CC BY
43
оригинальные статьи
51
© Е. В. Федорова1, А. с. Егоров1, T. Ammosova2, с. л. аврусин1, а. сантимов1, с. нехай2, A. Гром3, В. Г. часнык1
1 ГБОУ ВПО СПбГПМА Минздравсоцразвития России;
2 Howard University, Washington, USA;
3 Cincinnati Children's Hospital, USA.
Резюме. Предполагается, что неодинаковая распространенность в различных этнических группах HLA-генотипа и мутации CCR5-Д32, приводящей к нарушению адгезивных свойств кодируемого белка CCR5, является одной из причин неодинаковой распространенности ювенильного ревматоидного артрита в различных популяциях. Результаты исследования 234 образцов ДНК (QIAamp Mini Kit) пациентов с системными формами ювенильного идиопатического артрита (сЮИА) не позволили выявить отличий распространенности мутации у больных системной формой ЮИА, у пациентов с синдромом макрофагальной активации и в популяции в целом. Наши результаты не позволяют считать доказанной протективную роль мутации CCR5-Д32 относительно сЮИА, что может быть обусловлено возможной взаимосвязью с HLA-генотипом либо с прочими факторами, ассоциированными с этнической принадлежностью. Вместе с тем, это может быть расценено, как дополнительное свидетельство целесообразности выделения сЮИА в качестве самостоятельного заболевания.
Ключевые слова: системный юве-нильный идиопатический артрит; мутация; CCR5delta32; этничность.
УДК: 616.72-002.77-053.2
мутация ccR5delta32 как фактор, определяющий системность и тяжесть течения ювенильного идиопатического артрита
введение
Ювенильный идиопатический артрит (ЮИА) — артрит неустановленной причины, продолжительностью более 6 недель, развивающийся у детей в возрасте не старше 16 лет при исключении другой патологии суставов [11].
Существуют три основные международные классификации идиопатического артрита: классификация Американской коллегии ревматологов (АКР), которая использует термин ювенильный ревматоидный артрит (ЮРА), классификация Европейской лиги против ревматизма, которая использует термин ювенильный хронический артрит (ЮХА), классификация Международной лиги ревматологических ассоциаций, использующая термин ювенильный идиопатический артрит (ЮИА) (табл. 1).
ЮИА — одно из наиболее частых и инвалидизирующих ревматических заболеваний у детей. Заболеваемость ЮИА составляет 2-16 случаев на 100 000 детского населения в возрасте до 16 лет. Смертность составляет 0,5-1 % [1] (табл. 2).
Системный ЮИА составляет 10-20 % всех ЮИА и отличается клинически от других форм ярким проявлением внесуставных черт, таких как лихорадка, сыпь, генерализованная лимфаденопатия, гепатоспле-номегалия и полисерозит. 2/3 смертности при ЮИА возникает из-за системной формы [12].
Около 5-8 % пациентов с системным ЮРА развивают синдром макрофагальной активации (МАС). Синдром характеризуется внезапным началом, длительной лихорадкой, панцитопенией, гепатоспленомега-лией, печеночной недостаточностью, коагулопатией и геморрагическими проявлениями, неврологической симптоматикой [13].
В патогенезе ювенильного ревматоидного артрита играют роль как генетические, так и средовые факторы. Описано множество ассоциаций между ювенильным ревматоидным артритом и полиморфизмом HLA. Однако ассоциации с HLA являются только частью общей наследственной предрасположенности к ЮРА, предполагаются и другие, не-HLA различия, также влияющие на восприимчивость к ювенильно-му ревматоидному артриту.
В патогенезе ювенильного ревматоидного артрита играют роль, в частности, Т-клетки. Синовит при ЮРА характеризуется инфильтрацией Т-клетками, плазматическими клетками, макрофагами и пролиферацией клеток синовиальной ткани. Миграция провоспалительных клеток в синовиальную оболочку обусловлена хемокинами, которые выборочно привлекают ТЫ-клетки. Эти Т-клетки характеризуются продукцией ИЛ-2, ИФН-у, ФНО-Р [9].
Хемокины регулируют движение лимфоцитов, активируя клеточную подвижность и молекулы адгезии[8].
CCR5 (C-C рецептор хемокина 5, англ. C-C chemokine receptor type 5) — белок человека, кодируемый геном CCR5. CCR5 является членом подкласса рецепторов бета-хемокинов, класса интегральных мембранных белков. Ген CCR5 расположен на коротком плече 3-й хромосомы. CCR5-A32 представляет собой делецию 32 пар оснований, приводящую к нарушению адгезивных свойств кодируемого ею белка CCR5 Т-клеток [5].
