CC BY
119
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2012
уровень экспрессии соответствовал возрастной норме (65,05 ± 0,7%). Экспрессия TLR2 превышала уровень экспрессии TLR4. Это можно объяснить более широким спектром микробных лигандов, распознаваемых TLR2, а также его димеризацией с TLR1 и TLR6.
Таким образом, при сепсисе у новорожденных существенное и быстрое повышение экспрессии TLR2 на моноцитах прослеживается уже при первоначальных признаках воспаления, и измерение экспрессии CD14+CD282+ может служить ранним маркером развития бактериального осложнения. Не исключено, что такой высокий уровень экспрессии TLR2 индуцирует выработку цитокинов, вызывает опосредованный цитокинами апоптоз иммунокомпетентных клеток и различные осложнения.
Натуральные киллеры (NK) являются третьей популяцией лимфоцитов иммунной системы, это клетки врожденного иммунитета. Механизм действия NK-клеток заключается в индукции апоптоза и пер-форинзависимом лизисе. T-NK(CD3+CD16+56+) - уникальный подкласс как Т-клеток, так и NK-клеток, которые регулируют продукцию, а также сами являются продуцентами важнейших цитокинов, направляющих течение иммунной реакции. Их значение важно у детей раннего возраста, когда система адаптивного иммунитета только формируется.
Следует отметить, что у новорожденных детей с СДР достоверно снижено как абсолютное, так и относительное содержание NK(CD3-CD16+56+) и T-NK(CD3+CD16+56+) по сравнению с таковым у здоровых новорожденных (1,98 ± 0,22% против 7,44 ± 0,31% и 0,05 ± 0,01 ■ 109/л против 0,25 ± 0,0Н09/л; 0,61 ± 0,04% против 2,52 ± 0,06% и 0,014 ± 0,002 ■ 109/л и 0,08 ± 0,002 ■ 109/л) (р < 0,05). На 3-5-е сутки динамического наблюдения и к 20-м суткам заболевания не наблюдали повышения содержания в периферической крови NK(CD3-CD16+56+) и T-NK(CD3+CD16+56+). Таким образом, полученные данные свидетельствуют о выраженной редукции клеток, обладающих киллерной активностью.
У новорожденных с СДР и документированным сепсисом отметили достоверно значимое снижение абсолютного и относительного количества NK -NK(CD3-CD16+56+) и T-NK(CD3+CD16+56+) по сравнению с таковым у здоровых новорожденных (р < 0,05). В процессе динамического наблюдения продолжалось достоверное снижение уровня NK(CD3-CD16+56+) и T-NK(CD3+CD16+56+) во все сроки наблюдения. Резюмируя вышеизложенное, можно заключить, что эта особенность эффекторного звена иммунологического реагирования, по-видимому, свидетельствует о напряжении защитной функции NK на фоне бактериальной инфекции и может лежать в основе сниженной резистентности новорожденных детей к инфекционным агентам.
Выводы. 1. Измерение экспрессии CD14+CD282+ на моноцитах может быть ранним маркером развития бактериального осложнения.
2. TLR можно использовать как новые маркеры осложнений при респираторной патологии, а также потенциальную мишень терапевтических вмешательств.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ковальчук Л. В., Хорева М. В., Варидова А. С. Врожденные компоненты иммунитета: ToU-подобные рецепторы в норме и при патологии // Журн. микробиол. - 2005. - № 4. - С. 96-104.
2. Кокряков В. Н. Очерки о врожденном иммунитете. - СПб., 2006.
3. Солдатова И. Г., Дегтярева М. В., Володин Н. Н. и др. Применение ронколейкина в комплексной терапии неонатального сепсиса // Вопр. гематол., онкол. и иммунопатол. - 2003. - Т. 2, № 1. - С. 62-65.
4. Хаитов Р. М., Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Биология рецепторов врожденной иммунной системы // Физиол. и патол. иммун. сист. - 2008. - Т. 12, № 6. - С. 3-28.
5. Хаитов Р. М., Пащенков М. В., Пинегин Б. В. Роль паттернра-спознающих рецепторов во врожденном и адаптивном иммунитете // Иммунология. - 2009. - Т. 30, № 1. - С. 66-76.
