CC BY
11
НАСЛЕДОВАНИЕ АЛЛОЗИМНЫХ ВАРИАНТОВ У ЛИСТВЕННИЦЫ ГМЕЛИНА
О А Я. Ларионова, Н.В. Яхнева УДК 575.1:582.475.2
Институт леса им. В.Н. Сукачева СО РАН, Красноярск
Работа выполнена при частичной финансовой поддержке СО РАН (интеграционный проект № 53)и РФФИ (грант № 03-04-49719)
Авторы выражают благодарность А.П. Абаимову за предоставленные для работы семена лиственницы Гмелина из Эвенкии
Методом электрофореза в 13% крахмальном геле исследованы ферменты эндоспермов семян 76 деревьев из трех природных популяций лиственницы Гмелина (Larixgmelinii (Rupr.) Rupr.), произрастающей в Эвенкии. Дано подробное описание электрофоретической изменчивости 10 ферментов: MDH, 1DH, GDH, G-6PD, 6-PGD, SkDH, ME, LAP. EST. GOT. Показано, что аллозимиое разнообразие этих ферментов находится под контролем 17 ген-ферментных локусов. Один из них (Mdh-1) является мономорфным, остальные локусы (Mdh-2, Mdh-3, Mdh-4, Idh, Gdh, G-6pd, 6-Pgd, Skdh Me-1. Me-2, Lap-1. Lap-2, Est-1. Got-1, Got-2, Got-3) обнаруживают изменчивость хотя бы в одной из исследованных популяций лиственницы. Анализы сегрегации подтверждают, что выявленные аллозимные варианты наследуются как моногенные признаки. Это позволяет использовать их в качестве маркеров структурных генов в генетикопопуляционных исследованиях лиственницы Гмелина.
Using the 13% starch gel electrophoresis, the enzymes of seed endosperms, collected from 76 trees of three natural populations of Gmelin larch (Larix gmelinii (Rupr.) Rupr.), were studied. A detailed analysis of electrophoretic variability of 10 enzymes: MDH, IDH, GDH. G-6PD, 6-PgD, SkDH, ME, LAP, EST, GOT is presented. It is shown that the allozyme diversity of the enzymes studied is coded 17 gene-enzyme loci. One of them (Mdh-1) is monomorphic, while the remaining loci (Mdh-2, Mdh-3, Mdh-4. Idh. Gdh, G-6pd. 6-Pgd. Skdh, Me-1, Me-2, Lap-1, Lap-2, Est-1, Got-1, Got-2, Got-3) appear polymorphic. Segregation data confirms the monogenic inheritance of the allozyme variants revealed. This allows one to use allozymes revealed in this work as a markers of structural genes in genetic and population studies of Gmelin larch.
Введение
Лиственница Гмелина является одним из основных лесообразующих видов рода Ьапх в Сибири. Она лучше других видов хвойных приспособлена к произрастанию на холодных почвах, хорошо адаптирована к суровым климатическим и почвенно-грунтовым условиям севера. Ареал лиственницы Гмелина почти полностью совпадает с зоной сплошного распространения вечной мерзлоты, а северная граница ареала повсеместно является климатическим пределом распространения древесной растительности, обусловленной недостатком тепла и коротким вегетационным периодом.
В высоких широтах Средней Сибири леса, образованные лиственницей Гмелина, составляют 81-90% покрытой лесом территории [АЬатоу й а1., 2000]. Они имеют важное биосферное
значение и в недалеком будущем могут стать
крупной сырьевой базой лесной
промышленности. Однако их генетические ресурсы практически не исследованы. Между тем знание уровня и характера распределения генетической изменчивости являются
необходимой основой для разработки научнообоснованных подходов к эксплуатации северных лесов, программ по их восстановлению и сохранению генетического разнообразия. Северные леса относятся к крайне неустойчивым экосистемам, поэтому любое, даже небольшое нарушение их экологического и генетического равновесия, может привести к необратимым отрицательным последствиям [Поздняков, 1986].