Таблица 1
Классификации ювенильного идиопатического артрита
ACR (Американская коллегия ревматологов) Еи1^ (Европейская лига против ревматизма) НА* (Международная лига ревматологических ассоциаций)
• Ювенильный ревматоидный артрит • Системный • Полиартикулярный • Олиго (пауци-) артикулярный • Ювенильный хронический артрит • Системный • Ювенильный ревматоидный артрит (РФ+) • Полиартикулярный (РФ-) • Олиго(пауци-)артикулярный • Олиго ^Полиартикулярный • Ювенильный анкилозирующий спондилит • Ювенильный псориатический артрит • Ювенильный идиопатический артрит • Системный • Полиартикулярный РФ- • Полиартикулярный РФ+ • Олигоартикулярный • Персистирующий • Распространившийся • Псориатический артрит • Энтезитный артрит • Другие артриты
В 1997 г. исследователи обнаружили протектив-ное действие к ВИЧ гомозиготности по делеции в 32 bp (bp — пара оснований) в гене хемокинового рецептора CCR5 [Zimmerman P. et al., 1997]. Деле-ция части гена CCR5 приводит к невозможности присоединения вируса ВИЧ к Т-клетке. В гетерозиготном состоянии эта мутация сильно уменьшает шанс инфицирования клетки ВИЧ, в гомозиготном приводит к полной невозможности инфицирования ВИЧ.
CCR5 представляет собой белок адгезии и является рецептором, сопряженным с G белком. Белок CCR5 экспрессируется преимущественно Т-клетками, макрофагами, дендритными клетками и клетками микроглии [14]. Его функция заключается в накоплении Т-хелперов 1 в синовии, где они аккумулируются и продуцируют провоспалительные цитокины, такие как ИЛ-2 и ИНФ-у, что приводит к развитию синовита и деструкции сустава. CCR5 присоединяет различные провоспалительные хемокины, включающие СС хемокины, такие как CCL5 (воспалительный макрофагальный белок 1a), CCL4 (воспалительный макрофагальный белок b), CCL5 (регулятор роста, активации, секреции Т-клеток). Эти хемо-кины были обнаружены в высокой концентрации
Распространенность и ежегодный прирост ревматоидного артрита в п
в синовиальной жидкости пациентов с ревматоидным артритом, что дало предположение о селективном накоплении CCR5+ Т-клеток в синовиальной жидкости в ответ на присутствие данных хемокинов [10].
Было отмечено, что количество CCR5 на поверхности клетки устанавливает интенсивность Т-клеточной миграции к синовиоцитам и их стимуляцию CCL5. Уровень CCR5 экспрессии может влиять на воспалительный эффект Т-клеток в синовиальной жидкости, облегчая их накопление и повышая их ответ на хемокины. Возможно, количество CCR5 на поверхности клетки может являться предиктором активности заболевания
[5].
В 1998 году было предположено, что мутация CCR5delta32 является протективным фактором в развитии ревматоидного артрита (РА). Hinks et а1. предположили связь между геном CCR5 и юве-нильным идиопатическим артритом. Было предположено, что CCR5de1ta32 имеет протективную роль в развитии ЮИА [9].
Интерес именно к этому гену не случаен, поскольку кодируемый им рецептор CCR5 ассоциирован с ТЪ-1-иммунным ответом при многих аутоиммунных заболеваниях.
Таблица 2
уляции разных стран (Alamanos У et а1., 2005)
Популяция Распространенность (%) Ежегодный прирост (%)
США в целом 0,9-1,1 0,02-0,07
США коренные 5,3-6,0 0,09-0,89
Великобритания 0,8-1,10 0,02-0,04
Финляндия 0,8 0,03-0,04
Швеция 0,5-0,9
Норвегия 0,4-0,5 0,02-0,03
Нидерланды 0,9 0,05
Дания 0,9
Ирландия 0,5
Испания 0,5
Франция 0,6 0,01
Италия 0,3
Греция 0,3-0,7 0,02
Болгария 0,9
Распределение в популяциях мутации гена рецептора CCR5 имеет четко выраженный этнический и расовый характер [7].
