CC BY
19
УДК 616.091:615.9-099:636.085/.087:636.4
Ключевые слова: микотоксины, поросята, тимус, лимфоциты, макрофаги, плазматические клетки
Key words: mycotoxins, piglets, thymus, lymphocytes, macrophages, plasmocytes
Ганкина Ю. В., Кудряшов А. А.
МОРФОМЕТРИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТИМУСА ПОРОСЯТ ПРИ ПОЛИМИКОТОКСИКОЗЕ
MORPHOMETRY OF THYMUS IN PIGLETS WITH POLYMYCOTOXICOSIS
ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», Санкт-Петербург Адрес: 196084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5. Тел. (812) 388-13-78
Saint-petersburg State Academy of veterinary Medicine, Saint-petersburg Address: 196084, Russia, Saint-petersburg, chernigovskaya street, 5. Tel. +7 812 388-13-78
Ганкина Юлия Владимировна, ассистент каф. патологической анатомии
Gankina Julia v., assistant of the Dept. of pathologic anatomy Кудряшов Анатолий Алексеевич, д. в. н., проф., зав. каф. патологической анатомии
Kudryashov Anatoly a., doctor of veterinary Science, professor, Head of the dept. of pathologic anatomy
Аннотация. Проведено морфометрическое исследование тимуса у 9 поросят в возрасте 3-4 месяцев, павших от полимикотоксикоза. Определены изменения клеточного состава, свидетельствующие о воспалении и имму-носупрессии впределены изменения клеточного состава, свидетельствующие о воспалении и иммуносупрессии в этом органе.
Summary. The results ofmorphometry of thymus in 9 piglets with polymycotoxicosis are described. Inflammatory changes and elements of immunosupression are determined.
Введение
В условиях современного животноводства микотоксикозы сельскохозяйственных животных встречаются довольно часто и причиняют значительный экономический ущерб. Причина микотоксикозов - высокий уровень заражения кормов растительного происхождения токсинообразующими грибами. Особенно чувствительны к токсинам свиньи [3, 4].
Краткий обзор литературы
Микотоксины представляют собой обширную группу токсинов, образуемых плесенями. Эти соединения могут быть крайне токсичными для животных и человека. На сегодняшний день установлено около 300 различных микотоксинов, а последние научные данные показали, что 30 % зерна, производимого во всем мире, поражено ми-котоксинами [2].
В литературе освещаются вопросы, касающиеся в основном острых микотоксикозов, вызванных определенным видом токсина в экспериментальных условиях. Вместе с тем на практике чаще отмечаются случаи хронических полимикотоксикозов, которые проте-
кают с менее выраженными и смешанными клиническими признаками. Патоморфология подобных микотоксикозов мало изучена.
Исходя из актуальности тематики, нами проведено изучение патоморфологии внутренних органов при полимикотоксикозе [1]. В ходе исследования мы пришли к предварительному выводу, что в лимфоидных органах (селезенке, лимфатических узлах, тимусе) развиваются изменения, указывающие на иммуносупрессию. Чтобы убедиться в этом, потребовалось провести морфометрическое исследование органов иммунной системы.
Цель работы
Дать морфометрическую характеристику тимуса у поросят для уточнения патогенеза и прогноза болезни.
Материалы и методы исследования
Для исследования использован тимус, отобранный при вскрытии поросят в возрасте 3-4 месяцев, павших от полимикотоксико-за, из крупного свиноводческого хозяйства. В хозяйстве хронический полимикотокси-коз у свиней был вызван токсинами при поедании контаминированных кормов. Коли-
чество микотоксинов определено в пробах кормов и сравнено с предельно допустимой концентрацией.
При анализе результатов микотоксиколо-гического исследования кормов сделан вывод о наличии микотоксинов в кормах для поросят. Содержание афлатоксина, охраток-сина и дезоксиваленона значительно превышает ПДК, что и привело к токсикозу при длительном поедании корма.
От 9 павших и от 3 здоровых (для контроля) поросят отобран тимус.
Пробы зафиксированы в 10%-м растворе нейтрального формалина, уплотнены в парафине, от каждого животного изготовлено 10 гистосрезов. Гистологические срезы окрашены гематоксилин-эозином. Препараты изучили в световом микроскопе при увеличении 40х60. Подсчитывалось количество лимфоидных клеток, эпителиальных клеток, макрофагов, эритроцитов, плазматических клеток и нейтрофильных лейкоцитов. Подсчет велся в 10 полях зрения. Толщины микроструктур тимуса определяли с помощью окулярного микрометра.
