CC BY
30
УДК 6l6.33-002.2-07:6l6.33-018.2]-076.5
нарушение зонального распределения муцинов
в эпителии слизистой оболочки желудка
у пациентов с хроническим гастритом
С. В. Никитин
Пермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А Вагнера, г. Пермь, Россия
zonal mucin distribution disturbed in gastric mucosa epithelium of patients with chronic gastritis
S. V. Nikitin
Perm State Academy of Medicine named after Academician E. A Wagner, Perm, Russia
Цель. Изучить зональное распределение муцинов в эпителии слизистой оболочки желудка (СОЖ) у пациентов с хроническим гастритом (ХГ).
Материалы и методы. Объектом исследований являлись 22 человека в возрасте от 18 лет до 81 года, госпитализированные для обследования и лечения в специализированное гастроэнтерологическое отделение МУЗ ГКБ № 4 г. Перми в 2010—2011 гг. Все пациенты на момент госпитализации имели диагноз «хронический гастрит» или «хронический гастродуоденит», который уточнялся в процессе проведения комплекса лечебно-диагностических мероприятий. Формирование групп пациентов при проведении гистологической оценки гастробиоптатов осуществлялось с соблюдением принципов рандомизации. В процессе исследования было сформировано две группы больных, основанием для разделения всей изучаемой выборки на две группы послужило обнаружение в биоптатах слизистой оболочки желудка микробных тел Helicobacter pylori. Для точной верификации диагноза и определения распространенности патологического процесса в СОЖ всем пациентам выборки проводилась фиброэзофагогастродуо-деноскопия (ФЭГДС) при помощи фиброгастроскопа «Olympus» (Япония) с прицельной биопсией СОЖ. Образцы получали из антрального, фундального отделов, а также из тела желудка (по одному биоптату). H. pylori идентифицировали в биоптатах СОЖ с помощью гистобактериоскопического метода. Результаты. У пациентов с геликобактерным ХГ нейтральные мукополисахариды выявлялись в большинстве случаев (88,89%) не только в покровно-ямочном эпителии, но и в эпителии глубоких отделов желез. В группе больных с негеликобактерным ХГ нарушение зонального распределения нейтральных мукополисахаридов выявлено в 76,92% случаев. При окрашивании альциановым синим (рН = 2,5) препаратов СОЖ пациентов с геликобактерным ХГ мы выявляли кислые мукополисахариды в бокаловидных клетках ямочного эпителия и эпителия желудочных желез, что являлось одним из признаков кишечной метаплазии эпителиоцитов.
Выводы. Гистохимические исследования образцов СОЖ выявили нарушение зонального распределения муцинов в эпителии СОЖ как у пациентов с геликобактерным, так и с негеликобактерным ХГ. В группе больных с ХГ, обусловленным инфицированием Helicobacter pylori, эти изменения наблюдались у большего числа больных и проявлялись не только в перераспределении нейтральных муцинов в СОЖ, но и в появлении кислых мукополисахаридов.
Ключевые слова. Муцины, эпителий слизистой оболочки желудка, пациенты, хронический гастрит.
© Никитин С. В., 2012 е-таП: [email protected] тел. 8 (342) 217 10 31
[Никитин С. В. — аспирант кафедры патологической физиологии].
Aim. To study the zonal mucin distribution in gastric mucosa (GM) epithelium of patients with chronic gastritis (CG).
Materials and methods. The object of investigations were 22 persons aged 18—81 hospitalized for examination and treatment to specialized Gastroenterological Unit of MHE CCH № 4, Perm in 2010—2011. All patients at the moment of hospitalization were diagnosed «chronic gastritis» or «chronic gastroduodenitis» which were defined more precisely during complex treatment-and-diagnostic measures. Groups of patients for histological assessment of gastrobioptates were formed according to randomization principles. During investigation two groups of patients were formed. The basis for dividing all the investigated selection into two groups was detection of microbial bodies Helicobacter pylori in gastric mucosa bioptates. For the purpose of precise verification of diagnosis and determination of pathologic dissemination process in gastric mucosa, all the selected patients were fulfilled fibroesophagogastroduodenoscopy (FEGDS) using fibrogastroscope «Olympus» (Japan) with target GM biopsy. The samples were obtained from antral functional parts and from gastric body (one bioptate for each). H.pylori were identified in GM bioptates with histobacterioscopic method. Results. In the group of patients with helicobacter CG, neutral mucopolysaccharides were revealed in most cases (88,89%) not only in integument-pit epithelium, but in epithelium of deep glandular parts. In the group of patients with nonhelicobacter CG, disturbance of zonal distribution of neutral mucopolysaccharides was found in 76,92% of cases. In case of alcian blue staining (pH=2,5) of GM preparations belonging to helicobacter CG patients, we revealed acid mucopolysaccharides in goblet cells of pit epithelium and gastric gland epithelium that was one of the signs of intestinal epitheliocyte metaplasia.
