CC BY
19
DOI 10.31588/2413-4201-1883-237-1-156-161
УДК619:616.36-002:636.92
МОРФОЛОГИЯ ПЕЧЕНИ КРОЛИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО ВЫЗВАННОМ ГЕПАТИТЕ И КОРРЕКЦИИ ЕГО СРЕДСТВОМ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ
Пугатина А.Е. - аспирант, Грачева О.А. - к.в.н., доцент, Залялов И.Н.-д.в.н., профессор, Константинова И.С.- к.б.н., доцент
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: токсический гепатит, кролики, печень, патоморфология, гистологическое строение
Key words: toxic gepatitis, rabbits, liver, pathomorphology, histological structure
При токсическом поражении печени одним из первых звеньев в цепочке патологических нарушений является мем-браноповреждающий эффект, который приводит к расстройству функционирования каскада микросомальных и митохон-дриальных ферментов, участвующих в поддержании гомеостаза клетки [1,6]. Следующим этапом становится нарушение энергообразования в клетке и, как следствие, избыточное образование свободных радикалов, что в свою очередь приводит к гипоксическому и свободнорадикальному некробиозу. С точки зрения фармакологической коррекции, весьма существенной помощью для клеток печени являются два основных принципа: восстановление энергетического обеспечения (энергокоррекция) и антиоксидантная защита клеток. По этой причине лекарственные средства метаболического типа действия, способные эффективно корректировать метаболизм клеток и их энергетический обмен, всё шире используются при различных заболеваниях как полноценный компонент комплексной патогенетической терапии [5, 9]. Целью настоящих исследований явилось изучение патоморфологии экпери-ментального гепатита у кроликов после интраперитонеального воздействия четы-реххлористого углерода до и после применения препарата «Янтовет». Активным веществом препарата является янтарная кислота, обладающая прямым модифицирующим воздействием на клеточный метаболизм, при котором происходит активирование аэробного гликолиза в условиях гипоксии и органическое соединение
фосфора, потенциально способствующее усилению синтеза макроэргических молекул [3,7,8] .
Материал и методы исследований. Экспериментальные исследования проводились на 20 кроликах, массой 2,5 -2,7 кг в возрасте 3 месяцев породы Белый великан. Модель острого поражения печени вызывали путем внутрибрюшинного введения 50 % раствора СС14 (тетрахлор-метан) на оливковом масле из расчета 1 мл на кг массы тела два раза в неделю.
Объектом исследования служил препарат «Янтовет», который содержит в своем составе янтарную кислоту, органическое соединение фосфора и представляет собой прозрачную жидкость без цвета и запаха. Проведен опыт по исследованию гепатопротективного эффекта изучаемого препарата при остром токсическом гепатите [7,8]. Для этого животных разделили на 4 группы: первой группе -вводили че-тыреххлористый углерод (контроль), второй - на фоне отравления, начиная с 5 дня эксперимента, трехкратно каждые 3 дня внутримышечно применяли исследуемый препарат в дозе 1мл/животное. Животные третьей группы препарат получали за час до токсического воздействия, а также по аналогичной второй группе схеме, четвертая группа была интактной (здоровые животные). Все животные находились в одинаковых условиях содержания, на одинаковом кормовом рационе с соблюдением «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» [4] и правил лабораторной практики при
проведении доклинических исследовании в РФ.
В конце исследования животных подвергали эвтаназии в СО2-камере. Пато-морфологическое исследование включало некропсию и гистологические методики. Оценку гистологического строения печени проводили у контрольных и подопытных животных в каждой группе. Кусочки печени фиксировали в нейтральном 10% формалине. Обезвоживание патологического материала проводили в этаноле возрастающей крепости. Уплотнение кусочков органа осуществляли путем заливки в парафин. Срезы толщиной 8 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, азуром II эозином [2].
Результаты исследований. У животных первой группы, которым вводили четыреххлористый углерод, рисунок гистологического строения печени слабо вы-
ражен. Печеночные балки неравномерны по величине и направленности, местами они прерываются из-за полного разрушения эпителиальных клеток. Гепатоциты при этом отличаются выраженными признаками вакуольной дистрофии. Пикно-морфные ядра клеток богаты гетерохрома-тином и имеют центральное расположение, при этом ядрышки у них отсутствуют. Местами клетки паренхимы полностью утрачивают свою структуру. Только единичные гепатоциты, расположенные в непосредственной близости от ветвлений воротной вены, частично сохраняли структуру цитоплазмы и ядра. Как следствие ослабления биосинтеза, в ядре этих клеток мелкие ядрышки располагались около ка-риолеммы. Подавление биосинтетической активности клеток паренхимы органа у этих животных сочеталось резким уменьшением количества клеток с двумя ядрами.
