CC BY
403
микробиология
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 579.871.1.083.18
Г. А. Сорокина1, Н. В. Залесских1, А. П. Обрядина1, Т. И. Уланова1, А. Н. Бурков1, А. Г. Нехорошева2, Л. З. Скала2, И.Н.Лукин2
набор дс-диф-корине для идентификации микроорганизмов рода
corynebacterшm, включая с. офнтнетде
1ООО НПО «Диагностические системы», Нижний Новгород; 2ООО «Медпроект-3», Москва
Набор ДС-ДИФ-КОРИНЕ позволяет идентифицировать 20 видов коринебактерий, включенных в Определитель бактерий Берги (1997 г.) [4], в том числе биовары gravis и mitis, и вариант belfanti возбудителя дифтерии, а также определять его токсигенные свойства. Тест-система готова к использованию, в ее составе есть все необходимые компоненты для проведения бактериологического исследования при поиске дифтероидов и диагностике дифтерии. Представленные данные показывают высокую диагностическую эффективность нового набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ, который имеет государственную регистрацию в Росздравнадзоре от 18.05.2010 г., адаптирован к автоматическому считыванию на спектрофотометре и включен в программы Микроб-Автомат и Микроб-2.
Ключевые слова: коринебактерии, тест-система
G.A. Sorokina, N.V. Zalesskih, A.P. Obryadina, T.I. Ulanova, A.N. Burkov, A.G. Nekhorosheva, L.Z. Skala, I.N. Lukin THE DS-DIF-KORINE KIT TO IDENTIFY MICROORGANISMS CORYNEBACTERIUM, INCLUDING C. DIPHTHERIAE The DS-DIF-KORINE kit make it possible to identify 20 types of corynebacteriae entered the Bergi identification guide (1997) including biovars gravis and mitis and belfanti version of diphtheria agent. The possibility to determine its toxigenic characteristics is also provided. The test system is ready to be applied since it has all needed components to implement bacteriologic analysis in search of diphtheroids and diagnostics of diphtheria. The presented data demonstrate high diagnostic effectiveness of the new DS-DIF-KORINE kit which has the state registration in Roszdravnadzor and is adapted for spectrophotometer automatic pickup and included into Microbe-Automate and Microbe-2 programs.
Key words: corynebacteriae, test system
Введение. ООО «Научно-производственное объединение «Диагностические системы»» уже более 10 лет выпускает наборы реагентов для идентификации энтеробактерий (ПБДЭ) и для идентификации стафилококков (ПБДС), в которых осуществляется визуальный учет результатов биохимических реакций. Современные спектрофотометры типа Ми!мкап, iEMS-Reider или Multiskan-Ascent (фирмы ТЕR-МО-Labsystems, Финляндия) с вертикальной фотометрией позволяют производить автоматическое считывание биохимических реакций по плотности микробной суспензии как придонно, так и поверхностно растущих микроорганизмов. Так как существующие версии ПБДЭ и ПБДС не могут быть прочитаны автоматически, при усовершенствовании выпускаемых и конструировании новых наборов был подобран новый носитель для субстратно-индикаторных смесей - плоскодонные полистироловые планшеты для иммуноферментного анализа, которые подходят для автоматического прочтения спектрофотометром. С использованием таких планшетов разработаны наборы нового поколения для идентификации энтеробактерий ДС-ДИФ-ЭНТЕРО-24, ДС-ДИФ-ЭНТЕРО-12, ДС-ДИФ-САЛЬМОНЕЛЛА, сконструированы наборы для идентификации коринебактерий ДС-ДИФ-КОРИНЕ, для идентификации неферментирующих грамотри-
Для корреспонденции:
Сорокина Галина Анатольевна, зам. нач. отд. внедрения новых технологий
Адрес: 603093, Нижний Новгород, ул. Яблоневая, 22 Телефон: (831) 434-93-62 E-mail: [email protected]
цательных бактерий ДС-ДИФ-НЕФЕРМ, а также в качестве дополнительного теста бумажные полоски для определения бактериальной цитохромоксидазы ДС-ОКСИДАЗА.