Conclusion. Histochemical investigations of GM samples detected disturbance of zonal mucin distribution in GM epithelium of patients with both helicobacter and nonhelicobacter CG. In the group of patients with Helicobacter pylori caused CG these changes were observed in a greater number of patients and were manifested not only by re-distribution of neutral GM mucins, but by occurrence of acid mucopolysaccharides. Key words. Mucins, gastric mucosa epithelium, patients, chronic gastritis.
Введение
На сегодняшний день в структуре хронических заболеваний органов пищеварения неэрозивные и эрозивно-язвенные поражения верхних отделов желудочно-кишечного тракта (хронический гастрит, гастродуоде-нит, язвенная болезнь) занимают одно из первых мест. По частоте распространения и патогенетической связи с язвенной болезнью и раком желудка хронический гастрит является основной медико-социальной проблемой современного общества.
Известно, что при всех типах хронического гастрита морфологически в эпителии слизистой оболочки желудка (СОЖ) отмечаются изменения по типу хронического воспаления, сопровождающегося дистрофическими, атрофическими и дисрегенераторны-ми процессами, и в результате повторных повреждений СОЖ развивается ее атрофия и метаплазия эпителия с появлением боль-
шого количества слизистых клеток и изменения свойств защитного слизевого геля [2].
Цель исследования — изучение зонального распределения муцинов в эпителии СОЖ у пациентов с хроническим гастритом (ХГ).
Материалы и методы исследования
Нами проанализирован состав муцинов, продуцируемых клетками СОЖ при различных вариантах ХГ. Объектом исследований являлись 22 человека в возрасте от 18 лет до 81 года, госпитализированные для обследования и лечения в специализированное гастроэнтерологическое отделение МУЗ ГКБ № 4 г. Перми в 2010—2011 гг. Все пациенты на момент госпитализации имели диагноз «хронический гастрит» или «хронический гастро-дуоденит», который уточнялся в процессе проведения комплекса лечебно-диагностических мероприятий.
Критерии включения пациентов в исследование: наличие синдрома язвенноподоб-ной или неязвенной желудочной диспепсии (абдоминальный болевой синдром и/или синдром желудочной диспепсии).
Критерии исключения пациентов из исследования: прием больными антибактериальных или антисекреторных препаратов в течение 2—3 месяцев, предшествующих госпитализации, наличие аллергической и иммунной патологии, способной оказать влияние на течение основного заболевания, табакокурение и систематическое употребление алкогольных напитков. Необходимо отметить, что в анамнезе 15 из 22 пациентов сформированной выборки отмечалось употребление (систематическое — по назначению врача или эпизодическое — при болях различного характера) нестероидных противовоспалительных препаратов. В исследование не включали пациентов с наличием язв желудка и/или двенадцатиперстной кишки в анамнезе.
Все исследования проведены в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной медицинской ассоциации (рекомендациями для врачей по проведению биомедицинских исследований на людях), пересмотренной на 48-й Генеральной Ассамблее (Сомерсет Уэст, ЮАР, октябрь 1996 г.), с дополнениями от 2000 г., Основами законодательства Российской Федерации «Об охране здоровья граждан», Приказом МЗ РФ № 266 от 19.07.2003 г. «Об утверждении правил клинической практики в Российской Федерации», Национальным стандартом Российской Федерации «Надлежащая клиническая практика» (2005).
