О ГОНАДОТОКСИЧЕСКОМ И МУТАГЕННОМ ДЕЙСТВИИ ТРИАРИЛМЕТЛНОВ ОСНОВНОГО СИНЕГО К И ОСНОВНОГО ФИОЛЕТОВОГО К Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Краткие сообщения

УДК 813.632 + 612.64.014.461:668.8

А. И. Чесноков, Б. И. Вереникина, Г. В. Селюжицкий

О ГОНАДОТОКСИЧЕСКОМ И МУТА ГЕННОМ ДЕЙСТВИИ ТРИЛРИ ЛМЕТЛНОВ ОСНОВНОГО СИНЕГО К и ОСНОВНОГО ФИОЛЕТОВОГО к

Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт

Технология получения и применения основного синего К (ОС К) и основного фиолетового К (ОФК) сопровождается образованием сточных вод. Влияние этих красителей на органолептические свойства воды, санитарный режим водоемов и токсическое действие на организм теплокровных животных в условиях острого, подострого и хронического экспериментов изучено А. Н. Чесноковым. С целью более глубокого и точного обоснования ПДК указанных красителей в воде водоемов мы изучили гона-дотоксическое и мутагенное действие их на уровне порога хронического отравления на крысах-самцах при пероралыюй затравке в течение 6 мес.

Испытывали дозы ОСК 117, 39, 13, 0,13 и 0,013 мг/кг, ОФК—48.8, 16,3. 5,4, 0,054 и 0,005 мг/кг. Для оценки гонадотоксического действия красителей проводили функциональное и морфологическое исследование семенников. Определяли массу, коэффициент массы, объем по количеству вытесненной жидкости, удельный вес семенников, а также концентрацию сперматозоидов (в миллионах), время сохранения ими подвижности (в минутах), подвижность сперматозоидов (в баллах).

Для морфологического изучения гонад проводили фиксацию их в жидкости Кар-нуа и заливку в парафин-целлоидин. Срезы толщиной 6—8 мк окрашивали гематоксилин-эозином. Для количественной оценки морфологических изменении в процессе сперматогенеза подсчитывали индекс сперматогенеза (Н. И. Нуждин и соавт.), относительное количество извитых семенных канальцев со слущиванием клеток спермато-генного эпителия. Количество канальцев на XII стадии мейоза свидетельствует о нарушении процессов формирования зрелых форм сперматозоидов, а также отмечалось наличие патологических форм клеток сперматогенного эпителия. Для изучения гистохимических изменений семенников применяли окраску на гликоген (по Шабала-шу — Хочкиссу) и нуклеиновые кислоты (по Фельгену, Браше, галлоцианином по Эйнарсону), а также окраску бромфеноловым синим для оценки суммарного количества белка.

Анализ результатов исследования позволил установить, что ОСК в дозах 117, 39 и 13 мг/кг и ОФК в дозах 48,8, 16,3 и 5,4 мг/кг при пероральной затравке животных вызывают статистически достоверные изменения массы тела, коэффициентов массы, удельного веса и объема гонад, уменьшают время подвижности сперматозоидов и их количество. При применении этих доз обнаруживается снижение индекса сперматогенеза, появляется значительное количество извитых семенных канальцев со слущиванием клеток (от 2 до 16%) и дегенеративно измененных клеток с наличием кариорек-сиса. Гистохимические реакции позволили выявить значительное уменьшение содержания гликогена, суммарного белка, рибонуклеиновой кислоты в клетках интерсти-циальиой соединительной ткани, клетках Лейдига и клетках сперматогенного эпителия, что свидетельствует об общем угнетении метаболической активности исследуемых структур. Дозы же ОСК 0,13 мг/кг и ОФК 0,054 мг/кг в отношении как функциональных, так и морфологических показателей сказались недействующими.

Для определения общегенетической опасности мы использовали анафазный метод учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга. Информативность и достоверность этого метода, применяемого для изучения цитогенетической активности промышленных факторов окружающей среды, в настоящее время общепризнаны (А. Н. Боков и соавт.; Ю. С. Каган и Б. М. Штабский, и др.). Объектом исследования являлись половозрелые крысы-самцы массой 200—250 г, которых подвергали пероральной затравке красителями в течение 6 мес. Дополнительно изучали дозы ОСК 0,13, 0,013 и 0,0025 мг/кг и ОФК 0,054. 0,005 и 0,0025 мг/кг. Всего в опыте использовали 84 крысы, у которых извлекали бедренные кости, срезали эпифизы и фиксировали по Карнуа. Затем приготовляли давленые препараты, предварительно обработанные по методу Фельгена (Э. Пирс). Перестройки хромосом (хромосомные и хроматидные мосты, слипания и фрагменты) анализировали на стадиях анафазы и аноталофазы на 200 клеток у каждого животного. Для изучения каждой дозы брали материал от 6 контрольных и 6 подопытных животных. На этих же препаратах производили подсчет митотического индекса на 1000 клеток.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что ОСК и ОФК обладают мутагенной активностью при пероральном пути поступления в организм теплокровных животных. При дозах ОСК 117, 39, 13, 0,13 и 0,013 мг/кг и ОФК 48,8, 16,3, 5,4,

