CC BY
0
DOI: https://doi. org/10.22263/2312-4156.2024.2.59
О результатах первичной токсикологической оценки фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид
В.М. Василькевич, А.А. Евтерева, Е.В. Чернышова
Республиканское унитарное предприятие «Научно-практический центр гигиены», г. Минск, Республика Беларусь
Вестник ВГМУ. - 2024. - Том 23, №2. - С. 59-68.
On the results of the initial toxicological assessment of the pharmaceutical substance articaine hydrochloride
V.M. Vasilkevich, A.A. Evtereva, E.V. Chernyshova
Republican Unitary Enterprise «Scientific and Practical Centre of Hygiene», Minsk, Republic of Belarus Vestnik VGMU. 2024;23(2):59-68.
Резюме.
Цель исследования - экспериментально установить основные параметры токсикометрии при остром воздействии, изучить кожно-раздражающее и ирритативное действие, способность к кожной резорбции и кумуляции, дать классификационную оценку опасности вредного действия на организм человека фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид с учетом профессиональных рисков фармацевтического производства. Материал и методы. Объектом исследований являлась фармацевтическая субстанция артикаина гидрохлорид. На лабораторных животных (аутбредные крысы, мыши, кролики-альбиносы) изучена острая токсичность при внутри-желудочном, внутрибрюшинном и ингаляционном поступлении, кожно-раздражающее, кожно-резорбтивное и ир-ритативное действие, кумулятивная активность. Методом пробит-анализа вычислены среднесмертельные дозы и концентрации (DL50, CL50). Расчетными методами по логарифмическим уравнениям дополнительно установлены коэффициент возможного ингаляционного отравления (КВИО), порог и зона острого действия (Lim и Z ). Результаты. Фармацевтическая субстанция артикаина гидрохлорид по большинству изученных токсикометриче-ских параметров относится к веществам мало- и умеренно опасным, не обладает кожно-раздражающим, иррита-тивным и кожно-резорбтивным действием. Кумулятивная активность, изученная по критерию «гибель», слабая. Видовая и половая чувствительность к артикаина гидрохлориду у лабораторных животных не выражена. Заключение. По лимитирующему (имеющему наименьшее значение) показателю токсичности (CL50) субстанция отнесена ко 2 классу опасности (вещества высокоопасные) по ГОСТ 12.1.007-76, что является основанием для продолжения исследований в объеме полной токсикологической оценки с постановкой хронического эксперимента на лабораторных животных и обоснованием предельно допустимой концентрации (ПДК) в воздухе рабочей зоны. Ключевые слова: фармацевтическая субстанция артикаина гидрохлорид, воздух рабочей зоны, токсикологическая оценка, токсичность, опасность для здоровья, гигиенический норматив.
Abstract.
Objectives. To experimentally establish the main parameters of toxicometry during acute exposure, to study the skin-irritant and irritative effects, the ability for skin resorption and cumulation, to make a classification assessment of the danger of the harmful effect on the human body of the pharmaceutical substance articaine hydrochloride, taking into account the professional risks of the pharmaceutical production.
Material and methods. The object of research was the pharmaceutical substance articaine hydrochloride. Acute toxicity during intragastric, intraperitoneal and inhalation administration, skin-irritant, skin-resorptive and irritative effects, and cumulative activity were studied on laboratory animals (outbred rats, mice, albino rabbits). The average lethal doses and concentrations (DL50 and CL50) were calculated using the probit analysis method. Calculation methods with the use of logarithmic equations additionally established the coefficient of possible inhalation poisoning, the threshold and the zone of acute action (L and Z ).
v imac яп'
Results. The pharmaceutical substance articaine hydrochloride, according to the majority of the studied toxicometric parameters, is a low- and moderately dangerous substance and does not possess a skin-irritant, irritative or skin-resorptive effect. The cumulative activity studied using the "death" criterion is weak. The species and sex sensitivity to articaine hydrochloride in laboratory animals is not expressed.
Conclusions. According to the limiting (having the lowest value) toxicity indicator (CL50), the substance is classified as hazard class 2 (highly hazardous substances) according to GOST 12.1.007-76, which is the basis for continuing research in the scope of a full toxicological assessment with a chronic experiment on laboratory animals and justification of maximum permissible concentration (MPC) in the air of the working area.
Keywords: pharmaceutical substance articaine hydrochloride, work area air, toxicological assessment, toxicity, health hazard, hygienic standard.
Введение
Фармацевтическая промышленность Республики Беларусь является динамично развивающейся отраслью с устойчивым трендом на развитие импортозамещающего производства. По данным Белстата за 2022 год среднесписочная численность работников, занятых в фармацевтическом производстве, составила 10 300 человек, или 1,2% от общей численности работников промышленности. Основной особенностью химико-фармацевтического производства является применение большого количества разнообразного химического сырья, что влечет за собой высокий риск загрязнения воздуха рабочей зоны комплексом химических соединений, в том числе фармацевтическими субстанциями [1-3]. По данным ряда авторов (A. Milovanovic, 2007, Л.Г. Горохова, 2017, 2018, С.В. Арабей, 2022) у работников фармацевтических предприятий отмечаются высокие показатели заболеваемости, формирующиеся под влиянием профессиональных факторов и, прежде всего, химического [2-5].
