CC BY
9
Могилевская О. #. — В кн.: Токсикология редких металлов. М., 1963, с. 191—193.
Тарасенко Н. Ю., Воробьева Р. С., Спиридонова В. С. и др. — Междукарод. ж. гиг., эпидемиол., микробиол., иммунол., 1974, № 2, с. 144—153.
Тарасенко Н. Ю., ШабалинаЛ. Я., Спиридонова В. С.— Int. Arch, occup. environm. Hlth, 1976, v. 37, p. 179— 192.
Тимофиевская Л. А., Иванова H. И., Балынина Е. С. — Гиг. труда, 1980, № 3, с. 25—27.
Шабалина Л. П. — Гиг. и сан., 1970, № 2, с. 98.
Шабалина Л. П., Спиридонова В. С. — В кн.: Физиология и гигиена труда в научно-техническом прогрессе. М., 1977, с. 23—25.
Harding Н. Е. — Brit. J. industr., Med., 1958, v. 15 p. 30.
Поступила 11.06.81
Summary. Stabilizers having different acid radical show different toxicities, and these are the lower, the more carbon atoms have molecules. All the stabilizers studied have marked cumulative properties, act on lung tissue (th< damaging effect is enhanced where barium is combined witl cadmium), and produce skin-absorptive effects. Past stabilizers are distinctly superior to powdery ones becausi they are less toxic and because their production offers ad vantages from the hygienic and economic points of view
УДК 6l5.212.7(Phthorotanum).099:612.64
И. Г. Анисимова
О ГОНАДОТОКСИЧЕСКОМ И ЭМБРИОТОКСИЧЕСКОМ ДЕЙСТВИИ
ФТОРОТАНА
Киевский медицинский институт
В современном комбинированном наркозе широко применяется ингаляционный анестетик фто-ротан (1,1,1-трифтор-2-хлор-2-бромэтан). По данным литературы, у медицинского персонала операционных блоков больниц повышена частота спонтанных абортов, преждевременных родов и рождения детей с пороками развития (А. И. Вайсман; Corbett и Cornell). Указанные формы патологии у медиков, работающих в операционных, предположительно можно связать с длительным воздействием низких концентраций анестетиков, в том числе фторотана.
Изучение гонадотоксического эффекта фторотана ранее не проводилось. Зарубежные специалисты, исследовавшие эмбриотоксический и тератогенный эффект анестетика при высоких (наркотических) уровнях воздействия, получили разноречивые результаты (Basford и Fink; Wittmann). Остались невыясненными возможность развития гонадотоксического, эмбриотоксического и тератогенного эффекта фторотана на низких уровнях воздействия и характер зависимости эффекта от концентрации, не определены пороги и специфичность действия анестетика, что стало предметом данного исследования.
Эксперименты выполнены на 184 крысах линии Вистар и 60 мышах линии СВА; обследовано 458 плодов и 208 крысят. Гонадотоксическое действие фторотана изучали в течение 4-месячного ингаляционного опыта при испытании 3 его концентраций: I серия — 1024±10,4 мг/м3 (уровень порога хронического действия — Limch, установленный нами по общетоксическим показателям), II серия — 202±1,6 мг/м3 (1/5 Limch), III серия — 44± ±0,91 мг/м3 (1/25 Limch).