Использование изоферментов (изоэнзимов) в качестве генных маркеров позволило получить данные о состоянии генетических ресурсов
широкого ряда видов хвойных, включая
информацию о генотипическом составе
популяций, аллельном разнообразии, параметрах
генетической изменчивости, степени
внутривидовой дифференциации популяций [314]. В значительной степени это обусловлено тем, что хвойные благодаря особенностям своей системы размножения являются идеальным объектом для применения изоэнзимного метода анализа генетической изменчивости. Эндосперм семян хвойных представляет собой гаплоидную ткань, поэтому выявление аллельных изоэнзимов (аллозимов) не требует выполнения специальных скрещиваний и анализа потомства. Достаточно лишь проверить расщепление изоэнзимов среди эндоспермов семян отдельных деревьев. У гетерозиготных деревьев аллозимы будут встречаться в соотношении 1:1. Это значительно облегчает и ускоряет проведение генетических исследований в популяциях хвойных.
В последние годы появились новые возможности для изучения генетической изменчивости, основанные на анализе непосредственного носителя генетической информации - ДНК. Однако метод электрофоретического фракционирования
изоэнзимов продолжает оставаться одним из наиболее удобных и широко используемых методов в генетико-популяционных
исследованиях хвойных. Следует однако отметить, что преимущества данного метода могут быть реализованы лишь в том случае, если подтверждено менделевское наследование
выявленных в процессе электрофореза изоэнзимных вариантов ферментов.
В задачи данного исследования входило описание и изучение механизмов наследования электрофоретического разнообразия десяти ферментов лиственницы Гмелина,
произрастающей в Эвенкии, с целью выявления изоэнзимных маркеров структурных генов,
пригодных для генетико-популяционных
исследований этого вида.
Материалы и методы исследования.
Материалом для исследования послужили семена, собранные с отдельных деревьев в 3-х разновозрастных популяциях лиственницы
Гмелина, расположенных в центральной части Среднесибирского плоскогорья в пределах 25 км радиуса от места впадения реки Кочечум в Нижнюю Тунгуску (окрестности пос. Тура).
Популяция I - лиственничник брусничнолишайниковый локализован на правом берегу реки Кочечум в долине так называемого «Баженого» ручья. Этот лиственичник произрастает на вершине останцевой горы, удаленной от берега реки Кочечум на 3 км. Отбор модельных деревьев производился на склоне юговосточной экспозиции крутизной 6-10°. Географические координаты: 64°19' с.ш. и
100°07' в.д. В древесном пологе представлен только один вид: 10 Лц. Густота древостоя - 250 шт./га. Возраст отобранных деревьев варьировал от 83 до 336 лет, составляя в среднем 174 года.
Популяция II - лиственничник бруснично зеленомошный расположен на левом берегу реки Кочечум в 5 км от кромки берега в средней части горы на склоне юго-восточной экспозиции крутизной 10-12°. Географические координаты: 64° 19' с.ш. и 100° 13' в.д. В этой популяции лиственница произрастает совместно с березой (Betula pendula Both). Состав древостоя: 6Лц4Б. Возраст деревьев колеблется от 36 до 73 лет, составляя в среднем 50 лет. Густота древостоя: 750-800 шт./га.
Популяция III - лиственничник лишайниково-зеленомошный расположен в 25 км от устья реки Кочечум вверх по течению реки Нижняя Тунгуска. Отбор деревьев производился на склоне юго-восточной экспозиции крутизной 10-15°. Географические координаты: 64°17' с.ш. и 100° 14' в.д. Характерной особенностью этой популяции является преобладание в ней деревьев перестойного типа, а также присутствие в составе сообщества единичного кедра (Pimts sibirica Du Tour): ЮЛц+К. Средний возраст деревьев
составляет 204 года. Густота древостоя: 400-450 шт./ га.
В каждой из популяций было отобрано по 24-27 деревьев с наиболее обильным семеношением. Всего в исследование было включено 76 деревьев.
