CC BY
14ФАРМАКОГНОЗИЯ И БОТАНИКА
О.А. Ёршик, Г.Н. Бузук, О.В. Созинов1
МОРФОМЕТРИЯ САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО: ВЗАИМОСВЯЗЬ РАЗМЕРОВ, ФОРМЫ И ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЛИСТЬЕВ
Витебский государственный медицинский университет 1Гродненский государственный университет им. Я. Купалы
Впервые изучена взаимосвязь между размерами, дескрипторами формы листьев сабельника болотного и накоплением в них различных групп фенольных соединений. Зависимости содержания различных групп фенольных соединений от исследованных параметров листьев имеют в основном линейный характер. Условия произрастания, способствующие формированию у сабельника болотного мелких листьев с вытянутой (узкой) терминальной листовой пластинкой, способствуют накоплению в них различных групп фенольных соединений. Наблюдается тесная связь между содержанием проантоцианидинов в листьях и корневищах (г=0,99) сабельника болотного. В меньшей степени эта связь выражена для суммы фенольных соединений и флавоноидов. Можно прогнозировать содержание действующих веществ в сырье сабельника болотного по морфологическим параметрам листьев и их частей, при этом пробы листьев для индикации и сырья могут быть взяты в различные (оптимальные для каждого органа) сроки.
ВВЕДЕНИЕ
Изучению влияния различных экологических факторов на морфологию и анатомию листьев посвящено большое количество работ [1-7]. Известно, что количественные признаки листьев могут служить для оценки сходства и различий эко-ценотических режимов участков местообитания [8, 9], индикатором изменения усло-
вий произрастания [10] и являться критерием эффективности действия того или иного фактора на продуктивность растений [11]. Экологические условия влияют на содержание в различных органах и структурах растений, в том числе и листьях, различных биологически активных веществ (фенольных соединений, алкалоидов, терпеноидов и других) [12-16].
Взаимосвязь между морфологическими параметрами листьев (длина, ширина, площадь, периметр, форма) и накоплением в них различных групп вторичных соединений практически не изучена. Этому вопросу посвящены единичные исследования [17, 18]. Изучение данной зависимости представляет большой интерес для практики: на основе видимых и легко определяемых в полевых условиях морфологических признаков можно прогнозировать содержание биологически активных веществ в лекарственных растениях.
Важным этапом данных исследований является разработка методических подходов: методики взятия репрезентативных образцов, в наибольшей степени отражающих влияние экологических условий на форму и размеры листьев отдельных особей и ценопопуляции в целом изучаемого вида. Разработанная методика должна быть нетрудоемкой и легко выполнимой в полевых условиях.
Проведенные ранее исследования [19-21] позволили нам впервые установить взаимосвязь между размерами, дескрипторами формы листьев черники, брусники и накоплением в них различных групп фенольных соединений. Было обнаружено, что зависимости содержания различных групп фенольных соединений от исследованных параметров листьев имеют в основном нелинейный характер с общей тенденцией максимального накопления указанных соединений в условиях произрастания, способствующих формированию небольших по размеру листьев.
Целью данной работы является установление взаимосвязи между размерами, дескрипторами формы листьев сабельника
болотного и накоплением в них различных групп фенольных соединений.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В отличие от исследованных ранее брусники и черники, для которых характерны цельные листья, у сабельника болотного листья перистые, с непостоянным числом фрагментов, от трех до семи. Поэтому возникла необходимость в уточнении методики взятия образцов: в качестве индикаторной была выбрана терминальная листовая пластинка наиболее развитого листа сабельника болотного.
Подобный подход использовался ранее при разработке недеструктивных методик оценки площади листьев различных видов и сортов клевера [22-27].
На учетных площадках, заложенных в различных, по возможности контра-
стных, экологических условиях, случайным образом срезали 30-40 наиболее развитых листьев сабельника. С каждого листа отделяли терминальную листовую пластинку, которую фиксировали в полевых условиях на клейкой прозрачной ленте (скотч), закрывали фильтровальной бумагой и закладывали в гербарный пресс. Далее поступали как при сушке обычного гербария.
Для измерения морфологических параметров листьев полученный гербарий сканировали (сканер EPSON Perfection 1270, RGB, 24 bit, 150 dpi).
