CC BY
8
яоротана от 8 до 1000 мг/м3 (А. И. Корбакова 1соавт.; Б. Д. Карпов и соавт.; А\^Ы1сЬег и соавт.) [ана на основании изучения острой токсичности и |едостаточно обоснована. Предлагаемая нами ПДК ггоротана в воздухе рабочей зоны при его произ-юдстве и применении с учетом общетоксического I специфического действия анестетика принята екцией по установлению санитарных стандартов одержания вредных веществ в воздухе рабочей оны.
Выводы. 1. Фторотан пр^хроническом инфляционном воздействии низких концентраций лияет на гонады крыс обоих полов.
2. Гонадотоксический эффект фторотана специ-1ичен, так как он проявляется на уровне недей-гвующей концентрации, установленной по обще-оксическим показателям (202±1,6 мг/м3—1/5 ¡тсИ).
3. Эмбриотоксический и тератогенный эффект )епарата при воздействии на крыс и мышей на )овне порога хронического действия в течение сей беременности не обнаружен.
4. Результаты исследований использованы при 5основании ПДК фторотана в воздухе рабочей
)НЫ.
итература. Анисимова И. Г., Благодарная О. А. и др. — Гиг. труда, 1980, № 3, с. 36—37. ариляк И. Р. Анализ механизмов патогенного действия антидиабетических сульфаниламидов на эмбриональное развитие крыс. Автореф. дис. канд. Л., 1967. айсман А. И. Некоторые вопросы гигиены труда врачей-анестезиологов. Автореф. лис. канд. М., 1967.
IK «15.285.7.025.1.015.46
Дыбан А. П., Баранов В. С. и др. — Арх. анат., 1970, № 10, с. 89—100.
Егорова Г. М. и др. — В кн.: Токсикология новых промышленных химических веществ. М., 1966, вып. 8, с. 33—41.
Карпов Б. Д., Немировский О. Н. и др. — В кн.: Некоторые вопросы экспериментальной промышленной токсикологии. М., 1977, с. 84—86.
Кречковский Е. А., Анисимова И. Г. — Гиг. и сан., 1979, № 2, с. 58—59.
Малашенко А. М., Егоров И. К■ — Генетика, 1967, № 3, с. 59-67.
Милованов В. К- Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М., 1962.
Токсикология фторорганнческих соединений и гигиена труда в их производстве./ Корбакова А. И., Макуло-ва И. Д., Марченко Е. Н. и др. М., 1975.
Basford A., Fink В. — Anesthesiology, 1S68, v. 29, p. 1167—1173.
CorbittJ. H., Cornell R. G. — Ibid., 1974, v. 41, p. 341 — 344.
Fogg L. C., Cowing R. F. — Gancer Res., 1951, v. 11, p. 23.
Mandl A., Zuckerman S. F. — J. Endocr., 1951, v. 7, p. 103.
Mandl A., Zuckerman S. F. — Ibid., 1952, v. 8, p. 341 — 346.
Whitcher C. et al. — Anesthesiology, 1971, v. 35, p. 348— 353.
Wiltman R. — Anaesthesist, 1974, v. 23, p. 30—35.
Поступила 17.07.80
Summary. In animal experiments, low concentrations of fluothane were found to have gonadotoxic, but not embryotoxic or teratogenic effects. A hygienic standard (MAC) for worksite air for this anesthetic has been set equal to 20 mg/m3 on the basis of its specific action on the gonads.
Канд. мед. наук Е. Ф. Горбачевская, М. А. Осипова, канд. мед. наук Л.М. Овсянникова
БАЛАНС АМИНОКИСЛОТ ПРИ АУТОИММУННЫХ ПРОЦЕССАХ, ВЫЗВАННЫХ ДЕЙСТВИЕМ НА ОРГАНИЗМ у-ИЗОМЕРА ГЕКСАХЛОРЦИКЛОГЕКСАНА
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Приобретение тканями аномальных антигенных ойств, обмен аминокислот и гиперпродукция [тител являются тесно связанными и взаимообус-»вленными процессами, которые могут быть след-вием не только интоксикации или конъюгации [мического вещества с теми или иными амино-[слотами, но и нарушений иммунной системы ор-низма. Последнее и определило задачу исследо-ния — выяснение особенностей баланса амино-слот сыворотки крови при аутоиммунных про-ссах, вызванных действием на организм живот-IX (кроликов) -^-изомера гексахлорциклогексана ХЦГ) в разных дозах.