Перед анализом семена замачивали в дистиллированной воде в течение 24 часов. Затем эндоспермы отделяли от зародышей и растирали в 1-2 каплях экстрагирующего буфера: трис-НС! рН 7.5, в который были добавлены р~
меркаптоэтанол до концентрации 0.2% и тритон Х-100 до 1% концентрации. Продолжительность экстракции - 1 час. У одного дерева исследовали от 10 до 40 эндоспермов на каждый фермент.
Электрофоретическое разделение
экстрактов проводили методом горизонтального электрофореза в 13% крахмальном геле в 2-х буферных системах: I - трис-цитратной рН 6.2 [15] и II - трис-цитратной рН 8.5 / гидроокись лития-боратной рН 8.1 [16]. Гистохимическое
выявление ферментов после электрофореза
осуществляли по стандартным прописям [17-18] с некоторыми модификациями. Включенные в анализ ферменты и использованные для их электрофоретического фракционирования
буферные системы приведены в таблице 1.
Аллельный характер обнаруженных в процессе электрофореза вариантов ферментов устанавливали на основании изучения их сегрегации среди гаплоидных эндоспермов семян отдельных деревьев. В соответствии с менделевскими закономерностями при моногенном наследовании у деревьев, гетерозиготных по какому-либо локус> аллельные варианты ферментов (аллозимы) должны сегрегировать в соотношении 1:1.
Степень соответствия наблюдаемых соотношений аллозимов ожидаемым проверяли с помощью критерия хи-квадрат (л2).
Таблица 1 - Ферменты и буферные системы, использованные в работе
Ферменты Аббревиатура Кодовый Иомер Буферная система
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа G-6PD 1.1.1.49. I
Изоцитратдегидрогеназа ЮИ 1.1.1.42. I
Малатдегидрогеназа MDH 1.1.1.37. I
6-фосфоглюконатдегидрогеназа 6-PGD 1.1.1.44 I
Шикиматдегидрогеназа SkDH 1.1.1.25. I
Глутаматдегидрогеназа GDH 1.4.2.3. II
Лейцинаминопептидаза LAP 3.4.1.1, 11
Эстераза EST 3.1.1.1. II
Малик энзим ME 1.1.1.40 II
Глутаматоксалоацетаттрансаминаза GOT 2.6.1.1. 11
При оценке уровня полиморфизма локусов использовали два обычно применяемых критерия полиморфности: 99%-ный (частота наиболее
распространенного аллеля не превышает 99%) и 95%-ный (частота наиболее распространенного аллеля не превышает 95%). Ожидаемую гетерозиготность (частоту гетерозиготных генотипов) рассчитывали для каждого локуса по частотам аллелей [19]
Результаты и обсуждение
В ходе электрофоретического анализа десяти ферментов в эндоспермах семян лиственницы Гмелина, произрастающей в Эвенкии, обнаружено 40 различных электрофоретических вариантов. Схема, демонстрирующая расположение выявленных вариантов на геле, представлена на рисунке.
Шикиматдегидрогеназа (SkDH).
Иа гелях, окрашенных на SkDH, выявляется одна зона активности фермента. В ней обнаружено два различающихся по подвижности однополосных варианта SkDH, сегрегирующих среди эндоспермов семян гетерозиготных деревьев в соотношении 1:1, что соответствует поведению вариантов, кодируемых аллелями одного генного локуса (таблица 2). Однолокусный контроль электрофоретического разнообразия SkDH установлен также у лиственницы западной {Larix occidentalis Nutt), европейской (L. decidua Mill.), курильской (L. kurilensis Mair), японской (L. kaempferi Sarg.), Сукачева (L. sukaczewii Dyl.) [20-23]. У лиственницы американской (L. laricina (Du Roi) K. Koch) выявлено 2 зоны активности фермента, кодируемые 2-мя независимыми локусами: Skdh-
1 и Skdh-2 [24]. Локус Skdh-1 мономорфен, локус Skdh-2 обнаруживает изменчивость. У лиственницы сибирской (L. sibirica Ledeb.) из 2-х выявленных зон SkDH стабильно проявлялась лишь медленномигрирующая зона,
контролируемая локусом Skdh-2 [25].