Полученные изображения обрабатывали с помощью программы ImageJ 1.42G и подпрограмм: http://www.gcsca.net/IJ/Shape_-
Descriptorlp.java, http://www.optinav.com/-
download/Measure_Roi_Curve.java.
Определяли следующие линейные, нелинейные параметры размера и дескрипторы формы листьев [19-21]:
Площадь (Б) листа, мм2;
Периметр (Р) листа, мм;
Большая ось эллипса (БОЭ), вписанного в лист;
Малая ось эллипса (МОЭ), вписанного в лист;
Длина (Ь) листа по линии центральной жилки, мм;
Наибольшая ширина (Ш) листа, мм;
Наибольшая длина по диагонали (ДД), мм;
Фактор формы (ФФ): ФФ = (4п х £)/(Р)2;
Фактор округлости (ФО): ФО = (4 х Б)/(пх БОЭ);
Фактор компактности (ФК): ФК = ^(4п х £) / БОЭ ;
Фактор отношения длины к диаметру (ФДД): ФДД = БОЭ /МОЭ;
Средний диаметр (СД): СД = VБ/пх 2 ;
Фактор твердости (ФТ): ФТ = (Б/БВ ), где БВ - площадь выпуклой части;
Фактор выпуклости (ФВ): ФВ = РВ / Р, где РВ - периметр выпуклой части.
Оставшиеся побеги с листьями подвергали естественной сушке в тени, затем листья одергивали. Образцы до анализа хранили в бумажных пакетах.
За день-два до проведения анализа листья измельчали на кофемолке до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями 0,25 мм.
Спиртовые извлечения листьев и корневищ с корнями сабельника болотного получали согласно [28]. Определение содержания фенольных соединений, флаво-ноидов и проантоцианидинов проводили методом спектрофотометрии [19-21, 2В, 2931]. Статистическую обработку данных проводили методами корреляционного и регрессионного анализа с использованием пакетов программ Matlab 7 и Excel 2003 и приложения XLStats [32].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
На первом этапе определяли связь параметров терминальной листовой пластинки с параметрами для целого листа, рассчитанных как сумма параметров всех листовых пластинок, включая терминальную. Полученные данные представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Корреляционная матрица параметров терминальной листовой пластинки
и целого листа
Целый лист Терминальная листовая пластинка
S P БОЭ МОЭ ДД L Ш
S 0,88 0,86 0,76 0,90 0,81 0,84 0,90
P 0,60 0,77 0,51 0,63 0,60 0,69 0,65
БОЭ 0,73 0,81 0,64 0,74 0,71 0,77 0,75
МОЭ 0,56 0,53 0,36 0,74 0,43 0,48 0,74
ДД 0,75 0,83 0,68 0,75 0,75 0,80 0,76
L 0,69 0,82 0,61 0,70 0,69 0,76 0,71
Ш 0,64 0,60 0,45 0,78 0,52 0,57 0,78
Как видно из данных корреляционного анализа, имеются достоверные связи параметров терминальной листовой пластинки с такими же параметрами цельного листа. Связи носят линейный характер
(рис. 1). Отсюда следует возможность прогнозирования параметров сложного листа путем оценки параметров его терминальной листовой пластинки.
Рис. 1. Взаимосвязь площади целого листа (Б) и его терминальной листовой пластинки (Б1)
Кроме того, как видно из таблицы 2, зующими размеры терминальной листовой
имеются достоверные зависимости между пластинки листьев сабельника болотного.
определяемыми параметрами, характери-
аблица 2 - Корреляционная матрица параметров терминальной листовой пластинки
Параметр листа Б Р БОЭ МОЭ ДД ь Ш
Б
Р 0,90
БОЭ 0,95 0,91
МОЭ 0,92 0,78 0,75
ДД 0,95 0,95 0,99 0,78
ь 0,94 0,98 0,97 0,79 0,99
Ш 0,92 0,79 0,76 1,00 0,79 0,80
Это позволило предложить регрессионные уравнения для расчета таких нелинейных параметров листьев, как площадь и периметр, на основании вариантов измерений их длины и ширины (табл. 3) с высокой точностью (коэффициент детерминации - Б = 0,83-0,96).