Присутствие в воздухе рабочей зоны аэрозоля сложного химического состава требует организации постоянного лабораторного контроля, однако безопасное содержание большинства фармацевтических субстанций не регламентировано, не разработаны и не прошли метрологической аттестации аналитические методы контроля содержания субстанций.
Следует отметить, что разработка гигиенического норматива для фармацевтических субстанций проводится на основании токсикологической оценки (первичной или полной оценки с установлением в эксперименте на животных порога хронического действия) с учетом данных паспортизации производств, которые включают физико-химическую и фармакологическую характери-
стику субстанции и лекарственного средства на его основе, анализ особенностей технологии и условий производства.
Первым этапом токсиколого-гигиенической регламентации химических веществ (субстанций) и обоснования безопасных условий производства является первичная токсикологическая оценка, результаты которой позволяют принять решение о необходимости либо нецелесообразности дальнейших длительных токсикологических исследований (хронический эксперимент на лабораторных животных при поступлении субстанции путями, адекватными реальным условиям трудовой деятельности человека).
Объем исследований при первичной токсикологической оценке и гигиенической регламентации химических веществ и субстанций, как правило, включает [6]:
- токсиколого-гигиеническую характеристику изучаемого вещества и его аналогов;
- установление параметров острой токсичности и потенциальной опасности острого отравления при различных путях поступления (в желудок, внутрибрюшинно, накожно, ингаляци-онно) в организм животных с учетом их видовой чувствительности;
- определение способности оказывать местное раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки глаз;
- оценку кожно-резорбтивных свойств при однократном и повторном воздействии;
- выявление возможных кумулятивных свойств.
Для веществ, в процессе первичной токсикологической оценки которых установлены параметры токсикометрии, классифицирующие их как чрезвычайно- или высокоопасные (1, 2 классы опасности согласно ГОСТ 12.1.007-76 [7]), а также обладающих аллергенной активностью или
имеющих обоснованные литературные сведения о существовании аналогов, проявляющих канцерогенные или мутагенные свойства, результаты исследований являются недостаточными и служат основанием для продолжения экспериментов по токсиколого-гигиенической регламентации с целью разработки предельно допустимой концентрации (далее - ПДК).
В Республике Беларусь в настоящее время реализуется Государственная научно-техническая программа «Разработка фармацевтических субстанций, лекарственных средств и нормативно-правового обеспечения фармацевтической отрасли», 2021-2025 гг., которой предусмотрено для ряда фармацевтических субстанций научное обоснование и разработка ПДК и классов опасности, методов контроля их содержания в воздухе рабочей зоны и атмосферы населенных мест.
Среди фармсубстанций и препаратов представляет интерес группа средств для местной анестезии, которые широко используются в клинической практике для обезболивания. Следует отметить, что в настоящее время в Республике Беларусь отсутствуют гигиенические нормативы в воздухе рабочей зоны для наиболее востребованных местных анестетиков, которые имеют схожее химическое строение и относятся к амид-ной группе (лидокаин, тримекаин, мепивакаин, прилокаин, бупивакаин, этидокаин, артикаин). Отдельно следует выделить артикаин, который является препаратом последнего поколения.
Цель исследования - экспериментально установить основные параметры токсикометрии при остром воздействии, изучить кожно-раздра-жающее и ирритативное действие, способность к кожной резорбции и кумуляции фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид, позволяющие оценить токсические свойства и классифицировать субстанцию по степени опасности вредного действия на организм человека с учетом профессиональных рисков фармацевтического производства.
Материал и методы
Объектом исследований являлась фармацевтическая субстанция артикаина гидрохлорид производства S.I.M.S. S.r.L (Societa Italiana Medicinali Scandicci), Италия. Степень химической чистоты - 99,96%. Образец субстанции для исследований представлен ОАО «Борисовский завод медицинских препаратов».
Артикаина гидрохлорид - фармацевтическая субстанция, относящаяся к химическому классу амидов. Впервые синтезирован в 1969 г. (Винтер (Winter), Германия), получил одобрение врачебным сообществом для применения в медицине в 1975 г. На данный момент артикаин является наиболее популярным анестетиком в стоматологии [8] и препаратом выбора для большинства терапевтических, хирургических и ортопедических вмешательств [9], ежегодно включается в республиканский формуляр и клинические протоколы по оказанию пациентам различных видов стоматологической медицинской помощи.
Регистрационный номер CAS: 23964-57-0. Брутто-формула - C13H21ClN2O3S. Структурная формула представлена на рисунке 1.