Глутаматдегидрогеназа (GDH).
Выявляется на геле в виде узкой хорошо окрашивающейся полосы фермента, кодируемой локусом Gdh. В исследованных популяциях лиственницы Гмелина локус Gdh представлен 2-мя аллелями, продуцирующими однополосные варианты, различающиеся по
электрофоретической подвижности. У
большинства видов рода Larix генетический контроль вБИ также осуществляется одним локусом, как правило мономорфным или слабополиморфным [22,25-30].
Изоцитратдегидрогеназа (11)11).
Представлена на геле 2-мя аллозимными вариантами, контролируемыми локусом ЫЬ В изученных ранее популяциях лиственницы Гмелина [29, 31], а также у ряда других видов лиственницы [22,25,30-33] локус ЫИ мономорфен. У лиственницы западной он обнаруживает изменчивость практически во всех исследованных популяциях [20].
Малик энзим (МЕ).
Локализуется на геле в 2-х пространственно разобщенных зонах ферментативной активности, каждая из которых контролируется отдельным полиморфным локусом. Оба выявленных локуса: Ме-1и Ме-2 имеют по два аллеля. У лиственницы американской также обнаружено 2 зоны активности фермента, однако изменчивость наблюдалась только в медленномигрирущей зоне, кодируемой локусом Ме-2 [24]. У лиственницы сибирской удалось идентифицировать лишь один локус, кодирующий МЕ [26].
Малатдегидрогеназа (М БИ).
Электрофоретический спектр этого фермента состоит из 4-х пространственно разделенных зон активности, кодируемых 4-мя независимыми локусами: МёИ-1, МёИ-2, МёИ-3, МёИ-4. Локус МёИ-1, контролирующий наиболее быстромигрирующую зону фермента, является мономорфным. Остальные локусы полиморфны. Локусы М&-2 и М&-З диаллельны. Локус МёИ-4 представлен в популяциях лиственницы Гмелина 4-мя аллелями, два из которых кодируют однополосные варианты, различающиеся по подвижности, один - двухполосный вариант, а один - фенотипически не выраженный вариант. У всех исследованных до настоящего времени видов лиственницы идентифицируется 4 локуса, кодирующих МБИ [20-22, 29, 32-35].
Глюкозо-б-фосфатдегидрогеназаЮ-бРР).
При гистохимическом окрашивании фермента на геле выявляется одна зона ферментативной активности, которая как и у других видов лиственницы [20-21, 26, 34-36] контролируется локусом в-6рё. В исследованных популяциях лиственницы Гмелина локус в-6рё представлен 2-мя аллелями, продуцирующими
однополосные варианты, различающиеся по подвижности. В популяциях этого вида из Хабаровского края обнаружено 4 аллеля, один из которых кодирует вариант, не имеющий ферментативной активности [29].
б-Фосфоглюконатдегидрогеназа(б-РОР).
В результате генетического анализа электрофоретической изменчивости 6-PGD обнаружено три различающихся по подвижности однополосных варианта фермента,
контролируемых аллелями одного полиморфного локуса б-Pgd. Самый медленный из вариантов является редким. Он обнаружен лишь в одной популяции лиственницы Гмелина с частотой менее 2%. Однолокусный контроль электрофоретического разнообразия 6-PGD был установлен и при изучении других популяций этого вида [31], а также лиственницы сибирской [25]. У американской лиственницы идентифицированы 2 локуса, кодирующие 6-PGD, причем оба локуса полиморфны [24].
Эстераза (EST).
На гелях, окрашенных на EST, выявляется до 4-х зон ферментативной активности. Однако в условиях нашего эксперимента четко и стабильно проявлялась только быстромигрирующая зона Est-1. В этой зоне обнаружено 4 варианта фермента, сегрегирующих среди эндоспермов семян в соотношении близком 1:1. Один из вариантов, обозначенный на рис. цифрой 1 -двухполосный, три других - однополосные, различающиеся по подвижности. На основании данных по сегрегации предполагается, что выявленные варианты находятся под контролем независимого полиморфного локуса Est-1. У хвойных, включая и некоторые виды рода Larix, описано от 1 до 5 локусов, кодирующих
электрофоретическое разнообразие
неспецифических эстераз [5, 32-33,37-39].