Рисунок 1- печень животных первой группы. Окраска азуром 11и эозином.Х 500.
Дистрофические и некробиотиче-ские процессы в паренхиме печени сопровождались значительными нарушениями внутриорганной гемоциркуляции. Профили просвета синусоидных капилляров в местах с наиболее выраженными деструк-
тивными изменениями были незаметными. Ретикулоэндотелиоциты в них отсутствовали. Просветы сосудов в области триад, собирательных вен вследствие общего венозного застоя были обозначенными. Ядра эндотелиоцитов в них резко уплощенны.
Действие ядовитого вещества способствовало нарушению процесса желчеобразования. Об этом свидетельствовали не дифференцируемые билиарные полюса гепатоцитов и проходящие между ними желчные капилляры. Желчные протоки при этом имели суженные просветы.
Токсическое действие влияло не только на клетки паренхимы, но и на структуры органа, имеющие мезенхималь-ное происхождение. В области триад наблюдали незначительные скопления инфильтратов клеток лимфоидного ряда.
У животных второй группы (рис. 2)
паренхима печени выделялась нарушением балочного строения. Большинство гепато-цитов теряли клеточные границы и приобретали выраженные признаки белкового гепатоза, в результате которого возникали клетки, утратившие структуры цитоплазмы и ядра. Цитоплазма сохранившихся гепатоцитов содержала мелкую белковую зернистость, а их деформированные, пикноморфные ядра накапливали малоактивный гетерохроматин. Участки среза органа с вакуолизированными гепатоцитами переходили без четких границ в область некробиоза паренхимы.
Рисунок 2- печень животных второй группы. Окраска азуром Ни эозином.Х 320.
В этих участках полностью отсутствовало балочное и клеточное строение. Структура печени в них представляла собой скопление обломков ядер и цитоплазмы. Синусоидные гемокапилдляры были неравномерного наполнения и в их стенках едва обозначались клетки ретику-лоэндотелия. Как слабовыраженное проявление феномена местного адаптационного синдрома в отдельных участках органа наблюдали малочисленные и разреженные скопления клеток лимфоидного ряда и ги-
стиоцитов. В противоположность гемока-пиллярам крупные венозные сосуды были более полнокровными.
Рисунок гистологического строения органа у животных третьей группы был умеренно выраженным. Клетки паренхимы выделялись неравномерностью по величине и структуре. Большинство гепатоци-тов имели признаки выраженной зернистой дистрофии, характеризовались резким увеличением объема эпителиальных клеток, наличием в них оксифильно окрашен-
ной мелкой зернистости, местами имели плохо обозначенные клеточные границы. Ядра гепатоцитов небольшого объёма округло-овальной формы с маргинально расположением в кариоплазме гетерохро-матином. Пикноморфное ядрышко, как следствие ослабления биосинтеза, обнаруживалось вблизи кариолеммы. Вместе с тем у животных этой группы в печени вблизи стенок сосудов воротной системы отмечали присутствие гепатоцитов с темной оксифильной окраской цитоплазмы. Это крупные клетки с овальным ядром и хорошо обозначенным ядрышком, расположенным на периферии. Среди таких клеток встречались единичные гепатоциты, имеющие признаки гипертрофии. Они выделялись умеренной полигональностью и слабой оксифильной окраской. За счет набухания эндоплазматической сети цитоплазма в них приобретала мелкоячеистую структуру. Такие клетки имели ядро округло-овальной формы с центральным расположением крупного ядрышка. Одновременно можно было обнаружить и дву-ядерные клетки паренхимы. Различные виды гепатоцитов (клетки со светлой и темной цитоплазмой, двуядерные клетки) явились морфологическим эквивалентом начавшихся регенераторных процессов.