По физико-химическим свойствам артикаина гидрохлорид представляет собой белый или белый с желтовато-зеленоватым оттенком кристаллический порошок, который легко растворим в воде. Температура кипения фармсубстанции составляет 440,6 °C, водородный показатель (рН) 1% раствора 4,2-5,2 единиц рН, давление насыщенного пара (упругость) при температуре 20°C - 5,79х10-8 мм рт. ст.
На отдельных стадиях производственного процесса (операции, связанные с разгерметизацией оборудования, загрузка и выгрузка порошка) возможно выделение фармацевтической субстанции в воздух рабочей зоны в виде мелкодисперсного аэрозоля.
При выполнении исследований придерживались как общей методологии гигиенического нормирования промышленных вредных веществ, изложенной в Инструкции 1.1.11-12-35-2004 и МР № 118-00-10 [6, 10], так и методических подходов установления ориентировочного безопасного уровня воздействия (ОБУВ) и ПДК лекарствен-
О
Рисунок 1 - Пространственная конфигурация (структурная формула) артикаина гидрохлорида
ных средств в воздухе рабочей зоны, которые приведены в Инструкции 1.1.11-12-206-2003 [11].
Оценка острой токсичности артикаина гидрохлорида проведена при различных путях введения на лабораторных животных двух видов (нелинейные самки и самцы белых крыс, мышей). Экспериментальные группы животных формировали методом случайной выборки с учетом пола и массы тела в качестве определяющих показателей, при этом разность в массе тела животных составляла не более 10%.
Острую внутрижелудочную токсичность оценивали при однократном введении животным опытных групп 50%-ного водного раствора артикаина гидрохлорида в диапазоне доз от 100 до 5000 мг/кг, при этом животные контрольной группы получали дистиллированную воду. Период наблюдения с регистрацией клинических симптомов отравления составил 14 дней.
Для изучения острой внутрибрюшинной токсичности подопытным животным однократно вводили 50%-ный водный раствор артикаина гидрохлорида в дозах от 100 до 500 мг/кг. Животные контрольной группы получали физиологический раствор в эквивалентных количествах. Видовую резистентность к токсическому действию артикаина гидрохлорида оценивали путем расчета коэффициента видовой чувствительности (КВЧ) как при внутрижелудочном, так и при внутрибрюшинном введении.
При изучении острой ингаляционной токсичности применяли модель воспроизведения ингаляционного воздействия путем интраназального введения лабораторным животным (подробно изложена в МУ № 5789/1-91 [12]): белым крысам в концентрациях 1000-3000 мг/м3; белым мышам в концентрациях 500-3000 мг/м3. Контрольной группе интраназально вводили дистиллированную воду в аналогичных условиях.
Статистическая обработка результатов экспериментов по определению среднесмертельных доз и среднесмертельной концентрации выполнена методом пробит-анализа Литчфилда и Уилкок-сона (в модификации Штабского Б.М.).
С целью оценки потенциальной (прогнозируемой) опасности острого ингаляционного отравления при применении фармсубстанции в условиях производства рассчитывали коэффициент возможности ингаляционного отравления (КВИО) как отношение максимально достижимой концентрации фармсубстанции артикаина гидрохлорид в воздухе при 20°С (или абсолют-
ной летучести - 0,001 мг/м3) к средней смертельной концентрации вещества для мышей (СL50).
Ещё одним гигиеническим критерием опасности острого ингаляционного отравления, но уже в условиях производства (реальной или фактической опасности) является величина зоны острого действия (2ас), которая служит интегральным показателем компенсаторных свойств организма и зависит не только от физико-химических особенностей субстанции, а в большей степени от ответной реакции со стороны организма. Зону острого действия (2ас) определяли как отношение средней смертельной концентрации (^50) к пороговой ^тас) при однократном воздействии [13].
Кожно-раздражающее действие изучали согласно Инструкции 1.1.11-12-35-2004 [6]. Оценку кожно-раздражающего действия артикаина гидрохлорида проводили при однократных четырехчасовых аппликациях фармацевтической субстанции на выстриженные участки кожи спины белых крыс с последующим исследованием толщины кожной складки на опытных и контрольных участках кожи через 1 час и 16 часов после воздействия.
Ирритативное действие фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид изучали на трех кроликах, которым в нижний конъюнкти-вальный свод правого глаза однократно вносили исследуемое вещество в виде 50% водного раствора в количестве 50 мкг, при этом левый глаз животных служил в качестве контрольного. Визуальное наблюдение за состоянием слизистой и конъюнктивы глаз подопытных животных проводили через 1 и 24 часа после воздействия.
Кожно-резорбтивное действие фармсуб-станции изучено при однократном и повторном 20-кратном погружении хвостов белых крыс в пробирки с 50% водным раствором артикаина гидрохлорида. Количественные данные регистрируемых физиологических показателей у животных представлены в виде среднего арифметического и стандартной ошибки (М±т), сравнение групп выполнено с помощью ^критерия Стью-дента при уровне значимости р<0,05.