Лейцинаминопептидаза (LAP).
У лиственницы Гмелина, как и у других видов лиственницы [22-24,25-26, 30, 32-33], LAP локализуется на геле в 2-х зонах, контролируемых локусами Lap-1 и Lap-2. Оба локуса изменчивы. Каждый из них представлен в изученных популяциях 2-мя аллелями, один из которых является нуль - аллелем. У лиственницы Гмелина из Хабаровского края [29] оба локуса имеют по э аллеля, а нуль - аллель обнаружен лишь по локусу Lap-1.
ГлутаматоксалоацетаттрансаминазаЮОТ).
Выявляется на геле в 3-х пространственно разделенных зонах активности фермента, которые, как показал генетический анализ, контролируются 3-мя полиморфными локусами: Got-1, Got-2, Got-3. Локусы Got-1 и Got-З имеют по 3 аллеля, локус Got-2 - два аллеля. Трех локусный контроль электрофоретической изменчивости GOT установлен и при изучении других популяций лиственницы Гмелина [29], а также у лиственницы западной [20], Сукачева [23,40], курильской и японской [22].
Анализы сегрегации подтверждают моногенное наследование выявленных у лиственницы Гмелина электрофоретических вариантов ферментов. Из представленных в таблице 2 данных по сегрегации, суммированны: для каждого типа гетерозигот, видно, что ни у одного из идентифицированных нами полиморфных локусов не наблюдалось достоверного отклонения от ожидаемого для вариантов, кодируемых аллелями одного локуса, соотношения 1:1. Значение критерия соответствия хи-квадрат (%2) варьировало от 0.125 до 2.400.
Таблица 2 - Сегрегация аллозимов среди эндоспермов семян гетерозиготных деревьев лиственницы Гмелина
Локус Аллозимы Число деревьев Соотношение Критерий х2
Mdh-2 1 2 2 17:15 0.125
Mdh-3 1 2 21 153:167 0.612
Mdh-4 1 2 3 20:25 0.556
2 3 5 63:59 0.524
2 n 2 24:20 0.364
Skdh 1 2 5 72:78 0.240
G-6pd 1 2 10 106:94 0.720
6-Pgd 1 2 7 70:85 1.452
2 3 1 13:8 1.190
Me-1 1 2 2 22:28 0.720
Me-2 1 2 7 71:83 0.935
Gdh I 2 3 36:24 2.400
Got-1 1 2 1 13:17 0.534
2 3 4 28:22 0.720
Got-2 1 2 9 130:140 0.370
Got-3 1 2 5 72:78 0.240
2 3 2 25:20 0.556
Idh 1 2 5 79:88 0,485
Est-1 1 2 2 37:31 0.529
1 3 13 95:100 0.128
2 3 1 20:25 0.556
3 4 2 52:47 0.253
Lap-1 1 n 5 80:63 2.020
Lap-2 1 n 2 50:45 0.263
Сумма dhd 119 1348:1362 0.072
Таблица 3 - Средние частоты аллелей и ожидаемая гетер озиготн ость (Не) 17 ген-ферментных локусов лиственницы Гмелина
Локус Аллель Ожидаемая гетероз и готность (Не)
1 2 3 4 n
Mdh-1 1.0000 0.0000
Mdh-2 0.9868 0.0123 0.0260
Mdh-3 0.2171 0.7829 0.3399
Mdh-4 0.0197 0.9342 0.0132 0.0329 0.1256
Skdh 0.0329 0.9671 0.0636
G-6pd 0.8684 0.1316 0.2285
Idh 0.0461 0.9539 0.0879
6-Pgd 0.0724 0.9211 0.0065 0.1464
Me-1 0.0132 0.9868 0.0260
Me-2 0.0592 0.9408 0.1114
Gdh 0.9803 0.0197 0.0387
Est-1 0.3355 0.0329 0.6184 0.0132 0.5037
Lap-1 0.9671 0.0329 0.0636
Lap-2 0.9868 0.0132 0.0260
Got-1 0.0197 0.9539 0.0264 0.0889
Got-2 0.0592 0.9408 0.1114
Got-3 0.0132 0.9013 0.0855 0.1801
Наиболее низкий уровень изменчивости среди полиморфных локусов обнаруживают локусы.МёИ-2, 8кёИ, Ьар-1, Ьар-2, Оо^1, ЫИ, Ме-
1, ОёИ. Частоты наиболее распространенных аллелей этих локусов варьируют от 0.9539 до 0.9868. Это означает, что к полиморфным их можно отнести лишь при 99%-ном критерии полиморфности. При 95%-ном критерии перечисленные выше локусы следует считать мономорфными. Расчет средней ожидаемой гетерозиготности для каждого из этих локусов показал, что в исследованных популяциях лиственницы Гмелина они изменчивы не более, чем у 8.8% проанализированных деревьев.
