CC BY
6
АктуальН проблеми сучасно!' медицины
DOI 10.31718/2077-1096.19.2.107 УДК: 616.61 - 001.17 Басараб Я.О.
NO-ЕРПЧНА СИСТЕМА В ТКАНИНАХ НИРОК ПРИ ОП1КОВ1Й ХВОРОБ1
Укра'шська медична стоматологiчна академiя, м. Полтава
Мета досл'дження - вивчення стану NO-ергiчноУ системи в тканинах нирок щур'в при експеримен-тальнй опковй хворобi. Матерiали та методи. Експерименти виконан!' на статевозрлих щурах-самцях. Опкову хворобу моделювали за методом Довганського шляхом занурення ептьовано'У пове-рхнi шк'ри задньо'У юн^вки експериментальних тварин в гарячу воду (t 70-750С) nid легким ефiрним наркозом, протягом 7 сек. Розмiр дтянки пошкодження визначали в залежностi в'д площi шюряного покриву, яка в середньому становила 12-15% поверхн тла тварини. Площу ураження розраховува-ли за допомогою спец'ально'У таблиц Кочетыгова. Пстологiчне досл'дження пошкоджено'У шк'ри свi-дчило, що при вищезазначених умовах утворювався опк IIIA-Б ступеня, що, зг/'дно до сучасних уяв-лень, е стандартною моделлю розвитку оп'ковоУ хвороби в експеримент!'. Щурiв декаптували пд ефiрним наркозом через 1,7,14,21 д'б, що, за сучасними уявленнями, в'дпов'дае стад'ям шоку, ран-ньо'У i п'зньо'У токсемИ i септикотоксем'УУ. Для о^нки стану NO-ергiчноУ системи визначали актив-нсть NO-синтази (КФ 1.14.13.19) та вмсту н'/трит'в в тканинах нирок. Результати. В залежност'1 в 'д стада оп'ковоУ хвороби змни в NO -ергiчнiй системi мали сво'У особливост'1. Так в нирках, на 1-у добу, в стадю оптового шоку активнсть NOS збльшувалась максимально, при цьому пк збль-шення вмсту нiтритiв спостергався на 7-у добу, в стадю ранньо'У токсем'УУ. Висновки. Таким чином, в умовах тривало'У оп'ковоУ хвороби в'дзначалось пдвищення активност'1 NO-ергiчноУ системи в нирках щур'в. Це можна пояснити актива^ею запальних процес'т у нирках в умовах оп 'ковоУ хвороби та накопиченням NO2- у нирках. Ключов1 слова: NO-ерпчна система, нирки, откова хвороба.
Дана робота виконана в рамках НДР «Загальнi закономiрностi патологiчних змн при експериментальнiй опжовш хворобi та розробка спосо6!6 iх корекцИ»
Вступ
Ошкова травма в розвинених краТнах е одним iз самих розповсюджених в^фв пошкоджень мирного та военного часу [6, 9]. За даними Всесв^-ньоТ оргашзаци охорони здоров'я (ВООЗ) ошки стабтьно займають трете мюце в структурi травматизму; на термiчнi пошкодження приходиться 6% вщ уах травм, при цьому ктькють постраж-далих в промислово розвинених краТнах постш-но зростае [5,6].
Роль N0-ерriчноТ системи при ушкодженш рн зномаштних оргашв досить суперечлива, було описано як шкщлив^ так i корисш ефекти N0 [5,11,12]. Збтьшуеться ктькють дослщжень про роль N0 в порушены функцш оргашв при ошках. Як було нещодавно встановлено, N0 е важли-вим регулятором нирковоТ гемодинамки i гломе-рулярноТ фтьтрацп. Проте вплив ошковоТ хвороби в рiзнi ТТ стади на метаболiзм тканин нирок, зокрема, на N0-ергiчну систему вивчений недо-статньо.
Мета дослщження
Вивчення стану N0-ергiчноТ системи в тканинах нирок щурiв при експериментальнш ошковш хворобк
Матерiали
Експерименти щурах-самцях лшп Вютар масою 200-220 г. Ош-кову хворобу моделювали за методом Довганського [1] шляхом занурення ешльованоТ поверхш шюри задньоТ кш^вки експериментальних тварин в гарячу воду ^ 70-750С) пщ легким ефiрним
методи
виконаш на статевозртих
наркозом, протягом 7 сек. Розмiр дтянки пошкодження визначали в залежносп вщ площi шюряного покриву, яка в середньому становила 12-15% поверхш тта тварини. Площу ураження розраховували за допомогою спе^альноТ таблиц Н.И. Кочетыгова [2].