6. Guntur A. Role of immune response in sepsis and septic shock // Inter. Immunorehabil. - 2002. - Vol. 4, N 3. - P. 370-374.
Поступила 13.01.12
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012
УДК 615.281.8.03:616.2-002-022:578.831.31].036.8
И. П. Шиловский, Г. В. Корнилаева, М. Р Хаитов
НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ В ТЕРАПИИ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОЙ
вирусной инфекции: данные доклинического исследования препарата «эргоферон»
ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России (115478, г. Москва, Каширское ш., 24, стр. 2); Научноисследовательский институт вирусологии им. д. И. Ивановского (123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 16)
Инфекционные заболевания, вызываемые респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ), зачастую приводят к развитию серьезных осложнений у детей. В настоящее время существуют препараты для профилактики и патогенетической терапии данного заболевания, однако их широкое применение ограничено главным образом нежелательными явлениями, связанными с приемом препаратов, а также высокой стоимостью лечения. В рамках изучения противовирусной активности препарата «Эргоферон» исследована его эффективность в отношении РСВ на клетках линии LeLa in vitro. Противовирусную активность оценивали методом RT-PcR и титрованием на монослое клеток MDKB. данные, полученные в ходе исследования, показывают, что эргоферон оказывает противовирусное действие в отношении РСВ и может быть использован в составе комплексной терапии и профилактики данного заболевания.
Ключевые слова: респираторно-синцитиальный вирус, эргоферон, противовирусная терапия, антитела, интерферон-у, CD4, гистамин
- 144 -
ИММУНОПАТОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Shilovsky I.P., Kornilaeva G.V., Khaitov M.R.
NOVEL POSSIBILITIES FOR THE TREATMENT OF THE RESPIRATORY-SYNCYTIAL VIRAL INFECTION: THE RESULTS OF THE PRECLINICAL STUDY OF ERGOFERON
The infectious diseases caused by respiratory-syncytial virus (RSv) not infrequently lead to the development of serious complications in the children. At present, a variety of medicines are available for the prevention and pathogenetic therapy of these conditions, but their wide application is limited, in the first place by the adverse events accompanying their intake and the high cost of the treatment. The program of evaluation of the antiviral activity of ergoferon envisaged the in vitro study of its action on RSv in a heLa cell line. The antiviral activity of the preparation was estimated by the RT-PcB technique and titration in the monolayer of MDKB cells. The results of the study indicate that ergoferon is possessed of antiviral activity with respect to RSv and can be recommended for the introduction into combined therapy and prevention of respiratory-syncytial viral infection.
Key words: respiratory-syncytial viral infection, ergoferon, antiviral therapy, antibodies, interferon-gamma, CD4, histamine
Введение. Сезонное инфекционное заболевание, вызываемое респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ), - является наиболее частой причиной бронхио-лита и заболеваний нижних дыхательных путей у новорожденных детей. Эпидемии РСВ проходят от одного до нескольких раз в год в течение осенне-зимнего периода и, по данным ВОЗ, охватывают более 60% детей, из которых 80% - дети 1-го года жизни. У 40% всех заболевших детей развиваются инфекционные заболевания нижних дыхательных путей, бронхиолит и пневмония, что приводит к утяжелению течения заболевания, госпитализации, хроническим заболеваниям бронхов и легких и даже смерти. Каждый год в мире регистрируется более 1 млн смертей от РСВ-инфекции, что в 10 раз превышает показатель смертности при заболевании гриппом.
Наиболее подвержены инфекции, тяжелому течению заболевания и развитию осложнений дети группы риска, к которым относятся недоношенные дети (до 35 нед) и дети с врожденными заболеваниями респираторного тракта (бронхолегочная дисплазия и т. д.). Дополнительными факторами риска являются недостаточное грудное вскармливание и иммунодефицитные состояния.
