CC BY
115
УДК 632.937
О методике и точности учета мучного клеща и амблисейуса при их разведении
А.И. АНИСИМОВ, заведующий кафедрой биологической защиты растений Санкт-Петербургского государственного аграрного университета С.А. ДОБРОХОТОВ, заведующий биолабораторией Ленинградской станции защиты растений
Для грамотного использования хищных клещей из р.ЛтЬ!увв1ив, определения норм их выпуска, правильного соотношения хищника и жертвы, при котором биологический метод борьбы будет достаточно эффективным, и других аспектов биометода необходимо точно определять плотность популяции амблисейуса в субстрате на конечном этапе его разведения. Этот параметр, как и эффективность разведения в целом, во многом определяется численностью мучного клеща в субстрате (отруби) на момент заселения амблисейусом, которую также необходимо определять с достаточной точностью.
Впервые точный, но трудоемкий метод определения плотности популяции мучного клеща и амблисейуса был описан Г.А. Бегляровым и Ф.А. Сучалкиным (1985). Более простой способ, основанный на учете клещей в 5 полях зрения бинокуля-ра, предложен Н.В. Бондаренко с соавторами (1988). Он применялся при разведении клещей в чашках Петри. Плотность амблисейуса рассчитывали по формуле
У = 0,86Х +53,7, (1)
где У -абсолютная численность амблисейуса в 1 см3 субстрата, а Х -суммарное количество амбли-сейуса, обнаруженного на поверхности отрубей, в 5 полях зрения микроскопа МБС-1 или МБС-2.
Е.В. Слепко (1992, 1994) адаптировала эту методику для определения плотности амблисейуса при его разведении в трехлитровых банках. Из них отруби насыпали в чашку Петри
Таблица 1 Коэффициенты пропорциональности (К) для разных марок бинокулярных микроскопов и уровней увеличения
Объектив Коэффициент (К)
Марка Оку- ляр Муч- ной клещ Амб- ли- сейус Муч- ной клещ Амб- ли- сейус
МБС-9 6 4 1 269,9 17,1
МБС-1 6 4 1 338,6 21,6
Цейсс 6,3 4 1 183,1 29,3
Таблица 2
Средние показатели численности хищных клещей в 1 см3 субстрата, их абсолютные и относительные ошибки, определенные при разном числе проб
Число проб
16 12 8 4 2
АтЫ^тсешв тскешіеі
Партия 1
Среднее число клещей в 1 см3 51,4 53,3 52,9 54,8 52,8
Стандартная ошибка ±3,15 ±3,03 ±2,53 ±4,13 ±7,50
Относительная ошибка 6,1 % 5,7 % 4,8 % 7,5 % 14,3 %
Доверительный интервал 44,7-58,1 46,6-59,9 46,9-58,9 41,6-67,9 -42,8-147,8
Партия 2
Среднее число клещей в 1 см3 88,9 91,5 93,4 96,8 109,5
Стандартная ошибка ±7,10 ±7,45 ±9,41 ±13,16 ±16,50
Относительная ошибка 8,0 % 8,1 % 10,1 % 13,6 % 15,1 %
Доверительный интервал 73,8-104,0 75,1-107,9 71,1-115,7 54,9-138,6 -100-319
Партия 3
Среднее число клещей в 1 см3 134,3 135,5 135,0 134,3 132,0
Стандартная ошибка ±5,85 ±7,28 ±7,69 ±11,51 ±27,00
Относительная ошибка 4,4 % 5,4 % 5,7 % 8,6 % 20,5 %
Доверительный интервал 122-147 119-152 117-153 99-161 -211-475
АтЬІ^тсеіш сиситеї^
Партия 1
Среднее число клещей в 1 см3 45,2 46,0 45,78 46,5 40,5
Стандартная ошибка ±2,40 ±2,82 ±4,00 ±7,79 ±10,50
Относительная ошибка 5,3 % 6,1 % 8,7 % 16,8 % 25,9 %
Доверительный интервал 40,1-50,3 39,8-52,2 36,3-55,2 21,7-71,3 -93,0-174,0
Партия 2
Среднее число клещей в 1 см3 96,9 95,8 97,5 96,8 81,0
Стандартная ошибка ±4,65 ±5,50 ±7,50 ±10,98 ±15,00
Относительная ошибка 4,8 % 5,7 % 7,7 % 11,3 % 18,5 %