Таблица 3 - Регрессионные уравнения связи площади и периметра листа с их длиной ___________________________________и шириной_____________________
Уравнение регрессии (п = 472) Б
£ = -1669,444 + 42,782 х БОЭ 0,86
£ = -908,649 + 98,953 х МОЭ 0,94
£ = -1718,633 + 39,726 х ДД 0,87
£ = -1605,688 + 32,852 х Ь 0,89
£ = -919,547 + 96,805 х Ш 0,93
Р = -9,357 + 3,581 х БОЭ 0,87
Р = 67,94 + 7,767 х МОЭ 0,83
Р = -15,607 + 3,35 х ДД 0,90
Р = -14,504 + 2,854 х Ь 0,96
Р = 66,602 + 7,616 х Ш 0,83
Для оценки силы и характера влияния экологических факторов на исследованные морфологические параметры и дескрипторы формы листьев сабельника болотного (терминальная листовая пластинка) применяли дисперсионный анализ.
Силу влияния экологических факторов ( [л ) на параметры листьев сабельника болотного определяли по формуле (1): л = 1 / О, )х(( -1)/(( - а)) (1),
где Бг - дисперсия, вызванная случайными факторами (остаточная);
- дисперсия общая;
N - общее количество исследованных листьев, (472);
а - общее количество исследованных ценопопуляций, (12).
Представленные в таблице 4 результаты показывают, что в наибольшей степени подвержены влиянию экологических факторов морфологические параметры листьев, такие как площадь (Б), периметр (Р), большая (БОЭ) и малая (МОЭ) оси эллипса, вписанного в лист, длина (Ь), ширина (Ш), длина по диагонали (ДД), средний диаметр (СД); в меньшей степени - параметры (дескрипторы) формы - факторы формы (ФФ), округлости (ФО), компактности (ФК), отношения длины к диаметру (ФДД), твердости (ФТ), выпуклости (ФВ).
Таблица 4 - Сила (/л) и достоверность (Б) влияния экологических условий на параметры терминальной листовой пластинки листьев сабельника болотного (п = 472)
Параметр л Б
Б 0,77 145,25
Р 0,77 146,30
БОЭ 0,79 161,39
МОЭ 0,74 125,45
ДД 0,79 163,35
ь 0,78 151,52
Ш 0,74 123,12
фф 0,13 7,36
ФО 0,34 23,00
ФК 0,35 24,26
ФДД 0,39 27,89
СД 0,81 184,37
ФТ 0,30 19,78
ФВ 0,27 16,91
Примечание - Г - критерий Фишера
Для оценки взаимосвязей между морфологическими параметрами и дескрипторами формы терминальной листовой пластинки листьев сабельника болотного и содержанием в них различных групп фенольных соединений в дальнейшем использовали регрессионный анализ при аппроксимации зависимостей полиномами степеней 1-4.
Лучшие результаты были получены при аппроксимации зависимостей полиномом первой степени.
Дальнейшее повышение степени полинома лишь незначительно улучшало аппроксимацию или, напротив, даже ухудшало ее.
Данные регрессионного анализа (рисунки 2-6, таблица 5) показывают, что в наибольшей степени с линейными (БОЭ, МОЭ, Ь, Ш, ДД) и нелинейными (Б, Р) параметрами листьев связано содержание суммы фенольных соединений, в меньшей степени - содержание флавоноидов и, не-
значительно, проантоцианидинов. Наблюдается общая тенденция: с уменьшением размеров листьев происходит увеличение содержания исследуемых групп биологически активных веществ.
Наибольшее число достоверных связей (р<0,05) параметров формы (ФФ, ФО, ФК, ФДД, СД, ФТ, Фв) наблюдали для суммы фенольных соединений и в единичных случаях для проантоцианиди-нов и флавоноидов.
Общей тенденцией является повышение содержания биологически активных веществ с увеличением вытянутости терминальной листовой пластинки листа сабельника болотного.
Таким образом, условия произрастания, способствующие формированию у сабельника болотного мелких листьев с вытянутой (узкой) терминальной листовой пластинкой, способствуют накоплению в них различных групп фенольных соединений.