С момента выделения РСВ из ткани легких ученые занимаются поиском эффективного средства для профилактики и лечения данного заболевания, однако до сих пор в арсенале современных противовирусных средств отсутствует лекарственный препарат, который может эффективно и безопасно использоваться в практической медицине. Единственный препарат, разрешенный к применению при тяжелых формах РСВ-инфекции, - рибавирин, синтетический нуклеозид, с противовирусной активностью. Однако его высокая стоимость, сложность введения и возможная тератоген-ность делают невозможным его широкое применение. Кроме того, было показано, что рибавирин ингибирует репликацию РСВ in vitro, но недостаточно эффективен in vivo. Это объясняется тем, что к моменту появления первых клинических симптомов репликация вируса в ткани легких уже завершается. Так, в нескольких клинических исследованиях противовирусный эффект ри-бавирина статистически не различался, или различия были незначительными по сравнению с плацебо [8]. С учетом малой эффективности противовирусного лечения в настоящее время проводится много работ по разработке средств профилактики РСВ-инфекции. К
Шиловский Игорь Петрович - канд. биол. наук, науч. сотр., тел. 8(926)183-93-94, e-mail:[email protected]
настоящему моменту разработано несколько препаратов: RSV-IVIG (поликлональные IgG-антитела (АТ), полученные из нейтрализованных АТ взрослых), пали-визумаб и мотавизумаб - гуманизированные моноклональные АТ к эпитопу антигена белка слияния (белок F) РСВ, отличающиеся друг от друга на 13 аминокислотных остатков [4]. В ходе клинических испытаний показано, что применение RSV-IVIG значительно снижало количество тяжелых форм РСВ-инфекции и частоту развития осложнений. Несмотря на достаточную эффективность, данный препарат имеет ряд недостатков: продолжительные (6-7 ч) внутривенные вливания большого объема препарата (15 мл/кг), риск заражения инфекциями, передающимися с кровью, высокая стоимость лечения и необходимость госпитализации на время введения иммуноглобулина. В ходе исследований паливизумаба показано, что он безопасен в применении, однако не предотвращает заражение РСВ, а лишь препятствует распространению инфекции в нижние отделы респираторного тракта [9]. В связи с недостаточным протективным эффектом требуются ежемесячные повторные введения паливизумаба в течение сезона высокой заболеваемости; высокая стоимость лечения осложняет его широкое применение.
Указанные проблемы терапии РСВ-инфекции моноклональными АТ могут быть решены при использовании АТ в сверхмалых дозах, так как для данного класса препаратов показана высокая эффективность (противовирусные препараты на основе сверхмалых доз эффективны в отношении широкого спектра вирусных инфекций, в том числе и особо опасных) и безопасность (препараты разрешены к применению у детей 1-го года жизни). Более того, препараты на основе сверхмалых доз имеют отличные фармакоэкономические показатели, что позволяет применять их в течение длительного периода, а также практически во всех популяциях. В связи с этим в рамках программы по изучению противовирусной активности нового отечественного препарата «Эргоферон» (производство компании ООО НПФ «МА-ТЕРИА МЕДИКА ХОЛДИНГ») проведено экспериментальное исследование эффективности эргоферона в отношении инфекции, вызванной РСВ. Эргоферон - это комплексный препарат, содержащий смесь сверхмалых доз поликлональных АТ к интерферону (ИФН)-у, поликлональных АТ к CD4 и поликлональных АТ к гистамину.
Материалы и методы. Клеточные линии и питательные среды, штамм вируса. В работе использованы клетки эпителиоидной карциномы шейки матки человека HeLa и клетки почки быка MDBK. Культивирование клеток осу-
- 145 -
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2012
ществляли в полной среде DMEM («ПанЭко», Россия), содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки («ПанЭко», Россия), 300 мг/л глутамина («ПанЭко», Россия), 25 мМ HEPES («ПанЭко», Россия) и 80 мг/л гентамицина («ПанЭко», Россия) при 37°С в 5% атмосфере CO2.
Для инкубации клеток с вирусом РСВ штамма Long использовали поддерживающую бессывороточную среду DMEM, содержащую 600 мг/л глутамина («ПанЭко», Россия), 25 мМ HEPES («ПанЭко», Россия) и 80 мг/л гентамицина («ПанЭко», Россия).