0,054 и 0,005 мг/кг выход хромосомных аберраций достаточно высок и разница с контролем достоверна. Наибольшая часть хромосомных аберраций приходится на хромосомные мосты. Количество их увеличивается с уменьшением числа других типов хромосомных перестроек. Вместе с тем доза ОС К и ОФК 0,0025 мг/кг не вызывала изменений митотического индекса и увеличения количества аберрантных клеток костного мозга у экспериментальных животных по сравнению с контрольными. Данные подострого и хронического опытов позволяют предположить, что мутагенное действие ОС К и ОФК в дозах выше порога хронического действия, по-видимому, реализуется через токсический эффект действия этих соединений на клетку. Однако результаты нашего исследования не позволяют сделать заключение о механизме мутагенного действия данных соединений.

Выводы

1. Результаты исследования показали, что большие дозы ОС К и ОФК в хрони* ческом эксперименте способны вызывать функциональные и морфологические повреж" дения семенников у белых крыс. Дозы ОС К 0,13 мг/кг и ОФК 0,054 мг/кг не ока" зывают гонадотоксического действия и совпадают с недействующими в токсикологи' ческом хроническом опыте.

2. Полученные данные позволяют считать, что ОСК в дозах от 117 до 0,013 мг/кг и ОФК в дозах от 48,8 до 0,005 мг/кг в хроническом эксперименте на белых крысах дают мутагенный эффект. Генетически недействующей является доза ОСК и ОФК 0,0025 мг/кг (0,05 мг/л).

3. Порог патогенетического действия ОСК и ОФК, выявляемый анафазным методом в эксперименте на белых крысах, ниже действующих доз в хроническом опыте

ЛИТЕРАТУРА

Боков А. Н., Гуськова С. И., Гуськов Е. П. — Гиг. и сан., 1977, № 7, с. 38—41. Каган Ю. С., Штабский Б. М. — Там же № 6, с. 75—78.

Нуждин Н. И., Шапиро Н. М., Полиранцева М. Д. и др. — Ж. общей биол., 1959,

т. 20, № 3, с. 8—11. Пирс Э. (Pearse Е.). Гистология. Теоретическая и прикладная. М., 1962. Чесноков А Н.— Гиг. и сан., 1978, № 4, с. 102—103.

Поступила 20/XII 1978 г.

УДК 615.917*269.311.032.2.07:[в 16.153.915 + 616.153.269.11-074

Л. А. Коннова, В. П. Тимофеев, Т. М. Соколовская, О. С. Морозова

ЛИПИДНЫЕ КОМПЛЕКСЫ И ТИОЛДИСУЛЬФИДНЫЕ ГРУППЫ КРОВИ В УСЛОВИЯХ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНГАЛЯЦИОННОЙ ЗАТРАВКИ ДИМЕТИЛДИСУЛЬФИДОМ

Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт

Первичные механизмы действия метилсернистых соединений, таких, как диме-тилдисульфид (ДМДС), при ингаляционном пути поступления в организм практически не изучены. Тем не менее этот вопрос представляет несомненный интерес в связи с тем, что на современных предприятиях целлюлозно-бумажной промышленности в ряде цехов воздух постоянно загрязнен подобными соединениями (В. П. Тимофеев; Б. Б. Шугаев).

В проведенных нами исследованиях получены следующие результаты. Со стороны фосфолипидов мембран эритроцитов через 20 дней от начала затравки наблюдалось уменьшение содержания прочно связанной фракции и одновременное возрастание «лабильно связанной» фракции (Р<0,001). На 40-й день фосфолипиды подопытных кроликов практически не отличались от контроля. Однако к 60-му дню у животных 3-й группы вновь, как и у животных 1-й группы, наметилось снижение уровня прочно связанной и повышение уровня лабильной фракции. Прекращение затравки приводит к нормализации количества фосфолипидов, что видно по 4-й группе, где контрольные и опытные показатели оказались почти одинаковыми.

Изменения со стороны холестерина эритроцитов в процессе затравки кроликов ДМДС имели противоположную по сравнению с фосфолипидами направленность: на 2-й день возрастало содержание прочно связанной и снижалось количество лабильной фракции холестерина (Р<0,001). Однако к 40-му дню так же, как и со стороны фосфолипидов, данные опыта практически не отличались от контрольных. На 60-й день происходило достоверное снижение уровня прочно связанной и повышение уровня ла-

1 Для такого вывода требуется более полное изучение генетической активности.—

Ред.