УДК 619:612.0.15.030.031
С. Ю. Смоленцев, Э. К. Папуниди, Г. Р. Юсупова, А. Х. Волков, Р. Э. Хабибуллин
НОРМАЛИЗАЦИЯ ИММУНИТЕТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРЕПАРАТАМИ
«ИММУНОФЕРОН» И «РИБОТАН»
Ключевые слова: иммунитет, повышение, показатель, иммуноферон, риботан, крупный рогатый скот.
Проведенные исследования показали, что при применении стельным коровам иммуностимуляторов «Иммуноферон» и «Риботан» отмечается достоверное повышение в сыворотке крови коров и полученных от них телят иммуноглобулинов А, Ми G, а также повышается лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови, увеличивается фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. Было отмечено и увеличение количества Т и В-лимфоцитов.
Key words: immunity, increase, indicator, immunoferon, ribotan, cattle.
The conducted researches have shown that at application of immunostimulators «Immunoferon» and «Ribotan» to pregnant cows is marked authentic increase А, M and G antibodies in blood whey of cows and calves, and also raises lysozyme and bactericidal activity of blood whey, increases phagocytosis index and phagocytosis number. Also the increase in Т and В-lymphocytes quantity has been noted.
Введение
Иммунитет является одной из важнейших характеристик для всех живых организмов, созданных в процессе эволюции. Иммунная система обеспечивает защиту организма от инфекций [2]. Состояние иммунной системы, как и любого другого органа, характеризуется комплексом морфологических, функциональных и клинических показателей, присущих иммунной системе в норме, и они определяют иммунный статус [3]. Изменение какого-либо одного или нескольких из этих показателей свидетельствует о нарушении иммунного статуса, то есть отклонении его от нормы, и трактуется как иммунодефицит [1].
Проблема иммунодефицита представляет интерес для ветеринарных врачей в связи с неуклонным ростом инфекционно-воспалительных заболеваний, склонных к хроническому течению на фоне низкой эффективности проводимой базовой терапии, бактериальных и вирусных заболеваний, обуславливающих высокий уровень заболеваемости, и даже смертности [4].
Целью данных исследований явилось изучение влияния иммуностимуляторов
«Иммуноферон» и «Риботан» на организм коров.
Материалы и методы
Исследования были проведены в условиях фермы крупного рогатого скота ООО «Молочные продукты» Советского района Республики Марий Эл.
Опыт был проведен на коровах черно-пестрой породы, находящихся во второй половине стельности, для этого были сформированы 3 группы по 5 животных в каждой. Животным первой группы вводили препарат «Иммуноферон», внутримышечно в дозе 10 мл на животное, однократно. Второй группе вводили подкожно препарат «Риботан» двукратно в дозе 5 мл на животное и с интервалом 48 часов. Третья группа служила контролем и содержалась на обычном рационе.
В крови определяли содержание иммуноглобулинов А, М, в; количество Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов; бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови; фагоцитарный индекс и число.
Результаты исследований
В ходе исследования было отмечено, что содержание иммуноглобулинов А в крови коров достоверно увеличилось на 15-й день в первой группе на 4% (р<0,05), во второй группе - на 12,8% (р<0,05). На 45-й день исследований их уровень составил в первой группе 2,28±0,05 мг/мл (р<0,01), во второй - 2,16±0,06 мг/мл (р<0,01). На 60-й день содержание иммуноглобулинов А было выше (р<0,01) первоначальных данных в первой группе на 14% (2,14±0,04 мг/мл), во второй - на 17% (2,09±0,02 мг/мл), а в контрольной группе их уровень составил 1,86±0,04 мг/мл.
Концентрация иммуноглобулинов М увеличилось на 15-ый день в первой группе на 9% (р<0,05), во второй - 18,5% (р<0,05). На 60-й день их содержание составило в первой группе 2,65±0,08 мг/мл (р<0,01), во второй - 2,59±0,05 мг/мл (р<0,01), что в свою очередь выше фонового показателя на 13 и 28,5% соответственно.
Аналогичная картина отмечалась и при анализе содержания иммуноглобулинов в в сыворотке крови. Их уровень к концу исследования составило в первой группе 18,01±0,73 мг/мл (р<0,001), во второй - 17,95±0,68 мг/мл (р<0,001).