Цель работы - оценка набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ, предназначенного для биохимической идентификации корине-бактерий, включая С. diphtheriae, и определения токсигенных свойств возбудителя дифтерии. Дифтерия - это острое инфекционное заболевание, вызываемое токсигенными штаммами С. diphtheriae [1-3, 5, 6]. Быстрое и точное микробиологическое подтверждение клинического диагноза лежит в основе эпидемиологического надзора за циркуляцией возбудителя, особенно на ранних стадиях заболевания. Выявление токсигенности у выделенных штаммов С. diphtheriae является самым важным тестом для постановки диагноза дифтерии. Некоторые виды ко-ринебактерий являются естественными патогенами скота или грызунов; некоторые входят в состав нормальной микрофлоры кожи и слизистых оболочек человека. В последние десятилетия клиническая роль условно-патогенных коринебактерий возросла - их все чаще выделяют как возбудителей воспалительных гнойно-септических и респираторных заболеваний у лиц с вторичными иммунодефицитами, подвергавшихся иммунодепрес-сивной терапии после тяжелых операций, наркоманов, онкологических и гематологических больных, ВИЧ-инфицированных, престарелых. Устойчивость некоторых видов (С. jeikeium, С. cystitidis, С. атусоЫит) к антибиотикам (пенициллинам, ами-ногликозидам, хинолонам) способствует их распространению как агентов госпитальной инфекции [1].
Материалы и методы. Стандартные образцы. Отраслевой стандартный образец мутности бактерийных взвесей стеклянный на 10 ЕД (ОСО 42-28-85-06П).
микробиология
Клинические штаммы. 120 клинических изолятов корине-бактерий: С. diphtheriae gravis токсигенный - 11 штаммов, С. diphtheriae gravis нетоксигенный - 1 штамм, С. diphtheriae mitis токсигенный - 1 штамм, С. diphtheriae mitis нетоксигенный - 3 штамма, нетоксигенные коринебактерии - 104 штамма.
Референсные штаммы. 6 штаммов из ГКПМ ФГУЗ ГИСК им. Л. А. Тарасевича РФ: С. diphtheriae gravis токсигенный № 75, С. diphtheriae mitis токсигенный "Сеньков", С. diphtheriae mitis нетоксигенный № 203-АГ, С. ulcerans № 675, С. pseudodiphtheriticum (hofmanii) № 25, С. xerosis№ 72а.
Тест-системы сравнения. "Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов" (СИБ): набор № 5 "Для идентификации коринебактерий дифтерии", набор № 7 "Для определения токсигенности коринебактерий дифтерии" ФГУП «НПО "Микроген"» Минздравсоцразвития РФ.
Результаты и обсуждение. Контрольные штаммы коринебактерий хранили при температуре -20°С в эппендорфских пробирках в смеси триптиказосоевого бульона, глицерина и сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС) производства ООО «Биолот» или ФГУП «НПО «Микроген»» (80,0 мл + 10,0 мл + 10,0 мл). Для восстановления культур содержимое эппендорфских пробирок переносили в питательный бульон с сывороткой КРС (4 мл + 0,4 мл) и инкубировали при температуре 37 ± 0,5°С в течение 16-20 ч. Затем культуры из бульона высевали на коринебакагар (КБА) или 10% сывороточный агар и инкубировали при температуре 37 ± 0,5°С в течение 18-24 ч [2, 3, 5]. Суточную агаровую культуру контрольных штаммов использовали для выявления цистиназы в пробе Пизу, для определения токсигенности в модифицированной пробе Элека и для приготовления микробного инокулята в 0,5% пептонной воде (согласно инструкции на тест-систему ДС-ДИФ-КОРИНЕ).
