42
ЗНиСО ИЮНЬ №С (243)
НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ СОСТОЯНИЯ АНТИОКСИДАНТНЫХ СИСТЕМ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ ПРИ ДЕЙСТВИИ БЕНЗОЛА И ХРОМА
И.В. Михайлова, Н.В. Шарапова, Л.А. Чеснокова, А.И. Смолягин, С.И. Красиков
SOME INDICATORS OF THE STATE OF ANTIOXIDANT SYSTEMS I N BLOOD RED BLOOD CELLS AND EFFECT OF BENZENE CHROMIUM
I.V. Mikhailova, N.V. Sharapova, L.A. Chesnokova, A.I. Smolyagin, S. Krasikov ГБОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации Исследовано влияние бензола и хрома на активность антиокислительных ферментов эритроцитов крови крыс Вистар. Полученные результаты показали, что бихромат калия, бензол, а также их комбинация, в целом снижали активность антиокислительных ферментов эритроцитов крови крыс, что выражалось в угнетении активности СОД и каталазы. Ключевые слова: СОД, каталаза, хром, бензол, крысы.
The influence of benzene and chromium on the activity of antioxidant enzymes of red blood cells in Wistar rats. The results showed that potassium dichromate, benzene, and their combination, in general, reduces the activity of antioxidant enzymes of red blood cells of rats, which was reflected in the inhibition of SOD activity (90, 135 per day) and catalase (45, 135 per day). Keywords: SOD, catalase, chromium, benzene, rat.
В последние годы все больше исследований посвящается качеству жизни и, в том числе, потреблению воды, соответствующей гигиеническим нормативам. Одними из достаточно распространенных загрязнителей воды являются соединения хрома и бензола, источником которых служат предприятия газодобывающей, газо- и нефтеперерабатывающей промышленности, машиностроения и автотранспорт [2, 6]. В ранее проведенных исследованиях были установлены изменения параметров иммунной системы под влиянием хрома и бензола [5]. Для расшифровки механизмов изменения параметров иммунной системы под влиянием хрома и бензола представляет интерес изучение влияния данных веществ на активность антиокислительных ферментов эритроцитов крови в условиях модельного эксперимента.
Целью данной работы явилось исследование активности СОД и каталазы эритроцитов крови крыс Вистар при длительном поступлении с питьевой водой бихро-мата калия, бензола и их комбинации.
Материалы и методы. Экспериментальные исследования проведены на 76 здоровых половозрелых крысах-самцах Вистар массой 250—300 г. Все животные были
ь± —р
3
разделены на 4 группы и содержались на стандартном пищевом рационе.
Первая группа являлась контролем. Ежедневно на протяжении 45, 90 и 135 суток животные 2-й группы вместе с водой получали бензол из расчёта 0,6 мл/кг, 3-й группы — бихромат калия из расчета 20 мг/кг, 4-й группы — смесь бихромата калия (20 мг/кг) и бензола (0,6 мл/кг). Выбор дозы, способа введения и длительности эксперимента обоснован выполненными ранее исследованиями [6]. Через 45, 90 и 135 дней животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом в соответствии с этическими нормами и рекомендациями по гуманизации работы с лабораторными животными, отраженными в «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей» (Страсбург, 1985). Активность антиоксидантных ферментов определяли в эритроцитарной массе, полученной трехкратным отмыванием крови охлажденным (5 °С) физиологическим раствором. Активность СОД определяли по скорости аутоокисления адреналина в адренохром в щелочной среде [4]. Определение активности каталазы проводили кинетическим спектрофотометрическим методом
Таблица. Влияние бензола, бихромата калия и их комбинации на состояние антиоксидантных ферментов эритроцитов крыс Вистар в течение 45, 90 и 135 дней
Группы Сроки, дни Каталаза, усл.ед.Д-Hb СОД, усл.ед.Д-Hb
Контроль n=20 257,40+8,49 226,68+25,58
45 n=7 230,36±6,72 207,97+14,40
2 группа 90 n=7 269,23+9,59* 112,12±9,55*
135 n=7 165,03±15,35*# 33,63±3,34*#
45 n=7 218,68±3,75 189,01+9,86
3 группа 90 n=7 274,79+8,04* 123,39±14,24*
135 n=7 171,93±20,85*# 124,78±53,01
45 n=7 198,85±3,55 154,70+7,39
4 группа 90 n=7 271,28+13,20* 144,52±10,68
135 n=7 224,51+42,33 26,05±2,88*#
Примечание: обозначены достоверные отличия (р < 0,05): жирным — по отношению к контролю; * — 45 и 90, 45 и 135 дней; # — 90 и 135 дней.
ИЮНЬ №6 (243)
43
прямой регистрации разложения субстрата фермента — перекиси водорода [11]. Все измерения выполнены на сканирующем спектрофотометре Genesys 5 (США). Результаты обрабатывались статистически методами с использованием пакета программ для ПК «Microsoft Excel». Для сравнения показателей в группах использовали критерий Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение. На основании проведенных исследований установлено, что по сравнению с контрольной группой крыс активность каталазы была снижена на 45 сутки (2, 3, 4 группы); на 135 сутки (2, 3 группы). При этом активность СОД на 45 сутки имела тенденцию к уменьшению, а на 90 и 135 сутки достоверно снижалась во всех группах (табл.).