Следствием сохранения патологического воздействия, являлось слабое обозначение профилей синусоидных капилляров и относительно малое количество клеток, формирующих их стенки. В области триад с меньшей выраженность проявлялись признаки застойного полнокровия, содержание клеток лимфоидного ряда в перибилиарных областях, по сравнению с печенью кроликов предыдущей подопытной группой, было уменьшено. У печени животных четвертой группы структура органа сохранена полностью. Хорошо обозначенные печеночные балки были образованы из однородных по величине и структуре гепатоцитов. Клеточные границы в них были хорошо обозначена, а цитоплазма представляла собой достаточно гомогенную структуру, в которой отсутствовали признаки обратимой и необратимой форм белковой дистрофии. Насыщенная оксифильная окраска цито-
плазмы гепатоцитов, преобладание в их кариоплазме эухроматина и ценральное расположение ядрышка в кариоплазме указывала на сохранение умеренной выраженности биосинтетической активности органа. Синусоидные капилляры сохраняли профили просветов. Ретикулоэндо-телиоциты определялись по достаточно крупным вытянутым ядрам богатым гете-рохроматином. Неравномерные профили центральных вен, уменьшение профилей просвета собирательных сосудов характеризовали слабый уровень проявления картины общего венозного застоя. У животных данной группы, отсутствовали признаки раздражения мезенхимальных структур, в связи с этим периваскулярные, перибилиарные лимфоидные инфильтраты в строме органа не обнаруживали.
Заключение. Таким образом, структура печени у подопытных и контрольных кроликов показала, что токсическое вещество воздействует с меньшим уровнем повреждающего действия, если действие осуществляется после применения испытуемым препаратом.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Абдуллаев, Н.Х. Печень при интоксикации гепатропными ядами / Н.Х. Абдуллаев, Х.Я. Каримов. - Ташкент: Медицина - 1989. - 96с.
2. Волкова, О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К.Елецкий // М.: Медицина, 1982. 204 с
3. Грачева, О.А. Коррекция гепа-токсического синдрома при кетозе коров / О.А. Грачева // Ветеринарная патология. -2017. - № 1 (59). - С.48
4. Европейская Конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях. - Страсбург, 18 марта - 1986.
5. Ивницкий, Ю. Ю. Янтарная кислота в системе средств метаболической коррекции функционального состояния и резистентности организма / Ю.Ю. Ивницкий, А. И. Софронов // СПб., 1998. 82 с.
6. Мышкин, В.А. Преодоление гепатотоксичности антиоксидантами: реальность и перспективы / В. А. Мышкин, Д. А. Еникеев. - Уфа. - 2014. - 184 с.
7. Пугатина, А.Е. Оценка влияния препарата «Янтовет» на биохимические показатели крови при экспериментальном гепатите кроликов / А.Е. Пугатина, О.А. Грачева // Ученые записки КГАВМ. -2018. - Т. 232. - С. 116
8. Пугатина, А.Е. Динамика морфологических показателей при экспериментальном гепатите кроликов / А.Е.
Пугатина, О.А Грачева // Ученые записки КГАВМ. - 2018. - Т. 234. - С.162
9. Смирнов, А.В. Янтарная кислота и ее применение в медицине / А.В. Смирнов, О.Б. Нестерова, Р.В. Голубев // Нефрология. Часть 1. Янтарная кислота: метаболит и регулятор метаболизма организма человека. - 2014. - Т. 18. - №2. - С.33-41
МОРФОЛОГИЯ ПЕЧЕНИ КРОЛИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО ВЫЗВАННОМ ГЕПАТИТЕ И КОРРЕКЦИИ ЕГО СРЕДСТВОМ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ
Пугатина А.Е., Грачева О.А., Залялов И.Н., Константинова И.С.
Резюме
Целью настоящих исследований явилось изучение патоморфологии экспериментального гепатита у кроликов после интраперитонеального воздействия четыреххлористого углерода до и после применения препарата «Янтовет». Активным веществом препарата является янтарная кислота, обладающая прямым модифицирующим воздействием на клеточный метаболизм, при котором происходит активирование аэробного гликолиза в условиях гипоксии и органическое соединение фосфора, потенциально способствующее усилению синтеза макроэргических молекул. В конце исследования животных подвергали эвтаназии в СО2-камере. Патоморфологическое исследование включало некропсию и гистологические методики. У животных первой группы, которым вводили четыреххлористый углерод, рисунок гистологического строения печени оказался слабо выраженным. Кролики второй группы имели печень, радиальное направление печеночных балок в которой было нарушено, местами они прерывались из-за полного разрушения гепатоцитов. Подавление биосинтетической активности клеток паренхимы органа у этих животных сочеталось резким уменьшением количества клеток с двумя ядрами. Рисунок гистологического строения органа у животных третьей группы был умеренно выраженным. Патологическое воздействие отрицательно сказывалось на структурах органа, что проявлялось в слабом обозначении профилей синусоидных капилляров и относительно малым количеством клеток, формирующих их стенки. У печени животных четвертой группы структура органа сохранена полностью. В печени данной группы, отсутствовали признаки раздражения мезенхимальных структур, в связи с этим периваскулярные, перибилиарные лимфоидные инфильтраты в строме органа не обнаруживали. Структура печени у подопытных и контрольных кроликов показала, что токсическое вещество воздействует с меньшим уровнем повреждающего действия, если действие осуществляется после применения испытуемых препаратов.
