CC BY
39
ТЕЗИСЫ
МАТЕРИАЛЫ XI ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ..
5
Н.Ю. Анисимова1, А.Н. Копылов1 Ф.С. Сенатов2, А.В. Максимкин2, М.В. Киселевский1 МУЛЬТИПОТЕНТНЫЕ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫЕ СТРОМАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ ДЛЯ СОЗДАНИЯ БИОИМПЛАНТОВ
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва
2Национальный исследовательский технологический университет «МИСиС», Москва
Задачи исследования. Изготовление имплантов с помощью клеточных технологий, заселением матрикса клетками реципиента in vitro, может способствовать ускорению биоадаптации импланта в организме реципиента. Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК), на сегодняшний день, считаются одним из самых перспективных видов аутологичного материала для клеточной терапии и тканевой инженерии. ММСК могут быть выделены из различных тканей человека или животного. in vitro они могут дифференцироваться в фиброциты, кардиомиоциты, поперечнополосатые и гладкомышечные клетки, нервные (глиальные) клетки, остеоциты, хондроциты, теноциты, адипоциты. Целью настоящего исследования являлось выделение из костного мозга человека и животных ММСК и отработка методов, обеспечивающих их культивирование и пролиферацию.
Материалы и методы. Из костного мозга онкологических больных с солидными опухолями методом иммуномагнитной сепарации выделяли CD271+ клетки (Miltenyi Biotec). Суспензию выделенных клеток культивировали в среде MACS NH Expansion Medium (Miltenyi Biotec) в течение 5-14 суток при 37 °С и 5% СО2. Уровень экспрессии на мембранах клеток CD271+ характеризовали методом проточной цитометрии BD Canto II. Анализ результатов проводили в программе Cyflogic.
Результаты и выводы. В результате культивирования целевых клеток, выделенных их костного мозга, наблюдалось значительное увеличение их количества в культуре - в 9,1-16,3 раза. Уровень экспрессии CD271 в культуре соответствовал 59-77 %. По своим морфологическим особенностям ММСК, полученные по описанному дизайну, характеризовались как фибробластподобные, адгезирующиеся на пластике, а также на бесклеточном матриксе. Полученная культура ММСК может быть использована для получения индивидуализированного биосовместимого импланта, получаемого путем деиммунизации бесклеточного матрикса костно-хрящевого происхождения соответствующих конфигурации и размеров, с его последующей реколонизацией клетками реципиента. Для улучшения свойств имплантов была предложена технология модификации поверхности матрикса нанокомпозитными биосовместимыми синтетическими покрытиями типа керамических пленок, что призвано обеспечивать клеточную адгезию к материалу матрикса и создавать условия для 2D и 3D колонизации матрикса для эпителизации и реваскуляризации трансплантата, а также снижения образования грануляций в области анастомоза
А.Н. Балаев, В.Н. Осипов, К.А. Охманович, В.Е. Федоров
НОВЫЙ жидкофазный метод синтеза трипторелина -
СИНТЕТИЧЕСКОГО АНАЛОГА ГОНАДОТРОПИН-РИЛИЗИНГ ГОРМОНА
ЗАО ”Фарм-Синтез”, Москва
Задачи исследования. Разработка жидкофазного метода синтеза Трипторелина оптимизированного с учётом использования полупродуктов производства Буселерина, производимого на ЗАО ”Фарм-Синтез”.
Материалы и методы. Трипторелин - синтетический декапептид, является аналогом природного го-надотропин-рилизинг гормона (гонадорелина), с более выраженным сродством к рецепторам и более стабильным по сравнению с природным гормоном. Трипторелин, в качестве противоопухолевого антигонадо-тропного средства, применяется для лечения гормонозависимой карциномы простаты у мужчин и для лечения эндометриоза у женщин. В настоящее время Трипторелин не производится на территории Российской Федерации, хотя входит в перечень ЖНВЛП. По своей структуре Трипторелин (Руг-ШБ-Тгр^ег-Туг-Э-Тгр-Ьеи-А^-Рго-01у-ЫН2) отличается от Буселерина (Руг-Н18-Тгр-8ег-Туг-В-8ег(1-Ви)-Ьеи-А^-Рго-ЫНЕ1) дополнительным концевым глицинамидным фрагментом и заменой защищённого Б-серина на Б-триптофан в середине молекулы. На ЗАО ”Фарм-Синтез” был разработан оригинальный метод синтеза Буселерина, производимого в количестве полностью покрывающем потребность России. В целях расширения ассортимента отечественных препаратов было решено разработать новый жидкофазный метод синтеза Трипторелина основываясь на полупродуктах производства Буселерина, что позволит существенно упростить как сам процесс синтеза так и уменьшить его стоимость.
Результаты. Разработанный нами жидкофазный метод синтеза Трипторелина с использованием полупродуктов производства Буселерина: Вос-РгоОН, Вос-Ьеи-А^ОН, 2-8ег-ТуЮН и Руг-ШБ-ТгрОН позволяет при паралельном производстве обоих продуктов существенно сократить число стадий синтеза и удешевить процесс производства. В данном способе не используются токсичные и дорогостоящие реагенты. Полный цикл производства сокращён до 3 недель. В настоящее время на ЗАО ”Фарм-Синтез” производится наработка опытной партии Трипторелина для регистрации препарата.
Выводы. В результате проделанной работы разработан и внедряется в производство новый жидкофазный способ совметного синтеза Трипторелина на базе действующей схемы получения Буселерина. Предложенный способ отличается простотой и позволяет получать целевой декапептид с минимальными затратами.
№ 2/том 11/2012
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
