CC BY
31
астроглп. Таким чином, суттеве пiдвищення BMicTy ГФКБ в Kopi i rinoKaMni тварин е доказом посилення експресп цитоскелетного бiлкa та (або) пpoлiфepaцп aстpoцитiв. PiBern експресп iншoгo глiaльнoгo маркеру -бшка S-100 - також значно тдвищувався за умов експериментального ЦД. Анaлiзуючи результати визначення вмiсту даного НСБ в кopi i ппокамт, можна вiдмiтити значне зростання кшькосп пoлiпeптидa, що складало 131 i 149% вiдпoвiднo контрольних пoкaзникiв (табл. 1).
Значне зростання вмкту фшаментного i розчинного ГФКБ та S-100, мapкepiв aктивнoстi глiaльних клiтин, а також поява деградованих фpaкцiй ГФКБ за умов ЦД свщчить про порушення стану пpoмiжних фiлaмeнтiв астроципв i розвиток глioзу, що вочевидь е результатом посилення експресп даних НСБ, фiбpилoгeнeзу та пpoлiфepaцil астроглп. Пoдaльшi eкспepимeнтaльнi дoслiджeння представляються достатньо сучасними та важливими як з теоретично!, так i з практично! точки зору.
ж
1. Дроздов О. Л. Динaмiкa вмiсту глiaльнoгo фiбpиляpнoгo кислого бшка i лiзoсoмних протеаз у фронтальнш кopi щуpiв при формуванш умовно-рефлекторно! пaм'ятi / О. Л. Дроздов, В.1. Чорна // Мeдичнi перспективи. - 2009. - Т. XIV, № 4. - С. 1 - 4.
2.Никандров В.Н. Протеин S-100: структурно-функциональные свойства и роль в нервной ткани / В.Н. Никандров, Е.В. Чаплинская // Бioпoлiмepи i клгтина. - 2005. - Т. 21, № 1. - С. 12 - 27.
З.Чорная В.И. Влияние ионизирующей радиации на содержание белка промежуточных филаментов глеев и состояние протеолиза головного мозга / В.И. Черная // Вкник Дншропетровського державного аграрного ушверситету. - 2010. - № 2. - С. 26-29.
4.Чорна В.1. Вплив юшзуючого випромшювання на вмкт бшка пpoмiжних фшаменпв rail головного мозку i цистeíнoвi протеази / В.1. Чорна, О.Л. Лянна // Техногенна безпека. - 2010. - Вип. 126, Т. 139. - С. 64 - 68.
5.Frontczak-Baniewicz M. Ultrastructural and immunochemical studies of glial scar formation in diabetic rats / M. Frontczak-Baniewicz, L. Struzynska, J. Andrychowski [et al.] // Acta. neurochir. suppl. - 2010. - № 106. - P. 51 - 55.
6.Theodosis D. Activity-dependent structural and functional plasticity of astrocyte-neuron interactions / D. Theodosis, D. Poulain, S. Oliet // Physiol. rev. - 2008. - Vol. 88. - P. 983 - 1008.
7.Wu Y. Age related changes of various markers of astrocytes in senescence-accelerated mice hippocampus / Y. Wu, A. Zhang, D. Yew // Neurochem. internat. - 2005. - Vol. 46. - P. 565 - 574.
8.Witcher M. Plasticity of perisynaptic astroglia during synaptogenesis in the mature rat hippocampus / M. Witcher, S. Kirov, K. Harris // Glia. -2006. - Vol. 55. - P. 13 - 23.
СОСТОЯНИЕ НЕРВНОСПЕЦИФИЧНИХ БЕЛКОВ В КОРЕ БОЛЬШИХ ПОЛУШАРИЙ И ГИППОКАМПЕ БЕЛЫХ КРЫС В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА Гузь В.А., Гузь Л.В., Клопоцкий Г.А.