Фторотан в воздухе затравочных камер определяли газохроматографическим методом (Е. А. Креч-ковский и И. Г. Анисимова). О функциональном состоянии семенников судили по длительности
сохранения подвижности сперматозоидов (Г. М. Его рова и соавт.), относительному количеству под вижных, неподвижных и патологических фор» сперматозоидов, и их осмотической резистент ности (В. К- Милованов). Морфологические из менения в гонадах оценивали на основании индек са сперматогенеза по четырехбалльной систем Fogg и Cowing, количеству нормальных спермато гоний, числу канальцев со слущенным семяродньп эпителием и с 12-й стадией мейоза (метафаза 2-п деления созревания). Кроме того, учитывали коэ4 фициенты массы, размер, объем и массу семенников Показатели определяли спустя 2 и 4 мес от начал затравки. Эстральный цикл изучали путем анализ вагинальных мазков у самок-крыс в течение 2 нед д начала эксперимента, ежедневно в течение затрав ки и 1 мес восстановительного периода. В конц эксперимента определяли коэффициенты массы яич ников, после чего готовили серийные срезы чере весь орган для количественной оценки микрост руктуры (Mandle и Zuckerman). Для выявлени действия анестетика на функцию воспроизводств три группы крыс-самцов, затравленных фторотг ном в течение всего цикла сперматогенеза в укг занных выше концентрациях, спаривали с интакт ными самками. Эмбриональный материал учить вали на 20-й день беременности.
Влияние фторотана на эмбриогенез изучали н беременных крысах, которых с 1-го по 20-й ден беременности затравляли из расчета Lime (1024 мг/м3). Половину самок забивали на 20-день беременности и определяли антенатальну! гибель эмбрионов по А. М. Малашенко и И. К Егорову, массу и длину плодов и плаценты, плод: исследовали по методике Wilson в модификаци И. Р. Бариляка и модифицированной методик Dawson (А. П. Дыбан и соавт.). Аналогичном анализу подвергали эмбриональный материал, пс лученный от беременных мышей, затравленны
Таблица 1
1орфофункциональное состояние гонад и сперматогенного эпителия крыс при ингаляционном воздействии фторотана
в концентрациях 1024, 202 и 44 мг/м3 в течение 4 мес (М±т)
Исследование через 2 мес Исследование через 4 мес
Показатели
контроль I серия II серия III серия контроль II серия III серия
:ремя -подвижно-
сти, мин 149,16±9,67 86,66±10,48* 117,5±19,5 135,0+10,4 162,86±6,29 128,57+20,97 162,85±16,78
1роцент патологи-
ческих форм 1,35±0,17 6,3±1,93* 1,67±0,33 1.4+0,02 1.19+0,41 2,16±0,41 0,7+0,07
1роцент неподвиж-
ных форм 58,64±13,2 65,84+13,0 62,55±3,77 53,57±8,67 51,37±3,92 57,49+6,01 57,64+4,89
(смотическая ре-
зистентность <2500 <2500 <2500 <2500 <2500 <2500 <2500
[идекс спермато-
генеза 3,28±0,11 2,96+0,14 3,01+0,14 3,1±0,09 3,35+0,1 3,16±0,14 3,26+0,11
[роцент канальцев
со спущенным 2,37±0,12
эпителием 1,5±0,37 4,5+0,12* 3,5±0,12* 1.0+0,24 1,62±0,37 5,12+0,86*
исло нормальных
сперматогоний 44,27±1,36 38,13±1,09* 44,76+1,11 44,4+0,7 46,5± 1,48 39,98+1,36* 46,58+2,1
роцент канальцев
с 12-й стадией
мейоза 2,87±0,37 3,25+0,49 2,62+0,62 2,62+0,49 3,12+0,62 3,37+0,62 3,0±0,37
оэффициенты мас-
сы семенников:
левого 6,02±0,23 4,64+0,25* 5,47±0,38 5,57+0,38 6,17+0,19 5,56±0,3 6,21+0,28
правого 6,09+0,27 4,67+0,29* 5,46+0,27 5,54+0,35 6,09+0,35 5,42+0,27 6.19±0,28
* Здесь и в табл. 2 и 3 различия с контролем статистически значимы (Р<0,05).