В составе набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ среда для определения цистиназы предлагается в готовом полужидком виде в герметично закрытых стеклянных флаконах, высота столбика среды 1,5 ± 0,2 см. Для выявления цистиназы использовали коммерческие среды производства ФГУН ГНЦПМ и ФГУП «НПО "Микроген"» Минздравсоцразвития РФ, а также собственную среду, приготовленную из отдельных компонентов. Питательную среду готовили согласно «Инструкции по приготовлению» с последующей обработкой, позволяющей более длительно хранить готовую среду, так как обычно готовая среда может храниться не более 1 мес
Таблица 1
определение цистиназы в пробе Пизу
Внешний вид среды Положительная Отрицательная
во флаконе проба Пизу проба Пизу
Желеобразная масса Черный след Светлый след
светло-желтого цвета по ходу укола и от укола с
с небольшим белым темно-коричневое отдельными
осадком на дне. Допустимо облако вокруг него темными
образование небольшого в виде воронки или точками без
количества конденсата диффузное облака
при температуре 4°С [2, 3, 5]. Для постановки пробы Пизу суточную агаровую культуру контрольных штаммов засевали бактериологической петлей диаметром 2 мм уколом в столбик среды для определения цистиназы, инкубацию проводили при температуре 37 ± 0,5°С в течение 16-24 ч. Положительные результаты начинали формироваться уже через 6-8 ч. Описание внешнего вида среды представлено в табл. 1, результаты работы среды приведены в табл. 2.
В состав набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ входят бумажные диски диаметром 0,6 см, содержащие 5 МЕ/диск антитоксина диагностического дифтерийного. Для приготовления бумажных дисков использовали антитоксин диагностический дифтерийный, очищенный ферментолизом и специфической сорбцией, производства ФГУП «НПО «Микроген»». Определение токсигенности штаммов С. diph1heriae проводили в модифицированной пробе Элека в чашках Петри с агаровым гелем [3, 6-9]. Для приготовления чашек использовали коринетоксагар производства ФГУН ГНЦПМ, сыворотку крови КРС ООО "Биолот" или ФГУП «НПО "Микроген"», чашки Петри диаметром 9 см готовили согласно Инструкции по приготовлению (17 мл коринетоксагара и 3 мл сыворотки крови КРС). На такой чашке можно разместить до четырех дисков с антитоксином и соответственно до 20 бляшек культур (по 5 бляшек вокруг каждого диска, чередуя бляшки токсигенного и испытуемого штамма). Постановку пробы проводили согласно Инструкции по применению набора реагентов ДС-ДИФ-КОРИНЕ, т. е. бактериологической петлей диаметром 2 мм суточную агаровую культуру размещали бляшками на расстоянии 0,6-0,7 см от края диска с антитоксином, диаметр бляшки - 0,7 см, инкубацию чашек проводили при температуре 37 ± 0,5°С в течение 16-24-48 ч. Линии иммунопреципитации между диском с ан-
Таблица 2
Результаты сравнения работы готовой среды для определения цистиназы в пробе Пизу (через 16-24 ч инкубации)
Питательная среда Штамм
С. diphtheriae gravis С. diphtheriae mitis С. ul- С. pseudo diphtheriticum С. xerosis
токсигенный № 75 токсигенный "Сеньков" cerans № 675 (hofmanii) № 25 № 72a
Среда для определения цистиназы в пробе Пизу
сухая, ФГУН ГНЦПМ:
после приготовления + + + - -
хранение 10 сут при 20-24°С + + + - -
хранение 1 год 3 мес при 4-8°С + + + - -
Питательная среда для идентификации
коринебактерий по тесту расщепления цистина
сухая, ФГУП «НПО "Микроген"» МЗ РФ:
после приготовления + + + - -
хранение 10 сут при 20-24°С + + + - -
хранение 1 год 3 мес при 4-8°С + + + - -
Сред а для определения цистиназы в пробе Пизу
производства ООО "НПО ДС":
после приготовления + + + - -
хранение 10 сут при 20-24°С + + + - -
хранение 1 год 3 мес при 4-8°С + + + - -
Таблица 3
результаты сравнения работы дисков с дифтерийным антитоксином в модифицированной пробе Элека на разных агаровых средах
Штамм
Диски с антитоксином дифтерийным C. diphthe- C. diphthe- C. ulce- C. diphtheriae mi-
Питательная среда riae gravis riae mitis rans tis нетоксигенный
токсигенный токсигенный № б75 203 АГ
№ 75 "Сеньков"
Коринетоксагар ФГУН ГНЦПМ, сывор. КРС Биолот; чашка Петри d = 9 см (17 мл + З мл)