Локусы: МёИ-4, Оо^2, Оо^3, 6^ё, Ме-2 характеризуются средним уровнем изменчивости. Частоты преобладающих в популяциях аллелей данных локусов колеблются от 0.9013 до 0.9408, ожидаемая гетерозиготность - от 0.1114 до 0.1801. Три локуса (МёИ-3, 0-6рё, Е&-1)
относятся к сильнополиморфным локусам. У этих локусов частоты наиболее распространенных в популяциях аллелей не превышают значения
0.8684, а ожидаемая гетерозиготность имеет самые высокие значения (0.3399; 0.2285 и 0.5037 соответственно).
Заключение
В результате проведенных исследований получены данные, свидетельствующие о генетической природе электрофоретического разнообразия 10 ферментных систем лиственницы Гмелина, произрастающей в Эвенкии. Обнаруженные в процессе электрофореза изоэнзимные варианты ферментов наследуются как моногенные признаки и могут быть использованы в популяционно-генетических
исследованиях этого вида в качестве биохимических маркеров структурных генов.
Установлено, что генетический контроль выявленных аллозимов осуществляется 17-ю ген-ферментными локусами, один из которых (Mdh-1) мономорфен, остальные полиморфны, то есть представлены в популяциях несколькими аллелями. Среднее число аллелей на полиморфный локус составляет 2.44. Наиболее высокий уровень генетической изменчивости в исследованных популяциях лиственницы Гмелина обнаруживают локусы: Mdh-3, G-6pd и Est-1. Локусы: Mdh-4, Got-2, Got-3, 6-Pgd, Me-2 имеют средний уровень изменчивости, а локусы: Mdh-2, Skdh, Lap-1, Lap-2, Got-1, Idh, Me-1, Gdh относятся к слабополиморфным. Выявленные у этих локусов альтернативные аллели встречаются в популяциях с частотой не превышающей 5.% .
Библиографический список
1. Abaimov A.P., Zyryanova О.А., Prokushkin S.G., Koike T, Matsuura Y. Forest ecosystems of the cryolithic zone of Siberia; regional features, mechanisms of stability and pyrogenic changes // Eurasian J. For. Res. 2000. V.l. P. 1-10.
2. Поздняков Л.К. Мерзлотное лесоведение. Новосибирск: Наука, 1986. 192 с.
3. Yeh F., El-Kassaby Y.A. Enzyme variation in natural populations of Sitka spruce (Picea sitchensis). I Genetic variation patterns among trees from 10 IUFRO provenances // Can. J. For. Res. 1980. V.10.N.5. P.415-422.
4. Guries R.P., Ledig F.T. Genetic diversity and population structure in pitch pine (Pinus rigida Mill.) // Evoluton. 1982. V.36. P.387-402.
5. Loukas M., Vergini Y., Krimbas G.B. Isozyme variation and heterozygosity in Pinus
halepensis L. // Biochem. Genet. 1983. V.21. N.5-6. P.497-510.