горотаном в концентрации, равной ЫшсЬ 024 мг/м3), на протяжении всего срока беремен-эсти и забитых на 19-й день. Другую половину шок крыс доводили до родов с целью изучения зстнатального развития потомства. Регистриро-1ли гибель крысят после рождения, прирост мас->1 тела в динамике (с 1-го по 60-й день развития). В результате анализа действия фторотана на >нады крыс-самцов установлено наличие эффекта зи применении его в концентрациях 1024±10,4 202±1,6 мг/м3 (табл. 1). У животных I серии «действие фторотана в течение 2 мес вызывало леньшение массы (1,35±0,09 при 1,73±0,03 в жтроле; Р<0,01), объема (1,57±0,03 при 1,96±
±0,13 в контроле; Р<0,02) и коэффициентов массы семенников (4,64±0,25 при 6,02±0,23 в контроле; Р<0,01). Кроме того, сокращалось время подвижности сперматозоидов и увеличивался процент патологических форм. При воздействии концентрации 202±1,6 (II серия) и 44±0,91 мг/м3 (III серия) подобных изменений не выявлено. Со стороны морфометрических показателей наиболее чувствительными оказались относительное число канальцев со слущенным семяродным эпителием и количество нормальных сперматогоний, что достоверно отличалось от контроля у животных I и II серий. В III серии не обнаружено морфологи-
Таблица 2
Результаты изучения влияния фторотана на функцию воспроизводства у крыс
онцентра-|ня фторо-!на. мг/м1
Число беременных крыс
Число желтых тел
Число иест имплантаций
Число живых эмбрионов
Гибель эмбрионов, %
до имплантации
после имплантации
общая
нтроль
20
226
206
196
8,85±1,89
4,85±1,5
13,27±2,26
)24±Ю,4 202+1,6 44±0,91
20 20 20
254 235 228
184
205
206
171
182 194
27,5±2,8* 12,7±2,17 9,65+1,97
7,0±1,88 11,2±2,2* 5,83±1,62
32,6±2,94* 22,5±2,72* 14,91 ±2,36
со
Таблица
Среднее число структурно-функциональных элементов яичника крыс после 4-месячного ингаляционного воздействи
фторотана в концентрациях 1024, 202 и 44 мг/м3
Структурно-функциональные элементы яичника Контроль Конценрация фторотана. мг/м>
1024 ±10.4 202 ±1.6 44 ±0.91
Примордиальные фолликулы и с одним слоем гранулезных клеток Фолликулы с 2 и более слоями гранулезных клеток Граафовы пузырьки Желтые тела Атрезирующиеся фолликулы и атретические тела 805,0±47,14 117,5±21.09 7,5±1,24 8,5±0.87 955,0±34,73 398,3±68,23» 100,0-4-17,36 9,2-t-2,48 7,5±0,62 1240,0±94,29* 677,5±48,38 И 5,0± 13,64 8,3±1,24 7,3±0,25 1198,3±116,6 668,3±62,03 130,0± 23,57 9,2-1-2,48 8,2±0,74 1108,3±90,57
Всего. . . 1932,7±14,88 1755,0±116,62 2006,5±П 1,66 1924,0± 161,2
ческих и функциональных изменений гонад и спер-матогенного эпителия.
Установлено, что нарушение сперматогенеза влияет на функцию воспроизводства у крыс. У самок, спаренных с самцами I серии, отмечено увеличение общей эмбриональной смертности за счет повышения доимплантационной гибели зародышей. У самок, спаренных с самцами II серии, наблюдалось повышение постимплантационной и общей смертности эмбрионов (табл. 2).
Воздействие фторотана в концентрации 44± ±0,91 мг/м3 (III серия) невлияло на воспроизводимость потомства.
Ингаляционная затравка крыс-самок в концентрациях 1024 и 202 мг/м8 вызывала нарушение функции яичников к концу 1-го месяца затравки, выражающееся в удлинении фазы диэструса (46,39± ±2,76% дня в I серии, 45,31 ±3,95% дня во II серии и при 36,44±1,49% дня в контроле; Р<0,01). С увеличением сроков затравки продолжительность фазы диэструс нарастала (до 58,2±2,45% дня), что повлекло за собой у крыс I серии увеличение продолжительности эстрального цикла (5,08± ±0,25 дня при 4,22±0,11 дня в контроле; Р<0,01). В восстановительном периоде функция яичников крыс в основном нормализовалась. Исключение составили животные I серии, у которых оставалась увеличенной продолжительность фазы диэструс (51,58±4,04% дня против 35,71 ±4,04% дня в контроле).
