CC BY
9
УДК619:591.111.057:636.92
ДИНАМИКА МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ КРОЛИКОВ
Пугатина А.Е. - аспирант, Грачева О.А. - к.в.н., доцент ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: токсический гепатит, кролики, печень, янтарная кислота, гемоглобин, эритроциты, лейкоциты
Key words: toxic gepatitis, rabbits, liver, succinic acid, hemoglobin, erythrocytes, leukocytes
Поскольку, болезни печени широко распространены, профилактика и коррекция нарушений метаболизма у животных является одной из острых проблем. Для лечения и профилактики заболеваний печени в основном используются растительные средства, содержащие, как правило, широкий спектр метаболически близких организму биологически активных веществ и обладающие низкой токсичностью. Перспективными, в плане поиска новых гепатопротекторов, следует считать препараты, обладающие антиок-сидантными свойствами, поскольку общим патогенетическим механизмом, участвующим в поражении печени, является развитие окислительного стресса с активацией процессов перекисного окисления липидов и белков, истощением ан-тиоксидантной системы защиты, что приводит к нарушению целостности мембран и гибели клеток [1,3]. Установлено, что янтарная кислота обладает такими свойствами и может применяться в комплексной терапии заболеваний печени [4].
Цель настоящих исследований -дать оценку влияния нового препарата на морфологические показатели крови на модели экспериментального гепатита кроликов [2].
Материалы и методы исслед-лваний. Экспериментальные исследования проводились на 20 кроликах, массой 2,5 - 2,7 кг в возрасте 3 месяцев породы Белый великан. Модель острого по-
ражения печени вызывали путем внутри-брюшинного введения 50 % раствора CCl4 (тетрахлорметан) на оливковом масле из расчета 1 мл на кг массы тела два раза в неделю. Объектом исследования служил препарат «Янтовет», который содержит в своем составе янтарную кислоту, органическое соединение фосфора и представляет собой прозрачную жидкость без цвета и запаха.
Проведен опыт по исследованию влияния изучаемого препарата на динамику морфологических показателей крови животных при остром токсическом гепатите, для чего животных разделили на 4 группы: первой группе - вводили четыреххлористый углерод (контроль), второй - на фоне отравления, начиная с 5 дня эксперимента трехкратно каждые 3 дня внутримышечно применяли исследуемый препарат в дозе 1 мл/животное, третьей - препарат использовали за час до токсического воздействия и по аналогичной второй группе схеме, четвертая группа была интактной (здоровые животные).
Все животные находились в одинаковых условиях содержания и на одинаковом кормовом рационе с соблюдением «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» и правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ.
Оценку влияния изучаемого средства на морфологические показатели проводили по изменению содержания гемоглобина, количества эритроцитов и лейкоцитов, определение которых проводили общепринятыми методами [5]. Полученные в результате исследований данные подвергали вариационно-статистической обработке с применением критерия достоверности Стьюдента на персональном компьютере с использованием программы Microsoft Excel.
Результаты исследований. Экспериментально вызванный токсический гепатит был подтвержден результатами клинико-биохимических исследований. В ходе исследований установлено, что у животных на 3-и сутки после применения токсиканта развивались клинические симптомы интоксикации, которые выражались в гиподинамии и угнетении животных. Волосяной покров матовый, взъерошен, животные лежат, слизистые оболочки и кожные покровы бледные с желтоватым оттенком, аппетит снижен.
В группах, где параллельно применяли изучаемый препарат, через 5 дней после начала терапевтических мероприятий отмечали улучшение общего состояния. Кролики более охотно принимали корм, совершали активные движения, активно реагировали на внешние раздражители. У животных первой группы положительная динамика не наблюдалась. Симптомы интоксикации у кроликов данной группы исчезали только на 10-12-ые сутки после начала эксперимента.