Этот ген встречается у 20 % людей белой расы [Garred P., 1998]. У афроамериканцев в популяции до 6 % гетерозигот, у испанцев до 7 %, у азиатов менее 1 %. Среди африканцев, таиландцев, японцев и корейцев практически не встречаются гетерозиготы по делеции в гене CCR5 [McNicholl J. et al., 1997]. Северная Африка — 2 %, CCR5D32 не встречается в центральной и западной Африке [2].
Мутация CCR5-A32 в гетерозиготном состоянии встречается в Европе с частотой 5-14 % [12]. В Северной Европе она встречается чаще. В центральной и западной Европе средняя частота составляет 10 %, на юге — меньше, например, Португалия и Греция — 4-6 %. Наивысшие в мире частоты CCR5-A32 отмечены у поморов (33 %, из них 3 % — в гомозиготном состоянии). У русских в целом и украинцев частоты этой мутации в среднем составляют 21 % [2].
Неравномерность распространения CCR5D32 в Европе связывали с климато-географическими факторами. Ранние исследования Stephens et al. сводились к предположению о том, что данная мутация возникла не из-за дрейфа генов, а появилась внезапно. До сих пор многие авторы обсуждают вопрос о том, что Черная Чума 1348 года является причиной возникновения данной мутации [3].
Преобладание CCR5-положительных синовиальных мононуклеарных клеток среди пациентов с различными типами артритов предполагает, что CCR5 играет важную роль в синовиальном воспалении. У детей с ювенильным ревматоидным артритом синовиальные Т-клетки экспрессируют более высокий уровень CCR5. Делеция в 32 положении открытой рамки считывания (экзон 3) гена кодирующего CCR5 (CCR5-A32) исследовалась на предмет ассоциации с ревматоидным артритом у взрослых с противоречивыми результатами. Гомозиготность по CCR5-A32 приводит к отсутствию экспрессии CCR5 на поверхности клетки. Эта аллель ассоциирована с защитой от ревматоидного артрита у взрослых. Prahalad S. et al. (2006) проверяли гипотезу, что генетические вариации CCR5 ассоциированы с восприимчивостью к ЮРА [9]. Результаты показали, что два варианта (CCR5-1835T и CCR5-A32) гена, кодирующего CCR5 ассоциированы с ювенильным ревматоидным артритом, особенно у детей с дебютом заболевания в возрасте ранее 6 лет. Они обладают защитным эффектом в отношении заболевания. CCR5-Delta32 был значительно ниже у пробандов с ранним началом ювенильного ревматоидного артрита [9].
Целью исследования Lindner E. et al. (2007) было установить, ассоциирован ли полиморфизм CCR5Delta32 с ревматоидным артритом и ювенильным идиопатическим артритом в норвежской популяции. 853 пациента с ревматоидным артритом, 524 пациента с ювенильным идиопатическим артритом и 658 контрольных типировали на CCR5Delta32 полиморфизм. Частота аллели CCR5Delta32 составила 11,5 % у контрольных, 10,4 % у пациентов с ревматоидным артритом и 9,7 % у пациентов с ювенильным идиопатическим артритом. Данные результаты не подтвердили связь между аллелью CCR5Delta32 и ревматоидным артритом и ювенильным идиопатическим артритом у норвежцев [6].
Scheibel I. et al. (2008) изучали, асооциирован ли полиморфизм CCR5Delta32 с ювенильным идио-патическим артритом и ревматоидным артритом у бразильских пациентов. В исследовании принимали участие 203 пациента с ревматоидным артритом, 101 пациент с ювенильным идиопатическим артритом и 104 здоровых. Частота Delta32 аллели была выше у пациентов с ювенильным идиопатическим артритом (9,4 %) как в сравнении с контрольными (3,8 %), так и с пациентами с ревматоидным артритом (3,2 %). В группе ювенильного идиопатического артрита CCR5Delta32 аллель наблюдалась в 4,1 % случаев олигоартрита, в 11,2 % при полиартрите (9,5 % при РФ-негативном и 33,3 % при РФ-позитивном) и в 25 % при системном варианте ювенильного идиопатического артрита. Результаты данного исследования предполагают, что при ювенильном идиопатическом артрите, в отличие от ревматоидного артрита CCR5Delta32 не обладает защитным эффектом, а напротив, может быть фактором, ассоциированным с более тяжелыми формами заболевания [15].