Формирование групп пациентов при проведении гистологической оценки гастро-биоптатов осуществлялось с соблюдением принципов рандомизации. В процессе исследования было сформировано две группы
больных, основанием для разделения всей изучаемой выборки на две группы послужило обнаружение в биоптатах СОЖ микробных тел Helicobacter pylori. Таким образом, I группу составили пациенты, у которых при микроскопии гистологических препаратов, полученных при проведении биопсии, выявлены микробные тела Helicobacter pylori в СОЖ; II группа была образована пациентами, у которых при гистологическом исследовании образцов СОЖ при окрашивании метиленовым синим не удалось выявить Helicobacter pylori. Группу сравнения (гистологическая норма СОЖ) составили 4 человека, погибшие в результате несчастных случаев от причин, не связанных с заболеваниями желудочно-кишечного тракта.
При постановке диагноза ХГ мы руководствовались Хьюстонской модификацией Сиднейской системы (1996).
Для точной верификации диагноза и определения распространенности патологического процесса в СОЖ всем пациентам выборки проводилась фиброэзофагогастро-дуоденоскопия (ФЭГДС) при помощи фиброгастроскопа «Olympus» (Япония) с прицельной биопсией СОЖ. Образцы получали из антрального, фундального отделов, а также из тела желудка (по одному биоптату). H. pylori идентифицировали в биоптатах СОЖ с помощью гистобактериоскопическо-го метода. Морфологическое исследование гастробиоптатов проводилось с учетом рекомендаций модифицированной Сиднейской классификации ХГ и методических рекомендаций «Морфологическая диагностика гастрита на биопсийном материале».
При проведении гистохимических исследований мы руководствовались рекомендациями Пирс (1968), согласно которым по-лисахаридный состав муцинов изучают на основе комплекса гистохимических методов, включающего ряд аналитических и фермен-
тативных обработок. При этом результаты, полученные в группе пациентов с геликобак-терным ХГ, были сопоставлены с результатами исследования СОЖ пациентов с негели-кобактерным ХГ. Для выявления нейтральных муцинов использовали ШИК-реакцию, позволяющую выявлять гликоген и гликопро-теины, являющиеся, как известно, составной частью слизистых секретов желез, в том числе желез желудка; гликоген дифференцировали от гликопротеинов путем предварительной обработки срезов фенилгидразином [4]. Для выявления кислых групп углеводных соединений, не реагирующих с Шифф-йодной кислотой, использовали окрашивание гистологических препаратов альциановым синим при рН = 2,5 [2, 4].
Результаты и их обсуждение
Согласно результатам исследований, при окрашивании по методу ШИК в слизистой оболочке людей, погибших вследствие причин, не связанных с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (гистологическая норма), интенсивная реакция выявлялась в эпителиальных клетках в области желудочных ямок и шеек желудочных желез, причем наиболее интенсивное окрашивание имели эпителиоциты ямок (рис. 1). В теле желез ви-
Рис. 1. Выявление нейтральных мукополисахаридов в интактной СОЖ ШИК-реакция. х600
зуализировались единичные слабоокрашен-ные эпителиальные клетки, ШИК-положительный секрет которых был сосредоточен преимущественно в апикальной части клетки. Отношение ШИК-реакции к фенилгидра-зину позволяло считать, что в состав секрета входят нейтральные муцины.
Известно, что нейтральные муцины, гис-тохимически выявляемые ШИК-реакцией, определяются в поверхностных отделах СОЖ, им отводится протективная, защитная роль [3]. Наибольшее количество ШИК-позитивной слизи содержится в ямочном эпителии; в условиях патологии — в эпителио-цитах фундальных желез [1].
У пациентов с геликобактерным ХГ нейтральные мукополисахариды выявлялись в большинстве случаев (88,89%) не только в покровно-ямочном эпителии, но и в эпителии глубоких отделов желез. В группе больных с негеликобактерным ХГ нарушение зонального распределения нейтральных мукополисахаридов выявлено в 76,92% случаев (рис. 2).
Рис. 2. Нарушение зонального распределения нейтральных мукополисахаридов в СОЖ пациента с негеликобактерным ХГ. Окраска Шифф-йодной кислотой. х600
При окрашивании альциановым синим кислые мукополисахариды в эпителии ин-тактной СОЖ не выявлялись, что соответствует общепринятым представлениям. При окрашивании альциановым синим (рН = 2,5)
препаратов СОЖ пациентов с геликобактер-ным ХГ мы выявляли кислые мукополисаха-риды в бокаловидных клетках ямочного эпителия и эпителия желудочных желез (рис. 3), что являлось одним из признаков кишечной метаплазии эпителиоцитов.