В работе исследовали влияние экспериментального сахарного диабета на содержание и полипептидный состав глиального фибриллярного кислого белка, а также содержание белка 8-100 в коре больших полушарий и гиппокампе белых крыс. Экспериментальный сахарный диабет моделировали введением аллоксана (120 мг/кг). Установлено, что экспериментальный сахарный диабет вызвал увеличение деградации состава глиального фибриллярного кислого белка, существенный рост общего количества глиального фибриллярного кислого белка и 8-100 во всех исследуемых отделах.
Ключевые слова: аллоксан, сахарный диабет, крысы, глиальный кислый белок, 8-100.
Стаття надшшла 01.11.2013 р.
STATE OF CENTRAL NERVOUS SYSTEM PROTEINS IN THE CEREBRAL CORTEX AND HIPPOCAMPUS OF RATS IN EXPERIMENTAL DIABETES MELLITUS CONDITIONS Guz V.A., Guz L.V., Klopotsky G.A.
We investigated the effects of experimental diabetes on the content and polypeptide composition of glial fibrillary acid protein (GFAP ) and protein S-100 in the cerebral cortex and hippocampus of rats. Experimental diabetes was simulated by alloxan injections (120 mg/kg). A significant increase of filament content and soluble GFAP and S-100, glial cell marker activity, and also the appearance of degraded fractions of GFAP under conditions of diabetes confirms a violation of intermediate filaments of astrocytes and development of gliosis, is clearly the result of increased expression data NSB, fibrylogenesis and proliferation of astroglia.
Key words: alloxan, diabetes mellitus modeling, rats, GFAP, S-100 protein.
Рецензент Непорада К.С.
УДК 616.831-005.1-005.4-036
МОРФОЛОГ1ЧН1ЗМ1НИ КОРИ ВЕЛИКИХ П1ВКУЛЬ ГОЛОВНОГО МОЗКУ ЩУР1В ПРИ ПЕРВИННОМУ ТА ПОВТОРНОМУ ГЕМОРАГ1ЧНОМУ 1НСУЛЬТ1
Дослщжено структурно-морфолопчш змши при первинному та повторному геморапчному шсульт! Встановлено, що патогенез первинного i повторного геморапчного шсульту характеризуемся прогресуючою динамкою розвитку набряку тканини мозку i дистрофiчними змшами. Гострий перюд (до 21 доби) шсульту включае виразну гщрошчну дистрофш, загибель 8,4±1,0% (р<0,05) нейрошв кори шсультно! швкуш шсля первинного i 15,4±2,0% (р<0,05) шсля вторинного геморапчного шсульту. В ранньому виновному перiодi (36 мюящв) процеси набряку тканини мозку вже виражеш в меншш мiрi, а вщдалеш нейродегенеративш процеси характеризуются iшемiчним типом загибелi клПин. Щшьшсть нейрошв при первинному шсульт! зменшуеться на 28,1±2,5% (р<0,05), а при повторному на 33,7±3,9% (р<0,05).
Ключов1 слова: первинний геморапчний шсульт, повторний шсульт, нейродегенеращя, кора великого мозку.
Геморапчний шсульт складае близько 20-30% вах шсульпв 1 е значущою медичною та сощальною проблемою, оскшьки найчастше крововилив у мозок розвиваеться у хворих працездатного в1ку - 45-60 роюв [1]. Первинш внутр1шньомозков1 крововиливи складають в1д 70% до 80% в1д уах внутр1шньочерепних крововилив1в, при цьому летальн1сть залишаеться високою 1 до тепершнього часу (60-70%) [3, 4]. Повторний
шсульт розвиваеться у 15% хворих i майже четверта частина таких пашенпв помирають впродовж першого мюяця пiсля рецидиву [5]. Ризик повторного геморапчного iнсульту протягом 5 рокiв е високим у людей вшом вiд 75 до 85 роюв, а також у пашенпв i3 геморагiчним типом першого шсульту та i3 цукровим дiабетом в анамнезi [6]. Наслiдки вторинного шсульту бшьш драматичнi, а патофiзiологiчнi прояви рiзко вираженi, як невролопчно, так i патоморфологiчно [8]. Проте динамщ цих змiн не придшяеться достатньо1 уваги. У зв'язку з цим уточнення патофiзiологiчних механiзмiв розвитку геморагiчного iнсульту актуально для вдосконалення пiдходiв його лiкування.