Colambia agar, Bovine Serum, Adult; чашка Петри d = 9 см (15 мл + 4 мл) Colambia agar, Bovine Serum, Adult; чашка Петри d = 4 см (2,5 мл + 0,7 мл) Colambia agar, Newborn Calf Serum; чашка Петри d = 9 см (15 мл + 4 мл)
Colambia agar, Newborn Calf Serum; чашка Петри d = 4 см (2,5 мл + 0,7 мл)
После приготовления Токс +
Хранение 4 года при 4—8°С Токс +
СИБ набор № 7 "Для определения токсигенности Токс + коринебактерий дифтерии" ФГУП «НПО "Микроген"»
После приготовления Токс +
Хранение 4 г при 4-8°С Токс +
После приготовления Токс +
Хранение 4 года при 4—8°С Токс +
После приготовления Токс +
Хранение 4 года при 4—8°С Токс +
После приготовления Токс +
Хранение 4 года при 4—8°С Токс +
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токе -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токс -
Токс + Токс - Токе -
Токс + Токс - Токс -
титоксином и токсигенным штаммом были различимы уже через 18 ч инкубации, через 24 ч хорошо сформированы, а через 48 ч соединены друг с другом при расположении токсигенных штаммов рядом. Для сравнения использовали набор СИБ № 7 "Для определения токсигенности коринебактерий дифтерии" ФГУП «НПО "Микроген"» Минздравсоцразвития РФ и методику определения токсигенности штаммов С. diphtheriae с лабораторным изготовлением бумажных полосок с дифтерийным антитоксином. Получено 100% совпадение результатов.
Кроме отечественных питательных сред для определения токсигенности в модифицированной пробе Элека использовали Colambia agar, Fluka; Bovine Serum Adult, Sigma; Newborn Calf Serum, Sigma. Из различных комбинаций (агар + сыворотка) выбраны оптимальные для чашек Петри диаметром 9 см (15 мл + 4 мл) и для чашек Петри диаметром 4 см (2,5 мл + 0,7 мл) [7]. Размещение дисков и бляшек культур на больших чашках аналогично указанному выше, на маленьких чашках можно разместить 1 диск и 5 бляшек культур вокруг него. Результаты работы дисков с дифтерийным антитоксином (после приготовления и в процессе хранения) на отечественном коринетокс-агаре и колумбийском агаре представлены в табл. 3.
Полученные результаты определения токсигенности С. diphtheriae при использовании отечественного коринетокса-гара и колумбийского агара идентичны и могут применяться в рутинной лабораторной практике.
Сухие субстратно-индикаторные среды для определения утилизации глюкозы, сахарозы, крахмала, мальтозы, фруктозы, галактозы, редукции нитратов и разложения мочевины расположены в лунках стрипов планшета для иммуноферментно-го анализа. В составе набора стерильная 0,5% пептонная вода рН 7,4-7,6, стерильное вазелиновое масло и раствор реактива Грисса (для теста "редукция нитратов"). Из суточной агаровой культуры штаммов коринебактерий готовили микробную взвесь в 0,5% пептонной воде плотностью 10 ЕД ОСО 42-2885-06 П или 3-й степени по шкале McFarland. По 0,15 мл микробного инокулята одного штамма вносили в 8 лунок одного вертикального стрипа, для создания анаэробных условий в тесте с мочевиной вносили 0,05 мл вазелинового масла. Планшет, накрытый крышкой и помещенный в полиэтиленовый пакет, инкубировали при температуре 37,0 ± 0,5°С от 16 до 24 ч. По окончании инкубации вносили 0,05-0,1 мл раствора реактива Грисса в тест с нитратами и проводили учет результатов (либо визуально, либо автоматически на спектрофотометре).
Для сравнения работы биохимических тестов использовали СИБ набор № 5 «Для идентификации коринебактерий дифтерии», который содержит бумажные диски с глюкозой, сахарозой, крахмалом и мочевиной. В аналогичных тестах с использованием тест-системы ДС-ДИФ-КОРИНЕ получено 100% совпадение с результатами работы СИБ и с классическими пробирочными средами.
Для интерпретации полученных результатов при визуальном учете в составе набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ есть таблица биохимических свойств коринебактерий, каталог кодов, ключ. Данные вспомогательные пособия упрощают процедуру идентификации исследуемых культур коринебактерий. Набор дополнен флаконом-капельницей для внесения реактива Грисса, крышкой-капельницей для внесения вазелинового масла, цветным указателем.