Статистическая обработка данных, полученных в эксперименте, была реализована с помощью программного пакета STATIS-Т1СА 6.0. Прежде всего, с целью определения
Сравнение толщины микроструктур
закона распределения исследуемых величин были выполнены расчеты асимметрии и эксцесса для каждой выборки. Было доказано, что полученные данные подчиняются нормальному распределению Гаусса. Для описательной статистики внутри каждой группы вычислялись среднее арифметическое и стандартная ошибка среднего для р < 0,05.
Поскольку выборки являются независимыми, для опровержения нулевой гипотезы о принадлежности разных выборок к одной генеральной совокупности были рассчитаны параметрические ^-критерий Стьюдента) и непараметрические (критерий Колмогорова-Смирнова и и-критерий Манна-Уитни).
Поскольку ^критерий Стьюдента является самым робастным показателем из вышеперечисленных и исследуемые варианты представлены в достаточно богатой количественной шкале, этот метод можно считать основополагающим в данном исследовании. Непараметрические методы применялись с учетом того, что контрольная и опытная группы значительно отличались по количеству вариант.
Результаты исследования
Результаты морфометрии тимуса сведены в таблицах 1-4.
Таблица 1. [муса у больных и здоровых поросят
толщина, мкм, больные толщина, мкм, здоровые р
капсула 9±0,9534 10,9±1,22882 0,241283
септы 30,975±5,1359 19,3±4,10013 0,141879
корковое вещество 50,262±4,1569 52,825±10,050035 0,781407
мозговое вещество 50,75±6,6877 25,1±3,65589 0,373598
тимические тельца 3,593±0,1818 3,925±0,37962 0,633629
сосуды 6,593±0,5627 7±0,83666 0,765444
Таблица 2.
Сравнение клеточного состава коркового вещества тимуса у больных и здоровых поросят
больные здоровые р
лимфоидные клетки 855,743±124,5593 1317,25±88,01393 0,012345
эпителиальные клетки 11,675±1,4315 18,7±3,1557 0,02285
макрофаги 0,4±0,1522 0,2±0,13333 0,404002
плазматические клетки 2,4±0,8243 нет в срезах
эритроциты 20,733±3,6007 нет в срезах
нейтрофильные лейкоциты 0,4±0,2211 нет в срезах
митозы 0,4±0,2211 0,1±0,1 0,232257
Таблица 4.
Сравнение клеточного состава периваскулярного пространства тимуса
у больных и здоровых поросят
Таблица 3.
Сравнение клеточного состава мозгового вещества тимуса у больных и здоровых поросят
больные здоровые р
лимфоидные клетки 2217,28±163,0108 1325,5±70,7373 0,0000347
эпителиальные клетки 11,85±1,1178 15,65±2,31275 0,099379
макрофаги 9,333±2,8387 0,25±0,09934 0,012261
плазматические клетки 3,167±0,521 0,5±0,17014 0,000174
эритроциты 9,5±2,0995 нет в срезах
митозы нет в срезах 0,15±0,08192
больные здоровые р
малые лимфоциты 500,15±69,2535 788,55±79,2078 0,013321
средние лимфоциты 55,6±37,8804 0,3±0,17918 0,152552
большие лимфоциты 7,367±1,126 2,5±0,76261 0,002369
макрофаги 0,7±0,1569 0,55±0,15347 0,546748
ретикулярные клетки 14,325±1,6042 22,75±2,866621 0,007449
эритроциты 50,825±6,7804 249,5±45,83055 0
плазматические клетки 4,475±0,6544 0,9±0,54724 0,000758
нейтрофильные лейкоциты нет в срезах 1,2±0,51208
Р-уровень менее 0,05 оказался только при сравнении толщины мозгового вещества, значит эти показатели достоверно различны -мозговое вещество толще в 2 раза у больных животных. При сравнении остальных метрических показателей микроструктур тимуса р-уровень более 0,05, что говорит о низкой степени достоверности разности между средними показателями толщины структур тимуса у больных и здоровых животных.
Среднее количество долек тимуса у здоровых животных составляет 3,55±0,39387, у больных - 3,275±0,616, р-уровень равен 0,765444, значит разница между этими показателями не достоверна. Среднее количество тимических телец у здоровых животных составляет 2,6±0,53998, у больных -2,075±0,3404, р-уровень равен 0,396068; это значит, что разница между этими показателями также не достоверна.
Р-уровень менее 0,05 при сравнении количества лимфоидных и эпителиальных клеток коркового вещества, значит различия между их количеством в норме и при болезни достоверны. Лимфоидных клеток у здоровых животных в 1,5 раза больше, чем у больных,
эпителиальных клеток больше также у здоровых поросят в 1,6 раза. Плазматические клетки, эритроциты и нейтрофильные лейкоциты встречались только в группе больных животных.