Таблица 5 - Уравнения регрессии связи фенольных соединений (Х,%), флавоноидов (г,%), проанто-цианидинов (W,%) с параметрами терминальной листовой пластинки листа сабельника _______________________________________(У = Ь х X + а)_________________________________
ь а Б Р
X -0,001130x8 8,317769 0,64 0,002
W -0,000130хБ 0,648811 0,31 0,063
г -0,000300x8 2,123141 0,34 0,046
X -0,013650хр 10,165210 0,65 0,002
W -0,001780хр 0,917211 0,39 0,030
г -0,003570 хр 2,596013 0,33 0,049
X -0,046360хБОЭ 10,090680 0,53 0,008
W -0,005660 хБОЭ 0,876110 0,28 0,080
г -0,013770хБОЭ 2,705988 0,35 0,044
X -0,109480 хМОЭ 9,320640 0,60 0,003
W -0,012050хМОЭ 0,747343 0,25 0,095
г -0,028370хШЭ 2,367895 0,30 0,066
X -0,043900хДД 10,229120 0,58 0,004
W -0,005330хДД 0,890642 0,30 0,066
г -0,012630хДД 2,712064 0,36 0,040
X -0,037410 хЬ 10,220520 0,60 0,003
W -0,004870 хЬ 0,922448 0,36 0,040
г -0,010040 хЬ 2,636134 0,32 0,054
X -0,105590хШ 9,296858 0,59 0,004
W -0,011750хШ 0,748000 0,26 0,094
г -0,026540хШ 2,339553 0,28 0,079
X 9,039413хфф 3,941228 0,03 0,622
W 5,545371 хфф -1,098120 0,33 0,049
г -0,086160хфф 1,642896 0,00 0,990
X -19,539700хФО 12,870810 0,39 0,030
W -1,376350хфО 0,882789 0,07 0,413
г -3,356960хфО 2,725566 0,09 0,355
X -23,049100хФК 19,674470 0,39 0,029
W -1,243240хфК 1,143514 0,04 0,532
г -4,477350хфК 4,191778 0,11 0,290
X 2,061746хФДД 0,151957 0,39 0,029
W 0,129659хфДД 0,034302 0,05 0,465
г 0,356844хфДД 0,532429 0,09 0,349
X -0,076210хСД 9,895565 0,62 0,002
W -0,008710 хСД 0,825240 0,29 0,073
г -0,021460хСД 2,594792 0,37 0,036
X 7,635514хфТ -0,587480 0,01 0,795
W 7,504673 хфТ -6,468880 0,24 0,107
г -10,663600хфТ 11,420750 0,10 0,310
X 22,211130хФВ -8,913360 0,34 0,046
W 4,126023хФВ -2,421230 0,41 0,024
г 3,851064хфВ -1,041280 0,08 0,384
Примечание - Б - коэффициент детерминации, жирным шрифтом выделены уравнения, достоверные на 5% (р<0,05) и более высоких уровнях значимости
Имеется четкая взаимосвязь между числом выявленных связей фенольных соединений с их содержанием в листьях (рисунок 7), независимо от их возраста и расположения. Наибольшее число связей с параметрами терминальной листовой пластинки листьев наблюдали для суммы фенольных соединений, содержание которых наибольшее (8,3-11,0%), значительно
меньшее - суммы флавоноидов (1,401,75%) и проантоцианидинов (0,34-0,52%). Данный факт косвенно указывает на наличие в сумме фенольных соединений веществ с более выраженным адаптивным потенциалом по сравнению с флавоноида-ми и проантоцианидинами.
12
10 -
8
6
4 -
2
0
2
□ 3
Х,%
1. нижний лист; 2. срединный лист; 3. верхний лист;
г, %
Рис. 7. Содержание суммы фенольных соединений (Х,%), проантоцианидинов (^,%) и флавоноидов (г,%) в листовых пластинках листьев сабельника болотного различного
возраста и положения на побеге
Физиологический механизм таких взаимосвязей объясняется следующим образом: фенольные соединения, в том числе дубильные вещества, являются, с одной стороны, ингибиторами действия гиббе-реллинов [33-36], а с другой - ингибируют (о-дифенолы) или усиливают (монофенолы) катаболизм индолилуксусной кислоты [37], а также нарушают или модифицируют транспорт фитогормонов [38, 39]. Оба фитогормона играют ведущую роль в регуляции роста и развития листьев растений [40, 41], поэтому накопление в листьях фенольных соединений ведет к подавлению эффектов гиббереллинов и
ауксинов, что замедляет рост листьев и модифицирует их форму.
Для определения силы связи содержания различных групп фенольных соединений в терминальной листовой пластинке листьев, собранных в период их максимального развития (стадия цветения - начало плодоношения), с таковыми у корневищ, собранных в период их заготовки (конец вегетационного периода), собирали образцы сырья сабельника болотного из тех же мест произрастания.
