CC BY
26
isolated with their typing using staphylococcal hyaluronidase. It was established that the isolated microorganisms represent two serological variants. A total of 14 pasterel cultures were isolated, ten of which were assigned to serovariant A, and four cultures were typified as P. Multocida serovar D. Differences in the biochemical properties and virulence of the resulting pasteurell cultures coincide with their serovari-ant affiliation.
УДК 619:591.111.057:636.92
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ПРЕПАРАТА «ЯНТОВЕТ» НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ КРОЛИКОВ
Пугатина А.Е. - аспирант, Грачева О.А. - к.в.н., доцент ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: токсический гепатит, кролики, печень, янтарная кислота, общий белок, глюкоза, холестерин
Key words: toxic gepatitis, rabbits, liver, succinic acid, total protein, glucose, cholesterol
В последнее время ведется активный поиск средств, повышающих устойчивость печени к патологическим воздействиям, усиливающих ее обезвреживающие функции путем повышения активности ее ферментных систем, а также способствующих восстановлению ее функций при различных повреждениях. Гепатопротекторный эффект в той или иной степени могут оказывать различные фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, в том числе витамины, средства, ингибирующие перекисное окисление липидов, а также обладающие антигипоксической активностью. Показаниями для назначения антигипоксан-тов, в частности янтарной кислоты, в комплексной терапии больных с гепатитами служат наличие цитолитического синдрома, проявления мезенхимально-воспалительной реакции, недостаточности гепатоцитов, ферментативного и неферментативного звеньев системы антиоксидантной защиты, выраженность процессов липопероксидации [6,7,8,] .
Цель настоящих исследований - изучить влияние препарата, разработанного на кафедре терапии и клинической диагностики с рентгенологией ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ, содержащего янтарную кислоту и органическое соединение фосфора, на функциональное состояние печени на модели экспериментального гепатита кроликов [4].
Материалы и методы исследований. В качестве объекта для моделирования токсического поражения печени использовались кролики весом 2,5 -2,7 кг в возрасте 3 месяцев породы Белый великан. Животные содержались в условиях вивария с естественным световым режимом на стандартной диете [ГОСТ Р 50258-92], с соблюдением «Евро-
пейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» [5] и правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ.
Моделирование острого поражения печени проводили путем внутрибрюшинного введения 50 % раствора СС14 (тетрахлорме-тан) на оливковом масле из расчета 1 мл на кг массы тела два раза в неделю. Перед началом эксперимента у кроликов проводился гематологический анализ крови. Далее в ходе эксперимента забор крови для анализа выполнялся на 5-е, 15-е, 30-е сутки.
Для изучения гепатозащитного действия препарата кроликов с экспериментальным токсическим поражением печени разделили на 3 группы по принципу аналогов: первая группа - не леченные, второй -начиная с 5 дня эксперимента трехкратно каждые 3 дня внутримышечно вводили исследуемый препарат в дозе 1 мл/животное, третьей - препарат вводили за час до токсического воздействия и параллельно с тет-рахлометаном по аналогичной второй группе схеме. Четвертая группа была интактной и служила контролем.
Функциональную оценку эффективности гепатопротекторного действия исследуемого препарата проводили по степени нормализации биохимических показателей, характеризующих состояние печени: в сыворотке крови определяли показатели белкового (содержание общего белка, альбуминов и глобулинов), углеводного (содержание глюкозы) и липидного (содержание триглицери-дов и холестерина) обменов на биохимическом анализаторе «Biochem SA» на базе лаборатории ветеринарного клинико-
диагностического центра «Академсервис». Полученные в результате исследований данные подвергали вариационно-статистической обработке с применением критерия достоверности Стьюдента на персональном компьютере с использованием программы Microsoft Excel.
Результаты исследований. После двухкратного введения CCl4 у экспериментальных животных развивалось токсическое поражение печени, что подтверждалось результатами клинического исследования и гематологического анализа крови.
При токсическом гепатите, индуцированным четыреххлористым углеродом, отмечается функциональная недостаточность печени и угнетение ее функций. Так, анализируя биохимические показатели на пятый день эксперимента, установлен широкий спектр выраженных патобиохимических изменений, включающий формирование гипо-протеинемии (концентрация общего белка уменьшилась на 23,7-24,5%, альбуминов - в среднем на 25,0%), дислипидемии (повышение уровня общего холестерина и триглице-ридов в 2-4 раза).
При развитии острого токсического гепатита содержание общего белка и альбумина в сыворотке крови опытных кроликов, по отношению к фоновым и контрольным значениям снижается в среднем на 20-25%, что говорит о нарушении белковосинтези-рующей функции печени. Данная тенденция сохраняется у кроликов с картиной токсического поражения печени до конца срока исследования, тогда как в группах, где на разных сроках применяли испытуемый препарат негативное действие на белковый обмен снижено. В третьей группе, где препарат применяли до начала интоксикации и в момент развития воспалительного процесса, к 15 дню исследований среднее значение общего белка приближается к нижним границам референсных значений, а к 30 дню практически достигает фоновых значений. Во
второй группе, где введение препарата осуществлялось после появления клинической картины гепатита, данный показатель нормализуется к 30 дню исследований, когда разница к контрольным и фоновым значениям составляет 4-7 %.