Пстолопчне дослщження пошкодженоТ шюри свщчило, що при вищезазначених умовах утворювався ошк ША-Б ступеня, що, згщно до сучасних уявлень, е стандартною моделлю розвитку ошковоТ хвороби в експеримент [3]. Щурiв дека-штували пщ ефiрним наркозом через 1,6,12 годин та 1,2,3,5,7,10,14,21,28 дiб, що, за сучасними уявленнями [3], вщповщае стадiям шоку, ранньоТ i пiзньоТ токсемiТ i септикотоксемп.
Для оцiнки стану N0-ергiчноТ системи визначали активнють N0-синтази (КФ 1.14.13.19) та вмюту нiтритiв в тканинах слинних залоз [ 7,9].
Результати та 1х обговорення
Активнють N0-синтази у тканинах нирок щу-рiв зростала у порiвняннi з контролем у 2,34 рази (р<0,05) на 1-у добу ЕОХ, на 7-у добу - у 2,08 рази (р<0,05), на 14-у добу - у 2,02 рази (р<0,05), на 21-у добу - у 1,94 рази (р<0,05), на 28-у добу - у 1,68 рази (р<0,05). Найвищi показ-ники активност N0-синтази припали на 1-у та 7-у добу ошковоТ хвороби, що вщповщае стадiям ошкового шоку та ранньоТ токсемiТ (табл.).
Рiвень нiтритiв у тканинах нирок щурiв збть-шився у порiвняннi з контролем у 2,34 рази (р<0,05) на 1-у добу ЕОХ, на 7-у добу - у 3,56 рази (р<0,05), на 14-у добу - у 2,95 рази (р<0,05), на 21-у добу - у 2,47 рази (р<0,05), на
В1СНИК Украхнська медична стоматологгчна академхя
28-у добу - у 1,91 рази (р<0,05), що свщчить про ошковоТ' хвороби, що вщповщае ранньоТ та шз-розвиток нiтрозативного стресу. Найвищi показ- ньоТ токсемiТ (табл.). ники вмюту нiтритiв припали на 7-у та 14-у добу
_ Таблиця
Актившсть NO-синтази та вмст [NO2 ] в тканинах нирок щур'в при опковй хворобi, (М±т)
Група тварин Активнють NO-синтази, мкмоль/хвмг протешу Вмют [NO2-], мкмоль/г тканини
1. Контроль (n=7) 1,94±0,24 0,023±0,003
2. ЕОХ 1-а доба (n=7) 4,54±0,14* 0,054±0,005*
3. ЕОХ 7-а доба (n=7) 4,05±0,73* 0,082±0,005*
4. ЕОХ 14-а доба (n=7) 3,92±0,18* 0,068±0,004*
5. ЕОХ 21-а доба (n=7) 3,71±0,23* 0,057±0,008*
6. ЕОХ 28-а доба (n=7) 3,26±0,55* 0,044±0,006*
Прим1тка: n - кльксть тварин, в1роа1днють пор1вняно з контролем: *- p<0,05
У розвитку процеав, що супроводжуються п-поксичним стресом видтяють 2 ланки: оксида-цшну й штрозативну. Для штрозативного стресу характерним е збiльшена продукцiя та ушко-джуюча дiя оксиду азоту та його похщних. Голо-вний шлях синтезу NO - ензиматичний при учас-т ферментiв NO-синтаз, в якост субстрату в 6i-льшостi випадмв виступае аргiнiн. No може утворюватися in vivo шляхом вiдновлення жт-рат/нiтрит-анiонiв до NO гемвмiсними та мoлiбденвмiсними бiлками при гiпоксiï, бютран-сформацiя нiтриту до NO при ацидозi тканин, реакцiя мiж арпншом та пероксидом водню. Пе-релiченi механiзми мають назву метаболiчний цикл оксиду азоту. Оксид азоту та його втьно-радикальж похiднi в залежносп вiд умов утво-рення здатж виявляти регуляторнi або цитоток-сичнi ефекти. ïx цитотоксична дiя полягае в шп-буваннi активност деяких бiлкiв-ферментiв, зок-рема, внаслщок нiтрозування ïx функцiональниx груп, розщепленж нуклешових кислот, при ушкодженнi компонент ланцюга тканинного ди-хання, ушкодженж лiпiдiв [6,8,10].