Аутоиммунный процесс моделировали на поло-зрелых крольчихах, разделенных Ца 3 группы: в течение 3 мес вводили ГХЦГ перорально в дозе
4 мг/кг (750 ЬО50), 10 ежедневно в течениеб мес получали яд в допустимой суточной дозе 0,2 мг/кг ОЛооо и 10 контрольных — подсолнечное
масло (растворитель). Ставили реакции микропреципитации (Н. Н. Клемпарская и Н. В. Раева), пассивной гемагглютинации — РПГА (П. А. Кар-ташев и Н. Н. Клемпарская) и определяли уровень иммунекомпетентных клеток в крови (Н. Н. Клемпарская). Одновременно выясняли наличие у животных антигенных изменений нуклеопротеидных фракций печени и глобина крови. Для этого использовали реакцию анафилаксии с десенсибилизацией (Л. А. Зильбер), выделяли нуклеопротеиды печени по А. Н. Белозерскому. Исследования проведены на 80 морских свинках. Степень изменения синтеза глобина в сторону образования эмбрио-
Таблица
Количество эритроцитов, ретнкулоцитов, общего и фетального гемоглобина и иммуиокомпетентных клеток в крови (
мок, получавших хронически '/»о ЬО50 ^-изомера ГХЦГ (М±т)
Время исследовании Эритроциты, млн/мкл Ретикулоциты, %в Общий гемоглобин. г/л Феталькый гемоглобин, % Иммунокомпстентнь клетки, %
Фон 3,85±0,05 14,4+0,51 127±1,1 6,41+0,20 4,8+0,37
Через 1 мес 3,36+0,09 20,0+0,71 118+1,2 8,20+0,13 10,8+0,58
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Через 2 мес 3,06+0,03 25,2+0,49 107+1,4 14,53+0,48 18,6+0,92
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
Через 3 мес 2,86+0,02 30,6+0,92 101+0,8 17,26+0,13 23,0+0,63
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001
нальных форм устанавливали с помощью реакции щелочной денатурации (Singer) в модификации Е. Е. Бадюк. Аминокислотный состав сыворотки крови определяли на автоенализаторе КЛА-5 фирмы «Хитачи». Количественный учет ретикулоцитов проводили по П. В. Жгун.
В I серии экспериментов, в которой животные получали 7-изомер ГХЦГ из расчета 4 мг/кг (75о LD50), уже через 1 мес.с начала введения яда наблюдалось достоверное снижение количества эритроцитов и общего гемоглобина при повышенном уровне ретикулоцитов и фетального гемоглобина (табл. 1). Одновременно обнаруживались противоэритроцитарные аутоантитела агглютинирующего и преципитирующего порядка — титры антител были невысокими — 1:8—1:16 (Р<0,001) и от + до ++.
Параллельно выявлялись и антитела, направленные против антигенов печени, в титрах 1:4—1:16
(Р<0,001) в РИГА и от -f" до Ч—|--в реакции
микропреципитации. Спустя 2 мес от начала эксперимента указанные изменения нарастали (см. табл. 1). Титры аутоагглютининов были 1:16— 1:128 (Р<0,001), аутоэритропреципитинов — от -Ь до Ч—К Противопеченочные антитела обнаруживались в тех же реакциях в титрах 1:8—1:64 (Р<0,001) и от + до ++. Через 3 мес у животных нарастала анемия (см. табл. 1), сопровождавшаяся усилением аутоиммунного компонента: титры про-тивоэритроцитарных аутоантител равнялись 1:64— 1:128 (Р<0,001) и от +++ до ++++; титры противопеченочных антител — 1:32—1:128 (Р<0,001) и от +++ до ++++. Количество аутогемолизинов 23,0±0,63 (Р<0,001).