Доверительный интервал 87,0-106,8 ,8 7, 0 7 ,7 3, 8 79,7-115,3 61,8-131,7 -898-1161
Партия 3
Среднее число клещей в 1 см3 97,1 96,0 94,9 95,3 94,5
Стандартная ошибка ±7,05 ±8,31 ±10,16 ±18,18 ±37,50
Относительная ошибка 7,3 % 8,7 % 10,7 % 19,1 % 39,7 %
Доверительный интервал 82,1-112,1 77,7-114,3 ,9 8, 7 ,8 0, 7 3, 5 7 ,4 7, 3 71 5 1 8 3 -
МЕТОДЫ И СРЕДСТВА
(слоем 0,5 см) и по истечении 10 мин (время, необходимое для естественного распределения хищника в субстрате) подсчитывали клещей по той же схеме. Коэффициенты в уравнении прямолинейной регрессии для расчета плотности амб-лисейуса оказались очень близкими: У= 0,87Х + 54,4 (обозначения, как в формуле 1). (2)
Обе приведенные выше формулы дают удовлетворительный результат при плотности популяции амбли-сейуса в интервале от 50 до 130 особей на 1 см3 (Бондаренко и др., 1988; Слепко, 1992; 1994). Однако при более низких плотностях прямолинейная зависимость, используемая в этих формулах, начинает нарушаться, и рассчитанный результат может сильно отклоняться от реального (вплоть до абсурдного). В этом легко убедиться, поставив в уравнения значение Х = 0.
Кроме того, использование этих формул ограничено только 16-кратным увеличением (окуляр 2х, объектив 8х), при котором проводились эксперименты для их получения. Поэтому подсчет клещей при других увеличениях, например 25х, как рекомендуют А.К. Ахатов с соавторами (2004), очевидно, требует и других формул перехода от численности обнаруженных в поле зрения бино-куляра клещей к их плотности в единице объема субстрата.
Более чем 20-летний опыт нашей работы по разведению и применению хищных клещей из р. ЛтЬ1увв1ив в разных тепличных хозяйствах Санкт-Петербурга и Ленинградской области показал, что использование разных марок бинокулярных микроскопов и разных увеличений требует адаптации формулы перерасчета. По нашему опыту, гораздо проще сделать это, используя формулу У=КХ, (3)
где X- среднее число клещей в одном поле зрения бинокулярного микроскопа; У-численность амблисей-уса в 1 см3 субстрата; К - коэффициент пропорциональности. Эта формула имеет больший биологический смысл, чем предложенная Н.В. Бон-
даренко, так как при Х =0 и У =0. Коэффициент К показывает, сколько полей зрения бинокулярного микроскопа при конкретных окуляре и объективе (тем самым при конкретном увеличении)укладывается на площади чашки Петри, в которую вносят 1 см3 субстрата. Для определения К на предметный столик данного микроскопа помещают миллиметровую линейку и замеряют диаметр поля зрения. По формуле площади круга (Э = пЯ2) рассчитывают площадь поля зрения - Эпз. По той же формуле рассчитывается и площадь внутренней поверхности чашки Петри - Эчп, а коэффициент пропорциональности по формуле К=5чп/5пз.
Для определения плотности клещей пробу объемом 1 см3 помеща-
ют в чашку Петри, встряхивая, и с помощью мягкой кисточки отруби равномерно распределяют по поверхности. Под микроскопом просматривают 5-10 полей зрения. Сначала подсчитывают численность амблисейуса как более подвижного объекта, а затем, переключив объектив на более высокое увеличение, - мучного клеща. Определяют среднее значение Х по 5-10 полям. По формуле 3 рассчитывают плотность клещей в субстрате, используя соответствующее значение коэффициента К.