При морфометрическом анализе препаратов яичников крыс установлено, что фторотан в концентрации 1024±10,4 мг/м3 ведет к уменьшению количества примордиальных фолликулов и с одним •слоем гранулезных клеток и увеличению атрези-рующихся фолликулов и атретических тел, что указывает на наибольшую чувствительность к воздействию данного анестетика молодых овоцитов и ускорение развития процесса атрезии (табл. 3). Морфологических и функциональных изменений в
яичниках крыс при воздействии препарата в koi центрации 44±0,91 мг/м3 не обнаружено.
Фторотан при воздействии на беременных крь на протяжении всего срока беременности в koi центрации 1024±10,4 мг/м3 (уровень Limch) вызывал эмбриотоксического эффекта (общая п бель эмбрионов, а также гибель до и после импла: тации не отличались от контроля), не обусловливг аномалий развития внутренних органов и костнс системы. Масса и размер плодов и плаценты у Ж1 вотных опытной группы соответствовали кон ролю.
В постнатальном развитии крысят также не bi явлено особенностей. Гибель подопытных крысз после рождения наступала в первые 1—3 нед находилась на уровне контрольной (10,78±3,07 при 7,54±2,55% в контроле; /'>0,05). Прорез! вание глаз, отлипание ушей, покрытие шерсть у подопытных крысят наступали в те же срок что и у контрольных. Прирост массы тела крысят динамике (с 1-го по 60-й день развития) в опыте контроле совпадал. Фторотан также не оказыв влияния на эмбриогенез мышей при воздейств! в течение всего срока беременности на уров Limch.
Таким образом, полученные данные позволя! заключить, что порог гонадотоксического действ: фторотана (Limspec) для крыс находится на уров 202 мг/м3. Ранее нами (И. Г. Анисимова и соав определено, что порог хронического действия ai стетика, установленный по общетоксическим по» зателям (суммационно-пороговому, ЭКГ, акт* ности аминотрансфераз, гексеналовой пробе, коэ фициентам массы внутренних органов, данш патоморфологических исследований), рав 1056 мг/м3. Как следует из полученных резулы тов, зона специфического действия фторотана
( йщХ = 5'2)
свидетельствует о высокой опасности его как roi дотропного яда. Рекомендуемая в литературе ГЦ
яоротана от 8 до 1000 мг/м3 (А. И. Корбакова I соавт.; Б. Д. Карпов и соавт.; Whitcher и соавт.) [ана на основании изучения острой токсичности и |едостаточно обоснована. Предлагаемая нами ПДК ггоротана в воздухе рабочей зоны при его произ-юдстве и применении с учетом общетоксического I специфического действия анестетика принята екцией по установлению санитарных стандартов одержания вредных веществ в воздухе рабочей оны.
Выводы. 1. Фторотан пр^ хроническом ин-аляционном воздействии низких концентраций лияет на гонады крыс обоих полов.
2. Гонадотоксический эффект фторотана специ-1ичен, так как он проявляется на уровне недей-гвующей концентрации, установленной по обще-оксическим показателям (202±1,6 мг/м3—1/5 ¡тсИ).
3. Эмбриотоксический и тератогенный эффект )епарата при воздействии на крыс и мышей на )овне порога хронического действия в течение сей беременности не обнаружен.
4. Результаты исследований использованы при 5основании ПДК фторотана в воздухе рабочей
)НЫ.
итература. Анисимова И. Г., Благодарная О. А. и др. — Гиг. труда, 1980, № 3, с. 36—37. ариляк И. Р. Анализ механизмов патогенного действия антидиабетических сульфаниламидов на эмбриональное развитие крыс. Автореф. дис. канд. Л., 1967. айсман А. И. Некоторые вопросы гигиены труда врачей-анестезиологов. Автореф. лис. канд. М., 1967.