В контрольной группе содержание иммуноглобулинов М и в составило на 60-й день 2,30±0,05 мг/мл и 16,95±0,33 мг/мл.
Бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови достоверно повышалась в ходе всего исследования во всех опытных группах (Таблица 1). Так, бактерицидная активность сыворотки крови составила на 60-й день в первой группе 46,16±1,05% (р<0,05), во второй -48,35±2,32% (р<0,05), в третьей - 48,09±1,19%
(р<0,05). А лизоцимная активность сыворотки крови на 60-й день составила в первой группе 38,02±1,14% (р<0,05), во второй - 39,31±0,63% (р<0,05) и в третьей - 40,06±0,99% (р<0,05), что выше фонового показателя соответственно в 1,08; 1,09 и 1,14 раза.
Фагоцитарное число достоверно (р<0,05) увеличилось на 15-й день в первой группе на 6,7% (48,11±1,44) и во второй - 11,2% (49,05±2,05). На 60-й день исследований фагоцитарное число
составило в первой группе - 49,43±1,04 (р<0,01), во второй - 49,11±1,56 (р<0,01).
Фагоцитарный индекс также повысился во всех опытных группах и составил на 60-й день исследований 4,26±0,09 и 4,12±0,04 соответственно в первой, второй и третьей группах опыта (р<0,01). В контрольной группе фагоцитарный индекс и фагоцитарное число также остались на низком уровне.
Таблица 1 - Динамика изменения бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, фагоцитарного числа и индекса в крови коров, п=5
Группа Срок исследования, сут.
фон 15 45 60
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
Первая 43,89±2,11 47,11±1,77+ 46,00±2,19+ 46,16±1,05+
Вторая 44,05±1,98 48,02±1,41+ 47,18±1,03+ 48,35±2,32+
Контрольная 44,19±1,95 43,74±1,34 43,55±1,93 43,81±2,24
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
Первая 35,02±1,54 39,14±1,91+ 38,21±0,94+ 38,02±1,14+
Вторая 36,11±1,10 40,23±1,32++ 41,08±1,01++ 39,31±0,63+
Контрольная 34,08±2,28 35,01±2,03 33,12±0,88 34,14±1,01
Фагоцитарное число
Первая 45,07±0,70 48,11±1,44+ 47,08±1,06+ 49,43±1,04++
Вторая 44,10±1,43 49,05±2,05+ 48,13±2,11+ 49,11±1,56++
Контрольная 45,18±1,09 44,32±0,97 44,00±0,71 43,25±0,92
Фагоцитарный индекс
Первая 3,22±0,06 3,93±0,04+ 4,31±0,04++ 4,26±0,09++
Вторая 2,96±0,03 4,01±0,03++ 4,18±0,11++ 4,12±0,04++
Контрольная 3,31±0,05 3,27±0,07 3,36±0,09 3,34±0,04
Примечание: + - р<0,05; ++- р<0,01; *- р<0,001 уровень значимости критерия достоверности по сравнению с контрольной группой (аналогично для последующих таблиц)
Относительное количество Т-хелперов на 15 день увеличилось по сравнению с фоновым показателем в первой группе в 1,13 раза (р<0,01), во второй - 1,13 раза (р<0,001). На 45-ый день их количество составило в первой группе 56,6± 1,77% (р<0,05) и во второй - 60,1±1,62% (р<0,01). На 60-ый день исследований относительное количество Т-хелперов было выше фонового показателя в первой группе в 1,17 раза (р<0,001) и во второй - 1,15 раза (р<0,001). Абсолютное количество Т-хелперов также увеличилось на 60-ый день по сравнению с фоновым показателем в перовой группе в 1,17 раза (р<0,001), во второй - 1,16 раза (р<0,001).
Относительное количество Т-супрессоров на 15 день увеличилось в первой группе в 1,15 раза (р>0,05) и во второй - 1,15 раза (р>0,05). На 45-ый день их относительное количество составило 29,1±0,88% (р<0,01) и во второй - 31,5±0,56% (р<0,001). На 60-ый день их уровень был выше фонового показателя в первой группе в 1,17 раза (р>0,05), а во второй - 1,24 раза (р<0,001). Абсолютное количество Т-супрессоров на 60-ый день было достоверно (р<0,001) выше фонового показателя в первой группе в 1,38 раза (0,90±0,14-109/л, во второй - 1,30 раза (1,01±0,06-109 /л).
