CC BY
32
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
33
РЭС печени, селезенки и лимфатических узлов. лись от умеренных изменений, вызываемых “ТФ + АК”
Выводы. Изменения внутренних органов собак при или ТФ в тех же дозах, и согласуются с результатам отчета сочетанном применении каталитической системы “ТФ + в ФК М3 РФ по исследованию влияния ТФ и “ТФ+АК” на АК” с СВЧ-гипертермией в дозах 16 и 5,5 мг/кг не отлича- внутренние органы собак.
ДЕЙСТВИЕ ДИКАРБАМИНА НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ ИНТЕРФЕРОНА
*В.В. Мещерикова, *Е.М. Трещалина, **В.Е. Небольсин *Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
**000 “Фарминтерпрайсез”
Задачей исследования было изучение пролиферативной активности клеток меланомы под влиянием препарата дикарбамин и его сочетания с а-интерфероном.
Материал и методы. Опыты проведены на постоянных клеточных культурах мышиной меланомы В-16 и меланомы человека Ме1-5, растущих в виде монослоя. Дикарбамин (Д) переводили в маточный раствор (1000 мкМ), стерилизовали через фильтры с <1=0,22 мк и разводили до нужных концентраций. Интрон (ИН) вводили в концентрациях 70-700 МЕ/мл. Пролиферативную активность клеток определяли по начальной скорости размножения и оценивали по количеству клеток в микроколониях в первые дни после воздействия в двух группах: группа 1 - с препаратами, группа 2 - контроль без препаратов. Об отсутствии токсичности выбранных концентраций препаратов судили по выживаемости клеток после воздей-
ствия в сравниваемых группах.
Результаты. Показано, что 72-часовая инкубация клеток В-16 с 1 мкМ Д или 7 МЕ/мл ИН приводила к задержке скорости роста клеток в микроколониях на ~50% по сравнению с контролем, в случае Д+ИН рост микроколоний снижался до -26%. Аналогичное взаимодействие Д+ИН было получено при других концентрациях препаратов в среде, как для клеток В-16, так и для клеток Ме1-5, причем Д в сравнении с ИН ингибировал скорость роста колоний в более широком диапазоне концентраций.
Заключение. Таким образом, установлено, что дикарбамин в широком диапазоне концентраций обладает способностью замедлять скорость размножения клеток мышиной меланомы В-16 и Ме1-5 человека в первые дни после воздействия. Эффективность сочетанного применения ди-карбамина и интрона носит аддитивный характер.
НОВЫЕ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРЫ ДЛЯ ФДТ РАКА НА ОСНОВЕ ПРИРОДНОГО БАКТЕРИОХЛОРОФИЛЛА А
А.Ф. Миронов1, М.А. Грин1, Т.А. Кармакова2, А.Д. Плютинская2,
Р.И. Якубовская2, А.В. Феофанов3, П. Вини4 1 Московская государственная академия тонкой химической технологии
им. М. В. Ломоносова, пр. Вернадского, 86, 119571, Москва 2Научно-исследовательский онкологический институт им. П. А. Герцена,
2-й Боткинский проезд, д. 3, 125284, Москва
3 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, ул.
Миклухо-Маклая, 16/10, 119871, Москва
4 Центр молекулярной биофизики Национального центра научных исследований Франции,
г. Орлеан
Отличительной особенностью бактериохлорофилла а и его производных является наличие в электронном спектре интенсивной полосы поглощения в области 770 нм. Свет с подобной длиной волны достаточно глубоко проникает в ткани, что существенно увеличивает эффективность ФДТ рака. Кроме того, наличие ФС, поглощающих в указанной области, позволяет использовать доступные и сравнительно дешевые полупроводниковые лазеры.
Исходный бактериохлорофилл а получен из биомассы Шюс1оЬас1ег сарэи^ШБ по разработанной нами технологии. Последующее окисление бактериохлорофилла позволило получить ключевое в данном синтезе соединение - бак-
териопурпурин. Последний обладает хорошими спектральными и фотофизическими характеристиками, но недостаточно устойчив в водных растворах.
Для повышения стабильности нами был разработан метод замены ангидридного кольца в бактериопурпурине на имидное. Синтезирована группа циклоимидов с различными заместителями в основном макроцикле и при атоме азота добавочного имидного кольца. Это позволило получить не только более устойчивые соединения, но и существенно улучшить их спектральные характеристики. Основной максимум поглощения этих соединений смещен, по сравнению с исходным бактериохлорофиллом, в ближнюю
№1/том1/2003
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
34
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ
ИК-область на 30-40 нм.
Изучена фото- и цитотоксичность синтезированных производных бактериохлорофилла на культуре аденокарциномы легкого человека А 549. В зависимости от характера заместителей и их взаимного расположения полученные соединения могут быть разделены на три группы.