Полученные данные подвергнуты корреляционному анализу (таблица 6).
1
Таблица 6 - Корреляционная матрица содержания суммы фенольных соединений (Х,%), проантоцианидинов (W,%) и флавоноидов (Z,%) в терминальной листовой пластинке листьев
(L) и ко
рневищах (R) сабельника болотного
Xl Wl Zl Xr Wr Zr
ХL
Wl 0,84
Zl 0,73 0,98
Xr -0,58 -0,05 0,13
Wr 0,75 0,99 1,00 0,10
Zr 0,94 0,61 0,45 -0,82 0,48
Наблюдается тесная связь между содержанием проантоцианидинов в листьях и корневищах (r=0,99) сабельника болотного. В меньшей степени эта связь выражена для суммы фенольных соединений и флаво-ноидов.
Таким образом, можно прогнозировать содержание действующих веществ в сырье сабельника болотного по морфологическим параметрам листьев и их частей, при этом пробы листьев для индикации и сырья могут быть взяты в различные (оптимальные для каждого органа) сроки.
ВЫВОДЫ
1. Взаимосвязи между морфологическими параметрами терминальной листовой пластинки и целого листа имеют линейный характер: путем оценки параметров терминальной листовой пластинки можно прогнозировать параметры сложного листа.
2. Рассчитаны уравнения регрессии, позволяющие определять нелинейные параметры (площадь и периметр) листа и его терминальной листовой пластинки на основе измерений длины и ширины (линейных параметров). Установлена возможность и рассчитаны уравнения регрессии, позволяющие прогнозировать химический состав листьев сабельника болотного на основе определения параметров размеров и формы.
3. В наибольшей степени с параметрами размеров листьев связано содержание фенольных соединений, в меньшей - содержание флавоноидов и, незначительно, проан-тоцианидинов. С уменьшением размеров листьев происходит увеличение содержа-
ния исследуемых групп биологически активных веществ. С параметрами формы обнаружена связь для суммы фенольных соединений и в единичных случаях для проантоцианидинов и флавоноидов. С увеличением вытянутости терминальной листовой пластинки листа сабельника болотного происходит повышение содержания биологически активных веществ.
4. Доказана возможность прогнозирования содержания действующих веществ в корневищах с корнями сабельника болотного по морфологическим параметрам терминальной (индикаторной) листовой пластинки листьев.
SUMMARY
O.A. Yorshyk, G.N. Buzuk, O.V. Sozinov MORPHOMETRY OF COMARUM PALUSTRE
L.: INTERCONNECTION OF SIZES, FORMS AND CHEMICAL COMPOSITION OF LEAVES There has been studied for the first time the interconnection between the sizes, leaves form descriptors and the accumulation in them of various groups of phenolic compounds. The dependencies of various phenolic groups contents upon the researched leaves parameters bear in general line character. The conditions of growth, which contribute to Comarum palustre formation of small leaves with an extended (narrow) terminal leave plate contribute to the accumulation in them of various groups phenolic compounds. A close connection is observed between the contents of proan-thocyanidins in leaves and rhysomes (R=0,99) of Comarum palustre. To a lesser degree this connection is expressed in the sum of phenolic compounds and flavonoids. It is possible to prognose the content of active substances in the raw material of Comarum palustre according to leaves and their parts morphological parameters, where leave sam-
ples for indications and may be taken in different (optimal for each organ) terms.
ЛИТЕРАТУРА
1. Menadue, Y. Leaf polymorphism in Ranunculus nanus Hook (Ranunculaceae) / Y. Menadue, R.K. Crowden // New Phytol. -1990. - Vol. 114, N 2. - P. 265-274.
2. Neuffer, B. Leaf morphology in Capsella (Cruciferae): dependency on environments and biological parameters / B. Neuffer // Beitr. Biol. Pflanz. - 1989. - Bd. 64, N 1. - S. 39-54.
3. Jensen, R.J. Detecting shape variation on oak leaf morphology: a comparison of rotational-fit methods / R.J. Jensen // Amer. J. Bot.
- 1990. - Vol. 77, N 10. - P. 1279-1293.
4. Bentson, G.M. Size structure of populations within populations: leaf number and size in crowded and uncrowned Impatiens pallida individuals / G.M. Bentson, J. Weiner // Oecologia. - 1991. - Vol. 85, N 3. - P. 327331.