IK «15.285.7.025.1.015.46
Дыбан А. П., Баранов В. С. и др. — Арх. анат., 1970, № 10, с. 89—100.
Егорова Г. М. и др. — В кн.: Токсикология новых промышленных химических веществ. М., 1966, вып. 8, с. 33—41.
Карпов Б. Д., Немировский О. Н. и др. — В кн.: Некоторые вопросы экспериментальной промышленной токсикологии. М., 1977, с. 84—86.
Кречковский Е. А., Анисимова И. Г. — Гиг. и сан., 1979, № 2, с. 58—59.
Малашенко А. М., Егоров И. К■ — Генетика, 1967, № 3, с. 59-67.
Милованов В. К- Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М., 1962.
Токсикология фторорганнческих соединений и гигиена труда в нх производстве./ Корбакова А. И., Макуло-ва И. Д., Марченко Е. Н. и др. М., 1975.
Basford A., Fink В. — Anesthesiology, 1S68, v. 29, p. 1167—1173.
CorbittJ. H., Cornell R. G. — Ibid., 1974, v. 41, p. 341 — 344.
Fogg L. C., Cowing R. F. — Gancer Res., 1951, v. 11, p. 23.
Mandl A., Zuckerman S. F. — J. Endocr., 1951, v. 7, p. 103.
Mandl A., Zuckerman S. F. — Ibid., 1952, v. 8, p. 341 — 346.
Whitcher C. et al. — Anesthesiology, 1971, v. 35, p. 348— 353.
Wittman R. — Anaesthesist, 1974, v. 23, p. 30—35.
Поступила 17.07.80
Summary. In animal experiments, low concentrations of fluothane were found to have gonadotoxic, but not embryotoxic or teratogenic effects. A hygienic standard (MAC) for worksite air for this anesthetic has been set equal to 20 mg/m3 on the basis of its specific action on the gonads.
Канд. мед. наук Е. Ф. Горбачевская, уVI. А. Осипова, канд. мед. наук Л.М. Овсянникова
БАЛАНС АМИНОКИСЛОТ ПРИ АУТОИММУННЫХ ПРОЦЕССАХ, ВЫЗВАННЫХ ДЕЙСТВИЕМ НА ОРГАНИЗМ у-ИЗОМЕРА ГЕКСАХЛОРЦИКЛОГЕКСАНА
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Приобретение тканями аномальных антигенных ойств, обмен аминокислот и гиперпродукция [тител являются тесно связанными и взаимообус-»вленными процессами, которые могут быть след-вием не только интоксикации или конъюгации [мического вещества с теми или иными амино-[слотами, но и нарушений иммунной системы ор-низма. Последнее и определило задачу исследо-ния — выяснение особенностей баланса амино-слот сыворотки крови при аутоиммунных про-ссах, вызванных действием на организм живот-IX (кроликов) -^-изомера гексахлорциклогексана ХЦГ) в разных дозах.
Аутоиммунный процесс моделировали на поло-зрелых крольчихах, разделенных toa 3 группы: в течение 3 мес вводили ГХЦГ перорально в дозе
4 мг/кг (750 ЬО50), 10 ежедневно в течениеб мес получали яд в допустимой суточной дозе 0,2 мг/кг ОЛооо ^5о) и 10 контрольных — подсолнечное масло (растворитель). Ставили реакции микропреципитации (Н. Н. Клемпарская и Н. В. Раева), пассивной гемагглютинации — РПГА (П. А. Кар-ташев и Н. Н. Клемпарская) и определяли уровень иммунекомпетентных клеток в крови (Н. Н. Клемпарская). Одновременно выясняли наличие у животных антигенных изменений нуклеопротеидных фракций печени и глобина крови. Для этого использовали реакцию анафилаксии с десенсибилизацией (Л. А. Зильбер), выделяли нуклеопротеиды печени по А. Н. Белозерскому. Исследования проведены на 80 морских свинках. Степень изменения синтеза глобина в сторону образования эмбрио-