Метою роботи було встановлення динамши морфологiчних змш головного мозку щурiв при експериментальному первинному i повторному геморапчному шсулкл.
Матерiал та методи дослiдження. Моделювання iнсульту у 62 тварин (середня маса 220-260 г) здшснювали стереотаксичним методом шляхом мехашчно! деструкцiею тканини мозку в дшянщ внутршньо1 капсули Capsula interna, L=3,5-4,0; H=6,0; AP=0,6-1,0) [7] в межах право1 пiвкулi за допомогою мандрена-ножа iз додатковим введенням в зону деструкцп 0,1 мл аутокровi [2]. Повторний шсульт моделювали за тими ж координатами через 1 мкяць пiсля первинного шсульту. Бюпаю головного мозку отримували тсля iнтракардiальноl перфузп щурiв 4% розчином параформальдепду на фосфатному буферi (рН 7,4). Гiстологiчну оцiнку проводили на 3, 21 добу, через 3 i 6 мюящв тсля шсульту. Аналiзвали зм^ площi ядер та перикарюшв нейронiв. Дегенеративно змшеними вважались нейрони з ознаками тигролiзу, а також змiною щiльностi, об'ему та забарвлення ядра.
Результати дослщження та íx обговорення. Морфологiчнi змши головного мозку щурiв пiсля моделювання геморапчного шсульту включали набряк тканини мозку, розшарування тканини внутршньо! капсули i мозолистого тша та загибель нейрошв у дшянщ крововиливу (рис. 1).
А Б В Г
Рис. 1. Кора головного мозку шсля моделювання шсульту. Спостер^аеться збiльшення набряку тканини мозку та
дегенерацп нейрошв у вщдалений перiод пiсля повторного шсульту: А - первинний шсульт, 3 доба; Б - повторний шсульт, 3 доба; В -первинний шсульт, 6 мюящв; Г - повторний шсульт, 6 мкящв. Забарвлення метиленовим сишм-азуром II. Зб.: х400.
У трамщних нейронах III та V шар1в неокортексу спостершалися виразш явища центрального i перифершного тигролiзу. Середня кiлькiсть нейронiв на 3 добу у тварин i3 первинним геморапчним iнсультом достовiрно зменшувалася в середньому на 7,5% (р<0,05) (рис. 2). На 21 день тсля моделювання первинного геморапчного шсульту вiдмiчено збшьшення ступеня набряку тканини мозку, зростання дефшиту нейронiв, що е ознакою поглиблення патофiзiологiчного процесу.
Контроль Псевдоопероваш 3 доба 21 доба 3 мкяць 6 мкяць
——С^П1
Рис. 2. Динамжа нейродегенеративного процесу в корi великого мозку при геморапчному шсуль-п: Г1 - первинний геморагiчний iнсульт, П1 - повторний геморагiчний iнсульт.
При первинному геморапчному шсулкп змши в нейронах розвивались за шем1чним типом та мали ознаки пдротчно! дистрофп, що вщдзеркалювалося на морфометричних параметрах трамщних нейрошв неокортексу (табл. 1). Середня кшьюсть нейрошв на 21 добу зменшилася в середньому на 5,5% (р<0,05), пор1вняно 1з попередшм термшом спостереження. Через 3 мюяш тсля моделювання геморапчного шсульту
структурно-морфолопчш порушення набули вираженого характеру. В цей перюд збшьшувалася кшьюсть кровоносних судин з ознаками ангюнекрозу. Середня кшькють нейрошв в при первинному шсульп зменшилася на 13,3%, а при повторному на 26,7% (р<0,05). При цьому, при первинному шсульп в деяких тварин в1дм1чено ознаки незначного глюзу, що може свщчити про розвиток вщновних процеав в достджуваний перюд.