Оценка влияния эргоферона на гибель клеток от осмотического взрыва. Подбор максимального разведения препарата, при котором не происходит гибель клеток от осмотического взрыва, проводили с использованием клеточной линии MDBK. Для этого клетки засевали в 24-луночный плейт в количестве 1 • 105 клеток на лунку в объеме 1 мл полной среды DMEM и инкубировали до образования монослоя (1 сут). Затем добавляли препарат в необходимых разведениях: без разведения, 1:2; 1:3; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32. Отрицательным контролем служили необработанные клетки. В качестве положительного контроля использовали 5% H2O2. Клетки инкубировали с исследуемым препаратом в течение 1 сут. Затем к клеткам добавляли раствор пропидиума йодида (PI) в конечной концентрации 2,5 мкг/мл. Относительное количество погибших клеток оценивали методом проточной цитометрии (цитометр FACScan, «Becton Dickinson», США).
Оценка противовирусной активности эргоферона. Для определения противовирусной активности эргоферона использовали две экспериментальные модели. Во-первых, определили титр противовирусной активности исследуемого препарата, т. е. его разведение, обеспечивающее 50% защиту инфицированных клеток. Для этого клетки линии HeLa были посажены в 96-луночный плейт в количестве 1 • 104 клеток на лунку в 100 мкл полной среды DMEM с последующим инкубированием при 37°С в 5% С02-атмосфере до образования монослоя (примерно 1 сут). Затем клетки отмыли 100 мкл поддерживающей среды DMEM и полную среду DMEM заменили на 100 мкл поддерживающей среды DMEM, содержащей РСВ в различных дозах: 10 и 100 ЦПД50/лунка (MOI = 0,001 и MOI = 0,01 соответственно). Вирус инкубировали с клетками в течение 90 мин и удалили. Затем к инфицированным клеткам добавили исследуемые препараты в различных разведениях. В качестве положительного контроля использовали двоичные разведения коммерческого ИФН-I (PBL Interferon Source, США), в качестве отрицательного - поддерживающую среду без добавления каких-либо препаратов. Клетки с исследуемыми препаратами и контрольными образцами инкубировали при 37°С в 5% С02-атмосфере в течение 5 сут до появления цитопатического эффекта. Цитопатическое действие РСВ оценивали посредством световой микроскопии. Противовирусную активность рассчитывали по формуле Спирмена-Кербера:
logT = D + —- • (p - —),
где T - разведение препарата, обеспечивающее 50% противовирусный эффект; Dmax - двоичный логарифм разведения, выше которого произошла 100% защита; d - двоичный логарифм шага разведения (1 в случае двоичного титрования); n - количество лунок на каждую дозу препарата (4); p - количество лунок, давших защиту в Dmax и в последующих разведениях.
Во-вторых, определили вирусную нагрузку на клетки методом количественной полимеразноцепной реакции (ПЦР). Для этого клетки HeLa были посажены в 24-луночный плейт в количестве 1 • 105 в 0,6 мл полной среды DMEM с последующим инкубированием при 37°С в 5% С02-атмосфере до образования монослоя (примерно 1 сут). Далее клетки отмыли 0,6 мл поддерживающей среды DMEM и полную среду DMEM заменили на 250 мкл поддерживающей среды, содержащей вирус РСВ (1000 ЦПД50/лунка, что составляет MOI = 0,01). Вирус инкубировали с клетками в течение 90 мин, а
затем удалили и в лунки клеток добавили исследуемые препараты, разведенные в бессывороточной среде DMEM (в разведении 1:3), а также контрольные образцы коммерческого ИФН-I (в разведении 1:1 • 104). В качестве отрицательного контроля использовали поддерживающую среду, не содержащую каких-либо препаратов. Клетки с исследуемыми препаратами инкубировали при 37°С в 5% С02-атмосфере в течение 4 сут. Через 2 и 4 сут после инфицирования клеток вирусом из лунок плейта взяли клеточный супернатант, в котором оценивали количество РСВ методом ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ).
Оценка вирусной репродукции методом RT-PCR. Выделение общей РНК из 100 мкл вирусного материала осуществляли с помощью набора «Рибо-сорб» («AmpliSens», Россия) согласно инструкции производителя. Обратную транскрипцию провели с помощью набора «RevertAid H Minus Strand cDNA Synthesis Kit» («Fermentas», Литва) согласно инструкции производителя. Для обратной транскрипции использовали праймер, специфичный к гену P вируса РСВ (5’-ATGCCATGGTTGGT-3’).