6. Woods J.H., Blake G.M., Allendorf
F.W. Amount and distribution of isozyme variation in ponderosa pine from Eastern Montana // Silvae Genet. 1983. Bd.32. H.5-6. S.151-157.
7. Gullberg U., Yazdany R., Rudin D.s
Ryman N. Allozyme variation in Scots pine (Pinus sylvestris L.) in Sweden // Silvae Genet. 1985. Bd.34. H.6. S. 193-201.
8. Furnier G.R., Adams W.T. Geographic patterns of allozyme variation in Jeffrey pine // Amer. J. Bot. 1986. V.73. P.1009-1015.
9. Шурхал А. В., Подогас А. В.,
Животовский Л.А., Подгорный Ю.К. Изучение генетической изменчивости крымской сосны (Pinuspallasiana Asch., Graebn.) // Генетика. 1988. T.24. №2. С.311-315.
10. Крутовский К.В., Политов Д.В.,
Алтухов Ю.П., Милютин Л.И., Кузнецова Г.В., Ирошников А.И., Воробьев В.Н., Воробьева НА. Генетическая изменчивость сибирской кедровой сосны Pinus sibirica Du Tour. Сообщение IV. Генетическое разнообразие и степень генетической дифференциации между
популяциями // Генетика. 1989. Т. 25. № 11. С. 2009-2032.
11. Потенко В. В., Кривко В. Г.
Изменчивость и сцепление изоферментных локусов у ели восточной Picea orientctlis (L.) Link // Генетика. 1993. T.29. №4. C.632-637.
12. Гончаренко Г.Г., Силин А.Е., Падутов В.Е. Исследование генетической структуры и уровня дифференциации Pinus sylvestris L. в центральных и краевых популяциях Восточной Европы и Сибири // Генетика. 1993. Т.29. №12. С.2019-2038.
13. Янбаев Ю. А., Шигапов 3. X., Путенихин В. П., Бахтиярова Р. М. Дифференциация популяций ели сибирской (Picea obovata Ledeb.,) на южном Урале // Генетика. 1997. Т.ЗЗ. № 9. С. 1244-1249.
14. Ettl G.J., Peterson D.L. Genetic variation of subalpine fir ( Abies lasiocarpa ( HOOK.) NUTT.) in the Olympic Mountains< WA, USA // Silvae Genet. 2001.Bd.50. H.3-4. S. 145-153.
15. Adams W.T., Joly R.I. Genetics of allozyme variants in loblolly pine // Heredity. 1980. V.71.P.33-40.
16. Ridgway G.J., Sherburne S.W., Lewis R.D. Polymorphism in the esterases of atlantic hairing//Trans. Amer. Fish. Soc. 1970. V.99. P. 147 -151.
17. Brewer G.J. Introduction to isozyme techniques. N.Y.-L.: Academ. press., 1970. 186 p.
18. Корочкин Л.И., Серов О.Л., Пудовкин А.И. и др. Генетика изоферментов. М.: Наука, 1977.278 с.
19. Айала Ф. Введение в популяционную и эволюционную генетику / Пер.с англ.М.: Мир, 1984. 232 с.
20. Fins L., Seeb L.W. Genetic variation in allozymes of western larch // Can. J. Forest. 1986. V.16. P. 1013-1018.
21. Lewandowski A., Berczyk J., Mejnartowicz L. Genetic structure and the mating system in an old stand of polish larch // Silvae Genet. 1991.Bd..40. S.75-79.
22. Гончаренко Г.Г., Силин А.Е. К
вопросу о генетической изменчивости и дифференциации лиственницы курильской (Larix kuriiensis Mayr.) и лиственницы японской (Larix kaempferi Sarg.) // ДАН. 1997. Т.354. № 6. С.835-838.
23. Шигапов З.Х., Путенихин В.П.,
Шигапова А.Ш., Уразбахтина К.А. Генетическая структура уральских популяций лиственницы Сукачева // Генетика. 1998. Т.34. №1. С.65-74.
