CC BY
11
20
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
ценции клеток, окрашенных scFv-NSP4, по сравнению с МКА ИКО25 может свидетельствовать о способности рекомбинантного иммунотоксина узнавать недоступные для классических антител эпитопы белка за счет меньшего размера молекулы.
Д. П. Веевник1, А.С. Федулов2, Т.Л. Юркштович3, Н.К. Юркштович3, П.М. Бычковский3, А.И. Трутько1 ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ И ПЕРЕНОСИМОСТИ В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ НА ФОНЕ ЛОКАЛЬНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ «ТЕМОДЕКСОМ» 1Городская клиническая больница скорой медицинской помощи, Минск, Республика Беларусь; 2Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Республика Беларусь;
3Белорусский государственный университет, Минск, Республика Беларусь
Введение. Несмотря на постоянный прогресс в хирургии опухолей головного мозга и использовании лучевой и химиотерапии, сохраняется низкая выживаемость, высокая смертность и инвалидизация пациентов, особенно при опухолях высокой степени злокачественности.
Цель исследования — повысить эффективность лечения пациентов с нейроэпителиальными опухолями головного мозга супратенториальной локализации при применении локальной химиотерапии «Темодексом».
Материалы и методы. Дизайн клинического исследования: открытое, контролируемое, проспективное, рандомизированное с параллельными группами. В исследование рекрутированы 136 пациентов с первично-мозговыми злокачественными опухолями, находившихся на лечении в нейрохирургическом отделении учреждения здравоохранения Городской клинической больницы скорой медицинской помощи г. Минска с 2010 по 2014 г. В качестве суррогатных (промежуточных) точек наблюдения в послеоперационном периоде выбраны следующие: динамика статуса пациентов по шкале Карнофского, гематологические показатели, частота и характер осложнений. В качестве конечных точек исследования определены следующие: общая выживаемость и бессобытийная выживаемость.
Результаты. После тотального удаления медиана выживаемости в основной группе составила 73,0 (56,2—105,8) нед, в контрольной — 43,4 (32,3-53,1) (WW = 17,7, р = 0,000); после субтотального удаления медиана выживаемости в основной группе — 68,9 (50,9-119,1) нед, в контрольной — 39,0 (30,2-49,3) (WW = 6,7, р = 0,003) нед соответственно. Кумулятивная доля выживших пациентов с G II—IV опухолями основной группы при двухгодичном наблюдении — 38,5 %, в контрольной — 10,1 % (WW = 23,2, р = 0,0001). Доля выживших пациентов с G III—IV опухолями основной группы при двухгодичном наблюдении — 27,7 %, контрольной — 1,3 % (WW = 26,3, р = 0,0001). В основной группе осложнения отмечались в 9,8 % случаев, в контрольной — в 12,6 %. Тромбоэмболия легочной артерии послужила причиной летального исхода у 4,9 % пациентов основной и 2,1 % контрольной группы. В контрольной группе отек и дислокация головного мозга, осложнившие течение кровоизлияний в ложе удаленной
опухоли, и гнойный менингит привели к летальному исходу в 3,2 % случаев.
Заключение. Таким образом, в раннем послеоперационном периоде в основной группе осложнения по характеру и частоте не отличались от контрольной. Локальная химиотерапия с использованием препарата «Темодекс» является технически не сложной в выполнении, не сказывается на длительности оперативного вмешательства, безопасна и удовлетворительно переносится пациентами.
Ю.Л. Володина1, А.С. Тихомиров2, Л.Г. Деженкова2, А.Е. Щекотихин2, А.А. Штиль1 НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АНТРАФУРАНА: ХИМИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА И МЕХАНИЗМЫ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ
1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;
2ФГБНУ НИИНА им. Г.Ф. Гаузе РАМН, Москва, Россия
Введение. Антрафуран-3-карбоксамиды ЛХТА-2251 и ЛХТА-2273, содержащие в 2-положении CF3-группу и атом водорода соответственно, являются наиболее перспективными аналогами противоопухолевого препарата «Антрафуран» (ЛХТА-2034, Щекотихин А.Е. и др. Патент РФ №2554939, 2015).
Цель исследования — установить механизмы гибели опухолевых клеток, индуцируемых антрафуран-3-карбок-самидами ЛХТА-2251 и ЛХТА-2273.
