CC BY
9Мир вирусных гепатитов 3 (2009)
последние годк лечение гепатита С зпатгггельно улучшилось, общедоступной терапии всё ещё нет. В связи с этим существует необходимость разработки вакцин против BIC. Использование классического «одхода к разработке вакцины, основанного ка получении ослабленного или ингктивированною штамма вируса, в случае ВГС малоэффективно.
Цель: разработка вагцин нового поколения.
Результаты. Одним из перспективных вариантов является синтетическая пептидная вакцина. Синтет жческие вакцины не содержат бактерий и вирусов, .нродуктов их жизнедеятельности, вызывают иммунный ответ узкой специфичности и обладают высокой степенью стандартности. Исключены трудности выращиваний вирусов, хранения и возможности репликатщи в организме вакцинируемого в случае исаользования живых вакцин. При создании данного ^чпа вакцин можно присоединять к носителю несколько разных пептидов, выбирать наиболее иммуногенные из них для комплексирования с носителем. В ходе работы бьюш синтезированы две конструкции, представляющие собой 30- и 31-членные пептиды, содержащею предполагаемые В- и Т-хелперный эпигоны - фрагменты высококонсервативкых участков белка Е2 ВГС, соединенные линкером. Исследована лммунот-енность порученных конструкций для мышей и крыс. Показано, «то обе конструкции обладают собственной иммуногенностью и в присутствии адъюванта без конъюгации с белком-носителем способны вызывать образование антител как к самим себе и входящим в их состав фрагментам оболочечного белка Е2, так и к полноразмерному белку Е2 и гетеродимеру Е1Е2 ВГС. Одна из конструкций проявляла иммуногенность при введении мышам даже в отсутствие адъюванга. Одной из причин высокой иммуногенности этих конструкций может являться их способность к о л нгоме р и э а ц щ и, которая, возможно, способствует повышению стабильности конструкций к распаду в тканях иммунизируемых животных.
Заключение. Полученные синтетические пептидные конструкции могут быть включены в состав кандидатной закцины против ГС.
Работа выполнена при побОержке гранта РФФИ Ms 07-04-12117-офи.
74. Морфологические оссбекности хронической HBV-инфекции
И.А. Морозов1, А.К. Княженцева-, Л.Ю. Ильченко1, К.В. Гордейчук1, К.Г.Федоров2 Г/ Институт полиомиелита и вгрусных энцефалитов им. М П. Чумакова РАМН, Московская обл.;
'РГМУ Московская обл.
Хроническии гепат®1, вызванный гепатотропным вирусом В, тлеет высокую распространенность среди населения, даже несмотря на большие успехи вакщшопрофи,тактики, приведшие в последние годы к существенному снижению заболеваемости. В отдельных исследованиях установлено, что в России около 3,5-4 млн. человек имеют HBV-инфекцию. Зтот вирус приводит к более значимым патоморфологическим изменениям печетги больных, чем при инфекции другими гепаготропными вирусами. Цель, оценка морфологических критериев диагностики HBV-инфекции.
Световая микроскопия. По сравнению с хроническими гепатитами С, G, ТТ при гепатите В всегда отмечается зыраженный'йолиморфизм печеночных клеток, большое количество гепатоцитов с резким просветлением цитоплазмы (матово-стекловидных), чаще бывает высокая активность и более выраженная иммуно-воспалитейЯИая реакция, чаще наблюдаются фокальные, ступенч?тые и мостовидные некрозы, сопровождающиеся перипелтолярным и перисинусоидальньгм фиброзом, в большом проценте случаев развивается цирроз, а также целый ряд внепеченочпых осложнений.
Электронная микроскопия и иммуногистохимические исследования Вместе с тем, перечисленные йризнаки не являются специфическими и не могут служить диагностическими и этиологическими критериями, поскольку могут встречаться и при хронической инфекции другими гепатотрспными вирусами. Однако проведение иммуногистохимической реакции на HBsAg и HBcAg позволяет уже при светооптическом исследовании установить наличие ПВУ-инфекции. При электронной микроскопии обнаруживается ряд специфических и косвенных признаков хронтгческой В-вирусной инфекции. Наиболее специфическим признаком, прежде всего, является присутствие в цитоплазме беяшгого количества вирионов с максимальньсм диметром 44,9 ± 3,4 нМ, что соответствует данным лягШатурШ о размерах В-вирионов. Иммуноцитохимическая реакция с монокл опальными антителами к HBsAg и комплексом Protein А - Colloidal Gold убеждает в правильности интерпретации. Следует упомянуть также наличие паракристаллических белковых включений в цитоплазме гепатоцигов. По мнению ряпа авторов, эти включения образуются в результате избыточного синтеза HBsAg в период активной репликации вируса, ч+о также является специфическим: признаком TIBV-инфекчии. Появление митохондрий больШйх размеров (до 5 мкм) с гипертрофированной вш/тренней мембраной, формирующей многочисленные продольно расположенные кристы, поззоляет утверждать, что в печени йерсистирует
Мир вирусных гепатитов 3 {2 О С 9}
ДНК-вирус, к которым относится НВУ По всей видимости, ДНК вируса участвует не только в кодировке генома клетки в ее ядре, но и в изменении митохондриальной ДНК. Это приводит к изменению структуры и свойств бепков, участвующих в формировании внутренней мембраны митохондрий, и синтезируемых в цитоплазме и митохондриях.