Для некоторых, наиболее часто используемых в хозяйствах бинокулярных микроскопов, при помещении пробы на дно стандартной стеклянной чашки Петри диаметром
Таблица 3
Средние показатели численности мучных клещей в 1 см3 субстрата, их абсолютные и относительные ошибки при разном числе проб
Пар- Число проб
тия 16 12 8 4 2
1 Среднее число клещей в 1 см3 467,1 455,6 433,6 458,2 430,1
Стандартная ошибка ±21,45 ±26,16 ±34,5 ±23,53 ±37,40
Относительная ошибка 4,6% 5,7 % 8,0 % 5,1 % 8,7 %
Доверительный интервал 421-513 398-513 352-516 3 3 5 1 3 8 3 -45,3-906
2 Среднее число клещей в 1 см3 572,1 583,4 571,2 555,7 532,2
Стандартная ошибка ±14,89 ±16,73 ±23,07 ±33,85 ±10,15
Относительная ошибка 2,6 % 2,9 % 4,0 % 6,1 % 1,9 %
Доверительный интервал 540-604 547-620 517-626 448-663 403-661
3 Среднее число клещей в 1 см3 308,3 316,5 308,3 306,0 243,0
Стандартная ошибка ±18,87 ±22,75 ±28,14 ±50,38 ±81,00
Относительная ошибка 6,1 % 7,2% 9,1 % 16,5 % 33,3 %
Доверительный интервал 268-348 266-367 242-375 146-466 -787-1273
4 Среднее число клещей в 1 см3 478,3 466,7 463,8 513,0 531,0
Стандартная ошибка ±28,91 ±31,73 ±44,80 ±64,27 ±153,00
Относительная ошибка 6,0 % 6,8 % 9,7 % 12,5 % 28,8 %
Доверительный интервал 417-540 397-537 358-570 309-717 -6032-7466
5 Среднее число клещей в 1 см3 1083,3 1054,34 1034,8 1070,5 1080,0
Стандартная ошибка ±45,08 ±51,05 ±62,93 ±98,59 ±54,00
Относительная ошибка 4,2% 4,8 % 6,1 % 9,2% 5,0 %
Доверительный интервал 987-1179 942-1167 886-1184 757-1384 394-1766
6 Среднее число клещей в 1 см3 1343,3 1324,5 1327,5 1246,5 1233,0
Стандартная ошибка ±72,07 ±86,54 ±113,32 ±173,49 ±153,00
Относительная ошибка 5,4 % 6,5 % 8,5 % 13,9 % 12,4 %
Доверительный интервал 1190-1497 1134-1515 6 9 5 7 9 5 0 695-1798 -712-3178
УДК 632.937.3(470.21)
Энтомофаги в оранжереях Полярно-альпийского ботанического сада
100 мм эти коэффициенты нами определены (табл. 1). При этом мы контролировали абсолютную численность живых клещей в пробах объемом 1 см3 и удостоверялись в хорошем соответствии реальных значений плотности клещей и рассчитанных по формуле 3 при разных плотностях хищных клещей.
Помимо адекватности применяемых методик подсчетов и формул, существенное значение может иметь равномерность распределения клещей в субстрате, которая сказывается и на точности рассчитанных плотностей. Решение этого вопроса требует равномерного перемешивания отрубей перед взятием пробы, а также взятия нескольких проб из разных мест разводочных емкостей в момент оценки плотности клещей. В 2003 г. мы попытались определить оптимальное число таких проб. Из партий Лmblyseuis mckenziei и Л. си-cumeris, предназначенных для выпусков, брали по 16 проб и по описанной выше методике и формуле 3 определяли плотность хищных клещей в каждой пробе. Сходная процедура была проделана в отношении мучного клеща. Результаты оценки средней численности клещей в 1 см3 субстрата, а также абсолютных и относительных ошибок определения средних значений по 16, 12, 8, 4 и 2 пробам представлены в табл. 2 и 3.