Учитывая противоречивые результаты поиска связи CCR5A32 с ювенильным идиопатическим артритом (в одном исследовании сообщается о протективной связи CCR5A32 с ювенильным иди-опатическим артритом [9], другое не выявляет связи [6], а третье обнаруживает, что CCR5A32 связан с восприимчивостью к ювенильному ревматоидному артриту [15]) Hinks A. et al. (2010) изучали связь CCR5A32 с ювенильным идиопатическим артритом в британской популяции. CCR5A32 был типирован у 1054 пациентов с ювенильным идиопатическим артритом и 3129 здоровых контрольных. CCR5A32 оказался значительно ассоциирован с защитой от развития ювенильного идиопатического артрита в данной британской популяции. Интересно, что наиболее выраженный защитный эффект был обнаружен в группе РФ-положительного полиартри-
Рис. 1. Гель-документирование результатов ПЦР с прай-мерами
тического варианта, хотя существенной разницы в частоте аллели среди всех подтипов не наблюдалось. Мета-анализ всех опубликованных ранее исследований подтвердил защитную связь CCR5A32 с ЮИА. CCR5A32 определяет число рецепторов на поверхности Т-клеток, и, предполагается, что уровень CCR5 экспрессии может влиять на миграцию провоспалительных клеток в синовиальную оболочку, и, таким образом, на восприимчивость к ювенильному идиопатическому артриту [5].
Целью нашего исследования была попытка оценить протективную роль мутации CCR5-A32 у детей различной этнической принадлежности, страдающих системным ювенильным ревматоидным артритом (сЮРА).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Было проанализировано 234 образца ДНК пациентов с системными формами ЮИА. 210 образцов было предоставлено отделением ревматологии детского госпиталя Цинциннати (Огайо, США) в виде выделенной ДНК. Из них 175 пациентов — североамериканцы, 20 — латиноамериканцы, 12 — афроамериканцы, 1 — коренной житель Америки, 1 — азиат и 1 — мультирассовый представитель. 24 образца получены из клиники педиатрии №3 Санкт-Петербургской педиатрической медицинской академии в виде высушенной на фильтровальной бумаге крови. ДНК была выделена с использованием QIAamp Mini Kit (QIAGEN) в соответствии с прилагаемым протоколом. Диагноз был установлен в соответствии с критериями ILAR, все пациенты были информированы и дали согласие на участие в исследовании. У 25 пациентов течение ЮИА было осложнено синдромом ма-крофагальной активации.
С целью идентификации делеции CCR5 delta32 применялась полимеразная цепная реакция (ПЦР) с применением праймеров: CCR5-D32-F: 5,CTTCATTACACCTGCAGTCT, CCR5 -D32-R: 5TGAAGATAAGCCTCACAGCC3' при следующих
условиях: 95°-5' х 1; 9545» ^ 5545» ^ 72°-60» х 40; 72°-10' х 1 ^ 4°- да; продукты реакции были разделены в 2%-м агарозном геле в течение 1,5 часов; гель-документирование проводилось с помощью Gel Doc XR Plus (Bio-Rad, США) (рис. 1).
Для оценки полученных данных использовались методы статистического описания, а также методы проверки статистических гипотез.
Результаты исследования представлены в таблице 3.
По результатам проведенного исследования распространенность гетерозиготной формы CCR5 delta32 среди пациентов с системными формами ревматоидного артрита составила 16 %. При этом мутация CCR5 delta32 не была выявлена среди латиноамериканцев, афроамериканцев, что может быть обусловлено малым числом пациентов (20 и 12 соответственно) и низкой распространенностью данной мутации в этих этнических группах. Среди североамериканцев, выходцев из Европы, распространенность гетерозигот по CCR5 Д32 составила 16 %; у пациентов из России эта величина равна 21 %. Распространенность гетерозигот CCR5d32 среди пациентов с МАС составила 17 %. Среди обследованных больных ЮИА не было выявлено носителей делеции гена хемокинового рецептора CCR5 в гомозиготном состоянии (CCR5del32/CCR5del32).
ВЫВОДЫ
Предполагается, что неодинаковая распространенность в различных этнических группах HLA-генотипа и мутации CCR5-A32, приводящей к нарушению адгезивных свойств кодируемого белка CCR5, является одной из причин неодинаковой распространенности ювенильного ревматоидного артрита в различных популяциях. Предпосылками к тому, что мутация CCR5del32 может иметь значение в определении подверженности к этому заболеванию, явились наблюдения, показавшие, что делеционный полиморфизм CCR5 кроме этнической специфичности обнаруживает также по-пуляционное и географическое разнообразие. Но сообщения о роли делеции гена хемокинового рецептора CCR5 в восприимчивости к ЮИА достаточно противоречивы.