Рис. 3.Выявление кислыхмукополисахаридов в бокаловидных клетках желудочных ямок у пациента с гелико-бактерным ХГ. Окраска альциановым синим (рН = 2,5). х600
У пациентов с негеликобактерным ХГ, ввиду того, что кишечная метаплазия с наличием бокаловидных клеток в данной клинической группе встречалась крайне редко, мы не выявляли в клетках эпителия СОЖ кислых мукополисахаридов.
Таким образом, гистохимические исследования образцов СОЖ выявили нарушение зонального распределения муцинов в эпителии СОЖ как у пациентов с геликобактер-ным, так и с негеликобактерным ХГ. Однако в группе больных с ХГ, обусловленным инфицированием Helicobacter pylori, эти изменения наблюдались у большего числа больных и проявлялись не только в перераспределении нейтральных муцинов в СОЖ, но и в появлении кислых мукополисахаридов.
Известно, что кислые муцины, выявляемые при окраске препаратов альциановым синим с рН = 2,5, в норме располагаются в глубоких отделах СОЖ многих млекопитающих и выполняют протективную роль [3]. Человек в процессе филогенеза утратил спо-
собность эпителиоцитов СОЖ синтезировать кислые углеводы, в связи с этим появление кислых гликозаминогликанов (ГАГ) в эпите-лиоцитах является компенсаторной реакцией слизистой оболочки на хроническое повреждение, так как кислые ГАГ обладают лучшими протективными свойствами [1]. Бокаловидные клетки, появляющиеся при кишечной метаплазии эпителия СОЖ, содержат кислый муцин и окрашиваются альциановым синим при рН = 2,5; этот кислый муцин содержит смесь сиаломуцинов и сульфому-цинов.
Согласно литературным данным, при ге-ликобактерном гастрите в покровно-ямоч-ном эпителии СОЖ отмечается интенсивная ШИК-реакция, что свидетельствует о повышенном слизеобразовании в данной области; нередко отмечается одновременное снижение интенсивности ШИК-реакции в железистом эпителии СОЖ. Известно, что при ХГ и эрозивно-язвенных поражениях слизистой оболочки тела желудка в ней появляется линия так называемых UACL-клеток (ulcer associated cell lineage), представляющих собой отдельную дифференцировочную ветвь, происходящую из стволовых клеток. Эти клетки характеризуются определенным фенотипом: в отличие от окружающих слизистых клеток, продуцирующих кислые муцины, они вырабатывают нейтральные мукопо-лисахариды, выявляемые ШИК-реакцией.
Выводы
1. Гистохимические исследования выявили нарушение зонального распределения муцинов в эпителии СОЖ как у пациентов с ге-ликобактерным, так и с негеликобактер-ным ХГ.
2. Как для геликобактерного, так и для не-геликобактерного ХГ характерно появление нейтральных мукополисахаридов в эпите-лиоцитах фундальных желез желудка.
3. В группе больных с ХГ, обусловленным инфицированием Helicobacter pylori, выявленные изменения наблюдались у большего числа больных и проявлялись не только в перераспределении нейтральных муцинов в СОЖ, но и в появлении кислых мукополиса-харидов.
Библиографический список
1. Вусик М. В, Крицкая Н. Г., Евтушенко В. А. Клинико-морфологическая оценка результатов эндоскопической лазерной терапии у больных раком желудка в ранние сроки после дистальных субтотальных резекций. Сибирский онкологический журнал 2006; 3 (19): 34-40.
2. Казимирова А. А. Хронический гастрит у детей: механизмы развития, клинико-мор-
фологическая характеристика, оптимизация терапии: автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. Челябинск 2009; 40.
3. ЛинингД. А. Пролонгированная оценка обратного развития морфологических изменений слизистой оболочки желудка в результате эрадикации Helicobacter pylori: автореф. дис. . канд. мед. наук. Омск 2006; 23.
4. Рядинская Н. И, Сиразиев Р. З. Гистологическая и гистохимическая характеристика поджелудочной железы оленевых Алтая. Цитология 2008; 8 (50): 719-723.
5. Хомерики С. Г. Новые подходы к морфологической классификации хронического гастрита. Consilium-Medicum 2008; 1: 23— 25.
Материал поступил в редакцию 10.01.2012