В первую группу включены вещества, в которых можно четко выделить гидрофильную (обычно гидроксилсодержащие заместители) и гидрофобную части молекулы, причем указанные участки располагаются на наибольшем удалении друг от друга. Для данных соединений характерна очень высокая фототоксичность (ИК50 0,041-0,077 мкМ) в сочетании с низкой темновой токсичностью (>> 3-5 мкМ).
Вторая группа веществ сохраняет основные структурные особенности первой, но гидроксилсодержащие заместители в этом случае заменены на менее полярные группы, такие, например, как ацетильная. Фототоксичность подоб-
ных соединений лежит в пределах ИК50 0,11-0,40 мкМ, тем-новая 4-5 мкМ, а их соотношение составляет примерно 1/10.
Третью группу представляют гидрофобные соединения, в которых нельзя выделить полярные участки молекулы. Например, это могут быть производные бактериохлорофилла, в которых ацетильная группа замещена на ви-нильную. Соединения характеризуются низкой фототоксичностью и сравнительно высокой цитотоксичностью, причем их соотношение может достигать 0,3-0,5.
Методом конфокальной флуоресцентной микроскопии показано, что синтезированные циклоимиды бактериохлорофилла имеют смешанное диффузно-гранулярное распределение в цитоплазме клеток.
Порученные результаты свидетельствуют о высокой перспективности циклоимидов бактериохлорофилла в качестве новой группы эффективных фотосенсибилизаторов для ФДТ рака.
ПРОТИВОБАКТЕРИАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ АСКОРБИГЕНА И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА АЛОПЕЦИЮ МЫШЕЙ, ВЫЗВАННУЮ ПРИМЕНЕНИЕМ ЦИКЛОФОСФАМИДА
Е.П. Мирчинк, Е.Б. Исакова, Э.Р. Переверзева, В. М. Бухман ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе, РАМН, Москва
Цель работы. Выявление некоторых биологических свойств аскорбигена.
Методы. Моделирование стафилококкового сепсиса и экспериментальной алопеции у новорожденных мышат.
Результаты. В результате орального заражения 7-8 дневных мышат Staphylococcus aureus в дозе 5x106 КОЕ отмечалась гибель 30% животных. Предварительное введение аскорбигена внутрь в дозе 100 мг/кг течение 5 дней предотвращало гибель животных и сопровождалось снижением интенсивности высева стафилококка их внутренних органов в 2 раза, а из крови в 3 раза по сравнению с контролем.
Однократное внутрибрюшинное введение мышатам циклофосфамида в дозе 200 мг/кг приводило к полной потере волосяного покрова. Предварительное введение аскорбигена в дозе 100 мг/кг в течение 5 дней до инъекции цитостатика снижало интенсивность алопеции, а последующее введение аскорбигена приводило к восстановлению волосяного покрова на 3-4 дня раньше животных контрольной группы. Это подтверждено морфологическими
исследованиями. В группе положительного контроля (мыши, получившие циклофосфамид без аскорбигена) в коже было найдено истончение слоя эпидермиса, умеренный отек и фрагментации коллегановых волокон дермы. В части волосяных фолликулов волос отсутствовал. При этом отдельные клетки камбиального слоя и мышца, поднимающая волос, находились в состоянии атрофии. У мышей, получавших аскорбиген, структура кожи не отличалась от нормы.
Выводы. Так как в эксперименте на мышатах показано, что аскорбиген снижает обсемененность внутренних органов стафилококком, он может быть рекомендован для клинического изучения в терапии стафилококкового сепсиса.
Способность аскорбигена снижать выраженность алопеции и стимулировать восстановление волосяного покрова на фоне применения циклофосфамида может быть использована в онкологической клинике для реабилитации пациентов, получающих интенсивную химиотерапию, и улучшения их качества жизни.
ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА ДИКАРБАМИН НА КИНЕТИКУ ПОПУЛЯЦИИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК
Т. Г. Николаева, Я.В. Добрынин, И. П. Брызгалов, Е.М. Трещалина Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей, лаборатория фармакоцитокинетики
Задачей исследования было изучить влияние дикарба-мина на популяционный состав и кинетику клеточного цикла опухолевых клеток в перевиваемой опухоли животных и гетеротрансплантируемой меланоме человека. Изучить комбинированное действие дикарбамина, циклофос-фана и цисплатина на популяцию опухолевых клеток в перевиваемой опухоли.
Опыты ставили на перевиваемой опухоли легких Льюис (ЬЬС) мышей и перевиваемой на бестимусных мышах меланоме человека (штамм-6).
ДНК-цитометрический анализ проводили на проточном цитофлуориметре ІСР-22 (Германия). ДНК окрашивали специфическим флуоресцентным красителем этидиум-бромидом и антибиотиком митрамицином. Уровень лю-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№1/том1/2003