Нуклеопротеидные фракции печени крольчих приобретали аномальные антигенные свойства, не присущие печени контрольных крольчих. У контрольных самок отсутствовали изменения, наблюдавшиеся у подопытных. Антитела по отношению к аутоэритроцитам против антигенов тканей печени не определялись.
Далее мы выясняли возможность и степень развития аутоиммунного процесса у крольчих в условиях хронического действия на них V1000 LD60
у-изомера ГХЦГ. Поступление яда в такой дс на протяжении первых 2 нед не вызывало выраж* ных нарушений эритропоэза и нарастания уров аутогемолизинов. По истечении месяца отмечалс достоверное увеличение количества аутогемоли; нов и ретикулоцитов. Спустя 3 и 6 мес от нача эксперимента у крольчих выявлялись аутоаггл тинины в титрах 1:2—1:4 соответственно и ау эритропреципитины в титрах от + до + -К В 1 же титрах обнаруживались преципитины и к ан-генам гомопечени. Аналогичными оказались | зультаты РПГА с теми же антигенами и аутоэр! роцитами. В одноименные сроки у самок устан« лено достоверное повышение синтеза фетальнс гемоглобина при снижении (в пределах нижн границ исходных величин) количества общего моглобина и эритроцитов. Уровень аутогемоли: нов возрастал на протяжении всего эксперимен' Результаты реакции анафилаксии с десенсиби.) зацией свидетельствовали о том, что нуклеопроте! ные фракции печени крольчих данной серии приобретали аномальных антигенных свойств
Таблицг
Содержание свободных аминокислот (в г/л) в сыворо крови крольчих, получавших хронически 1/60ЬОЬ0 ХгН мера ГХЦГ (М±т)
Опыт Контроль
Аминокислота XI о-* X10-2 Я
Алании Аспарагиновая Валин Глицин Глутаминовая Изолейцин Лейцин Метионин Пролин Оерин Тирозин Треонин Фенилаланин Цистин 3,42+0,72 0,08+0,02 0,76+0,05 1,54+0,28 2,20+0,34 0,44+0,19 0,30+0,02 0,04+0,002 0,36+0,02 1,58+0,53 0,60±0,17 0,44+0,12 0,54+0,03 0,07+0,002 3,01 + 0,52 0,21+0,04 1,62±0,04 3,12+0,66 2,38+0,71 0,57±0,03 1,24+0,08 0,26±0,02 1,46±0,26 1,60±0,42 0,89+0,14 1,11±0,40 1,42+0,10 0,05+0,001 >0.5 <0,0 <0,0 <0,0 >0.5 >0,2 <0,0 <0,0 <0,0 >0,5 >0,1 >0,1 <0,0 <0,0
Далее изучали аминокислотный спектр сыворот-1 крови крольчих. Аминокислотный состав сы-)ротки крови самок, подвергавшихся хрониче-сой интоксикации у-изомером ГХЦГ по 76о )60, отличался от такового контрольных живот->ix. Это отличие проявлялось в достоверном '<0,001) снижении содержания незаменимых ами-жислот — валина, лейцина, метионина, фенила-шина — и недостоверном снижении количества юлейцина и треонина. Отмечался дефицит заме-шых аминокислот — аспарагиновой (Р<0,01), [ицина (Р<0,05), пролина (Р<0,001) и иедосто-рный — тирозина. Завышенным оказался уро-нь цистина (Р<0,001); увеличение содержания 1анина не носило достоверного характера (табл. 2). >и аналогичном анализе сыворотки крови кроль-х, получавших яд в допустимой суточной дозе 10оо LD50), установлена зависимость доза — >фект и на примере аминокислотного гомеостаза. 1к, при сравнении с показателями сыворотки юви самок, получавших V60 LD50 ^-изомера ЩГ, оказалось, что поступление яда в дозе, вной 71()оо LD60, не отражалось на уровне за-нимых (аспарагиновая кислота, пролин, гли-iH, цистин) и незаменимых (валин, лейцин, ме-онин, фенилаланин) аминокислот, приводя лишь достоверному (Р<0,001) дефициту изолейцина. Образование антител зарегистрировано у самок, лучавших ^-изомер ГХЦГ не только в токсиче-ой, но и в допустимой суточной дозе (в послед-м случае титры антител были значительно ниже). Известно, что аминокислоты с разветвленной леродной цепью — валин и лейцин с изолейци-м — являются незаменимыми для синтеза бел-в, в том числе антител. Обнаруженный нами де-цит этих аминокислот в сыворотке крови кроль-х мог быть обусловлен усилением у них синтеза гител. Для синтеза белков соединительной ткани еет большое значение и заменимая аминокислота элин; выявленный дефицит ее не исключает ¡можности повышенного потребления ее для 1теза антител. Незаменимая аминокислота фе-паланин является первоисточником синтеза био-ных аминов; дефицит ее может оказаться след-ием сенсибилизации организма. Дефицит неза-1имой аминокислоты метионина может объяс-ъся участием ее в процессах детоксикации ор-изма.