Р-уровень более 0,05 определен только при сравнении количества эпителиальных клеток, что говорит о недостоверности различий в этом показателе. При сравнении остальных показателей р-уровень меньше 0,05. Количество лимфоидных клеток больше у больных поросят в 1,7 раза. Количество макрофагов и плазматических клеток также больше у больных животных в 37 и 6 раз соответственно. Эритроциты встречались только у больных животных, митозы встречались только у здоровых поросят.
Р-уровень больше 0,05 оказался только при сравнении количества средних лимфоцитов и макрофагов, значит разница в этих показателях у больных и здоровых поросят не достоверна. В остальных показателях р-уровень меньше 0,05. Малых лимфоцитов больше у здоровых животных в 1,6 раза. Больших лимфоцитов больше в группе больных животных в 3 раза.
Ретикулярных клеток и эритроцитов больше у здоровых животных в 1,6 и 5 раз соответственно. Плазматических клеток больше у больных поросят в 5 раз. Нейтро-фильные лейкоциты в периваскулярном пространстве тимуса встречались только у здоровых поросят.
Выводы
Таким образом, при исследовании тимуса обнаружены следующие достоверные различия микроструктур.
• Толщина мозгового вещества больше у больных животных.
• Лимфоидных и эпителиальных клеток в корковом веществе больше у здоровых животных.
• Плазматическиеклетки,эритроциты, ней-трофильные лейкоциты в корковом веществе тимуса встречались только у поросят с полимикотоксикозом.
• Лимфоидных клеток, макрофагов и плазматических клеток в мозговом веществе больше у больных поросят.
• Эритроциты в мозговом веществе тимуса встречались также только у больных животных.
• Митозы в мозговом веществе встречались только у здоровых поросят.
• Малых лимфоцитов, ретикулярных клеток, эритроцитов в периваскуляр-ном пространстве больше у здоровых животных.
• Больших лимфоцитов и плазматических клеток в периваскулярном пространстве больше у больных поросят.
• Нейтрофильные лейкоциты в периваску-лярном пространстве встречались только у здоровых поросят.
Заключение
Результаты морфометрического исследования показывают, что в тимусе у поросят при полимикотоксикозе, с одной стороны, увеличивается количество плазматических, лимфоидных клеток, макрофагов, а также появляются нейтрофильные лейкоциты. Это указывает на воспалительную реакцию органа. С другой стороны, уменьшается количество малых лимфоцитов, ретикулярных клеток, отсутствуют митозы, что является признаками иммуносупрессии.
Список литературы
1. Ганкина, Ю. В. Патоморфологические изменения у поросят при микотоксикозе / Ю. В. Ганкина, А. А. Кудряшов // Актуальные вопросы ветеринарной биологи, 2009. - № 3. - С. 28-30.
2. Кузнецов, А. Ф. Ветеринарная микология / А. Ф. Кузнецов. - СПб : Лань, 2001. - 416 с.
3. Concova, E. Fusarian toxins and their role in animal diseases / E. Concova, A. Lagiakova, G. Kovac and H. Seidel // The veterinary journal. - 2003, Vol. 165, № 3. - P. 214-220.
4. Harley, Roger B. Effects of treatment of growing swine with aflotoxin and T-2 toxin / Roger B. Harley, et al. // American journal of veterinary research. - 1990, Vol. 50, № 10. - P. 1688-1693.
I
e
МОСКОВСКИМ ВЕТЕРИНАРНЫМ
webmvc .com
i-LLEHTP
Заболел Ваш домашний питомец? Не отчаивайтесь - посетите наш веб-центр!
У нас Вы начете исчерпывающую информацию о бопезни Вашего друга, лечении, профилактике и других вопросах ветеринарии Также на нашем сайте Вы можете найти адрес ближайшей к Вам ветеринарной клиники, чтобы обратиться за помощью к специалистам.
за помощью
специалистам
Кроме этого, наш веб-центр располагает полным спектром информации по уходу за животными -будь то кошки или собаки, птицы и пи рыбы, черепахи или экзотические животные, Вы научитесь, как правильно разводить, кормить, дрессировать и вослитыаэть своих домашних питомцев, На страницах нашего сайта с Вами делятся опытом и советами признанные авторитеты в обласги ветеринарии и ухода за животными. К Вашим услугам - энциклопедический справочники и научные статьи о животном мире, фото и видеоматериалы, ежедневные новости и тематический форум.
Мы ждем Вас по адресу www.webmvc.com