Для ПЦР-РВ использовали праймеры, направленные к гену P вируса (прямой праймер - 5’-GAAGCATTA ATGACCAATGA-3’, обратный - 5’-CATCTGATGTGTCTTT TGC-3’) и набор реактивов для проведения ПЦР-РВ в присутствии Sybr Green I («Синтол», Россия). Реакция ПЦР-РВ была поставлена в триплетах для каждого образца кДНК. Реакцию ПЦР проводили в конечном объеме 25 мкл в соответствии с рекомендациями производителя с использованием термоциклера «BioRad IQ5». Параметры ПЦР-программы были следующие: 95°С в течение 120 с - 1 цикл; 58°С в течение 50 с, 95°С в течение 20 с - 45 циклов.
Для построения калибровочной кривой использовали образцы общей РНК, выделенные из 100 мкл вирусного материала с известным титром - 100 000, 10 000, 1000 и 100 ЦПД50/мл. Расчет пороговых циклов и построение калибровочной кривой провели с помощью программного обеспечения к термоциклеру «BioRad IQ5».
Статистическая обработка данных. Результаты статистически обработали с помощью пакета программ Statistica 8. Статистическую значимость отличий показателей, полученных для экспериментальных и контрольных образцов, изучали, используя непараметрические методы (критерий Манна-Уитни). Отличия признавали статистически значимыми приp < 0,05.
Результаты. Влияние разведения исследуемых препаратов на гибель клеток от осмотического взрыва. В результате экспериментов по оценке токсичности эргоферона показано, что только не разведенный в среде эргоферон приводит к существенной гибели клеток (до 99,4 ± 0,12% всей популяции клеток). В группе положительного контроля (5% H2O2) погибло 97,8 ± 0,35% клеток (р < 0,05 от отрицательного контроля). Выявленная клеточная цитотоксичность эргоферона обусловлена осмотическим взрывом, так как эргоферон тестировали в виде водного раствора. Уже при разведении препарата в соотношении 1:2 и последующих разведениях значительной гибели клеток не наблюдали, а количество погибших клеток варьировало от 1,8 до 2,6%, что статистически значимо не отличалось от отрицательного контроля (необработанные клетки) (рис. 1).
По результатам данного эксперимента выбрали дозу эргоферона для проведения исследования его противовирусной активности в отношении РСВ. Полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что эрго-ферон не обладает специфической токсичностью.
Ингибирование развития РСВ посредством эргоферона в экспериментах in vitro. При изучении противовирусной активности эргоферона на модели инфицирования клеток линии HeLa вирусом РСВ по-
- 146 -
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ АЛЛЕРГОЛОГИЯ
5% Н202 □ Эргоферон Ц Отрицательный контроль
Результаты исследования противовирусной активности эрго-ферона на экспериментальной модели инфицирования клеток линии HeLa вирусом рсв in vitro при различных инфекционных дозах
Препарат Средний титр активности (минимальное разведение, при котором обеспечивается 50% защита клеток) препаратов при множественности инфекции (MOI) РСВ
MOI = 0,001 MOI = 0,01
Эргоферон 3,3 ± 0,3** 2,7 ± 0,7**
ИФН-I* 26 ± 3** 23 ± 4**
Отрицательный контроль 0 ± 0 0 ± 0
Примечание. Представлены средние значения от трех независимых экспериментов; * - начальная активность ИФН-I 1940 U/мл; ** - статистически значимо отличается от отрицательного контроля (р < 0,05).
Рис. 1. Результаты исследования цитотоксичности эргоферона.
По оси абсцисс - разведение эргоферона; по оси ординат - относительное количество (в %) погибших клеток; * - статистически значимые отличия при р < 0,05.