Материалы и методы. Соединения ЛХТА-2251 и ЛХ-ТА-2273 получены конденсацией соответствующих 4,11-дигидроксиантра [2,3-6] фуран-3-карбоновых кислот (А.С. Тихомиров и др., ХГС, 2014, 2, 298; А.С. Тихомиров и др., ХГС, 2013, 2, 264) c (S) 3-аминопирролидином и (R+S) 3-аминопипперидином. Цитотоксичность определяли в MTT-тесте. Использовали линию клеток рака толстой кишки НСТ116 и сублинию НСТ116р53КО с инактивацией белка р53, линию лейкоза К562 и сублинию К562/4 с гиперэкспрессией Р-гликопротеина (множественная лекарственная устойчивость). Ингибирование то-поизомеразы I изучали в реакции релаксации суперскру-ченной плазмидной ДНК. Внутриклеточное накопление соединений, клеточный цикл и апоптоз исследовали методом проточной цитометрии: о накоплении судили по флуоресценции клеток после обработки каждым соединением; распределение фаз клеточного цикла оценивали по свечению интеркалятора йодида пропидия; апоптоти-ческие клетки определяли по связыванию аннексина-V, конъюгированного с FITC. Некротические клетки выявляли окраской трипановым синим.
Результаты. Антрафуран-3-карбоксамиды ЛХТА-2251 и ЛХТА-2273 показали высокую антипролиферативную активность на линиях опухолевых клеток разного тканевого происхождения, в том числе на резистентных сублиниях. Оба соединения быстро (в течение 1 ч) накапливаются в опухолевых клетках. Производные ЛХТА-2251 и ЛХТА-2273 в микромолярных концентрациях ингиби-руют топоизомеразу I и вызывают апоптоз клеток К562. При действии ЛХТА-2251 гибели предшествует задержка клеточного цикла в фазе G2/M. Напротив, апоптоз клеток К562 при действии ЛХТА-2273 сопровождается быс-
Спецвыпуск / том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
21
трой некротизацией и не зависит от нарушений клеточного цикла.
Заключение. Новые антрафуран-3-карбоксамиды ЛХ-ТА-2251 и ЛХТА-2273 перспективны для углубленного доклинического изучения в качестве «кандидатов» в противоопухолевые препараты.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 16-33-00908 мол а.
Е.А. Волосникова, Л.Р. Лебедев, Г.М. Левагина, И.Ф. Демин, М.П. Богрянцева, С.Г. Гамалей, Е.Д. Даниленко
КОНЪЮГАТЫ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ АЛЬФА С БИФОСФОНАТОМ КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЕ СРЕДСТВА ЛЕЧЕНИЯ КОСТНЫХ МЕТАСТАЗОВ
Институт медицинской биотехнологии ФБУНГНЦВБ «Вектор», Бердск, Россия
Введение. Актуальность поиска новых средств и способов лечения злокачественных новообразований, для которых характерна способность к метастазированию, чрезвычайно высока. Среди веществ природного происхождения, обладающих противоопухолевым потенциалом, можно выделить фактор некроза опухоли альфа (ФНО-a). В качестве векторных молекул для направленной доставки ФНО-a в кость могут быть использованы бисфос-фонаты, отличающиеся способностью к накоплению в костной ткани и регуляции активности остеокластов /остеобластов.
Цель исследования — разработать методы конъюгиро-вания ФНО-a с бифосфонатом — алендроновой кислотой (АЛН) для обеспечения тропности белка к костному мат-риксу.
Материалы и методы. В работе применяли реактивы «Bio-Rad» (США), «Sample» (Япония), «AppliChem» (Германия). Для отработки методов синтеза использован препарат ФНО-a (субстанция) с концентрацией белка 1,95 мг/мл и удельной специфической активностью 2,5 х 108 МЕ/мг производства ИМБТ ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор». Конъюгаты ФНО-a с АЛН получали путем ковалентного присоединения молекулы АЛН к молекуле ФНО-a 3 способами: через сульфгидрильную, карбоксильную и аминогруппу белка с помощью сшивающих агентов разных типов. Исследованы 2 варианта проведения синтеза: в растворе и на твердом носителе.