Эксперимент по изучению кумулятивных свойств артикаина гидрохлорида проводился в условиях внутрижелудочного поступления арти-каина в организм лабораторных животных в дозе 1/10 от установленного значения DL50 в остром опыте в течение 1,5 месяца (по 5 раз в неделю). Кумулятивная активность была оценена по критерию «гибель» и визуальным проявлениям ин-
токсикации, макроскопическим морфологическим изменениям внутренних органов животных.
В ходе выполнения исследований с использованием лабораторных животных в обязательном порядке следовали принципам гуманного отношения (Европейская конвенция по защите позвоночных животных, используемых в эксперименте, Хельсинки, 1986 г.). Экспериментальная часть работы была предварительно согласована с локальной комиссией по биоэтике республиканского унитарного предприятия «Научно-практический центр гигиены» (протокол заседания № 4 от 21.08.2023).
Результаты и обсуждение
Острая внутрижелудочная и внутрибрю-шинная токсичность и опасность.
Клиническая картина острого отравления при внутрижелудочном и внутрибрюшинном способах введения не имела существенных отличий и у большинства животных опытных групп проявлялась в общей заторможенности и гиподинамии. В первые минуты после введения наблюдались нарушение дыхания и беспорядочные движения, позже отмечалась потеря равновесия, клонические сокращения мышц сгибателей и разгибателей конечностей. Токсические и летальные дозы вызывали у животных атаксию, адинамию. Большинство животных погибало в течение первых двух суток после введения фармацевтической субстанции, смерть наступала от остановки дыхания.
Основные результаты изучения острой токсичности при внутрижелудочном и внутрибрю-шинном введении представлены в таблице 1.
В ходе эксперимента не установлено существенных половых и видовых различий в чувствительности лабораторных животных к токсическому действию фармсубстанции, рассчитанный коэффициент видовой чувствительности (КВЧ) составил менее 3.
Полученные данные позволяют классифицировать фармацевтическую субстанцию артикаина гидрохлорид в условиях однократного внутри-желудочного воздействия на крыс и мышей как умеренно опасное вещество (III класс опасности) согласно ГОСТ 12.1.007-76 [7]. В соответствии с классификацией, изложенной в ТКП 125-2008 (02040) [14], установлена степень токсичности субстанции артикаина гидрохлорид по величине среднесмертельной дозы при внутрибрюшинном введении: малотоксичен (IV класс токсичности) для крыс и мышей.
Острая ингаляционная токсичность и опасность
Клиника острого отравления при ингаляционном поступлении субстанции была сходна с таковой при внутрижелудочном способе поступления. Экспериментально было установлено, что артикаина гидрохлорид относится ко второму классу опасности (вещества высокоопасные) по ГОСТ 12.1.007-76 (табл. 2).
Токсикометрические показатели опасности острого ингаляционного отравления
Основной путь попадания химических веществ и активных компонентов лекарственных средств, обладающих, как правило, наибольшей фармакологической биологической активностью, - ингаляционный, поэтому при регламентировании их безопасного содержания в воздухе рабочей зоны важное значение имеют показатели токсичности ^тас) и опасности (КВИО, зоны острого и хронического действия) ингаляционного отравления.
Для фармацевтической субстанции артика-ина гидрохлорид рассчитанная величина КВИО составила существенно менее 3 (5,5х10-7), что позволило классифицировать субстанцию к малоопасным веществам по данному показателю в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 [7].
Кроме непосредственно полученных в эксперименте результатов (CL50) для оценки токсичности и опасности фармацевтической субстанции
Таблица 1 - Параметры острой токсичности артикаина гидрохлорида при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении
Способ введения Вид животного Дозы, мг/кг Класс опасности (токсичности)
^6 ^50 ^84
Внутрижелудочно Крысы 274,8 2370,0 ± 555,3 9524,2 3
Мыши 383,8 2206,7 ± 608,3 8542,9 3
Внутрибрюшинно Крысы 192,9 286,7 ± 49,7 390,3 4
Мыши 150,5 273,3 ± 49,7 402,1 4
Таблица 2 - Параметры острой токсичности артикаина гидрохлорида при однократном ингаляционном воздействии
Вид животного Концентрация, мг/м3 Класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76
СЧб сь50 ^84
Крысы 1386,7 2066,7 ± 248,3 2746,7 2
Мыши 969,4 1819,4 ± 283,3 2669,4 2
Таблица 3 - Логарифмические уравнения для расчета токсикометрических параметров артикаина гидрохлорида
Логарифмическое уравнение (формула) Значение параметров токсикометрии
^ Ит>с = 0,7 ^ Ь^0 в/бр+0,06; ^ Ит>с = 0,71 ^ 2,457+0,06 где LD50 в/б = 286,7 мг/кг Limac = 63,79 (мг/м3)
^ Lim = 0,72 ^ DLC0 б +0,05; ° ас ' ° 50 в/бр ' ' lg Limac = 0,72 ^ 2,457+0,05 где LD5C0 в/б = 286,7 мг/кг Limac = 65,97 (мг/м3)
^ Lim = 0,76 lg ^ -1,62; о ас ' ° 50 ' ' lg Limac = 0,76 lg 3,260-1,62 где Сц50 = 1819,4 мг/кг Limac = 7,20 (мг/м3)
lg Limac =0,74 lgCL50-0,48; lg LimaC =0,74 lg3,260-0,48 где СLC0 = 46,25 мг/кг Limac = 85,57 (мг/м3)
^ Limac =0,62 1^50-1,08; 1g LimaC =0,62 1g3,260-1,08 где = 1819,4 мг/кг Limac = 8,73 (мг/м3)
Среднее значение Limac из всех формул расчета: (63,79+65,97+7,20+85,57+8,73)/5 Limac = 46,25 (мг/м3)
Ъ = СЬ / Lim ac 50 ac где СLC0 = 1819,4 мг/кг; Limac = 46,25 (мг/м3) Ъ = 39,34 ac '
артикаина гидрохлорид по токсикометрическим параметрам также обращались к расчетным методам. Необходимо отметить, что расчетные уравнения нашли широкое применение в прогнозировании и установлении гигиенических нормативов, характеризуются высокой точностью и основываются на количественных соотношениях между физико-химическими свойствами, биологической активностью и токсикометрическими параметрами, с одной стороны, и величиной нормативов, полученных при экспериментальном изучении токсичности и опасности веществ, с другой, подвергнутые статистической обработке, как правило, методом множественного корреляционно-регрессионного анализа.