казано, что на 5-е сутки после инфицирования эргоферон (двоичные разведения в культуральной среде 1:2-1:256) проявляет статистически значимое защитное действие при различных инфекционных дозах (как при MOI = 0,001, так и при MOI = 0,01). При MOI = 0,001 титр активности эргоферона (максимальное разведение, при котором обеспечивается 50% защита клеток) составил 3,3 ± 0,3 (р < 0,05), при MOI = 0,01 - 2,7 ± 0,7 (р < 0,05). Титр активности препарата сравнения ИФН-I составил 26 ± 3 U/мл (р < 0,05) и 23 ± 4 U/мл (р < 0,05) соответственно (см. таблицу).
Выявленная анти-РСВ активность эргоферона подтвердилась и в дальнейших экспериментах, в которых противовирусную активность оценивали по ингибированию вирусной нагрузки в клетках HeLa, инфицированных MOI = 0,01. Данные количественного ПЦР-анализа свидетельствовали о статистически значимом снижении вирусной нагрузки на клетки линии HeLa в присутствии эргоферона (разведенного в поддерживающей среде в соотношении 1:3) как на 2-е сутки, так и на 4-е после инфицирования в сравнении с отрицательным контролем. Так, титр РСВ в клеточных супернатантах через 2 сут после инфицирования клеток в присутствии эргоферона составлял
1000-,
900-
800-
700-
600-
500-
400-
300-
200-
100-
0-
р<0,05
р< 0,05
80 000 700006000050000400003000020000100000-
2-е
Эргоферон
ИФН
4-е
Отрицательный контроль
Рис. 2. Влияние эргоферона на изменение вирусной нагрузки на клетки HeLa.
Титр РСВ, оцененный в супернатантах клеток HeLa методом количественного ПЦР-анализа на 2-е (а) и 4-е (б) сутки после инфицирования MOI = 0,01. Представлены средние значения от трех независимых экспериментов. По оси ординат - титр вируса.
112 ± 10,1 (р < 0,05), а на 4-е сутки - 20 070 ± 7706 (р < 0,05). Титр РСВ при инкубации с препаратом сравнения ИФН-I (разведенного в поддерживающей среде в соотношении 1:1 • 104) на 2-е и 4-е сутки составил 185 ± 32,5 (р < 0,05) и 3921 ± 556 (р < 0,05) соответственно. В группе отрицательного контроля титр вируса был значительно выше, составив 326 ± 29,2 (р < 0,05) на 2-е сутки после инфицирования и 50 855 ± 9255 (р < 0,05) на 4-е (рис. 2).
Обсуждение. Результаты проведенного исследования препарата, содержащего АТ к ИФН-у, АТ к CD4 и АТ к гистамину, показали, что эргоферон оказывает протективное действие на клетки в экспериментах in vitro при инфицировании их различными инфекционными дозами РСВ. Эргоферон ингибирует репликацию РСВ, статистически значимо снижая вирусную нагрузку на клетки линии HeLa.
Ранее показано, что в противовирусной защите от респираторных инфекций важнейшую роль играют ИФН-I и ИФН-III [5, 6] продуцируемые, в том числе эпителиальными клетками.
Данное исследование проведено на клетках линии HeLa, которые имеют эпителиальное происхождение и для которых показана способность секретировать ИФН под действием индукторов [7]. Таким образом, к одним из механизмов анти-РСВ-активности исследуемого препарата, помимо прямого противовирусного действия (аналогичное действию IFN-I), относится индукция системы ИФН, опосредованная главным образом сверхмалыми дозами к ИФН-у, входящих в состав препарата.
Несмотря на высокую эффективность применения рекомбинантных ИФН в качестве противовирусных пре паратов, что, в частности, подтверждено и в данном исследовании, интерферонотерапия ограничена формированием антиинтерферо-новых АТ, а также ранними (гриппоподобный синдром) и поздними (снижение массы тела, подавление кроветворения в костном мозге, обратимое выпадение волос) побочными реакциями [2, 3].
б
р<0,05
р<0,05
- 147 -
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2012
Использование эргоферона позволяет решить описанные вопросы интерферонотерапии, так как одним из аспектов действия препарата является индукция продукции эндогенных ИФН, которые не обладают антигенными свойствами, поэтому не возникает негативных эффектов, присущих препаратам рекомбинантного иФн.
