольшим количеством спор, и лишь через 45 сут инкубации число головок и спор интенсивно нарастало, особенно к 60-му дню. Более выраженное влияние на рост всех изученных плесневых грибков и дрожжей Candida albicans оказывала доза Сг 10-При этой дозе видимый глазом рост всех грибков на чашках в течение 45 дней отсутствовал, воздушный мицелий не формировался, крайне замедленными темпами образовывался чрезвычайно разреженный мицелий, например культур Р. purpurogenes (рис. 2, б, г), A. flavus (рис. 1, е, ж), Stemphylium ilidis (рис. 1, a). Fusarium sp. (рис. 1, г), либо формировался микромонопласт почкующихся клеток Candida albicans (рис. 2, а) или хламндоспор Mucor muccdo на фоне дегенеративно измененного мицелия (рис. 1, и). При этом рост плесневых грибков, например. A. flavus, P. purpurogenes и M. mucedo, происходил в примитивных, в основном бластных, формах (см. рис. 1, д, ж, и, 2, б, г), мицелиальные трубки формировались с большим трудом, а конидиальное спороношение подавлялось в такой степени, что единичные экземпляры головок A. flavus (рис. 1, з) или зачатки кисточек у P. purpurogenes (рис. 2, в) даже на 55-й день инкубации приходились на 50—100 полей зрения при объективе 10. У грибка Stemphylium ilicis конидиальное спороношение подавлялось относительно меньше, чем в у P. purpurogenes и A. flavus. Так, если в контроле число конидиальных образований у Stemphylium ilicis № 288 в одном поле зрения трудно поддавалось счету (около 1000), то при дозе Сг*+ 10—* через 55 дней инкубации их было около сотни (см. рис. 1, а). При этой дозе рост различных плесневых культур и дрожжей Candida albicans замедлялся настолько, что в одном препарате удавалось подробно рассматривать различные фазы и этапы роста плесневых культур (см. рис. I, б, в, е. ж, д, рис.2, в и др.). Дозы Cr«+ 10-2, 10—ж.ь и 10-* для всех изученных культур были микоцидными. При действии субпороговой дозы (Ю-3.5) бихроматов наблюдались различные реакции в зависимости от видовых особенностей штаммов плесневых грибков. Так, наряду с эффектами стимуляции роста и пигментообразования, например у штамма Pénicillium purpurogenes № 282, при действии этой дозы происходило разрежение роста
Рис. 2. Влияние солей Сг"+ (а—г) и Cr3* (д—и) на плесневые грибки и дрожжи.
а — Candida albicans Ni 25. б—г — Pénicillium purpurogenes JA 282. Cr4+ в виде KiCrtO* доза 10—' г-атома хрома на 1л среды Чапека; д—Mucor mucedo Kt 314. е — Candida albicans Jft 25. ж—и —Pénicillium purpurogenes JA 282. Cr'+ в виде CrCI»*6HiO, доза I0—1 г-атома Cr на I л среды. Чапека. Инкубация 55 дней при 25°С. Об. 90. ок. «гомаль» 3. иммерсия.
я снижение образования конидий у различных грибков и полное подавление способности к формированию спо-рангиеносцев и распространяющемуся росту у Mucor mu-cedo. Значительно меньшим токсическим эффектом обла-
дали соли Сг3+. Доза его Ю-1 обладала лишь выраженной микостатической активностью для всех изученных культур. При ней видимый глазом рост культур, например Р. ригриго£епез, А. Пауиэ, 51етрНу1шт ¡ПЫв, Мисог ти-
Рис. 3. Влияние солей Сг3+ на плесневые грибки. а —в. д—ж — Aspergillus Bflavus Link ЛЧ 108, г — Stemphylium Illcls JA 288: s — Fusarium секции sporotrichiella JA 15; б — край макроколонии, ув. 30, « — то »:e, ув. 270; стрелка — единичная головка А flavus. Cr м- виде СгС1,-6Н.О. доза 10—1 г-атома хрома на 1 л среды Чапека. Инкубация 55 днеП при 25 °С. а—б об. 10. ок. «гомаль» 3; »—s — об-90. ок. «гомаль» 3.
cedo, Fusarium секции sporotrichiella. Candida albicans, до 55-го дня инкубации чаще отсутствовал и выявлялся лишь под микроскопом (рис. 2, д—и и рис. 3, а, г—з). Конидиальное спороношение было значительно редуцировано. Так, единичные головки. A. flavus (см. рис. 3. ас), обнаруживаемые на поверхности агара через 55 дней инкубации, приходились на 100—200 полей зрения при объективе 10 (см. рис. 3, а). Реже при этой дозе у A. niger и A. flavus в первые 8—55 дней соответственно мог формироваться слабо выраженный стерильный воздушный мицелий (см. рис. 3, б, в) с последующим возможным развитием конидиального спороношения при инкубации более 60 дней. Доза Cr3+ 10—4 была для всех изученных культур грибков безвредной, а доза Ю-3.6 давала слабый стимулирующий эффект.
Дозы солей Сг3+ от Ю-3 до 1-0-3 оказывали различное влияние, что зависело от видовых и штаммовых особенностей культур. При воздействии этих доз наблюдались как стимуляция роста, спорообразования и продукции пигментов, в частности у Р. purpurogenes и A. flavus, так и значительное ннгибнрование роста многих штаммов различных плесневых грибков.
Доза Cr3+ Ю-1.ь обладала выраженной микостатиче-ской активностью и сильно редуцировала спорообразование вплоть до полного его подавления у различных штаммов плесневых грибков.