THE MORPHOLOGY OF THE LIVER OF RABBITS WITH EXPERIMENTALLY INDUCED HEPATITIS AND ITS CORRECTION BY MEANS OF METABOLIC ACTION
Pugatina A. E., Gracheva O. A., Zaslow I. N., Konstantinov I. S.
Summary
The purpose of these studies was to study the pathology of experimental hepatitis in rabbits after intraperitoneal exposure to carbon tetrachloride, and before and after the use of the drug "Yantovet". The active ingredient of the drug is succinic acid, which has a direct modifying effect on cellular metabolism, in which there is an activation of aerobic glycolysis under hypoxic conditions and an organic phosphorus compound, which potentially enhances the synthesis of
macroergic molecules. At the end of the study, animals were euthanized in a CO2 chamber. Athological examination included necropsy and histological techniques. In animals of the first group, which were injected with carbon tetrachloride, the pattern of the histological structure of the liver was mild. Rabbits of the second group had a liver, the radial direction of the hepatic beams in which was violated, in places they were interrupted due to the complete destruction of the hepatocytes. The suppression of the biosynthetic activity of the organ parenchyma cells in these animals was combined with a sharp decrease in the number of cells with two nuclei. The figure of the histological structure of the organ in animals of the third group was moderately pronounced. Pathological effects adversely affected the structures of the organ, which was manifested in the weak designation of profiles of sinusoidal capillaries and a relatively small number of cells forming their walls. In the liver of animals of the fourth group, the structure of the organ is fully preserved. In the liver of this group, there were no signs of irritation of the mesenchymal structures; therefore, perivascular and peribiliary lymphoid infiltrates were not found in the stroma of the organ. The structure of the liver in experimental and control rabbits showed that the toxic substance acts with a lower level of damaging effect, if the action is carried out after the use of the tested drugs.
МОРФО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ И РИСТАЛЛОГРАФИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЩЕНКОВ-ЮНИОРОВ ПОРОДЫ БЕЛЬГИЙСКАЯ ОВЧАРКА
(МАЛИНУА) С НЕМАТОДНОЙ ИНВАЗИЕЙ
Садыкова Ю.Р. - к.б.н., доцент, Крылова И.О. - к.б.н., доцент, Иванова Н.В. - заведующий научно-практическим кабинетом учебного комплекса кинологического факультета
ФГК ВОУ ВО «Пермский военный институт войск национальной гвардии
Российской Федерации»
Ключевые слова: бельгийская овчарка (малинуа); токсокароз; кровь; микрокристаллизация сыворотки
Key words: Belgian shepherd (Malinois), toxokarosis, blood characteristics, blood microcrystallisation
DOI 10.31588/2413-4201-1883-237-1-161-168
УДК 636.7+ 616.995 + +612.1
Проблема поражения собак гель-минтозами не теряет своей злободневности во всем мире. Особенно это актуально в урбанизированных регионах. Так, на начало XXI века многими авторами приводятся данные о том, в России в разных регионах ситуация тревожна по токсокаро-зам, которым поражены от 10 до 76% собак [1; 6; 7; 9; 14]. Щенки, по данным Л.Е. Вереты и О.Г. Малышковой [14], до месяца заражены токсокарами (Т. сат^) на 100%, что обусловлено пожизненным но-сительством и передачей через плаценту от матерей во время беременности. Не вызывает сомнений, что при любом гельминтозе у животных отмечаются нарушения работы многих систем и органов, как при острых, так и при хронических формах.
Животные теряют племенную ценность, собаководству наносится значительный экономический ущерб. Наряду с этим, опасность многих гельминтозов заключена и в возможности заражения людей.
Поддержание здоровья собак служебного назначения, от которого зависит эффективность деятельности кинолога, является одной из первостепенных задач в кинологических подразделениях. Своевременный контроль функционального состояния, регулярные осмотры, дегельминтизация, диспансеризация - это необходимые мероприятия на питомнике служебных собак. В полной мере это относится и к оценке эпидемиологической обстановки по гельминтозам. По нашему мнению, в силовых структурах в обязанности ветеринар-