В реализацию фармакологической активности трехкомпонентного эргоферона вовлечены не только система ИФН, но и другие звенья иммунного ответа, такие как клеточный (Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты) и гуморальный иммунитет, а также процесс дегрануляции тучных клеток, приводящий к высвобождению гистамина, лейкотриенов и других медиаторов, поэтому можно предположить, что противовирусная активность эргоферона в отношении РСВ in vivo будет гораздо более выраженной, так как экспериментальная in vitro система существенно ограничивает исследование препаратов, оказывающих системное действие. Положительные результаты клинического исследования эффективности и безопасности применения одного из компонентов эрго-ферона сверхмалых доз АТ к ИФН-у в лечении РСВ-инфекции у детей подтверждают предположение [1].
Таким образом, результаты проведенного доклинического исследования нового отечественного препарата «Эргоферон» указывают на то, что в арсенале противовирусных препаратов появилось новое высокоэффективное лекарственное средство, отличающееся высоким профилем безопасности и позволяющее решить актуальные вопросы современной практической медицины.
ЛИТЕРАТУРА
1. Головачева Е. Г. Клинико-лабораторное обоснование применения иммунокорригирующей терапии при респираторносинцитиальной вирусной инфекции у детей: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - СПб., 2003.
2. Ершов Ф. И., Киселев О. И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). - М., 2005. - С. 22-23.
3. Antoniou K. M., Ferdoutsis E., Bouros D. Interferons and their application in the diseases of the lung // Chest. - 2003. - Vol. 123, N 1. - P. 209-216.
4. Cingoz O. Motavizumab // MAbs. - 2009. - Vol. 1, N 5. - P. 439-442.
5. Contoli M. et al. Role of deficient type III interferon-lambda production in asthma exacerbations // Nature Med. - 2006. - Vol. 12, N 9. - P. 1023-1026.
6. Gehlhar K. et al. Impaired virus-induced interferon-alpha2 release in adult asthmatic patients // Clin. Exp. Allergy. - 2006. - Vol. 36, N 3. - P. 331-337.
7. Milhaud P. G. et al. Interferon production of L929 and HeLa cells enhanced by polyriboinosinic acid-polyribocytidylic acid pH-sensitive liposomes // Bioconjug. Chem. - 1992. - Vol. 3, N 5. - P. 402-407.
8. Ventre K., Randolph A. G. Ribavirin for respiratory syncytial virus infection of the lower respiratory tract in infants and young children // Cochrane Database Syst. Rev. - 2007. - N 1. - P. 181.
9. Wang D., Bayliss S., Meads C. Palivizumab for immunoprophylaxis of respiratory syncytial virus (RSV) bronchiolitis in high-risk infants and young children: a systematic review and additional economic modelling of subgroup analyses // Hlth Technol. Assess. - 2011. - Vol. 15, N 5.
Поступила 30.09.11
ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012
УДК 616-092:612.017.1]-02:613.63]-078.33
А. И. Мартынов, Н. И. Ильина, Л. В. Лусс, А. А. Ярилин, Б. В. Пинегин, А. А. Мартынов, Т. г. Федоскова, М. Ф. Никонова
ОСОБЕННОСТИ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ
работников, подвергающихся воздействию химического фактора, по результатам 3-летнего мониторинга
ФБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России (115478, г Москва, Каширское ш., 24, к. 2)
В статье изучены особенности иммунного статуса у персонала объекта по уничтожению химического оружия в пос. Горный Саратовской области и населения, не имевшего контакта с химическим фактором по результатам 3-летнего мониторинга.
Ключевые слова: иммунный статус, аллергические заболевания, вторичная иммунная недостаточность A.I. Martynov, N.I. Ilyina, L.VLuss, A.A. Yarilin, B.V Pinegin, A.A. Martynov, T.G. Fedoskova, M.F. Nikonova
specific clinical and immunological features of the employees undergoing the influence of a chemical factor: the results of three-year monitoring
The paper describes peculiarities of the immune status of the personnel employed at the chemical weapons destruction facility near the settlement of Grozny, Saratov region. The influence of the chemical factor was estimated based on the results of continuous monitoring during 3 years.
Key words: immune status, allergic diseases, secondary immunodeficiency
- 148 -