При экспериментальном токсическом гепатите в сыворотке крови кроликов на 5 сутки эксперимента происходит достоверное повышение уровня глюкозы, обусловленное, вероятно, нарушением способности печени поддерживать углеводный баланс крови. Введение испытуемого препарата кроликам третьей группы приводит к нормализации этого показателя уже к 15 дню исследований, приближаясь к фоновым и контрольным значениям, тогда как у кроликов первой и второй групп уровень глюкозы в сыворотке крови снижается, и к 30 дню исследований ниже фоновых показателей соответственно на 30,3 и 21,5%. Выявленная гипогликемия связана с нарушением процессов гликогенолиза и глю-конеогенеза в печени экспериментальных животных.
Изменение содержания холестерина, его концентрации довольно часто связано с функциональным состоянием печени. При большинстве функционально компенсированных заболеваний печени, до развития печеночной недостаточности, наблюдается повышение содержания холестерина, в то время как при печеночной недостаточности его содержание в сыворотке крови падает. В условиях острого токсического гепатита наиболее достоверные изменения в крови у подопытных кроликов происходят в первую неделю исследований, когда уровень общего холестерина и триглицеридов возрастает в 4-5 раз по сравнению с первоначальными данными. Это, видимо, связано с нарушением функции печени, следствием чего являются увеличение секреции липопротеинов печени в плазму, а также нарушение биосинтеза холестерина в печени из ацетил-КоА.
Таблица 1 - Изменение биохимических показателей в сыворотке крови подопытных кроликов _(M+m, п=5)_
Показатели Группы Сроки исследований, суток
Фоновые значения 5 15 30
Общий белок, г/л 1 группа 67,60±0,91 51,60±1,82** 48,00±1,90** 49,40±1,04**
2 группа 66,80±1,08 50,40±2,46** 50,40±1,04** 62,00±1,37**
3 группа 68,00 ±1,58 51,60 ±1,04** 58,60 ±1,35** 63,80 ±2,33
интактные 68,00 ±1,27 65,00 ±1,84 65,40 ±1,79 66,00 ±1,90
Альбумин, г/л 1 группа 32,78 ±0,90 22,24 ±0,81** 23,28 ±0,38** 22,78 ±0,71**
2 группа 33,30 ±0,31 27,52 ±0,25** 28,98 ±0,75** 27,22 ±1,04**
3 группа 35,12 ±1,24 28,22 ±0,42** 27,38 ±0,31** 30,80 ±0,49
интактные 33,54 ±0,85 34,62 ±1,50 35,96 ±1,03 35,80 ±1,36
Глобулины, г/л 1 группа 34,82 ±1,36 29,36 ±0,49** 24,72 ±1,04** 26,62 ±0,71**
2 группа 33,50 ±0,81 22,88 ±2,41** 21,42 ±1,19** 34,78 ±1,49
3 группа 32,88 ±2,59 23,38 ±0,91** 31,22 ±1,42 33,00 ±2,24
интактные 34,46 ±2,0 30,38 ±0,43 29,44 ±1,07 30,20 ±1,19
Глюкоза, ммоль/л 1 группа 7,68 ±0,12 10,72 ±0,36** 7,84 ±0,33 5,20 ±0,54**
2 группа 7,52 ±0,13 11,28 ±0,44** 7,12 ±0,28 5,90 ±0,16**
3 группа 7,30 ±0,11 10,38 ±0,30** 7,70 ±0,41 7,36 ±0,14
интактные 7,52 ±0,13 7,54 ±0,10 7,44 ±0,17 7,48 ±0,19
Холестерин, ммоль/л 1 группа 1,05 ±0,11 5,96 ±0,08** 0,88 ±0,02 0,92 ±0,03
2 группа 1,06 ±0,12 5,98 ±0,07** 1,07 ±0,06 1,02 ±0,05
3 группа 1,07 ±0,05 4,48 ±0,20** 1,16 ±0,06 1,12 ±0,06
интактные 1,04 ±0,06 1,08 ±0,07 1,11 ±0,08 1,05+0,04
Триглицериды, ммоль/л 1 группа 1,26 ±0,03 4,87 ±0,09** 0,95 ±0,09 0,76 ±0,04
2 группа 1,28 ±0,01 4,25 ±0,08** 1,17 ±0,07 1,12±0,06
3 группа 1,26 ±0,03 3,85 ±0,07** 1,57 ±0,05** 1,32 ±0,02
интактные 1,36 ±0,04 1,37 ±0,02 1,39 ±0,02 1,23 ±0,07
Примечание: ** - р<0,01 по отношению к фону;
При этом установлен положительный эффект от применения испытуемого препарата, в третьей группе повышение данных биохимических показателей было менее значительно. К 15 дню эксперимента уровень холестерина и триглицеридов при использовании препарата во второй и третьей опытных группах возвращается к исходным значениям и не отличается от показателей здоровых контрольных животных, тогда как в первой группе, не получавшей терапии, снижение данных биохимических показателей установлено вплоть до 30 дня эксперимента. Так, уровень триглицеридов в сыворотке крови кроликов первой группы ниже фоновых и нормативных значений на 39,7%, а уровень холестерина -на 12,4%, что свидетельствует о развитии хронического воспалительного процесса и печеночной недостаточности.