Результаты исследования не выявили отличий распространенности мутации у больных системной формой ЮИА, у пациентов с МАС и в популяции в целом.
Наши результаты не позволяют считать доказанной протективную роль мутации CCR5-A32 относительно системного ЮРА, что может быть обусловлено возможной взаимосвязью с HLA-генотипом либо с прочими факторами, ассоциированными с этниче-
Таблица 3
Результаты определения мутации CCR5 delta32 у пациентов с системными формами ревматоидного артрита в различных популяциях
Группа Всего пациентов CCR5/CCR5 CCR5/CCR5Ä32 CCR5A32/CCR5Ä32
Северо-американцы 175 147 28 0
Русские 24 19 5 0
Латино-американцы 20 20 0 0
Афро-американцы 12 12 0 0
Коренные жители Америки 1 1 0 0
Азиаты 1 1 0 0
Мультирасовый представиель 1 1 0 0
ской принадлежностью. Вместе с тем, это может быть расценено, как дополнительное свидетельство целесообразности выделения системного ЮРА в качестве самостоятельного заболевания [12]. Данная проблема требует дальнейшего изучения.
список литературы
1. Клинические рекомендации. Ревматология / под ред. Е. Л. Насонова. - М., 2006. - P. 120-121.
2. Arenzana-Seisdedos F., Parmentier M. Genetics of resistance to HIV infection: Role of co-receptors and co-receptor ligands // Seminars in Immunology 18. - 2006. - P. 387-403.
3. Cohn S. K, Weaver L. T. The Black Death and AIDS: CCR5-_32in genetics and history // O. J. Med. -
2006. - Vol. 99. - P. 497-503.
4. Hinks A., Martin P., Flynn E. et al. Childhood Arthritis Prospective Study (CAPS), UKRAG Consortium, BSPAR Study Group, Barton A, Worthington J, Thomson W. Association of the CCR5 gene with juvenile idiopathic arthritis // Genes Immun. - 2010. - Vol. 11, N 7. -P. 584-589.
5. Hinks A, Martin P., Flynn E, Packham J. Association of the CCR5 gene with juvenile idiopathic arthritis // Genes and Immunity. - 2010. - N 11. - P. 584-589.
6. Lindner E., Nordang G. B., Melum E. et al. Lack of association between the chemokine receptor 5 polymorphism CCR5delta32 in rheumatoid arthritis and juvenile idiopathic arthritis // BMC Med Genet. -
2007. - Vol. 12, N 8. - P. 33.
7. Novembre J., Galvani A. P., Slatkin M. The Geographic Spread of the CCR5 D32 HIV-Resistance Allele // PLoS Biology. - www.plosbiology.org. - 2005. -Volume 3, Issue 11. - e339.
8. Pokorny V., McQueen F., Yeoman S. et al. Evidence for negative association of the chemokine receptor CCR5 d32 polymorphism with rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. - 2005. - Vol. 64. - P. 487-490.
9. Prahalad S., Bohnsack J. F., Jorde L. B. et al. Association of two functional polymorphisms in the CCR5 gene with juvenile rheumatoid arthritis // Genes Immun. -2006. - Vol. 7, N 6. - P. 468-475.
10. Prahalad S. Negative association between the chemokine receptor CCR5-A32 polymorphism and rheumatoid arthritis: A meta-analysis // Genes Immun. - 2006. - Vol. 7, N 3. - P. 264-268.
11. Prakken B, Albani S., Martini A. Juvenile idiopathic arthritis // The Lancet. - 2011. - Vol. 377, Issue 9783. - P. 2138-2149.
12. Ramanan A. V, GromA. A. Does systemic-onset juvenile idiopathic arthritis belong under juvenile idiopathic arthritis? // Rheumatology. - 2005. - Vol. 44. -P. 1350-1353.
13. Ravelli A, Martini A. Juvenile idiopathic arthritis // Lancet. - 2007. - P. 767-78.
14. 0dum N., Bregenholt S, Eriksen K. W. et al. The CC-chemokine receptor 5 (CCR5)is a marker of, but not essential for the development of human Th1 // Tissue Antigens. - 1999. - Vol. 54. - P. 572-577.