В контрольной группе абсолютное и относительное количество Т-хелперов и Т-
супрессоров по-прежнему находилось на низком уровне в период всего эксперимента.
Относительное количество Т-лимфоцитов также увеличилось в ходе исследований и составило на 60-ый день в первой группе 62,1± 1,19% (р<0,001), а во второй - 59,4±2,05% (р<0,001), что в свою очередь выше первоначального показателя соответственно в 1,18 и 1,21 раза.
Абсолютное количество Т-лимфоцитов было выше (р<0,001) на 60-ый день по сравнению с контрольной группой в 1,21 и 1,19 раза соответственно в первой и второй группах. Относительное количество В-лимфоцитов на 15 -ый день составило в первой группе 30,7±2,03% (р<0,01), во второй - 29,1±1,12% (р<0,01). На 45-ый день их количество было выше фонового показателя в первой группе в 1,35 раза (р<0,001), а во второй -1,43 раза (р<0,001). На 60-ый день их количество составило в первой группе 33,5±1,21% (р<0,001), а во второй - 34,6±2,11% (р<0,001).
Абсолютное количество В-лимфоцитов на 60-ый день был выше первоначального показателя в первой группе в 1,26 раза (р>0,05) и во второй - 1,39 раза (р<0,05). В контрольной группе относительное и абсолютное количество В-лимфоцитов составило на 60-ый день соответственно 25,5±0,19% и 0,99±0,02-109 /л
Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, полученных от опытных и контрольных коров представлены в таблице 2. Из таблицы видно, что на 8-10 день концентрация иммуноглобулинов А было выше (р<0,01) по сравнению с контрольной группой на 65,2% и 72,3% соответственно в первой и второй группах. На 30-32
Таблица 2 - Динамика содержания иммуноглобулинов
сутки концентрация иммуноглобулинов А была достоверно выше (р<0,01) в первой группе на 85,3%, во второй - 91,1% по сравнению с контрольной группой. Уровень иммуноглобулинов М также был выше у телят, полученных от опытных коров, в ходе всего исследования.
в крови телят, п=5
Группа Сроки исследования, возраст телят в днях
8-10 15-17 30-32
Иммуноглобулины А, мг/мл
Первая 1,85±0,02++ 1,90±0,01++ 1,89±0,03++
Вторая 1,93±0,04++ 1,96±0,02++ 1,97±0,04++
Контрольная 1,12±0,03 1,03±0,02 1,02±0,04
Иммуноглобулины М, мг/мл
Первая 2,13±0,03* 2,17±0,02* 2,15±0,01*
Вторая 2,16±0,02* 2,14±0,04* 2,19±0,03*
Контрольная 1,32±0,03 1,24±0,03 1,28±0,04
Иммуноглобулины в, мг/мл
Первая 12,08±0,54* 13,11±0,45* 13,22±0,63*
Вторая 11,58±0,33* 12,26±0,27* 12,31±0,40*
Контрольная 7,27±0,26 7,92±0,21 7,21±0,24
На 8-10 день концентрация иммуноглобулинов в составила в первой группе 12,08±0,54 мг/мл (р<0,001), во второй - 11,58±0,33 мг/мл (р<0,001), третьей - 16,31±0,18 мг/мл (р<0,001), а в контрольной группе 7,27±0,26 мг/мл. На 15-17 день данный показатель был достоверно выше (р<0,001) контрольной группы на 65,5%; 54,8% и 112,4% соответственно в первой, второй и третьей группах. Аналогичная картина была отмечена и при анализе содержания иммуноглобулинов в в сыворотке крови телят на 30-32 сутки.
Бактерицидная активность сыворотки крови на 8-10 день была достоверно выше (р<0,01) показателя контрольной группы в 1,27 и 1,20 раза соответственно в первой и второй группах. На 15-17 день бактерицидная активность сыворотки крови составила в первой группе 59,1±3,95% (р<0,01), а во второй - 57,5±2,64% (р<0,01). На 30-32 сутки данный показатель составил в первой группе 59,9±1,88% (р<0,01) и во второй - 58,2±2,35% (р<0,01), а в контроле - 43,2±2,85%.
