CC BY
67
В1СНПК ВДНЗУ «Украгнська медична стоматологгчна академ1я»
Summary
STRUCTURE OF SUBMANDIBULAR SALIVARY GLAND IN RATS UNDER CORRECTION OF EXPERIMENTAL ASEPTIC SIALADENITIS BY ADMINISTRATION OF CRYOPRESERVED PLACENTA Shepitko I.V.
Keywords: cryopreserved placenta, sialadenitis, submandibular salivary gland.
The results of the research presented allowed us to find out the administration of cryopreserved placenta to rats with acute experimental aseptic sialadenitis causes the reactions from the direction of parenchymal and stromal components of submandibular salivary gland lobules. They are manifested by the preventing dystrophic sings in distal and intercalated segments of the ducts and diminishing destructive changes in the striated and granular ducts. Due to bioactive substances of pla-cental tissue the restoration of the morphological characteristics and functions of the gland develops rapidly. The activation of mast cells contributes to the renewing in microcirculation and trophism of epithelial glandular complexes.
УДК 618.34:[618.3-06:616.98:578.828]
Шерстюк С. А., Сорокина И. В.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПЛАЦЕНТЫ
ОТ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ЖЕНЩИН.
Харьковский национальный университет им. В. Н. Каразина, медицинский факультет Харьковский национальный медицинский университет
В плаценте от ВИЧ-инфицированных женщин выявлены признаки хронической плацентарной недостаточности с выраженными в различной степени неспецифическими инво-лютивно-дистрофическими изменениями и острыми циркуляторными расстройствами, а также признаки плацентита, преимущественно в виде децидуита и хориоамнионита на фоне виллузита и интервиллозита. Подобные морфологические изменения косвенно свидетельствующие о нарушении проницаемости плацентарного барьера, что может явиться причиной возможного трансплацентарного инфицирования плода.
Ключевые слова: плацента, ВИЧ-инфекция, плод.
Исследование проводится в рамках научно-исследовательской работы «Патоморфологические особенности формирования плода и новорожденного под влиянием патологии матери» (№ государственной регистрации 0110и001805).
Оценка морфофункционального состояния плаценты является одним из наиболее важных критериев, который позволяет выяснить роль патологии в системе мать - плацента - плод, в прогнозе для плода [2 ;3; 6; 9]. Несмотря на многочисленные работы, в которых подробно разбираются морфологические проявления недос-
таточности плаценты, далеко не все причины, которые могут привести к развитию плацентарной недостаточности, в настоящее время могут считаться установленными [1; 8]. Как правило, исследователи ограничиваются довольно узким кругом патологии периода беременности, сахарным диабетом и гемолитической болезнью новорожденных, тогда как роль инфекционной и, в особенности, вирусной патологии плаценты в возникновении недостаточности, развитии и срыве компенсаторных реакций попрежнему остается неизвестной [8].
Учитывая тот факт, что количество случаев инфицирования ВИЧ женщин репродуктивного возраста и беременных в Украине неуклонно растет [5], изучение морфологического состояния плаценты, от ВИЧ-инфицированных женщин, на наш взгляд, является весьма актуальным.
Цель исследования
Целью настоящего исследования явилось выявление морфологических особенностей плаценты от ВИЧ-инфицированных женщин.
Материалы и методы исследования
Проведено патоморфологическое исследование плацент у 40 женщин. 22 плацент были от ВИЧ-инфицированных женщин (группа сравнения). Контролем служили 18 плацент с физиологически протекающей беременностью. Забор материала для гистологического исследования проводился по общепринятой методике. После осмотра, взвешивания, измерения плаценты из периферических и центральных ее отделов через всю толщу вырезали кусочки, производили забор оболочек от места разрыва до края плаценты.
Вырезались кусочки, которые после спиртовой проводки заливались в целлоидин-парафин. Изготовлялись срезы толщиной 5-6 мкм. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином и пик-рофуксином по ван Гизон.