Таблиця 1
Група Первинний геморапчний шсульт Повторний геморапчний шсульт
Площа нейрона Площа ядра Площа нейрона Площа ядра
Псевдоопероваш 340,1±8,6 a 187,1±7,1 a -/- -/-
3 день 367,2±11,7 a,b 215,3±8,8 a,b 384,6±15,8 a,b 226,8±11,8 a,b
21 день 381,6±12,2 a,b,c 221,9±10,2 a,b 394,8±16,4 a,b 218,9±11,0 a,b
3 мкяць 355,0±12,8 a,b,c 210,5±10,7 a,b 361,0±9,6 a,b,c 194,2±7,7 a,c
6 мкящ 321,5±28,4 208,1±8,7 a,b 321,4±12,1 186,9±11,8 a
Примiтки: a-достовiрно по вщношенню до iнтактних тварин (р<0,05); b-достовiрно по вiдношенню до псевдооперованих тварин (р<0,05); c-достовiрно по вщношенню до попереднього перюду iнсульту (р<0,05).
Через 6 мюящв пюля моделювання геморапчного шсульту вщбувалося достов1рне зменшення розм1р1в клпин у пор1внянн1 1з попередн1ми перюдами шсульту (див. табл. 1). Тривал1 гемодинам1чн1 порушення спричинили вщдалет процеси нейродегенерацп, що морфолопчно в1дм1чено у вигляд1 деформованих гшерхромних нейронв та зменшенн щшьносп трамщних нейронв в кор1 мозку. Останнш параметр при первинному шсульп зменшувався на 28,1±2,5% (р<0,05), а при повторному - на 33,7±3,9%. В окремих випадках при первинному геморапчному шсулкп реестрували вогнища глюзу в тканин мозолистого тша; процеав некрозу та/або запалення не в1дм1чали. При повторному шсульп ознак глюзу 1 лейкоцитарно! шфшьтрацп не в1дм1чено.
ж.
1. Патогенез первинного 1 повторного геморапчного шсульту характеризуеться прогресуючою динамшою розвитку набряку тканини мозку 1 дистроф1чними змшами. Гострий перюд (до 21 доби) шсульту включае виразну пдрошчну дистрофю, загибель 8,4±1,0% (р<0,05) нейронв кори шсультно! п1вкул1 пюля первинного 1 15,4±2,0% (р<0,05) пюля вторинного геморапчного шсульту.
2. В ранньому виновному перюд1 (3-6 мюящв) процеси набряку тканини мозку вже виражет в менш1й м1р1, а вщдалет нейродегенеративн1 процеси характеризуються 1шем1чним типом загибел1 кл1тин. Щ1льн1сть нейронв при первинному 1нсульт1 зменшуеться на 28,1±2,5% (р<0,05), а при повторному на 33,7±3,9% (р<0,05).
Перспективи подальших до^джень. Плануеться подальше вивчення морфологiчно-функцiональних розладiв при iнсультi, а також ефективностi дИ лiкарських засобiв на Ц процеси.
1. Виберс Д. Инсульт (клинич. рук.) / Д. Виберс, В. Фейгин, Р. Браун // - М. : БИНОМ, - 2005. - 608 с.
2. Макаренко А.Н. Метод моделирования локального кровоизлияния в различных структурах головного мозга у экспериментальных животных / А.Н. Макаренко, Н.С. Косицын, Н.В. Пасекова [и др.] // Журн. высш. нервн. деятельн. - 2002. - Т. 52, № 6. - С. 765-768.
3. Никифоров Б.М. Лечение больных среднего и пожилого возраста с гипертоническими гематомами супратенториальной локализации / Б.М. Никифоров, Ж. Закарявичус // Матер. III съезда нейрохирургов России. - 2002. - С. 345-346.
4. Скворцова В.И. Геморрагический инсульт / В.И. Скворцова, В.В. Крылов // - М : ГЭОТАР-Медиа, - 2005. - 160 с.