5. Kuiper, P.J.C. Analysis of phenotypic responses of plant to changes in the environment in terms of stress and adaptation / P.J.C. Kui-per // Acad. Bot. neerl. - 1990. - Vol. 39, N
3. - P. 217-227.
6. Lotz, L.A.P Within-population variability in morphology and life history of Plantago major L. ssp. pleiosperma Pilger in relation to environmental heterogeneity / L.A.P. Lotz, H. Olff, P.H. Tienderen // Oecologia. - 1990. -Vol. 84, N 3. - P. 404-410.
7. Гамалей, Ю.В. Сравительная анатомия растений в качестве метода оценки изменений среды обитания / Ю.В. Гамалей, Ц. Шифэвдамба // Методологические вопросы оценки состояния природной среды МНР. -Пущино, 1990. - С. 56-57.
8. Житков, В.С. Значение динамики размеров особей Anemone fasciculate для идентификации местообитаний / В. С. Житков // Организация форм охраны объектов природно-заповедного фонда. - М., 1989. -С. 162-167.
9. Пельтек, Л. А. Анализ продукционного процесса брусники в естественных условиях произрастания / Л. А. Пельтек, О.П. Чер-ненков // Многоцелевое лесопользование. -М., 1992. - С. 99-104.
10. Валетов, В.В. Биометрические показатели листьев ольхи черной, произрастающей в различных по увлажнению местообитаниях / В.В. Валетов // Ботаника. - Минск: Наука и техника, 1984. - С. 63-64.
11. Липская, Г. А. Морфологические изменения растений при оптимизации плодородия дерново-подзолистой почвы путем торфования и землевания / Г.А. Липская, Н.П. Иванов, Н.К. Чертко; под ред. Г.А. Липской // Ботаника. -Минск: Наука и техника, 1984. - Вып. 26. - С. 67-68.
12. Крылова, И.Л. Влияние экологических факторов на содержание действующих веществ в листьях брусники / И.Л. Крылова, Я.С. Тремб-ля // Хим. фарм. журн. - 1976. - № 6. - С. 7376.
13. Гозин, А. А. Динамика накопления дубильных веществ в вегетативных органах брусники в зависимости от почвенно-грунтовых условий / А. А. Гозин // Ботаника. - Минск: Наука и техника, 1971. - Вып. 13. - С. 205-208.
14. Бузук, Г. Н. О влиянии микроэлементов на биосинтез алкалоидов / Г.Н. Бузук // Растительные ресурсы. - 1986. - Т. 22, № 2. - С. 272279.
15. Bennet, B.C. Geographic variation in alkaloids content of Sanquinaria Canadensis (Papaveraceae) / B.C. Bennet, C.R. Bell, R.T. Baulware // Phodora. - 1990. - Vol. 92, N 870. - P. 57-69.
16. Гозин, А.А. Влияние экологических факторов на накопление биологически активных веществ в бруснике / А. А. Гозин // Экология. -1972. - № 1. - С. 45 - 47.
17. Крылова, И.Л. Влияние географического и экологических факторов на анатомоморфологические признаки листьев багульника болотного и связь этих признаков с химическим составом листьев / И. Л. Крылова, Л. И. Прокошева // Растительные ресурсы. - 1980. -Т. 14, Вып. 4. - С. 502.
18. Кузьмичева, Н. А. Корреляционные связи между морфологическими показателями и содержанием флавоноидов в листьях ивы остролистной и ивы трехтычинковой / Н. А. Кузьмичева // 40 лет фармацевтическому факультету: сб. науч. труд., Витебск, 1999. / ВГМУ; редкол.: А.Н. Косинец [и др.]. - Витебск, 1999. - С. 115126.
19. Бузук, Г.Н. Морфометрия лекарственных растений. 1. Vaccinium vitis-idaea L. Изменчи-
вость формы и размеров листьев / Г.Н. Бу-зук // Вестник фармации. - 2006. - № 2. - С. 21-33.
20. Морфометрия лекарственных растений.
2. Vaccinium myrtillus L. Взаимосвязь морфологических признаков и химического состава / Г.Н. Бузук [и др.] // Вестник фармации. - 2007. - № 1. - С. 26-37.
21. Морфометрия лекарственных растений.