Результаты. Показано, что при проведении реакции конъюгирования в растворе продукты реакции были гете-рогенны. Метод с использованием фиксации активных компонентов на твердой фазе позволил получить конъюгаты высокой степени гомогенности (не более 95,7 %) и стехиометрии, близкой к 1:1. В ходе исследования конъ-югатов ФНО-a с АЛН, полученных твердофазным синтезом, показано, что молекулярная масса ФНО-a в составе конъюгатов соответствует молекулярной массе исходного белка (16,7 ± 0,3 кДа). Выход конъюгатов в реакции синтеза на твердой фазе составлял около 90 %. Анализ специфической активности на культуре клеток L929 подтвердил сохранность цитотоксических свойств ФНО-a в составе конъюгатов всех 3 типов (активность конъюгатов — 2,1—2,2 х 107 МЕ/мг белка).
Заключение. Представленные данные подтверждают возможность получения конъюгатов ФНО-а с АЛН с повышенной тропностью к матриксу костной ткани для лечения костных метастазов.
Данная публикация подготовлена при финансовой поддержке Минобрнауки России, в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014—2020 годы», Соглашение о предоставлении субсидии от 27.06.2014 № 14.604.21.0061. Уникальный идентификатор прикладных научных исследований (проекта) RFMEFI60414X0061.
Л.Л. Высоцкая, А.К. Голенков, Е.В. Трифонова, Т.А. Митина, Ю.Б. Черных, Е.В. Катаева ТАРГЕТНОЕ ЛЕЧЕНИЕ НИЛОТИНИБОМ РЕЗИСТЕНТНОГО ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА
ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Москва, Россия
Цель исследования — оценить эффективность лечения нилотинибом (НЛ) — ингибитором тирозинкиназ (ИТК) 2-й линии пациентов с резистентным хроническим миело-лейкозом (ХМЛ) по непосредственным результатам.
Материалы и методы. В научный анализ включены 44 пациента ХМЛ, получающих НЛ в суточной дозе 800 мг, из них в хронической фазе (ХФ) — 33 (75 %) пациента, в фазе акселерации (ФА) — 11 (25 %) пациентов, мужчин — 17, женщин — 27. Медиана возраста составила 50 лет (26— 73 лет). Медиана длительности заболевания до начала лечения ИТК 1-й линии (иматинибом) (ИМ) была 13,8 мес (1,5—61 мес), медиана предшествующего лечения ИМ —
44.3 мес (6—103 мес). Основная часть (69,2 %) пациентов — с гематологическим рецидивом и цитогенетической резистентностью (58,3 %) к ИМ (Р^хромосома от 35—100 %). С цитогенетическим рецидивом на фоне лечения ИМ — 30,8 %, с отсутствием молекулярного ответа (МО) при полном цитогенетическом ответе (ПЦО) в течение 84 мес лечения ИМ — 3,8 %, с отсутствием полного гематологического ответа (ПГО) в течение первых 3 мес лечения ИМ — 11,5 % пациентов. Медиана длительности лечения НЛ составила
40.4 мес (3—90,6 мес). Проанализированы непосредственные результаты лечения НЛ — ПГО, ПЦО, частичный ци-тогенетический ответ (ЧЦО), МО.
Результаты. Через 3 мес после начала лечения НЛ 800 мг/сут ПГО достигнут у 83 % пациентов, у 31 (70,5 %) пациента достигнут большой цитогенетический ответ (БЦО): ПЦО — у 9 (20,5 %) пациентов, ЧЦО — у 22 (50 %). К 12 мес ПЦО составил 64 % у 28 пациентов, к 18 мес — 90 % у 39 пациентов, к 24 мес — 100 %. Большой МО к 12 мес терапии получен у 3 (6,8 %) пациентов, к 18 мес — у 33 (75 %) пациентов, к 24 мес — у 44 (100 %) пациентов. Полный МО получен к 24 мес у 11 (25 %) пациентов. На фоне лечения НЛ прогрессии заболевания до ФА бластного криза не наблюдалось. У 1 пациентки в ХФ отмечалась первичная цитогенетическая и молекулярная резистентность к НЛ, у 5 (11,4 %) пациентов — гематологическая токсичность III степени, у 3 — негематологическая токсичность П—Ш степени (у 1 пациента — развитие диффузного узлового зоба, у 1 — повышение уровня липазы, у 1 — повыше-
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