Гематологическими исследованиями установлено (таблица 1), что введение тетрахлорметана угнетает кроветворение, что выражается резким снижением уровня гемоглобина в сыворотке крови опытных животных по сравнению к фоновым значениям и к таковым у ин-тактных животных. Так, на 5-ые сутки исследований снижение уровня гемогло-
бина у животных с экспериментальным гепатитом составило в среднем 43%. К 15-ым суткам эксперимента отмечен положительный эффект от применения изучаемого средства во второй и третьей группах, где уровень гемоглобина стал повышаться и достиг к концу эксперимента фоновых значений, однако, отличался от такого показателя интактных животных. При этом более выраженное действие установлено от превентивного использования средства. Аналогичная динамика выражена и в изменении количества эритроцитов, на 5-ые сутки после токсического влияния уровень эритроцитов в крови снизился на 33-36% у всех животных подопытных групп, в последующие сроки он незначительно возрастал во всех группах, но более значимые изменения происходили в третьей группе. К 30-му дню исследований показатель в данной группе был ниже на 11,2%, чем уровень у здоровых животных, однако превышал таковой у первой группы на 13%.
При парентеральном введении че-тыреххлористого углеводорода количества лейкоцитов резко возрастало во всех группах, кроме интактной (здоровые кролики), и оставалось выше физиологически нормальных значений практически до конца срока наблюдений. Так, в первой группе, где животные находились без терапевтической поддержки, даже на 30-ые сутки исследований, уровень лейкоцитов был максимально высоким. Во второй и третьей группе количество лейкоцитов снижалось, достигнув верхней границы физиологической нормы, но было выше, чем у здоровых животных соответственно на 16,5 и 28,2%. При изучении лейкоцитарной формулы установлено, что изменения происходят за счет увеличения процентного соотношения сегментоядерных нейтро-филов и моноцитов.
Таблица 1 - Морфологические показатели крови у кроликов при экспериментальном гепатите (M+m, п=5)_
Показатели Группы Сроки исследований, суток
Фон 5 15 30
Гемоглобин, г/л 1 группа 142,40±2,80 74,60±4,56** 75,40±2,73** 74,80±2,88**
2 группа 131,00±3,71 70,20±2,41** 84,40±2,93** 101,20±2,30**
3 группа 137,00±4,18 74,60±4,56** 105,80±2,82** 116,40±5,67
контроль 130,00±3,95 130,80±2,22 132,60±4,22 138,00±1,84
Эритроциты, 1012/л 1 группа 6,58±0,19 4,16±0,12** 4,38±0,08** 4,62±0,14**
2 группа 6,24±0,23 4,16±0,14** 4,64±0,15** 5,32±0,14**
3 группа 6,66±0,13 4,30±0,14** 5,28±0,18** 5,40±0,14**
контроль 6,06±0,15 6,58±0,16 6,28±0,16 6,08±0,08
Лейкоциты, 109/л 1 группа 7,96±0,25 15,96±1,20** 15,86±0,20** 14,24±0,28**
2 группа 7,26±0,22 15,92±0,52** 11,90±0,52** 10,10±0,37**
3 группа 7,20±0,31 15,54±1,02** 13,48±0,37** 9,18±0,25**
контроль 7,72±0,41 8,08±0,56 7,48±0,20 7,88±0,22
Примечание: **- р<0,01 по отноше!
Так, при первом исследовании установлено, что количество сегментоядерных лейкоцитов при возникновении интоксикации возрастало у опытных животных на 10-14 %, моноцитов в 2-3 раза, при этом соответственно уменьшалось коли-
к фону.
чество лимфоцитов, процентное соотношение других видов лейкоцитов не изменялось, такая картина характерна для интоксикации и началу воспалительного процесса.