«Скрытая» НВ\'-инфекция Особую проблему в диагностике представляет патентная (скрытая, оккультная) форма НВУ-инфеютии, при которой в сыворотке крови можно обнаружить (да и то не всегда) только крайне небольшое ко,гичество ДНК НГЗ\' Лица с латентной формий составляют по данным ряда авторов 15-20% от всех НВУ-инфицированных. Среди сотен тысяч больных хроническим гепатитом с неустановленной этиологией преобладают именно НВУ-инфицированные, что делает данную проблему чрезвычайно актуальной Из всех гег.атотропных вирусов НВУ обладает наиболее выраженной способностью к мутациям В его ДНК имеется, по крайней мере, три участка, в которых часто происходят эта изменения, что позволяет НВУ-вириону «ускользать» от стандартных диагностических методов. Помимо этого, в развитие хронической НВУ-инсЬекци-5 отмечаются периоды, во время которых в крови больного практически отсутствуют антигены, а зирионы сконцентрированы в гепатоцитах В этих случаях без проведения пункционной биопсии диагноз вьнтгядит как «Хронический гепатит неясной (неустановленной) этиологии», что не позволяет назначить патогенетически обоснованную терапию. Следует отметить, что препараты современной медикаментозной терапии вирусных гепатитов не обладают прямым воздействием на вирионы, особенно если они сосредоточены внутри гепатоцитов. В силу этого, даже при существенном улучшении клинической картны и исчезновении I ШУ-аптагенов из крови, достаточное количество вирионов сохраняются внутри гепатоцитов, что> приводит к реактивации болезни через несколько месяцев после окончания терапии.
Заключение. Ивсле проведения пункционной биопсии Яйагносгика НВУ-инфекции не представляет особой сложности и при наличии методической оснащенности может быть осуществлена одним из трех методов: полимеразной цепной реакции в ткани печени, иммуногистохимии НБэАр; при световой микроскопии, а также с ГГомоптью трансмиссионной электронной микроскопии и электронно-микроскопической иммуноцитохимии ЙВяЛ^. Аналогичный подход можно использовать и для диагностики коинфекции несколькими гепатотрспными вирусами, а также для опенки успешности проведенного лечения и элиминации вируса из ткани печени
Работа выполнена при поддержке Российского гуманитарного научного фонда, грант№ 08-06-00181а.
73. Современные эпидемиологические особенности вирусного гепатита В
С .Л. Мукомолов, И.А Левакова, В.А. Васильева А.З. Сталеьская Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Постеро Роспотрсбнадзооо, г. Санкт-Петербург
Цель: охарактеризовать современный эпидемический пронесс вирусного гепатита В (ГВ). В течение 10 лет с 1997 г. по 2008 г. спетдаалнсты стали свидете.|1ями значительных изменений в продлениях эпидемического процесса ПЗ в Российской Федерации. С 2001 г. тенденция к снижению заболеваемости острыми формами инфекции приобрела ярко выраженный необратимый характер. В 20С8 г. показатель острого ГВ (ОГВ) в стране составил лишь 4.0 на 100000, что является рекордно низким значением за все годы наблюдения. В период с 1999 г. по 2001 г, показатель заболеваемости хроническим гепатитом В (ХГВ) в стране закономерно рос, поскольку отражал улучшение диагностики и выявления больных хроническими формами инфекции, которые накопились на территориях. В песледующие годы (2002-2008 гг.) уровень регистрации вновь выявленных случаев ХГВ находился: примерно на одинаковом уровне и незначительно колебался в пределах 14-15 0/ оооо.
Таким образом, разная направленность динамик;, заболеваемости ОГВ и ХГВ привела в 2007 г. к ситуации, когда показатель ХГВ в 2,6 раза превысил показатель О^В. За 12 анзтизируемых лет (1997-2008 гг.) произошли существенные изменения заболеваемости ОГВ в зависимости от возраста В конце 90-х годов лрошлиго века эпидемическое неблагополучие по гепатиту В прочно связывалось с двумя возрастными группами - 15-19 лет и 2С-29 лет. Средние показатели заболеваемости ОГВ, рассчитанные в 1997 р. яв Данным 48 субъектов РФ, составили у подростков 15-19 лет 141,9 О/оооо, а у молодых взрослых 20-29 пет -102,5 П/оооо. Специальное исследование, проведенное в 19°7 г. в Санкт-Петербурге, показало, что средний возраст заболевших ОГВ мужчин составил 23,4 года, а женшин - 24,3 года. Соотношение мужчлн и женщин в группе ОГВ составляло 1,53, т.е. мужчин среди заболевших было почти в 2 раза больше, чем женщин В 2007 г. показатель острого ГВ у подростков 15-19 лет, рассчитанный по материалам 54 субъектов РФ (5,6 0/оооо) оказался в 3 раза ниже, чем в возрасте 20-29 лет (17,7 О/оооо) и на 25% ниже, чем в возрасте 30-39 лет (7,5 О/оооо). Снижение заболеваемости подростков изменило возрастную структуру ОГВ в Российской Федерации в 2007 г. по сравнению с 1997 г. В 2007«;'доля заболевших подрос гков 15-19