5. Christoforidis G. Hemorrhage volume as an objective measure to define significant intracranial hemorrhage associated with thrombolysis / G. Christoforidis, A. Slivka Y. Mohammad [et al.] // Stroke. - 2007. - Vol. 38, № 7. - Р. 1799-1804.
6. Lansberg M. Risk factors of symptomatic intracerebral hemorrhage after tPA therapy for acute stroke / M. Lansberg, V. Thijs, R. Bammer [et al.] // Stroke. - 2007. - Vol. 38, № 8. - P. 2275-2278.
7. Paxinos G. The rat brain in stereotaxic coodiates / G. Paxinos, C. Watson. - San Diego // -: Academic Press, - 2008. - 400 p.
8. Pierot L. Vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage: recent advances in endovascular management / L. Pierot, M. Aggour, J. Moret // - 2010. - Vol. 16. - P. 110-116.
Ж.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ КОРЫ БОЛЬШИХ ПОЛУШАРИЙ КРЫС С ПЕРВИЧНЫМ И ПОВТОРНЫМ ГЕМОРРАГИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ Колдунов В.В., Бибикова В.Н.
Исследованы структурно-морфологические изменения при первичном и повторном геморрагическом инсульте. Установлено, что патогенез первичного и повторного геморрагического инсульта характеризуется прогрессирующей динамикой развития отека ткани мозга и дистрофических изменений. Острый период (до 21 суток) включает выраженную гидропическую дистрофию, гибель 8,4±1,0% (р<0,05) нейронов коры инсультного полушария после первинного и 15,4±2,0% (р<0,05) после повторного геморрагического инсульта. В раннем восстановительном периоде (3-6 месяцев) процессы отека ткани мезга выражены в меньшец степени, а отдаленные нейродегеративные процессы характеризуются ишемическим типом гибели клеток. Плотность нейронов при первичном инсульте снижается на 28,1±2,5%
MORPHOLOGICAL CHANGES OF THE BRAIN CORTEX OF RATS WITH PRIMARY AND REPEATED STROKE Koldunov V.V., Bibikova V.N.
The dynamics of morphological changes in rat brain in experimental primary and secondary hemorrhagic stroke was establish. Repeated simulated stroke 1 month after the initial stroke. Histological evaluation was performed on the 3th, 21th day, after 3 and 6 months after stroke in a test area the size of 1-2 mm. Degenerative dameged modified neurons with signs of cytolysis, kariolisis with homogeneously colors acidophilic nuclei or with signs piknozis. Are studied structurally-morphological changes at primary and repeated hemorrhagic stroke. The pathogenesis of primary and repeated hemorrhagic stroke is characterized by progressive dynamics of brain tissue edema and degenerative changes. When repeated stroke reliable growth changes in the
(р<0,05), а при повторном на 33,7±3,9% (р<0,05). Достоверное увеличение степени дистрофических изменений нейронов коры мезга наблюдалось при повторном инсульте
Ключевые слова: первичный геморрагический инсульт, повторный инсульт, нейродегенерация, кора больших полушарий.
Стаття надшшла 30.10.2013 р.
cerebral cortex exacerbates neurological deficit, is an unfavorable factor recovery period and requires further study of the pathophysiological level.
Key words: primary hemorrhagic stroke, repeated stroke, neurodegeneration, brain cortex.
Рецензент Масловський С.Ю.
УДК 591.147.1+591.471.36]:613.29
ДИНАМИКА МАССЫ ТЕЛА ПОЛОВОЗРЕЛЫХ КРЫС ПОСЛЕ бО-ДНЕВНОГО ВВЕДЕНИЯ БЕНЗОАТА НАТРИЯ ИЛИ ТАРТРАЗИНА В РАЗЛИЧНЫХ ДОЗАХ
В эксперименте на 300 белых беспородных половозрелых крысах-самцах установлена динамика их массы тела после 60-ти дневного введения бензоата натрия или тартразина в различных дозах. Выявлено уменьшение темпов набора массы тела, как после 30 суток, так и 60 суток эксперимента, по сравнению с данными животных контрольной группы, наиболее выраженные по амплитуде в группе с использованием бензоата натрия в дозировке 1000 мг/кг, а тартразина в дозировке 1500 мг/кг.