3. Vaccinium myrtillus L. Взаимосвязь размеров, формы и химического состава листьев / Г.Н. Бузук [и др.] // Вестник фармации. - 2007. - № 1. - С. 26-37.
22. Gamper, H. Nondestructive Estimates of Leaf Area in White Clover Using Predictive Formulae. The Contribution of Genotype Identity to Trifoliate Leaf Area / H. Gamper // Crop. Sci. - 2005. - Vol. 45. - P. 2552-2556.
23. Black, J.N. Competition between plants of different initial seed sizes in swards of subterranean clover (Trifolium subterraneum L.) with particular reference to leaf area and the light microclimate / J.N. Black // J. Agric. Res.
- 1958. - Vol. 9. - P. 299-318.
24. Wiersma, J.V. Estimation of leaflet, trifoliate, and total leaf areas of soybeans / J.V. Wiersma, T.B. Bailey // J. Agron. - 1975. -Vol. 67. - P. 26-30.
25. Variation within white clover (Trifolium repens L.) for phenotypic plasticity of morphological and yield related characters, induced by phosphorus supply / J.R. Caradus ^t al.] // New. Phytol. - 1993. - Vol. 123. - P. 175-184.
26. Hamilton, N.R.S. The dynamics of Trifolium repens in a permanent pasture. 1. The population dynamics of leaves and nodes per shoot axis / N.R.S. Hamilton, J.L. Harper // Biol. Sci. - 1989. - Vol. 237. - P. 133-173.
27. Marshall, J.K. Methods for leaf area measurement of large and small leaf samples / J.K. Marshall // Photosynthetica. - 1968. - Vol. 2. -P. 41-47.
28. Ёршик, О.А. Количественное определение проантоцианидинов в сабельнике болотном Comarum palustre L. / О.А. Ёршик, Г.Н. Бузук // Вестник Фармации. - 2007. -№ 4. - С. 10-17.
29. Биохимические методы анализа растений. Под ред. М. Н. Запрометова. - Москва:
Издательство иностранной литературы, 1960. -592 с.
30. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения и методы их исследования / М.И. Запрометов // Биохимические методы в физиологии растений. - М.: Наука, 1971. - С. 185-208.
31. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермаков [и др.]; под ред. А.И. Ермакова. - 3-е изд. - Л.: Агропромиздат. Ленинградское отделение, 1987. - 430 с.
32. Зайцев, Г. Н. Математика в экспериментальной ботанике. - М.: Наука, 1990. - 296 с.
33. Tannins as Gibberellin Antagonists / M.R. Corcoran [et al.] // Plant Physiol. - 1972. - Vol. 49, N 3. - P. 323-330.
34. Green, F.B. Inhibitory Action of Five Tannins on Growth Induced by Several Gibberellins / F.B. Green, M.R. Corcoran // Plant Physiol. - 1975. -Vol. 56, N 6. - P. 801-806.
35. Jacobson, A. Tannins as Gibberellin Antagonists in the Synthesis of Р-Amylase and Acid Phosphatase by Barley Seeds / A. Jacobson, M.R. Corcoran // Plant Physiol. - 1977. - Vol. 59. - P. 129-133.
36. Harada, J. The inhibitory effect of tannic acid on gibberellic acid-induced growth of rice / J. Ha-rada, H. Nakayama // Proc. Crop. Sci. Soc. Jap. -1974. - Vol. 43. - P. 493-497.
37. Tomaszewski, M. Interactions of Phenolic Acids, Metallic Ions and Chelating Agents on Auxin-Induced Growth / M. Tomaszewski, K.V. Thimann // Plant Physiol. - 1966. - Vol. 41, N 9. - P. 14431454.
38. Flavonoid Accumulation in Arabidopsis Repressed in Lignin Synthesis Affects Auxin Transport and Plant Growth / S. Besseau [et al.] // Plant Cell. - 2007. - Vol. 19. - P. 148-162.
39. Jacobs, M. Naturally Occurring Auxin Transport Regulators / M. Jacobs, P.H. Rubery // Science. - 1988. - Vol. 24I. - P. 346-349.
40. Дерфлинг, К. Гормоны растений / К. Дер-флинг. - М.: Мир, 1985. - 304 с.
41. Муромцев, Г.С. Гиббереллины / Г.С. Муромцев, В.Н. Агнистикова. - М.: Наука, 1984. -208 с.
Поступила 17.02.2009 г.