Средние значения плотности клещей, полученные по разному числу проб, отличаются незначительно, что свидетельствует об адекватности применяемой методики оценки и формулы для расчета этого показателя. Однако ошибки среднего (как стандартная - SE, так и относительная) при уменьшении числа проб увеличиваются. Это приводит к существенному расширению доверительного интервала - SD, который при 2 пробах в подавляющем большинстве случаев получается неприемлемым (до отрицательных значений плотности клещей).
Поэтому для оценки плотности клещей в конкретной партии мы рекомендуем брать не менее 4 проб (лучше больше).
Н.С. РАК, С.В. ЛИТВИНОВА
В Полярно-альпийском ботаническом саду проводятся научно-исследовательские работы по формированию комплекса энтомофагов для защиты оранжерейных растений от чужеродных вредителей, которые ввозятся вместе с интродукционным материалом из разных регионов страны. В результате многолетней интродукции и акклиматизации сформированы северные (мурманские) популяции, адаптированные к экстремальным климатическим условиям Заполярья.
Нами проведена оценка действия северных популяций фитосейулюса персимилис, хищной галлицы афи-димизы, амблисейуса маккензи. Выпуск фитосейулюса проводили в соотношении хищник : жертва 1:20.
При колонизации фитосейулюса на розы с плотностью заселения от 1 до 3 баллов (в зависимости от сортовой принадлежности) паутинным клещом на всех растениях численность вредителя начинала сокращаться не сразу после выпуска ака-рифага, резкий спад наблюдали только после 4-7-го дня. Через 16 дней очаги паутинного клеща были подавлены фитосейулюсом на растениях с плотностью заселения 1 балл, через 24 - 2 и 3 балла. На контрольных растениях численность вредителя возрастала.
Биологическая эффективность фитосейулюса на розах составила 38,4 % на 5-8-й день, 99,2 % на 28-й день.
Массовое размножение паутинных клещей на розах может возникнуть в любой период года. Своевременный выпуск фитосейулюса весной весьма эффективен и позволяет сдерживать и контролировать численность вредителя. При выпуске хищника осенью на заселенные
растения, уходящие (по технологии выращивания) в покой, вредитель был уничтожен за короткий период и не появлялся в следующем году.
На астрах после выпуска фитосейулюса численность паутинного клеща мало изменялась в течение 35 дней, в контроле рост был гораздо интенсивнее. Для полного уничтожения вредителя при плотности в 1 балл акарифагу было необходимо 15 дней, 2-3 балла - 30-40.
Биологическая эффективность фитосейулюса на астрах составляла на 15-20-й день лишь 5,4-13,5 %, медленно возрастала и только через 40 дней достигла 91,4 %. В контроле растения погибли.
На каллах (горшечная культура на стадии 3-4 листьев) снижение численности паутинного клеща отмечали через 8-10 дней после локального выпуска фитосейулюса. Динамика численности вредителя была одинаковой на всех растениях независимо от плотности заселения - сразу после выпуска наблюдали ее незначительный рост, а затем - постепенное снижение. Полное подавление очагов паутинного клеща было зафиксировано на растениях с плотностью заселения в 1 балл через 14 дней после выпуска; 2 балла -через 21, 3 балла - через 25 дней. Необходимо отметить, что при увеличении нормы выпуска акарифага вдвое срок подавления очага вредителя сокращался только на 20-30 %.
Биологическая эффективность фитосейулюса на каллах уже на 4-й день после выпуска акарифага составила 26,9 %, постоянно увеличивалась и на 21-й день после выпуска составила 99 %.
На астрах, гладиолусах и георгинах фитосейулюс успешно подавлял очаги вредителя, однако чем выше была исходная численность вредителя в очаге, тем больше времени требова-