Заключение. Таким образом, превентивная терапия животных с острым гепатитом испытуемым препаратом характеризовалась статистически значимым улучшением биохимических показателей, характеризующих белковый, углеводный и жировой обмены, по сравнению с аналогичными показателями как нелеченной группы, так и группы животных, получавшей изучаемое средство после развития патологического процесса (на 5 день).
ЛИТЕРАТУРА:
1. Абдуллаев, Н.Х. Печень при интоксикации гепатропными ядами /Н.Х. Абдуллаев, Х.Я. Каримов.- Ташкент: Медицина, 1989.- 96с.
2. Биленко, М.В. Ишемические и ре-перфузионные повреждения органов (молекулярные механизмы, пути предупреждения и лечения) / М.В. Биленко. - М.: Медицина, 1989. - 367с. .
3. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, Н.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов. - М.: Медицина, 1986.-279с.
4. Грачева, О.А. Коррекция гепаток-сического синдрома при кетозе коров / О.А.Грачева // Ветеринарная патология. -2017. -№ 1 (59). - С.48-53.
5. Европейская Конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях. -Страсбург, 18 марта - 1986
6. Ивницкий, Ю.Ю. Янтарная кислота в системе метаболической коррекции функционального состояния и резистентности организма / Ю.Ю. Ивницкий, А.И. Головко, Г А. Софронов. - СПб., 1998. - 97с.
7. Лукьянова, Л.Д. Фармакологическая коррекция митохондриальной дисфункции при гипоксии /Л.Д. Лукьянова // Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и медицинские аспекты. - 2004. - С.
456-487.
ее последствий при критических состояниях: материалы Всероссийской конференции, Санкт-Петербург, 7-8 октября 2004 года. -СПб., 2004. - С. 36
8. Семиголовский, Н.Ю. Клиническая классификация антигипоксантов /Н.Ю. Се-миголовский // Фармакотерапия гипоксии и
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ПРЕПАРАТА «ЯНТОВЕТ» НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ КРОЛИКОВ
Пугатина А.Е., Грачева О.А Резюме
Целью исследований явилось изучение влияния разработанного на кафедре терапии и клинической диагностики с рентгенологией ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ препарата, содержащего янтарную кислоту и органическое соединение фосфора, на динамику биохимических показателей крови, характеризующих белковый, углеводный и жировой обмены, при индуцированном тет-рахлорметаном, экспериментальном токсическом гепатите у кроликов.
Для изучения гепатозащитного действия препарата кроликов с экспериментальным токсическим поражением печени разделили по принципу аналогов на 3 группы: первая группа - не леченные, второй - начиная с 5 дня эксперимента трехкратно каждые 3 дня внутримышечно вводили исследуемый препарат в дозе 1 мл/животное, третьей - препарат вводили за час до токсического воздействия и параллельно с тетрахлометаном по аналогичной второй группе схеме.
Превентивная терапия животных с острым гепатитом испытуемым препаратом характеризовалась статистически значимым улучшением биохимических показателей по сравнению с аналогичными показателями как нелеченной группы, так и группы животных, получавшей изучаемое средство после развития патологического процесса.
EVALUATION OF THE EFFECT OF THE DRUG "ANTAVIT" ON BLOOD BIOCHEMICAL PARAMETERS IN EXPERIMENTAL HEPATITIS OF RABBITS
The aim of the research was to study the effect of the treatment developed at the Department of therapeutics and clinical diagnostics with the X-ray radiography of the FSBEI HE Kazanskaya SAVM of a preparation containing succinic acid and an organic phosphorus compound on the dynamics of biochemical blood indices characterizing protein, carbohydrate and fat metabolism in rabbits with experimental toxic induced by tetrachloromethane.
To study the hepatoprotective effect of the preparation of rabbits with experimental toxic damage of the liver, they were divided according to the principle of analogs into 3 groups: the first group left untreated, the second group - starting from the 5th day of the experiment, three times every 3 days, intramuscular injection of the developed drug in a dose of 1 ml / animal was administered, the third group the preparation was administered an hour before the toxic effect and simultaneously with tetrachloromethane in a similar manner as in the second group.
Preventive therapy of animals with acute hepatitis with the test drug was characterized by a statistically significant improvement in biochemical parameters in comparison with the similar indices of both the untreated group and the group of animals receiving the studied agent after the development of the pathological process.
P^tina A. E., Gracheva O. A. Summary