15. Scheibel I., Veit T, Neves A. G. et al. Differential CCR5Delta32 allelic frequencies in juvenile idiopathic arthritis subtypes: evidence for different regulatory roles of CCR5 in rheumatological diseases // Scand. J. Rheumatol. - 2008. - Vol. 37, N 1. - P. 13-17.
mutation ccR5DELTA32 As A DETERMINANT of system onset and severity of juvenile idiopathic arthritis
Fedorova E. V., EgorovA, Ammosova T., Avrusin S. L, Santimov A, Nekhai S., Grom A.,. Chasnyk V. G.
♦ Resume. It is suspected that the prevalence in different ethnic groups of HLA-genotype and of mutation CCR5delta32 -factors which alter adhesion of protein CCR5 - are the causes of different prevalence of juvenile idiopathic arthritis in different ethnic populations. Our results, based on the analysis of 234 DNA-samples (QIAamp Mini Kit) drawn from patients with soJIA didn't reveal any differences in prevalence of mutation in patients with soJIA, in patients with soJIA + MAS and in total population. Our results do not support the idea of protective role of the mutation CCR5delta32 against soJIA, which conclusion can be explained also by probable association of soJIA with HLA-genotype or other factors of ethnicity.
At the same time it can be considered as an additional evidence of expediency of soJIA being an original disease different from the rest of JIA group of diseases.
♦ Key words: system onset juvenile idiopathic arthritis; mutation; CCR5delta32; ethnicity.
♦ Информация об авторах
Федорова Елена Владимировна — аспирант. Кафедра госпитальной педиатрии. ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Минздрав-соцразвития России. 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2. E-mail: [email protected].
Егоров Андрей — аспирант. Кафедра госпитальной педиатрии. ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Минздравсоцразвития России. 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2. E-mail: [email protected].
Аммосова Татьяна — научный сотрудник. Лаборатория протео-мики. Университет Говарда. 20001, Вашингтон, США. E-mail: [email protected].
Аврусин Сергей Львович — к. м. н., доцент. Кафедра госпитальной педиатрии. ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Минздравсоцраз-вития России. 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2. E-mail: [email protected].
Сантимов Андрей — аспирант. Кафедра госпитальной педиатрии. ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Минздравсоцразвития России. 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2. E-mail: [email protected].
Нехай Сергей — к. м. н., доцент. Центр серповидноклеточной анемии. Университет Говарда. 20001, Вашингтон, США. E-mail: [email protected].
Гром Алексей — доцент, педиатрическое отделение. Детский госпиталь Цинциннати. 3333, Цинциннати, США. E-mail: [email protected].
Часнык Вячеслав Григорьевич — д. м. н., профессор, заведующий кафедрой госпитальной педиатрии. ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Минздравсоцразвития России. 194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская, д. 2. E-mail: [email protected].
Fedorova Elena Vladimirovna - postdoctoral research fellow. Chair of Hospital Pediatrics, State Pediatric Medical Academy. 2 Litovskaya street, St. Petersburg, 194100, Russian Federation. E-mail: [email protected].
EgorovAndrei - postdoctoral research fellow. Chair of Hospital Pediatrics, State Pediatric Medical Academy. 2 Litovskaya street, St. Petersburg, 194100, Russian Federation. E-mail: andrew_ [email protected].
Ammosova Tatyana - Research Fellow. Laboratory of Proteomics, Howard University . 1840 7th St., NW. HURB1 Suite 202, Washington DC 20001, USA. E-mail: [email protected]. Avrusin Sergei L'vovich - Associate Professor. Chair of Hospital Pediatrics, State Pediatric Medical Academy. 2 Litovskaya street, St. Petersburg, 194100, Russian Federation. E-mail: avrusin4@ gmail.com.
Santimov Andrey - postdoctoral research fellow. Chair of Hospital Pediatrics, State Pediatric Medical Academy. 2 Litovskaya street, St. Petersburg, 194100, Russian Federation. E-mail: [email protected].
Nekhai Sergei - Associate Professor. Center for Sickle Cell Disease, Howard University. 1840 7th St., NW. HURB1 Suite 202, Washington DC 20001, USA. E-mail: [email protected]. Grom Alexei - Associate Professor. UC Department of Pediatrics, Cincinnati Children's Hospital. 13333, Burnet Avenue, Cincinnati, Ohio 45229-3026, USA. E-mail: [email protected]. Chasnyk Vyacheslav Grigor'evich - Professor, Head of the Department of Hospital Pediatrics. Saint-Petersburg State Pediatric Medical Academy. 2 Litovskaya street, St. Petersburg, 194100, Russian Federation. E-mail: [email protected].