Комплекс гистологических, морфометриче-ских, исследований проводился на микроскопе Olympus BX-41 с использованием программ Olympus DP-Soft (Version 3:1) и Microsoft Excel [4]. Плотность клеточных элементов пересчиты-валась при увеличении 400, в 10 ограниченных полях зрения. Все цифровые данные обрабатывались методами математической статистики с использованием вариационного и альтернативного анализа [4]. При использовании методов альтернативной и вариационной статистики вычисляли среднюю арифметическую степень дисперсии, среднеквадратическое отклонение, среднюю ошибку разницы, вероятность различия. Вероятность различия между двумя средними при малых выборках определяли по таблице Стьюдента с соблюдением условия (n1+n2-2) [7]. При определении степени вероятности допускали точность р<0,05, что, как известно,
соответствует Р>95,0%.
Результаты исследований и их обсуждение
Плаценты от ВИЧ-инфицированных женщин были овальной или круглой формы с гладкой, блестящей плодовой поверхностью. Котиледоны целы, границы между ними четкие, поверхность котиледонов немного выбухает, на разрезе ткань рыхлая. В толще котиледонов отмечаются немногочисленные белые инфаркты и пет-рификаты. На материнской поверхности - сгустки крови. Оболочки целы, белесовато-сероватые, несколько отечные с очаговыми мелкоточечными множественными кровоизлияниями.
Во всех отделах плаценты выявлены дистрофические и инволютивные изменения, представленные полями фибриноидного некроза и очагового кальциноза в децидуальной и хоральной пластинках, а также материнским и плодовым фибриноидом в ворсинчатом хорионе. В строме ворсин среднего и мелкого калибров выявлялись очаги фибриноидного некрозов, распадающиеся клетки с гиперхромными крупными ядрами.
Синцитиальный покров крупных и средних ворсин очагово некротизирован. На поверхности таких ворсин выявлялись обширные наложения фибриноидных масс. Встречались поля ворсин, склеенных фибриноидом. В строме крупных ворсин склеротические процессы были выражены умеренно. При окраске по ван-Гизон интенсивное красное окрашивание выявлялось пери-васкулярно в виде т.н. фиброзных манжеток.
В синцитиальном покрове мелких ворсинок выявлялись участки двухрядного расположения синцития, многочисленные синцитиальные узелки. Ядра синцития часто становились ги-перхромными.
Характерной особенностью плацент данной исследуемой группы являлось изменение эндо-телиальной выстилки сосудов ворсин крупного и среднего калибра, известные как эндотелиоз в виде выраженной пролиферации эндотелиоци-тов, частичной их десквамацией, что привело к сужению просветов сосудов, местами вплоть до их полной облитерации. Ядра эндотелиоцитов крупные и гиперхромные, часто с признаками кариопикноза и кариорексиса. Цитоплазма клеток вакуолизирована. Базальные мембраны сосудов неравномерно утолщены. В мелких сосудах ворсинок обнаруживались фибриновые тромбы.
Как следствие склеротических процессов и эндотелиоза в сосудистом русле ворсин, в плацентах обнаружены обширные ишемические инфаркты, локализующиеся преимущественно в субдецидуальной зоне.
Подобные морфологические изменения сосудов ворсин, как свидетельствуют данные литературы, являются особенностью вирусного повреждения плаценты [8].
Воспалительная клеточная инфильтрация выявлялась в децидуальной и хориальной пластинках, в ворсинчатом хорионе преимущественно в субдецидуально расположенных ворсинках.
Во всех плацентах нами были выявлены признаки интрамурального отека и незрелости в виде наличия ворсин с «ползучим» характером роста, открытыми стромальными каналами, обилием сохранившихся клеток Кащенко-Гофбауера.
Проявлением компенсаторно-адаптационных реакций явились обнаруженные поля ворсинок-регенератов с сочным, часто двухрядным син-цитиальным покровом, обилием синцитиальных гиперхромных узелков.
Следствием острого нарушения плацентарного кровообращения является обнаружение интрадецидуальных и субдецидуальных гематом, расширение просветов сосудов и их неравномерное наполнение кровью.
Базальная мембрана амниона неравномерно утолщена, с признаками склеротических изменений.
Эпителиальный покров амниотической оболочки неоднороден. Эпителиоциты, располагающиеся на базальной мембране как одноядерные, так и двуядерные, встречаются также многоядерные клетки. Преобладал кубический эпителий. Базофильные ядра клеток содержали, как правило, эухроматин.