Порог острого действия (Ыт^) был определен с помощью расчетных формул, основанных на анализе связей между Ыт^ при ингаляцион-
ном воздействии и средней смертельной дозой/ концентрацией при внутрибрюшинном - DL50 (формулы расчета из МР № 118-00-10 [10] и Инструкции 1.1.11-12-206-2003 [11]) и ингаляционном поступлении - ^50 (формулы расчета из [15]). Данные расчеты приведены в таблице 3.
Установленное с помощью расчетов значение зоны острого действия позволяет отнести артикаина гидрохлорид к веществам 3 класса опасности по ГОСТ 12.1.007-76 [7], обладающим умеренной степенью опасности в плане развития острых отравлений при ингаляционном поступлении в реальных условиях производства.
Кожно-раздражающее действие
Результаты эксперимента по изучению кож-но-раздражающего действия артикаина гидрохлорида не выявили признаков раздражения и воспаления кожных покровов на местах аппликаций
(гиперемия, сухость, отек), что подтверждается данными инструментального исследования толщины кожной складки на опытных участках кожи крыс через 1 час и 16 часов после воздействия, не имевших значимых различий с таковыми на контрольных «окошках», что свидетельствует об отсутствии у субстанции способности вызывать раздражение кожи.
Ирритативное действие Внесение раствора субстанции в нижний конъюнктивальный свод глаз кроликов не вызывало признаков раздражения слизистой оболочки (слезотечение, птоз, блефароспазм, инъецирование сосудов, отек век и т. д.).
Средний суммарный балл выраженности ир-ритативного действия составил 0 баллов (табл. 4). В последующий период наблюдения - 14 суток, изменений со стороны конъюнктивы и других структур глаза не отмечалось.
Следовательно, фармацевтическая субстанция артикаина гидрохлорид не индуцирует раздражающего действия слизистых оболочек глаз в условиях однократного воздействия (0 класс по выраженности ирритативного действия по классификации в соответствии с Инструкцией 1.1.1112-35-2004) [6].
Кожно-резорбтивное действие При однократном и повторном 20-тикратном погружении хвостов белых крыс в пробирки с 50% водным раствором артикаина гидрохлорида, а также по окончании эксперимента гибели и внешних (клинических) признаков интоксикации не установлено. Состояние обследуемых участков кожи, результаты измерения толщины хвостов крыс и интегральных физиологических показателей (табл. 5), а также поведение животных опытной
группы в течение всего периода наблюдения не отличались от контрольной группы животных.
Отсутствие изменений регистрируемых показателей, симптомов интоксикации и проявлений местной реакции со стороны кожных покровов позволяют сделать вывод об отсутствии чрескожного (кожно-резорбтивного) токсического действия.
Кумулятивная активность
На протяжении всего эксперимента по изучению кумулятивных свойств (1,5 месяца) гибель животных не зафиксирована, что не позволило рассчитать коэффициент кумуляции (Ккум>5,1). Визуальный осмотр внутренних органов животных, выведенных из эксперимента по его окончании, не выявил каких-либо макроскопических морфологических изменений. Результаты эксперимента указывают на слабую кумулятивную активность и отсутствие у субстанции эффекта материальной кумуляции.
Из данных токсикологического профиля на лекарственное средство артикаин следует, что для препарата сенсибилизирующее действие на кожу в экспериментах на морских свинках не выявлено; исследования мутагенности в стандартной батарее тестов in vitro и in vivo не показали мутагенного потенциала вплоть до цитотокси-ческих концентраций препарата; репродуктивная токсичность на уровне доз, не оказывающих общетоксического действия для материнского организма, не установлена; артикаин не включен в список потенциальных канцерогенов Международного агентства по исследованию рака (IARC), Национальной токсикологической программы США (NTP) или Управления по охране труда и здоровья США (OSHA) [16].