Незаменимая аминокислота треонин — источник «енимых аминокислот — аспарагиновой и гли-ia. Достоверный дефицит последних в сыворот-крови животных выявлен при четко выраженной
тенденции к снижению уровня в ней треонина. Аспарагиновая кислота (как и глутаминовая) служит источником образования большинства заменимых аминокислот. Повышение содержания цистина может свидетельствовать о торможении активности ряда ферментных систем организма. Выявленная тенденция к повышению уровня аланина в сыворотке крови при воздействии ^-изомера ГХЦГ из расчета 760 LD60 может объяснятья извращением процессов переаминирования в печени животных.
Все изложенное свидетельствует о том, что хроническое воздействие на крольчих v-изомера ГХЦГ в малой дозе (710о0 LDS0) приводит к дисбалансу аминокислот, выраженному, однако, в значительно меньшей степени, чем у животных с явной интоксикацией данным ядом.
Выводы. 1. Хроническое действие на крольчих v-изомера ГХЦГ в токсической дозе (760 LD60) обусловливает анемизацию и развитие аутоиммунного процесса. Насыщение сыворотки крови антителами против аутоэритроцитов, тканей печени животных сочетается с дисбалансом аминокислот: общим (дефицит валина, лейцина, изолейцина, метионина, фенилаланина, пролина, аспарагиновой кислоты) и частным, характерным для действия у-изомера ГХЦГ (дефицит глицина, увеличение содержания цистина).
2. Хроническое действие на организм у-изомера ГХЦГ в допустимой суточной дозе (7,000 LD50) приводит к напряжению эритропоэза и антитело-генеза, не сказываясь существенно на пуле свободных аминокислот сыворотки крови.
Литература. Бадюк Е. Е. — Лабор. дело, 1960, № 4, с. 10.
Белозерский А. Н. Нуклеиновые кислоты и нуклеопроте-иды растений и микроорганизмов. Дис. докт. М., 1942. Жгун П. В. — Лабор. дело, 1962, № 4, с. 28. Зильбер J1. А. — В кн.: Современные вопросы медицинской
науки. М., 1951, с. 271. Карташев П. А., Клемпарская Н. Н. — Лабор. дело,
1971, № 7, с. 426. Клемпарская Н. Я., Раева И. В. — Бюлл. экспер. биол.„
1961, № 5, с. 77. Клемпарская Н. Н. Аутоантитела облученного организма. М., 1972.
Поступила 15.08 80
Summary. Chronic exposure of female rabbits to the V-isomer of hexachlorocyclohexane in a dose of 4 mg/kg led to the development of anemia and of an autoimmune process combined with an amino acid imbalance in the blood serum. The dose of 0.2 mg/kg had adverse effects on ery-thropoiesis and antibody formation without affecting significantly the pool of free amino acids in the blood serum.
t