Лизоцимная активность сыворотки крови опытных телят также была выше по сравнению с контрольной группой. Так на 30-32 сутки лизоцимная активность сыворотки крови была выше (р<0,01) в первой группе в 1,42 раза, во второй - 1,33 раза, по сравнению с показателем контрольной группы.
В первой группе на 8-10 день фагоцитарное число и фагоцитарный индекс составили 6,22±0,45 (р<0,001) и 2,65±0,03 (р<0,01). Во второй соответственно 6,38±0,50 (р<0,001) и 2,80±0,06 (р<0,01). На 15-17 день исследований данные показатели были выше по сравнению с контрольной группой в первой группе соответственно в 1,82
(р<0,001) и 1,48 раза (р<0,01), во второй - 1,72 (р<0,001) и 1,55 раза (р<0,01), а в контрольной группе они составили на 30-32 сутки 3,97±0,27 и 1,87±0,02.
Относительный уровень Т-лимфоцитов на 30-32 сутки был достоверно выше (р<0,001) по сравнению с данным показателем контрольной группы в 1,43 и 1,37 раза соответственно в первой и второй группе соответственно. Абсолютный уровень Т-лимфоцитов составил на 30-32 сутки в первой группе 2,94±0,01-109 /л (р<0,001), во второй -2,90±0,03-109 /л (р<0,001), а в контроле -2,41±0,01-109 /л.
Относительный и абсолютный уровни В-лимфоцитов на 30-32 сутки были выше (р<0,05) контрольной группы соответственно в 1,22 и 1,27 раза в первой группе; 1,22 и 1,23 раза во второй группе.
Относительные уровни Т-хелперов и Т-супрессоров в крови телят на 30-32 сутки также были достоверно выше по сравнению с контрольной группой и составили в первой группе 52,0±1,06% (р<0,05) и 35,6±1,11% (р<0,05), во второй -48,1±2,00% (р<0,05) и 33,3±0,68% (р<0,05), а в контроле данные показатели составили соответственно 40,0±1,96% и 27,8±0,77%.
Заключение
Таким образом, результаты исследований показали, что применение стельным коровам препарата «Риботан» и «Иммуноферон» способствует повышению специфической и не специфической резистентности организма как коров, так и полученных от них телят.
Литература
1. Островский, М. Иммунитет телят / М. Островский // Животноводство России.- 2007.-№ 2.-С.49-50.
2. Погодаев, В.А. Использование комплексного иммуномодулятора в скотоводстве / В.А. Погодаев, Б.А. Айсанова // Зоотехния.- 2008.-№ 7.-С.6-7.
3. Морякина, С.В. Патология репродуктивной функции у молочных коров / С.В. Морякина // Зоотехния.- 2008.-№ 2.-С.16.
4. Яранцева, С.Б. Общее состояние и показатели естественной резистентности / С.Б. Яранцева // Сельскохозяйственная биология.- 2008.-№ 6.-С.91-95.
© С. Ю. Смоленцев - д-р биол. наук, доцент каф. технологии производства продукции животноводства, Марийский государственный университет, [email protected]; Э. К. Папуниди - д-р биол. наук, профессор каф. ветеринарно-санитарной экспертизы, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана; Г. Р. Юсупова - д-р биол. наук, доцент каф. ветеринарно-санитарной экспертизы, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана, [email protected]; А. Х. Волков - д-р ветеринарных наук, профессор, зав. каф. ветеринарно-санитарной экспертизы, Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана; Р. Э. Хабибуллин - канд. техн. наук, доцент каф. технологии мясных и молочных продуктов КНИТУ, [email protected].
© S. Y. Smolentsev - Dr.Sci.Biol., associate professor of the production technology of production of animal husbandry, Mari state university, [email protected]; E. K. Papunidi - doctor of biological Sciences, professor of the Department of veterinary-sanitary examination, Bauman Kazan State Academy of Veterinary Medicine; G. R. Yusupova - doctor of biological Sciences, associate professor of the Department of veterinary-sanitary examination, Bauman Kazan State Academy of Veterinary Medicine; A. H. Volkov - doctor of veterinary sciences, professor, head of the Department of veterinary-sanitary examination, Bauman Kazan State Academy of Veterinary Medicine; R. E. Khabibullin - candidate of technical sciences, associate professor of the Department of meat and milk products technology, KNRTU.