CC BY
54
С.А. Ашуба1, Г.З. Чкадуа1, А.Н. Иншаков1, Т.А. Митина2, А.К. Голенков2, А.Ю. Барышников1 ИММУНОТЕРАПИЯ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ ВАКЦИНАМИ НА ОСНОВЕ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, Москва 2ГБУЗ МО МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского, Москва
Введение. Множественная миелома (ММ) - это лимфопролиферативное заболевание, морфологическим субстратом которого является плазматическая клетка, продуцирующая моноклональный иммуноглобулин. Неудовлетворительные результаты стандартных методов исследования диктуют необходимость поиска новых способов терапии множественной миеломы, одним из которых может явиться вакцинотерапия на основе дендритных клеток (ДК).
Цель исследования. Отработка методики получения вакцин на основе дендритных клеток и их применение в иммунотерапии множественной миеломы.
Материалы и методы. Дендритные клетки получали из моноцитов периферической крови больных множественной миеломой. ДК культивировали в среде ЯРМ1-1640, содержащей 2% сыворотки человека IV группы крови, в присутствии ГМ-КСФ и ИЛ-4. На четвертые сутки культивирования ДК нагружали миеломным белком, полученным из плазмы крови больного. Для созревания ДК в культуру вносили фНО-а и ПГЕ2. Через 48 ч собирали свободно плавающие клетки, отмывали от культуральной среды и проводили реакцию поверхностной иммунофлуоресценции. Открепившиеся, свободно плавающие клетки обладали иммунофенотипом зрелых ДК: СБ83; НЬЛ-БЯ; СБ80 и СБ86; ССЯ СБ54. Нагруженные дендритные клетки замораживали и хранили в жидком азоте до применения.
Результаты. Вакцину вводили 7 больным внутрикожно в 4-6 точек по ходу лимфатических коллекторов. Доза вводимых ДК за одну инъекцию составляла от 2*106 до 9*106 клеток. Больным было проведено от 4 до 8 вакцинаций с интервалом в 2-3 недели. У 5 больных после вакцинации отмечали повышение температуры и реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в месте введения вакцины, у этих же больных наблюдали стабилизацию болезни. У 2 больных после вакцинации ГЗТ и повышение температуры не отмечали, так же у этих больных наблюдали прогрессирование заболевания.
Выводы. Разработана и адаптирована методика культивирования ДК из моноцитов периферической крови больных ММ. В подавляющем большинстве случаев клинический ответ, выраженный в стабилизации болезни, наблюдался только среди тех больных, у которых удалось достичь иммунологического ответа (ГЗТ и повышение температуры), что делает связь вакцинации и клинического ответа более тесной.
А.Н. Балаев, В.Н. Осипов, К.А. Охманович, Е.В. Решетников, В.Е. Федоров РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ СИНТЕЗА ЛЕЙПРОРЕЛИНА -
СИНТЕТИЧЕСКОГО АНАЛОГА ЛЮТЕИНИЗИРУЮЩЕГО ГОРМОНА ГИПОФИЗА
ЗАО «Фарм-синтез», Москва
Задачи исследования. Разработка технологически приемлемого жидкофазного метода синтеза субстанции Лейпрорелина в целях замещения использования зарубежного препарата как в инъекционной так и в депо-форме.
Материалы и методы. Лейпрорелин (Руг-Н18-Тгр-8ег-Туг-Б-Ьеи-Ьеи-Л^-Рго-ЫНЕ1) - синтетический нонапеп-тид, агонист природного гонадотропин-рилизинг гормона (гонадорелина) последнего поколения имеющий существенно большую активность чем естественный гомон. Лейпрорелин широко используется при лечении прогрессирующего рака предстательной железы у мужчин, а также фибромы матки и эндометриоза у женщин. Следует отметить, что список показаний применения Лейпрорелина постоянно расширяется не только при проведении противоопухолевой терапии, но и, например, для экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Субстанция Лейпрорелина не производится на территории Российской Федерации. Поэтому в целях замещения зарубежного препарата и расширения ассортимента отечественных противоопухолевых препаратов на ЗАО «Фарм-Синтез» было решено разработать технологически приемлемый метод синтеза Лейпрорелина, оптимизированный как по стоимости исходного сырья и простоты проведения процесса, так и по эффективности самого производства.
Результаты. Разработанный нами новый жидкофазный метод синтеза Лейпрорелина с использованием 2+2+2+3 стратегии пептидного синтеза исключает токсичные и дорогостоящие реагенты, легко масштабируемый и позволяет выпускать субстанцию Лейпрорелина (Лейпрорелин ацетат) в полупромышленном масштабе. В настоящее время на ЗАО «Фарм-Синтез» производится наработка опытной партии Лейпрорелина для регистрации препарата.
Выводы. В результате проделанной работы разработан и внедряется в производство новый легко масштабируемый, технологически приемлемый, жидкофазный способ синтеза Лейпрорелина. Предложенный способ отличается простотой и позволяет получать целевой нонапептид в полупромышленном масштабе.
№ 2/том 12/2013
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