Таблица 4 - Оценка раздражающего действия на слизистые оболочки лабораторных животных суб-
станции артикаина гидрохлорид
№ животного Гиперемия конъюнктивы, балл Отек век, балл Выделения из глаза, балл Оценка, балл
контроль опыт контроль опыт контроль опыт
Состояние слизистых оболочек через 1 час после аппликации
1 0 0 0 0 0 0
2 0 0 0 0 0 0 0
3 0 0 0 0 0 0
Состояние слизистых оболочек через 24 часа после аппликации
1 0 0 0 0 0 0
2 0 0 0 0 0 0 0
3 0 0 0 0 0 0
Таблица 5 - Результаты изучения кожно-резорбтивного действия субстанции (объем хвостов и интегральные физиологические показатели)
Изучаемые показатели, единицы измерения Время изучения, сутки Контрольная группа Опытная группа
Прирост массы тела, % 30 52,6 ± 3,36 48,1 ± 2,34
Суммацио нно -порого вый показатель, вольт Исходный 7,23 ± 0,06 7,12 ± 0,04
30 7,19 ± 0,04 7,21 ± 0,05
Частота сердечных сокращений, уд/мин Исходная 420,8 ± 3,76 424,8 ± 4,12
30 420,0 ± 2,02 422,7 ± 2,48
Ректальная температура, °С Исходная 37,9 ± 0,13 37,9 ± 0,15
30 38,2 ± 0,04 38,1 ± 0,04
Объем хвостов, мл Исходный 6,02 ± 0,128 6,16 ± 0,08
10 6,03 ± 0,14 6,15 ± 0,12
30 6,07 ± 0,17 6,16 ± 0,14
Заключение
На основании результатов выполненных экспериментальных токсикологических исследований фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид и данных, полученных из расчетных уравнений, было установлено следующее:
- по величине среднесмертельной дозы при введении в желудок субстанция относится к третьему классу опасности (умеренно опасные вещества) по ГОСТ 12.1.007-76; при внутрибрюшинном введении - к IV классу токсичности (малотоксичные вещества) по ТКП 125-2008 (02040) «Надлежащая лабораторная практика»; при накожном нанесении - к малоопасным веществам (4 класс) в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76.
- среднесмертельная концентрация (^50) ар-тикаина гидрохлорида составляет (2066,7±248,3) мг/м3 для белых крыс и (1819,4±283,3) мг/м3 для мышей, что позволяет классифицировать изученную фармацевтическую субстанцию по данному параметру как вещество 2 класса опасности по ГОСТ 12.1.007-76 (вещества высокоопасные);
- в условиях однократного воздействия на кожу и слизистые оболочки лабораторных животных субстанция артикаина гидрохлорид не обладает кожно-раздражающим и ирритативным действием; а в условиях повторного эпикутанно-го воздействия не оказывает кожно-резорбтивно-го действия;
- кумулятивная активность субстанции (изучена по методу Ю.С. Кагана, В.В. Станкевича, 1964) по критерию «гибель» слабая (Ккум>5,1);
- видовая чувствительность к артикаи-на гидрохлориду у крыс и мышей не выражена
(КВЧ<3), поэтому дальнейшие токсикологические исследования можно проводить на крысах, которые являются традиционным и наиболее приемлемым видом лабораторных животных для токсикологического эксперимента;
- рассчитанные значения параметров потенциальной (КВИО) и реальной (зона острого действия) опасности развития острых отравлений при ингаляционном поступлении в условиях производства характеризуют субстанцию как вещество мало- и умеренно опасное соответственно.
Таким образом, экспериментально-расчетные результаты первичной токсикологической оценки фармацевтической субстанции артикаина гидрохлорид позволили установить по лимитирующему (имеющему наименьшее значение из всех) показателю токсичности (CL50) общий 2 класс опасности (вещества высокоопасные) по ГОСТ 12.1.007-76, что является основанием для продолжения исследований в объеме полной токсикологической оценки с постановкой хронического эксперимента на лабораторных животных и обоснованием ПДК в воздухе рабочей зоны.
Источники финансирования. Исследование проведено в рамках выполнения подпрограммы 2 «Нормативная правовая база» государственной научно-технической программы «Разработка фармацевтических субстанций, лекарственных средств и нормативно-правового обеспечения фармацевтической отрасли», задание 2.25.
Sources of financing. The study was carried out within the framework of subprogram 2 "Regulatory legalframework" of the state scientific and technical program "The development of pharmaceutical
substances, medicines and regulatory support for the pharmaceutical industry", task2.25.
Литература
1. Василькевич, В. М. Актуальные вопросы гигиенического регламентирования и создания безопасных условий труда на предприятиях по производству фармацевтических препаратов / В. М. Василькевич, Р. В. Богданов, Е. В. Дроздова // Медицина труда и пром. экология. 2020. Т. 60, № 9. С. 640-644.