Таблица 2 -Лейкоцитарная формула у кроликов при экспериментальном гепатите
Показатели Группы Сроки исследований, суток
Фон 5 15 30
Базофилы, % 1 группа 0,20±0,22 0,40±0,45 0,20±0,22 0,00
2 группа 0,00 0,20±0,22 0,00 0,00
3 группа 0,00 0,20±0,22 0,20±0,22 0,00
контроль 0,00 0,00 0,00 0,00
Эозинофилы, % 1 группа 0,60±0,27 0,20±0,22 0,00 0,20±0,22
2 группа 0,40±0,27 0,20±0,22 0,40±0,27 0,40±0,27
3 группа 0,40±0,27 0,60±0,45 0,20±0,22 1,20±0,42
контроль 0,40±0,27 0,60±0,45 1,20±0,65 0,80±0,42
Палочкоядерные нейтрофилы, % 1 группа 3,60±0,57 4,60±0,67 4,60±0,57 4,20±0,65
2 группа 5,00±0,61 5,00±0,50 5,20±0,42 5,00±0,79
3 группа 4,80±0,74 4,20±0,65 4,20±0,65 4,20±0,42
контроль 4,80±0,65 5,20±0,65 3,80±0,42 4,80±0,42
Сегментоядерные, % 1 группа 38,20±3,52 54,20±1,88** 53,60±1,68** 49,40±3,21
2 группа 37,40±2,14 47,80±3,11 50,40±1,40** 45,00±0,87
3 группа 36,40±3,05 50,20±2,63** 43,60±1,68 42,20±2,22
контроль 37,20±2,58 36,20±2,88 32,00±2,65 40,20±5,94
Лимфоциты, % 1 группа 55,40±3,25 34,40±1,35** 34,40±1,64** 40,20±2,27* *
2 группа 54,60±1,82 41,60±2,77** 37,40±2,77** 46,20±1,29* *
3 группа 55,60±2,31 38,40±1,92** 47,20±1,75 48,60±1,96
контроль 55,40±2,84 55,80±2,90 59,80±2,13 55,60±2,71
Моноциты, % 1 группа 2,00±0,35 6,20±0,82** 7,20±0,89** 7,20±0,82**
2 группа 2,60±0,57 5,00±0,50 4,60±0,57 3,40±0,27
3 группа 2,80±0,65 6,40±0,57** 4,60±0,57 3,80±0,42
контроль 2,20±0,42 2,20±0,42 3,00±0,35 2,60±0,45
Примечание: **- р<0,01 по отношению к фону.
Заключение. Таким образом, настоящими исследованиями показано, что экспериментально вызванный токсический гепатит характеризуется значительными изменениями морфологических показателей: значительным снижением уровня гемоглобина и эритроцитов, повышением количества лейкоцитов с относительными моноцитозом, нейтрофи-лией и лимфопенией. Применение изучаемого препарата «Янтовет» в опытных группах способствует нормализации гематологических показателей по сравнению с контрольной (нелеченной) группой.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров //Соросовский обра-зоват. журн.- 2000.- № 12.- С. 12-19
2. Грачева, О.А. Влияние новой композиции на основе янтарной ки-
слоты на гематологические показатели при кетозе коров / О.А. Грачева, Д.М. Мухутдинова.// Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.-2016. - Т.228.- С. 11-16
3. Максимова, Т.А. Еще раз об антиоксидантной терапии / Т.А. Максимова // Наука и жизнь. - 2001. - №2. - С. 52-56.
4. Смирнов, А.В.. Янтарная кислота и ее применение в медицине. / А.В. Смирнов, О.Б. Нестерова, Р.В. Голубев // Нефрология. - 2014. - Т. 18. - №2 -С.33-41
5. Справочник. Физиологические, биохимические и биометрические показатели нормы экспериментальных животных./Под редакцией: д.м.н., профессора - Макарова В.Г., д.м.н. -Макаровой М.Н.. - СПБ.: Изд-во «ЛЕМА», 2013.- 116 с.
ДИНАМИКА МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ КРОЛИКОВ
Пугатина А.Е., Грачева О.А.
Резюме
В эксперименте получена модель токсического гепатита печени путем внутрибрюшинного введения четыреххлористого углерода. Диагностику осуществляли в ходе клинических, морфологических и биохимических исследований. Эффективность применения препарата обоснована положительной динамикой изменения количества эритроцитов, лейкоцитов и уровня гемоглобина в группах, где была терапевтическая поддержка, по сравнению с контрольной группой.
DYNAMICS OF MORPHOLOGICAL INDICATORS EXPERIMENTAL HEPATITIS
RABBITS
Pugatina AE, Gracheva OA Summary
In the experiment, a model of toxic hepatitis of the liver was obtained by intraperitoneal administration of carbon tetrachloride. Diagnosis was carried out during clinical, morphological and biochemical studies. The effectiveness of the drug is justified by the positive dynamics of changes in the number of erythrocytes, leukocytes and hemoglobin levels in the groups where the therapeutic support was, in comparison with the control group.