Из клинических изолятов 109 (90,8%) штаммов были идентифицированы правильно, включая С. diphtheriae mitis и С. diphtheriae gravis токсигенные и нетоксигенные, 5 (4,17%) штаммов не были идентифицированы, 6 (5%) штаммов имели сомнительную идентификацию. Все контрольные штаммы (100%) были идентифицированы правильно. Набор ДС-ДИФ-КОРИНЕ в 2009 г. прошел испытания в ФГУЗ ГИСК им. Л. А. Тарасевича РФ и получил одобрение в Росздравнадзоре от 18.05.2010 г РУ № ФСР 2010/07815.
Для автоматизированного учета планшеты набора адаптированы к планшетному фотометру "iEMS-Reader" с вертикальной фотометрией. Адаптация планшетов к спектрофотометру проводилась силами специалистов ООО "Медпроект-3" (Москва) и методического центра по обучению и внедрению программы "Микроб-автомат" и «Система микробиологического мониторинга "МИКРОБ"» (СМММ) на базе бактериологической лаборатории ГУЗ Городская клиническая больница № 15 им. О. М. Филатова, Москва (микробиолог, канд. мед. наук А. Г. Нехорошева; химиотерапевт, канд. мед. наук Л. З. Скала и программист И. Н. Лукин). Набор получил рекомендацию для использования при идентификации коринебактерий в рамках программ "Микроб-автомат" и "Микроб-2».
Выводы. 1. Представленные данные свидетельствуют о высокой диагностической эффективности нового набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ. Срок годности набора ДС-ДИФ-КОРИНЕ 12 мес. Комплекс тестов, включенный в набор ДС-ДИФ-КОРИНЕ, позволяет идентифицировать до вида практически все корине-бактерии, описанные в Определителе бактерий Берги (1997 г.).
микробиология
2. Модификация среды для определения цистиназы в пробе Пизу позволяет использовать ее на протяжении всего срока годности набора.
3. Бумажные диски с дифтерийным антитоксином для модифицированной пробы Элека сохраняют специфическую активность на протяжении длительного срока хранения (более 12 мес).
4. Получены идентичные результаты определения токси-генности С. diphtheriae при использовании отечественного коринетоксагара и колумбийского агара.
ЛИТЕРАТУРА
1. КостюковаН. Н. // Клин. лаб. диагн. - 2001. - № 6. - С. 25-31.
2. Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции: Руководство.
- М., 1995.
3. Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции: Метод. указания МУ 4.2.698-98 (Утв. МЗ РФ 09.01.98) / Мазурова И. К., Мельников В. Г., Комбарова С. Ю. и др. - М., 1998.
4. Определитель бактерий Берги. - М., 1997. - Т. 1-2.
5. Приказ № 450 МЗ СССР от 02.04.1986 г. "О мерах по предупреждению заболеваемости дифтерией". - М., 1986.