Следует отметить, что при этом часто выявлялось неравномерное распределение хроматина в ядре, также выявлялись гиперхромные ядра с отчетливым ободком просветления по периферии, что по данным литературы является признаком вирусного повреждения амниона [8].
Также обращало на себя внимание обилие эпителиоцитов, находящихся в периоде покоя перед секрецией. Эти клетки имели крупные умеренно базофильные ядра и необильную зернистую цитоплазму. Значительная доля эпи-телиоцитов в функциональном плане соответствовала периоду экскреции. Как известно, именно эти клетки склонны к десквамации [1]. Деск-вамация эпителия в описываемых наблюдениях выражена значительно. Очагово, на значительном протяжении амниотической оболочки, отмечались зоны ацидофильного некроза эпителио-цитов.
HidП¡К ВДНЗУ «Украгнсъка медична стоматологгчна академ1я»
Рис. 1. Практически полная облитерация просвета сосуда ворсины крупного калибра при ВИЧ-инфекции. Окраска гематоксилином и эозином, х 200.
Выявлялись участки пролиферации эпителия с формированием немногочисленных амниоти-ческих ворсинок, эпителий последних часто характеризовался дистрофическими и некротическими изменениями.
По данным В. А. Цинзерлинга и соавторов (2002), при поражении плаценты ВИЧ выявляются, прежде всего, изменения трофобласта, децидуальных клеток, эндотелия и клеток стро-мы ворсин, которые увеличиваются в размерах, преимущественно за счет светлых, крупных ядер частью неправильной формы, что в полной мере совпадает с полученными нами результатами описанными выше.
Морфологическими изменениями, свидетельствующими о нарушении проницаемости плацентарного барьера, являются утолщение, дистрофические изменения синцитиокапилляр-ных мембран и стенок сосудов, а также задержка созревания ворсин в сочетании с их фиброзом [8; 9]. Учитывая вышесказанное, выявленные отчетливые ВИЧ-обусловленные изменения в плодной части последов, не позволяют, по нашему мнению, исключить возможность трансплацентарного инфицирования плода.
Таким образом, в плаценте от ВИЧ-инфицированных женщин имеются проявления хронической плацентарной недостаточности с выраженными в различной степени неспецифическими инволютивно-дистрофическими изменениями и острыми циркуляторными расстройствами, а также признаки плацентита, преимущественно в виде децидуита и хориоамнионита, на фоне виллузита и интервиллозита.
Выводы
1. В плаценте от ВИЧ-инфицированных женщин выявлены признаки хронической плацентарной недостаточности с выраженными в различной степени неспецифическими инволютив-но-дистрофическими изменениями и острыми циркуляторными расстройствами, а также признаки плацентита, преимущественно в виде де-цидуита и хориоамнионита на фоне виллузита и интервиллозита.
2. Морфологические изменения в плаценте
от ВИЧ-инфицированных женщин, косвенно свидетельствующие о нарушении проницаемости плацентарного барьера, что может явиться причиной возможного трансплацентарного инфицирования плода.
Перспективным является изучение органов эндокринной системы детей от ВИЧ-инфицированных матерей.
Литература
1. Алещенко И. Е. Патологическая анатомия плаценты и эндокринных органов плода при эндокринопатиях беременных : дис. док.мед.наук / Алещенко И. Е. - М., 2006 - 297 с.
2. Волощук И.Н Морфология ворсинчатого хориона и хромосомных аномалий / И.Н. Волощук // Медицинская генетика. - 2002. -Т.1, № 1. - С. 38-41.
3. Громова А.М. Патоморфологические особенности плаценты и плодных оболочек у беременных с преждевременным излитием околоплодных вод / А.М.Громова, Е.А. Тарановская, В.В. Талаш // Вюник проблем бюлогп i медицини. - 2011. - Вип. 2, Т. 1. - С. 182-184.
4. Лапач С.К. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Exel / С.К. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич. - К. : МОРИОН, 2001. - С. 144-155.
5. Марциновская В. А. Эпидемиологическая характеристика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных ВИЧ-инфицированными женщинами, в Украине / В. А. Марциновская // УкраТнський медичний часопис. - 2006. - №1. - С. 109-113.