Ключевые слова: крыса, маса тела, бензоат натрия, тартразин.
Работа является фрагментом НДР «Морфогенез различных органов и систем организма при нанесении дефекта в большеберцовых костях после 60-ти дневного введения бензоата натрия или тартразина» (государственный регистрационный номер -0113U005755).
В последнее время в различных странах мира приобретает широкое распространение использование химических веществ и природных соединений (пищевых добавок), которые предупреждают порчу пищевых продуктов и напитков, улучшают их качество и увеличивают продолжительность хранения [1,5]. Этот факт обусловлен недостатком растительной и животной пищи для обеспечения населения Мира [7]. Производство пищевых добавок в разных странах имеет тенденцию к постоянному количественному и качественному увеличению: в Азии - на 10-15%, в США - на 4,4%, а странах Европы - на 2% [6].
Особое внимание заслуживает постоянное использование пищевых добавок из группы красителей и консервантов, в том числе тартразина и бензоата натрия [3,12]. Данные добавки широко используются в мясной, рыбной, кондитерской промышленностях, при изготовлении алкогольных и безалкогольных напитков и др. [3,13,14]. Предельно допустимое суточное употребление бензоата натрия и тартразина строго регламентирется законодательно для исключения их негативного влияния на здоровье населения [5,9]. Однако, несмотря на это, при производстве пищевых продуктов с использованием данных пищевых добавок может иметь место преднамеренное превышение предельно допустимой суточной дозы.
Исследованию в эксперименте влияния бензоата натрия или тартразина в различных дозах и продолжительности воздействия на структурно-функциональную организацию различных органов посвящено недостаточное количество работ, в основном, выполненных зарубежными авторами [11,15,16,17]. При этом следует отметить, что сведения о динамике массы тела животных, как одного из основных интегративных показателей организма, после введения бензоата натрия или тартразина в одной и двух предельно допустимых суточных дозах в отечественной литературе полностью отсутствуют, а в зарубежной - неполны и противоречивы.
Целью работы было установить динамику массы тела половозрелых крыс после 60-дневного введения бензоата натрия или тартразина в одной и двух предельно допустимых суточных дозах.
Материал и методы исследования. Исследование проведено на 300 белых беспородных половозрелых крысах-самцах репродуктивного периода онтогенеза, которые вводились в эксперимент с исходной массой тела 200-210 г и были разделены на 5 групп по 60 животных в каждой: 1-ю группу составили контрольные животные, которым ежедневно в течение 60-ти дней при помощи желудочного зонда вводился 1 мл 0,9% изотонического раствора натрия хлорида; 2-ю и 3-ю группы - крысы, которым ежедневно в течение 60-ти дней при помощи желудочного зонда вводился 1 мл раствора бензоата натрия в дозировке 500 мг/кг и 1000 мг/кг массы тела соответственно (бензоат натрия (производитель «Eastman Chemical B.V., Нидерланды, расфасовано на КП КОР «Фармацевтическая фабрика», г. Киев по заказу АТ «Эксимед»)); 4-ю и 5-ю группы -крысы, которым ежедневно в течение 60-ти дней при помощи желудочного зонда вводился 1 мл раствора тартразина в дозировке 750 мг/кг и 1500 мг/кг массы тела соответственно (тартразин (производитель ROHA DYECHEM PVT LTD (A/44 & A45, Road № 2, MIDC Andheri (East), Mumbai - 400 093, India)). Препараты вводили в первой половине дня (с 700 по 800). Учитывая положительную динамику роста животных в конце каждой недели установленного срока производилась коррекция дозы вводимых пищевых добавок.
Содержание и манипуляции над лабораторными крысами проводились в соответствии с правилами, установленными «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1986) [2,10] и положениями Закона Украины № 3477-