6. Babych E. M., Ryzhkova T. A., Kalinichenko S. V., SklyarN. I. // Ann. Mechnikov Institute. - 2008. - № 4. - P. 19-21.
7. Engler K. H., Glushkevich T., MasurovaI. K. et al. // J. Olin. Microbiol. - 1997. - Vol. 35, № 2. - P. 495-498.
8. Engler K. H, Koslov R. S, Copping S. J. // J. Med. Microbiol. -2001. - Vol. 50. - P. 1006-1012.
9. Schubert J. H., Bickham S. T., Wiggins G. L. // Appl. Microbiol. -1968. - Vol. 16, № 11. - P. 1748-1752.
Поступила 22.04.11
© КОЛЛЕКТИв АвТОРОв, 2012 УДК 616.74-002.3:613.5]-078
А. Ю. миронов, С. в. Жилина, О. А. Дмитренко
архитектоника микробной экологии в отделении гнойной хирургии гкб
ГОУ вПО Первый московский государственный медицинский университет им. И. м. Сеченова
S. aureus; S. pyogenes; P. aeruginosa; E. coli; P. mirabilis; A. baumannii; S. epidermidis; K. pneumoniae; E. faecalis, E. cloacae являются приоритетными патогенами различных форм гнойно-воспалительных заболеваний (ГВЗ) и формируют архитектонику микробной экологии отделения гнойной хирургии многопрофильного ЛПУ регионального уровня; доминирующая роль принадлежит S. aureus subsp. aureus. При неизменном спектре приоритетных патогенов ГВЗ и гнойно-септических заболеваний (ГСЗ) снижается доля грамположительных кокков за счет уменьшения количества стрептококков и стафилококков, но увеличивается доля энтеробактерий и НГОБ. Растет резистентность грамположительных кокков в отношении эритромицина, клиндамицина, ципрофлоксацина; грамотрицательных палочек — в отношении ципрофлоксацина, цефалоспоринов III—IV поколений, амикацина. Наиболее высока резистентность у клинических изолятов MRSA, K. pneumoniae, A. baumannii. Ванкомицин активен в отношении всех грамположительных патогенов. Карбапенемы активны в отношении всех энтеробактерий. В отношении неферментирующих глюкозоокисляющих бактерий наиболее активны карбапенемы, цефоперазон/сульбактам, пиперациллин/тазобактам, цефепим, а также нетилмицин в отношении A. baumannii и полимиксин в отношении P. aeruginosa. Выявлена циркуляция госпитальных штаммов S. aureus определенного генотипа, что подтверждает распространение в многопрофильных ЛПУ Москвы эпидемических штаммов S. aureus, генетически родственных эпидемическим штаммам в европейских и других странах, согласно международной базе данных (http://SpaSer-ver.ridom.de). Генотипирование внебольничных гемокультур S. aureus ssp. aureus установило их значительное генетическое разнообразие, эпидемической связи между изолятами от разных пациентов не установлено. Разработаны алгоритмы рациональной антимикробной химиотерапии ГВЗ и ГСЗ в отделении гнойной хирургии многопрофильного ЛПУ Москвы.
Ключевые слова: микробная экология, архитектоника, ЛПУ, гнойная хирургия
A.Yu. Mironov, S.V Zhilina, O.A. Dmitrenko THE ARCHITECTONICS OF MICROBE ECOLOGY IN THE PURULENT SURGERY DEPARTMENT
OF MUNICIPAL CLINICAL HOSPITAL S.aureus, S.pyogenes, P.aerugenosa, E.coli, P.mirabilis, A.baumannii, S.epidermidis, K.pneumoniae, E.faecalis, E.cloacae are the priority pathogens of various forms of pyoinflammatory diseases. They form the architectonics of microbe ecology of the purulent surgery department of multi-type hospital of regional level with S.aureus subsp.aureus playing dominating role. In case of unchanged specter of priority pathogens of pyoinflammatory and pyoseptic diseases the number of gram-positive coccuses decreases at the expense of decrease of number of streptococcuses and staphylococcuses. At the .same time, the number of enterobacteria and gramnegative non-fermentative bacteria increases. The resistance of gram-positive coccuses increases regarding erythromycin, clyndamicin and cyprofloxacin. The resistance of gram-negative bacilli increases regarding ciprofloxacin, cephalosporins of III-IV generations, amikacin. The resistance is the highest among clinical isolates MRSA, K.pneumoniae, A.baumannii. The vancomycin is active regarding all gram-positive pathogens. The carbapenems are active regarding all enterobacteriae. The carbapenems, cefoperazone/tazobactam, cefepime are most active regarding non-fermentative glucose oxidizing bacteria. The netimicin is active regarding A.baumannii. The polymyxine is active regarding P. aerugenosa. The circulation of S.aureus hospital strain of particular genotype is established confirming the propagation of epidemic S.aureus strains in Moscow multi-type medical institutions. The strains are genetically affined to epidemic strains in European and other countries according the international data base (http://SpaServer.ridom.de). The genetic typing of S.aureus ssp.aureus out-hospital hemocultures detected their considerable genetic variety. The epidemic relationship between isolates from different patients is not established. The algorithms of rationale antibacterial chemotherapy of pyoinflammatory and pyoseptic diseases are developed to be implemented in the purulent surgery department of municipal clinical hospital of Moscow.
Key words: microbe ecology, architectonics, medical institution, purulent surgery