6. Милованова А.П. Внутриутробное развитие человека / А.П. Ми-лованова, С.В. Савельева. - М. : «МДВ», 2006. - 384 с.
7. Сергиенко В.И. Математическая статистика в клинических исследованиях / В.И. Сергиенко, И.Б. Бондарева. - М. : ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2000. - 256 с.
8. Цинзерлинг В. А. / Перинатальные инфекции, (вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клиника-морфологических сопоставлений). Практическое руководство. / В. А. Цинзерлинг, В. Ф. Мельникова. - СПб. : Элби СПб, 2002. -352 с.
9. Чайка В.К. Инфекции в акушерстве и гинекологии: Практическое руководство / Чайка В.К. - ООО «Альматео». - 2006. - С.637.
Реферат
МОРФОЛОПЧН1 ОСОБЛИВОСТ1 ПЛАЦЕНТИ В1Д В1Л-
1НФ1КОВАНИХ Ж1НОК
Шерстюк С. О., Сорокша I. В.
Ключовi слова: плацента, ВШчнфек^я, плщ.
У плацент вщ ВШчнфкованих жшок виявлен ознаки хрошчно'Т плацентарноТ недостатност з вираженими в рiзному ступен неспецифiчними iнволютивно-дистрофiчними змшами й гострими циркуляторними розладами, а також ознаки плацентиту, переважно у виглядi дециду^у й хо-рюамнюыту, на ™i втлузиту й штервтлозиту. Подiбнi морфолопчы змши, що побiчно свщчать про порушення проникност плацентарного ба-р'ера, що може з'явитися причиною можливого трансплацентарного шфкування плода.
Summary
MORPHOLOGICAL FEATURES OF PLACENTA IN HIV-
INFECTED WOMEN
Sherstiuk S.A., Sorokina I.V.
Key words: placenta, HIV infection, fetus.
The study of the placentas of HIV-infected shows the sings of chronic placental insufficiency with marked to a variable degree non-specific invo-lutive and dystrophic changes, acute circulatory disorders, as well as the signs of placentitis, mainly in the form of deciduitis and chorioamnionitis. These morphological changes indirectly point out the impairment of placental barrier permeability, which could result in possible transplacental infec-
tion of the fetus.
УДК 615.828.3:547.828.3 Щербак О. М.
ШВИДК1СТЬ ФОРМУВАННЯ РЕЗИСТЕНТНОСТ1 ЗБУДНИК1В ГРИБКОВИХ 1НФЕКЦ1Й ЩОДО ПОХ1ДНИХ 4Я-П1РИДО[4Г,3Г:5,6]П1РАНО[2,3-^]П1РИМ1ДИНУ
ДУ «1нститут 1тробюлоги та iмунологN iM. 1.1. Мечникова НАМН Украши» м. Харш
Проведено досл{дження швидкост1 формуван-ня резистентност{ збуднитв грибкових т-фекцш - родiв Candida та Aspergillus щодо нових rnxidHux 4Н-тридо[4\3^:5,6]трано[2,3-d]nipuMiduHy. При тридцятикратному культивуванн грибiв на середовищах, що Mi-стили зростaючi концентрацп досл1джених сполук, було встановлено повшьне формування резистентност1 збуднитв грибкових тфек-цш до нових поxiдниx конденсованих ттроге-новм^них гетероциклiв, що мютять пiримi-диновий фрагмент. Отриман результати свiдчaть про перспективтсть подальшого ви-вчення властивостей поxiдниx 4Н-пiридо[4\3^:5,6]пiрaно[2,3-d]пiримiдину з метою створення на гх основi ефективних засо-бiв для профшактики i лтування грибкових захворювань.
Ключовi слова: похщы 4Н-тридо[4',3':5,6]трано[2,3-с(]тримщину, збудники грибкових шфекцш, резистентнють.
Публка^я мае зв'язок i3 виконанням науково-дослщно''' ро-боти АМН 99/2011 «Протимiкробна активнють нових конденсованих ытрогеновмюних сполук та перспективи створення на ix основi профтактичних i лкувальних засобiв» № ДР 0111U004733.