Отже, в залежност вiд стадiï опiковоï хвороби змши в NO-ергiчнiй системi мали своТ особли-востi. Так, в нирках, на 1-у добу, в стадш оптового шоку активнiсть NOS збтьшувалась максимально, при цьому пк збiльшення вмiсту жт-ри^в спостерiгався на 7-у добу, в стадш ранньоТ токсемiï. Данi результати дозволяють припусти-ти, що при ошковш xворобi цитотоксичний ефект NO переважае над цитопротекторним, особливо в стадп оптового шоку i ранньоТ токсемiï.
Висновки та перспективи
Таким чином, в умовах тривалоТ ошковоТ хвороби вiдзначалось пiдвищення активност NO-ергiчноï системи в нирках щурiв. Це можна по-яснити актива^ею запальних процесiв у нирках в умовах ошковоТ хвороби та накопиченням No2-у нирках.
Очевидно, що подальше вивчення ролi NO при ошковш XBopo6i в нирках дозволить погли-бити знання про патогенез опшв, а звiдси i до появи нових методiв терапп ошковоТ хвороби.
Лтература
1. Dovganskiy AP. Materialyi k patogenezu ozhogovoy bolezni: avtoref. dis. na soiskanie uchen. stepeni doktora med. nauk: spets. 14765 «Patologicheskaya fiziologiya» [Materials for the pathogenesis of burn disease] Kishinev,1971. 32p. (Russian)
2. Kochetyigov NI. Ozhogovaya bolezn [Burn disease] Meditsina, 1973. 244p. (Russian)
3. Pasechka NV. Morfologiya kishki pri opikoviy hvorobi ta pislya korektsiyi enterosorbentami: avtoref. dis. na zdobuttya nauk.stupenya doktora med.nauk: spets. 14.03.16 «gistologiya, tsitologiya, embriologiya» [Morphology of the gut in burn disease and after correction by enterosorbents] Kyiv, 1996. 47p. (Ukrainian)
4. Avetlkov DS, Bondarenko VV, Netyuhaylo LG, Danilchenko SI. NO-ergichna sistema tkanin slinnih zaloz schuriv v umovah eksperimentalnoyi opikovoyi hvorobi [NO-ergic system of tissues of salivary glands of rats in conditions of experimental burn disease]. Visnik problem biologiyi i meditsini. 2012; 2 (93): 36-38. (Ukrainian)
5. Suhomlin TA, Netyuhaylo LG. Stan NO-erglchnoYi sistemi legen schurlv v umovah oplkovoYi hvorobi [Condition of the NO-ergic system of lungs of rats in conditions of burn disease]. Tavricheskiy mediko-biologicheskiy vestnik. 2012; 15: 315-317. (Ukrainian)
6. World Health Organization. Burns. Inf. Bulletin (Internet) WHO. 2016 Sept. - Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs365/ru/.
7. Ostrovskiy NV. et al. Sravnitelnaya otsenka vliyaniya lekarstvennyih sredstv dlya mestnogo lecheniya ran na zazhivlenie termicheskih ozhogov II-III stepeni v eksperimente [Comparative assessment of the effect of drugs for local wound healing on the healing of thermal burns II-III degree in the experiment]. Fundamentalnyie issledovaniya. 2014; 6: 512-515. (Russian)
8. Sakharov SP. On background of ambustial trauma translocation of cultivated and uncultivated bacteria in an organism of rabbits of brand «Chinchilla». Eastern Eur. Sci. J. 2014; 6: 56-60.