В ы воды. 1. Соединения Сг,+ после внесения в питательную среду могут подвергаться химическому обез-' вреживанию, поэтому при проведении токсикологических экспериментов необходимо контролировать наличие свободной формы ионов Сг04~ в среде.
2. Признаки токсического воздействия у плесеней и дрожжей, как и у бактерий, возникают под влиянием солей Сг*+ уже в концентрациях, обусловливающих наличие свободных ионов CrOj— во внешней среде.
3. Соединения Сг3+ для плесеней и дрожжей, как и для бактерий, менее токсичны, чем соединения Сгв+. Однако концентрации Сг3+ и «общего» хрома 10—3.? г-атом хрома на 1л и выше могут вызвать извращение метаболизма микроорганизмов вплоть до их полной блокады.
4. Попадание Сг'^ в водоемы различных видов водопользования в концентрациях, обусловливающих наличие свободных ионов CrOj-, и в субпороговых дозах может нарушить процессы их биологического самоочищения.
5. Добавление солей Сг,+ в дозах от Ю-3 до 10 2.5 или Сг3+ в дозах от Ю-1.ъ до Ю-1 г-атома хрома на I л агаризованной питательной среды может оказаться полезным для более детального изучения различных фаз и этапов роста плесневых культур и получения их качественных микрофотографий, а в дозах Cr,+ Ю-3. 6 или Сг3+ 10—а. 5 г-атом хрома на 1 л использоваться для подавления распространяющего роста мукоровых грибков и облегчения выделения аспергилл в чистую культуру.
Литература. Романенко В. И., Кореньков В. Н. — Биол. внутр. вод. (Информ. бюлл.), 1975, № 25, с. 8—9. Яковлев С. В., Кузмичева В. А., Кореньков В. Н. и др.— Водоснабжение и сан. техника, 1974, № 5, с. 7—10. Research Into Environmental Pollution. (WHO, Techn. Report ser. № 406). Geneva, 1968.
Поступила 16.10.80
УДК 371.7115828.9.061:617.753.2-053.5
О. Н. Савельев, В. Н. Васильков, Р. П. Гармида, В. Ф. Гудкова, Л. А. Партенко, Л. А. Савицкая
ОБОСНОВАНИЕ УРОВНЕЙ ОСВЕЩЕННОСТИ ДЛЯ ШКОЛЬНИКОВ С ПОНИЖЕННОЙ ОСТРОТОЙ ЗРЕНИЯ ВБЛИЗИ
с
Оренбургский медицинский институт, санэпидстанция Оренбургского отделения Южно-Уральской железной дороги, Оренбургский городской кабинет охраны зрения
детей
Уровни освещенности 150—300 лк, рекомендуемые для классных комнат школ, создают небольшую яркость, при которой зрачок (биологическая диафрагма в оптической системе глаза) уменьшается незначительно, и зрительная работа при чтении и письме у лиц с соразмерной рефракцией или дальнозоркостью может осуществляться только при напряжении аппарата аккомодации. Л. А. Борисова и соавт. показали, что занятия при такой освещенности приводят к рязвитню значительного зрительного утомления у учащихся.
Более высокие уровни освещенности (яркости) способствуют сужению зрачка и увеличению глубины фокусной области глаза (Н. М. Сергиенко). В данном случае четкое изображение на сетчатке получаете^ без участия аппарата аккомодации (Ю. Д. Жилов). В связи с этим при увеличении освещенности в 10 раз и более по сравнению с нормой (150 лк) у лиц с дальнозоркостью или соразмерной рефракцией, имеющих нарушения функции аккомодации и пониженную остроту зрения, повышена острота зрения вблизи (нередко до 1,0 D). Нарушение функции аккомодации и связанное с ним уменьшение остроты зрения вблизи довольно часто встречается у учащихся общеобразовательных школ. Для школьников с пониженной остротой зрения необходимы более высокие уровния освещенности го сравнению с существующими нормативами, разработанными в расчете на нормальную функцию зрительного анализатора (И. С. Коркнн; С. К. Кунин и Э. И. Кривиц-кая; 3. А. Скобарева). Следовательно, для школьников
с пониженной остротой зрения требуются оптимальные уровни освещенности для предупреждения прогрессирова-ния нарушений функции аккомодации и возникновения спазмов аккомодации.
Учитывая мнение Э. С. Аветисова о роли нарушений функции аппарата аккомодации в патогенезе близорукости, следует считать, что у школьников с пониженной остротой зрения высокие уровни освещенности при зрительной работе имеют значение и в профилактике близорукости.
В связи с отсутствием в литературе данных по указанному вопросу нашей задачей являлось установление для школьников с пониженной остротой зрения уровней освещенности, обеспечивающих выполнение зрительной работы без напряжения аппарата аккомодации.
Начальный этап исследований состоял в определении остроты зрения у 255 учащихся 4—7-х классов общеобразовательной школы, не страдающих близорукостью. При этом по таблице Д. И. Сивцева определяли остроту зрения вблизи (на расстоянии 30 см). Исследование проводили ранней весной, когда чаще происходит ослабление аккомодации (Л. Л. Богомолов). Пониженная острота зрения выявлена у 71 учащегося: большинство (60,5%) имели остроту зрения 0,9 О у остальных она была в пределах 0,8—0,4 О.
При офтальмологическом обследовании 69 учащихся с пониженной остротой зрения установлено, что у 24 (34,7%) имелась соразмерная рефракция, у 18 (26.1%)—