Вступ
Розповсюдженють шфекцш, викликаних ан-тибютикорезистентними бактерiями, зростае в усьому свт з кожним днем [1, 2, 7]. Головним чинником збiльшення ктькосп антибютикостш-ких бактерiй е зростання застосування антимк-робних препаратiв та шдвищення частоти вико-ристання антибютиш широкого спектру дм [2, 7]. Надмiрне i нерацiональне застосування антимк-робних засобiв призводить до виникнення анти-бiотикостiйкиx патогенiв, сприяе пригшченню конкурентно' ендогенно' мiкрофлори та активному розмноженню грибiв, що стае основною причиною с^мкого поширення грибково' шфек-цп [4 - 6]. За даними офщшно' статистики в останн роки частота грибкових уражень зросла до 20 % [5]. В Украши захворюванють на грибко-вi iнфекцií перевищуе 30 % [4]. У зв'язку iз змн ною спектру збудникiв та виникненням штамiв грибiв, стiйкиx до лкарських препаратiв, що найбiльш широко вико ристовуються виникае необхщнють пошуку нових стратепчних пiдxодiв [2 - 4]. Одним iз заxодiв для боротьби з резисте-нтнiстю е пошук нових протигрибкових препара-
tíb та розробка шляхiв та 3aco6iB направленого синтезу речовин з антифунгальними властивос-тями [2]. Перспективними у якост потенцшних протигрибкових засобiв можуть стати похщш конденсованих нiтрогеновмiсних гетероциклiв, що мютять пiримiдиновий фрагмент. Нашими попередыми дослiдженнями нових похiдних 4Н-шридо^Э^б^трано^Э-С^римщину було встановлено Тх високу антифунгальну активнють щодо збуднимв грибкових шфекцш.
Мета роботи
Дослщження швидкостi формування резисте-нтностi збудникiв грибкових шфекцш - грибiв ро-дiв Candida та Aspergillus щодо нових синтетич-них конденсованих ытрогеновмюних сполук, що мютять шримщиновий фрагмент.
Матерiали i методи
Об'ектом дослiдження були найбтьш перспе-ктивнi за протигрибковою активнютю поxiднi 4Н-шридо^Э^б^трано^Э-С^римщину, якi впе-рше синтезованi на кафедрi оргашчноТ xiмil На-цiонального фармацевтичного ушверситету МОЗ УкраТни пiд керiвництвом д.х.н. Журавель I.
0. Сполукам надан власн коди. Дослiджено швидкiсть формування стшкосп щодо похщноТ з групи М-арилацетам^в сполуки 12б, похщноТ тюшв сполуки 1ЭЭ, 4-алктсульфантпохщноТ сполуки 1Э6 та похщноТ ацетамiдiв сполуки 149. У якост розчинника в дослщах було використа-но диметилсульфоксид. Вихщш розчини сполук доводили до концентрацп 1000 мкг/мл. Формування резистентних варiантiв мiкроорганiзмiв щодо сполук нового синтезу проводилось на штамах C. albicans ATCC 885-653, C. rugosa Скляр -2/1 та A.niger АТСС 704, як було одержано з фтп музею мiкроорганiзмiв ДУ " IMI iм. I.
1. Мечникова НАМН УкраТни ".
Вивчення швидкост формування стiйкостi мь кроорганiзмiв щодо речовин нового синтезу проводилось in vitro, шляхом пасажiв тест-штамiв на поживних середовищах (бульйон та агарi Сабу-ро), що мютили зростаючi дози дослiджуваниx сполук.
Для порiвняння було застосовано субстанци антисептика гексетидину (похщного пiримiдину) та протигрибкових препара^в флуконазолу, ке-токоназолу та ^раконазолу. Взагалi було вико-нано по тридцять пасаж1в мiкроорганiзмiв в при-сутностi суббактерiостатичниx концентрацiй до-слщжуваних речовин. При дослiдженнi визнача-лась кратнють збiльшення мiнiмальноТ iнгiбуючоТ концентрацп (MIK) на п'ятому, десятому, п'ятнадцятому, двадцятому, двадцять п'ятому та тридцятому пасаж
Результати дослвдження та 1х обговорення За результатами проведених дослщжень встановлено досить повiльне формування рези-стентностi C. albicans щодо нових синтетичних конденсованих штрогеновмюних сполук. До десятого пасажу виxiдна MIK не зростала у жодноТ