2. Состояние здоровья работающих в химико-фармацевтической отрасли / Л. Г. Горохова [и др.] // Медицина труда и пром. экология. 2018. № 6. С. 38-42.
3. Гигиенические аспекты состояния здоровья работающих в химико-фармацевтическом производстве / Л. Г. Горохова [и др.] // Медицина в Кузбассе. 2017. Т. 16. № 3. С. 11-16.
4. Арабей, С. В. Условия труда и профессиональный риск здоровью работников цеха по производству противоопухолевых лекарственных средств / С. В. Арабей, А. В. Гиндюк // Журн. ГрГМУ 2022. Т. 20, № 5. С. 526-530.
5. Morbidity patterns of workers employed in pharmaceutical-chemical industry / A. Milovanovic [et al.] // Srp. Arh. Celok. Lek. 2007 Mar-Apr. Vol. 135, N 3/4. P. 184-190.
6. Инструкция 1.1.11-12-35-2004. Требования к постановке экспериментальных исследований для первичной токсикологической оценки и гигиенической регламентации веществ : утв. Гл. гос. санитар. врачом Респ. Беларусь 14.12.2004. Минск : М-во здравоохранения Респ. Беларусь, 2004. 42 с.
7. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности : ГОСТ 12.1.007-76. Введ. 1977-01-01. Москва : Стандартинформ, 2007. 5 с.
8. Пищинский, И. А. Свойства современных местных анестетиков, применяемых для обезболивания в терапевтической стоматологии / И. А. Пищинский, И. А. Захарова // Соврем. стоматология. 2016. № 4. С. 31-34.
References
1. Vasilkevich VM, Bogdanov RV, Drozdova EV. Topical issues of hygienic regulation and creation of safe working conditions at enterprises producing pharmaceuticals. Meditsina Truda Prom Ekologiya. 2020;60(9):640-4. (In Russ.)
2. Gorokhova LG, Ulanova EV, Shavtsova GM, Erdeeva SV, Blazhina ON. Health status of workers in the chemical-pharmaceutical industry. Meditsina Truda Prom Ekologiya. 2018;(6):38-42. (In Russ.)
3. Gorokhova LG, Martynova NA, Kizichenko NV, Logunova TD. Hygienic aspects of health status of workers in chemical-pharmaceutical production. Meditsina v Kuzbasse. 2017;16(3):11-6. (In Russ.)
4. Arabey SV, Gindyuk AV. Working conditions and occupational health risk of workers in the workshop for the production of antitumor medicines. Zhurn GrGMU. 2022;20(5):526-30. (In Russ.)
9. Чучула, Н. В. Местная анестезия у стоматологических пациентов группы риска / Н. В. Чучула, Е. Н. Чучула // Вестн. Харьк. нац. ун-та им. В. Н. Каразина. Сер. Медицина. 2012. № 24. С. 99-104.
10. Экспериментальное обоснование и расчет ОБУВ вредных веществ в воздухе рабочей зоны : метод. рекомендации № 118-00-10 : утв. М-вом здравоохранения Респ. Беларусь 13.10.2000. Минск : [М-во здравоохранения Респ. Беларусь, 2010]. 33 с.
11. Инструкция 1.1.11-12-206-2003. Гигиеническое нормирование лекарственных средств в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и воде водных объектов : утв. Гл. гос. санитар. врачом Респ. Беларусь 30.12.2003 : введ. 01.07.2004 // Сборник санитарных правил и норм по коммунальной гигиене : [в 2 ч.] / М-во здравоохранения Респ. Беларусь. Минск, 2004. Ч. 2. С. 13-63.
12. Методические указания по экспериментальному обоснованию ПДК микроорганизмов-продуцентов и содержащих их готовых форм препаратов в объектах производственной и окружающей среды : утв. начальником Гл. санитарнопрофилакт. Упр. Минздрава СССР 11.06.1991. Москва : Информ.-изд. центр Госкомсанэ-пиднадзора России, 1993. 20 с.
13. Максимов, Г. Г. Промышленная токсикология : учеб. пособие / Г. Г. Максимов. 2-е изд., перераб. и доп. Москва : Юрайт, 2023. 182 с.
14. Надлежащая лабораторная практика = Належная лаба-раторная практыка : ТКП 125-2008 (02040). Введ. 200805-01. Минск : М-во здравоохранения Респ. Беларусь, 2008. 35 с.
15. Turkina, V. Experimental substantiation for 2-hydroxypropanoic (lactic) acid temporary occupational exposure standard / V. Turkina, G. Pryzygley, O. Hrushka // Ukr. J. Modern Problems Toxicol. 2021 Jun. N 1. P. 70-74. doi: 10.33273/2663-4570-2021-90-1-70-74
16. Leuschner, J. Studies on the toxicological profile of the local anaestheticarticaine / J. Leuschner, D. Leblanc // Arzneimittelforschung. 1999 Feb.Vol. 49, N 2. P. 126-132.