24. Ying L., Morgenstern E.K. Inheritance and linkage relationships of some isozymes of Larix laricina in New Brunswick, Canada // Silvae Genet. 1990. Bd.39. H.5-6. S.245-250.
25. Семериков В.Л., Матвеев А. В.
Изучение генетической изменчивости
лиственницы сибирской (Larix sibirica Ldb.) no изоферментным локусам // Генетика. 1995. Т.31. №8. С. 1107-1113.
26. Шурхал А.В., Подогас А.В.
Семериков В.Л., Животовский Л.А. Аллозимный полиморфизм лиственницы сибирской (Larix sibirica Ledeb.) // Генетика. 1989. Т.25. № 10. С.1989-1901.
27. Тимерьянов А.Ш., Шигапов З.Х.,
Янбаев Ю.А. Генетическая изменчивость лиственницы Сукачева (Larix sukaczewii Dyl.) на Южном Урале. I Механизм генного контроля изоферментных систем // Генетика. 1994. Т.30. №
9. С. 1243-1247.
28. Ларионова А.Я. Генетическая
изменчивость лиственницы сибирской из Южного Забайкалья // Флора, растительность и растительные ресурсы Забайкалья (тезисы докладов). Чита. 1997. С.100-101.
29. Потенко В.В., Разумов П.Н.
Генетическая изменчивость и популяционная структура лиственницы даурской на территории Хабаровского края // Лесоведение. 1996. №5. С.11-18.
30. Lewandowski A., Meinartowicz L.
Inheritance of allozymes in Larix decidua Mill. // Silvae Genet. 1990. Bd.39. H.5-6. S. 184-188.
31. Semerikov V.L., Semerikov L.F.,
Lascoux M. Intra - and interspecific allozyme variability in Eurasian Larix Mill, species // Heredity. 1999. V.82. P.193-204.
32. Ларионова А.Я. Генетический
полиморфизм и внутривидовая изменчивость лиственницы Сукачева // Развитие генетики и селекции в лесохозяйственном производстве (тезисы докладов Всесоюзного научнотехнического совещания). Москва, 1988 а. С.31-33.
33. Ларионова А.Я. Генетический
полиморфизм и внутривидовая дифференциация
лиственницы сибирской // Десятый конгресс дендрологов. Современное состояние общего исследования естественной дендрофлоры с особым учётом сохранения её генофонда. София, 1988 6. С.239-244.
34. Cheliak W.L., Pitel J.A. Inheritance
and linkage of allozymes in Larix laricina II Silvae genet. 1985. Bd.34. S. 142-147.
35. Ying L., Morgenstern E.K. The
population structure of Larix laricina in New Brunswick, Canada // Silvae Genet. 1991. Bd.40. H.5.S.180-184.
36. Тимерьянов А.Ш., Шигапов З.Х.,
Янбаев Ю.А. Генетическая изменчивость лиственницы Сукачева (Larix sukaczewii Dyl.) на Южном Урале. I Механизм генного контроля изоферментных систем // Генетика. 1994. N.30. С.1243-1247.
37. Ларионова А.Я., Ларионова И.А.,
Милютина И.Л. и др. Сосна обыкновенная в
Южной Сибири. Красноярск: Ин-т леса и
древесины СО АН СССР, 1988. 150 с.
38. Yen F., El-Kassaby Y.A. Enzyme variation in natural populations of Sitka spruce (Picea sitchensis). 1 Genetic variation patterns among trees from 10 IUFRO provenances // Can. J. For. Res. 1980. V. 10. №5. P.415-422.
39. Stewart S.C., Schoen J. Segregation at enzyme loci in megagametophytes of white spruce, Picea glauca II Can. J. Genet. Cytol. 1986. V.28. P.149-153.
40. Тимерьянов А.Ш., Старова Н.В., Бахтиярова P.M. Генетическая изменчивость лиственницы Сукачева {Larix sukaczewii Dyl.) на Южном Урале. II Уровни изоферментной изменчивости в природных популяциях // Генетика. 1996. Т.32. №2. С.267-27
Поступило в редакцию 30 мая 2003 г.