9. Klimenko MO, Netyuhaylo LG. OpIkova hvoroba (patogenez I lIkuvannya) [Burn disease (pathogenesis and treatment)]. Poltava, 2009: 118 p. (Ukrainian)
10. Utkin OV, Lebedev MYu, Novikov DV et al. Spektr matrichnyih RNK Fas-antigena mononuklearnyih kletok krovi i syivorotochnoe soderzhanie rastvorimogo Fas u tyazheloobozhzhennyih bolnyih [The spectrum of Fas antigen mononuclear cell count matrix RNA and serum soluble Fas content in severely burned patients]. Immunologiya. 2008; 29: 362-365. (Russian)
11. Sheridan RL, Hurford WE, Kacmorek RM. Inhaled nitric oxide in burn patients with respiratory failure. J Trauma. 1997; 42: 641646.
12. Hevel JM. Purification of the inducible murene machrophage nitric oxide synthase. J. Biol. Chem. 1991; 266 (34): 22
Реферат
NO-ЭРГИЧЕСКАЯ СИСТЕМА В ТКАНЯХ ПОЧЕК ПРИ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ Басараб Я.А.
Ключевые слова: NO-ергическая система, почки, ожоговая болезнь.
Цель исследования - изучение состояния NO-эргической системы в тканях почек крыс при экспериментальной ожоговой болезни. Материалы и методы. Эксперименты выполнены на половозрелых крысах-самцах. Ожоговую болезнь моделировали методом Довганского путем погружения эпилиро-ванной поверхности кожи задней конечности экспериментальных животных в горячую воду ^ 70-75 С)
АктуальН проблеми сучасно! медицины
под легким эфирным наркозом в течение 7 с. Размер участка повреждения определяли в зависимости от площади кожного покрова, которая в среднем составляла 12-15% поверхности тела животного. Площадь поражения рассчитывали с помощью специальной таблицы Кочетыгова. Гистологическое исследование поврежденной кожи свидетельствовало, что при вышеупомянутых условиях образовывался ожог IIIA-Б степени, что, согласно современным представлениям, является стандартной моделью развития ожоговой болезни в эксперименте. Крыс декапитировали под эфирным наркозом через 1,7,14,21 суток, что, по современным представлениям, отвечает стадиям шока, ранней и поздней токсемии и септикотоксемии. Для оценки состояния NO-эргической системы определяли активность NO-синтазы (КФ 1.14.13.19) и содержания нитритов в тканях почек. Результаты. В зависимости от стадии ожоговой болезни изменения в NO-эргической системе имели свои особенности. Так, в почках, на первый день, в стадию ожогового шока активность NOS увеличивалось максимально, при этом пик увеличения содержания нитритов наблюдался на седьмой день, в стадию ранней токсемии. Выводы. Таким образом, в условиях длительной ожоговой болезни отмечалось повышение активности NO-эргической системы в почках крыс. Это можно объяснить активацией воспалительных процессов в почках в условиях ожоговой болезни и накоплением нитрит-ионов в почках.
Summary
NO-ERGIC SYSTEM IN RENAL TISSUE DURING BURN DISEASE Basarab Ya.O.
Key words: NO-ergic system, renal tissue, burn disease.
This research aimed at studying the state of the NO-ergic system in renal tissue of rats in modelled burn disease. Materials and methods. The series of experiments were carried out on pubescent male rats. Burn disease was modeled according to the Dovgansky method: the shaved and depilated area of a hind limb of test animals was dipped into hot water (t = 70 - 75 0С) under ethereal anesthesia for 7 sec. The size of the site damaged was determined depending on the area of the skin, which averaged 12-15% of the animal's body surface. The area of the skin damaged was calculated using the special Kochetygov's table. Histological study of the damaged skin showed that under the above conditions there was a burn of IIIA-B degree that, according to modern conceptions, is considered as a standard model of the development of burn disease in the experiment. The rats were decapitated under ethereal anesthesia in 1, 7, 14, 21 days that in accordance with the modern ideas is commensurate with shock phases, early and late toxemia, and septicotoxemia. To evaluate the status of NO-ergic system, we assessed the NO-synthase activity and the nitrites content in the renal tissues. Results. Depending on the stage of burn disease, the NO-ergic system changed its characteristics. On the 1st day, at the stage of burn shock, the activity of NOS in renal tissues increased to its maximal level, while the peak increase in the content of nitrites was observed on the 7th day, at the stage of early toxemia. Conclusions. Thus, during the course of long-term burn disease, there is an increase in the activity of the NO-ergic system in kidney of rats. This can be explained by the enhancement of inflammatory processes in the kidneys under burn disease and by NO2- accumulation of in the renal tissues.