Поступила 06.03.2024г.
Принята в печать 22.04.2024 г.
5. Milovanovic A, Jakovljevic B, Milovanovic J, Paunovic K, Ilic D, Torbica N, et al. Morbidity patterns of workers employed in pharmaceutical-chemical industry. Srp Arh Celok Lek. 2007 Mar-Apr;135(3-4):184-90. doi: 10.2298/ sarh0704184m
6. Instruction 1.1.11-12-35-2004. Requirements for setting up experimental studies for primary toxicological assessment and hygienic regulation of substances: utv Gl gos sanitar vrachom Resp Belarus' 14.12.2004. Minsk, RB: M-vo zdravookhraneniya Resp Belarus'; 2004. 42 р. (In Russ.)
7. Harmful substances. Classification and general safety requirements: GOST 12.1.007-76. Vved 1977-01-01. Moscow, RF: Standartinform; 2007. 5 р. (In Russ.)
8. Pishchinskiy IA, Zakharova IA. Properties of modern local anesthetics used for anesthesia in therapeutic dentistry. Sovrem Stomatologiya. 2016;(4):31-4. (In Russ.)
9. Chuchula NV, Chuchula EN. Local anesthesia in at-risk dental patients. Vestn Khar'k Nats Un-ta im VN Karazina Ser Meditsina. 2012;(24):99-104. (In Russ.)
10. Experimental substantiation and calculation of OPVs of harmful substances in the air of the working zone: metod rekomendatsii № 118-00-10: utv M-vom zdravookhraneniya Resp Belarus' 13.10.2000. Minsk, RB: [M-vo zdravookhraneniya Resp Belarus'; 2010]. 33 p. (In Russ.)
11. Instruction 1.1.11-12-206-2003. Hygienic rationing of medicinal products in the air of the working zone, atmospheric air of populated areas and water of water bodies: utv Gl gos sanitar vrachom Resp Belarus' 30.12.2003: vved 01.07.2004. V: M-vo zdravookhraneniya Resp Belarus'. Sbornik sanitarnykh pravil i norm po kommunal'noi gigiene: [v 2 ch]. Minsk, RB; 2004. Ch 2. P. 13-63. (In Russ.)
12. Methodological guidelines for experimental substantiation of MPCs of microorganisms-producers and finished forms of preparations containing them in industrial and environmental objects: utv nachal'nikom Gl
sanitarnoprofilakt Upr Minzdrava SSSR 11.06.1991. Moscow, RF: Inform-izd tsentr Goskomsanepidnadzora Rossii; 1993. 20 p. (In Russ.)
13. Maksimov GG. Industrial toxicology: ucheb posobie. 2-e izd, pererab i dop. Moscow, RF: Yurait; 2023. 182 p. (In Russ.)
14. Good laboratory practice: TKP 125-2008 (02040). Vved 2008-05-01. Minsk, RB: M-vo zdravookhraneniya Resp Belarus'; 2008. 35 p. (In Russ.)
15. Turkina V, Pryzygley G, Hrushka O. Experimental substantiation for 2-hydroxypropanoic (lactic) acid temporary occupational exposure standard. Ukr J Modern Problems Toxicol. 2021 Jun;(1):70-4. doi: 10.33273/26634570-2021-90-1-70-74
16. Leuschner J, Leblanc D. Studies on the toxicological profile of the local anaestheticarticaine. Arzneimittelforschung. 1999 Feb;49(2):126-32. doi: 10.1055/s-0031-1300372
Submitted 06.03.2024 Accepted 22.04.2024
Сведения об авторах:
В.М. Василькевич - к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории промышленной токсикологии, Республиканское унитарное предприятие «Научно-практический центр гигиены», https://orcid.org/0000-0002-6461-0655, е-mail: sabas2004@mail.ru - Василькевич Вадим Михайлович;
А.А. Евтерева - научный сотрудник лаборатории промышленной токсикологии, Республиканское унитарное предприятие «Научно-практический центр гигиены», https://orcid.org/0009-0005-1777-8972; Е.В. Чернышова - к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории промышленной токсикологии, Республиканское унитарное предприятие «Научно-практический центр гигиены», https://orcid.org/0009-0007-8840-063X.
Information about authors:
VM. Vasilkevich - Candidate of Medical Sciences, leading research officer of the laboratory of industrial toxicology, Republican Unitary Enterprise "Scientific and Practical Centre of Hygiene", https://orcid.org/0000-0002-6461-0655, е-mail: sabas2004@mail.ru - Vadim M. Vasilkevich;
A.A. Evtereva - research officer of the laboratory of industrial toxicology, Republican Unitary Enterprise "Scientific and Practical Centre of Hygiene", https://orcid.org/0009-0005-1777-8972;
E.V. Chernyshova - Candidate of Medical Sciences, leading research officer of the laboratory of industrial toxicology, Republican Unitary Enterprise "Scientific and Practical Centre of Hygiene", https://orcid.org/0009-0007-8840-063X.