Таким образом, полученные результаты показали, что бихромат калия, бензол, а также их комбинация в целом снижали активность антиокислительных ферментов эритроцитов крови крыс, что выражалось в угнетении активности СОД (90, 135 сутки) и каталазы (45, 135 сутки).
Причиной выявленных сдвигов, на наш взгляд, является активация процессов СРО, которая может быть следствием воздействия хрома как металла переменной валентности, а также бензола, биотрансформация которого осуществляется с участием свободно-радикальных механизмов [3]. Вероятный механизм снижения активности СОД может заключаться в повышенном содержании неорганических перекисей, возникающих в ответ на хроническое поступление в организм прооксидантов. В работах Кондрашова М.Н. указывалось на то, что микромолярные концентрации перекиси стимулируют СОД, а миллимолярные — ингибируют. Липидные перекиси обратимо ингибиру-ют СОД [1]. Вместе с тем менее выраженная депрессия каталазы на 135 сутки у животных, получавших смесь бихромата калия и бензола, может быть результатом снижения нагрузки на фермент из-за существенного угнетения СОД — одного из главных источников образования пероксида водорода.
Таким образом, анализ результатов исследования свидетельствует о высокой чувствительности антиокси-дантных ферментов эритроцитов к хроническому воздействию изученных веществ как индивидуально, так и сочетано. Это выражалось в снижении активности СОД, независимо от срока воздействия токсикантов, и каталазы на фоне кратковременного компенсаторного повышения ее активности на 90 сутки эксперимента у крыс. Учитывая выявленное нами ранее иммуноде-прессивное действие хрома и бензола на показатели клеточного иммунитета (количество лейкоцитов, тимо-цитов, спленоцитов, миелокариоцитов, уровень фагоцитарных показателей), полученные данные могут быть использованы для расшифровки механизмов развития дисфункции иммунной системы организма.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Кондрашев М.Н. Отрицательные аэроионы и активные формы кислорода //Биохимия. 1999. Т. 64. № 3. С. 430—432.
2. Куценко С.А. Основы токсикологии. СПб., 2004. 720 с.
3. Менщикова Е.Б. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания /Е.Б. Менщикова и др. Новосибирск: АРТА, 2008. 284 с.
4. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса ауто-окисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы //Вопр. мед. химии. 1999. Т. 45. № 3. С. 263—272.
5. Смолягин А.И., Михайлова И.В., Ермолина Е.В., Пушка-рева Л.А. Влияние соединений хрома и бензола на клеточные показатели иммунной системы и содержание микроэлементов у крыс //Гигиена и санитария. 2009. № 4. С. 75—77.
6. Утенин В.В. Гигиеническая характеристика хрома и бензола и морфофункциональные аспекты их взаимодействия на организм в условиях эксперимента. Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Оренбург, 2002. 24 с.
Контактная информация:
Михайлова Ирина Валерьевна, тел.: 8 (3532) 77-65-64, е-mail :[email protected]) Contact Information: Mikhailova Irina, phone: 8 (903) 365-49-33, е-mail: [email protected]
-V
ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ СУЩЕСТВОВАНИЯ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА Е В ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ
Е.В. Ковалевская
ASSESSING THE POSSIBILITY OF THE EXISTENCE OF THE EPIDEMIC PROCESS OF VIRAL HEPATITIS E IN THE ORENBURG REGION
E.V. Kovalevskaya
ГБОУ ВПО «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Проведен ретроспективный эпидемиологический анализ заболеваемости острым вирусным гепатитом неуточненной этиологии в г. Оренбурге с 2000 по 2010 гг. За период с июля по август 2011 г. было проведено исследование сывороток крови 474 доноров г. Оренбурга и Оренбургской области, а также 352 мигрантов, прибывших на территорию Оренбургской области, на наличие маркеров (анти-IgM, анти-IgG) вирусного гепатита Е. В ходе проведенного исследования установлена возможность наличия эпидемического процесса вирусного гепатита Е в приграничном регионе.
Ключевые слова: острый вирусный гепатит неуточненной этиологии, маркеры к вирусному гепатиту Е, мигранты, эпидемический процесс.
A retrospective epidemiological analysis of the incidence of acute viral hepatitis unspecified etiology in Orenburg in 2000 and 2010. During the period from July to August 2011 a study of blood serum of 474 donors in Orenburg and the Orenburg region, as well as 352 migrants arrived on the territory of the Orenburg region in the presence of markers (anti-IgM, anti-IgG) viral hepatitis E. During study established the possibility of an epidemic process of viral hepatitis E in the border region.
Keywords: acute viral hepatitis unspecified etiology, markers of viral hepatitis E, migrants, the epidemic process.
Значительный интерес к вирусным гепатитам, появившийся в последней четверти XX столетия, сохраняется и поныне. Несмотря на снижение уровня официально регистрируемой заболеваемости вирусными гепатитами, их повсеместное распространение, поражение трудоспособных слоев населения, развитие хронических форм, цирроза и первичного рака после некоторых этиологических форм, наибольший экономический ущерб в структуре всей инфекционной патологии обусловливают социально-
экономическую значимость и научный интерес к данной проблеме [2].
Гепатит Е причисляли к «новым» заболеваниям, что правомерно лишь в значении «недавно открытые» или «недавно описанные»; сама же болезнь, очевидно, существовала на протяжении веков, будучи скрытой под общим термином «инфекционная желтуха» [1].
Гепатит Е (ГЕ) — инфекционное заболевание с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя, характеризующееся, как правило, наличием желтушно-