Морфологические особенности аденогипофиза детей, умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей

Шерстюк С.А.

УДК 616.432--053.31/.36-091.8:[618.3-06:616.98:578.828]

С.А. Шерстюк

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АДЕНОГИПОФИЗА ДЕТЕЙ УМЕРШИХ В ВОЗРАСТЕ ОТ 6 МЕСЯЦЕВ ДО 1 ГОДА ОТ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ МАТЕРЕЙ

Харьковский Национальный университет им. В. Н. Каразина (г. Харьков)

Исследование проводится в рамках научно-исследовательской работы «Патоморфологические особенности формирования плода и новорожденного под влиянием патологии матери» (№ государственной регистрации 011011001805).

Вступление. На протяжении всего внутриутробного периода плод полностью зависит от материнского организма, а, следовательно, от условий, в которых пребывает мать [1, 3]. Любое нарушение течения беременности в зависимости от времени действия и тяжести клинических проявлений оказывает патологическое воздействие на организм плода [1, 6]. Известно, что при хронической фетоплацентарной недостаточности (симметричная форма ЗВУР плода, отечная форма гемолитической болезни, диабетическая фетопатия, преэклампсия) возникают состояние функционального истощения, декомпенсация эндокринных органов плода, дистрофия и деструкция секреторных клеток. Эти процессы являются не столько следствием нарушения обмена веществ, сколько проявлением перехода организма к аварийной секреции из-за гиперстимуляции со стороны регулирующих систем [3].

Ключевым звеном адаптационно-компенсаторного механизма эндокринной системы организма, как известно, является аденогипофиз, развитие ребенка на фоне материнской ВИЧ-инфекции, по-видимому, приведет к неким компенсаторным морфологическим изменениям. В доступной литературе данных о гистоархитектонике аденогипофиза детей, умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей, найти не удалось. Учитывая тот факт, что доминирующим путем передачи ВИЧ-инфекции в Украине стал гетеросексуальный путь - это неизбежно приведет к увеличению количества ВИЧ-инфицированных женщин детородного возраста и увеличению количества детей, рожденных ВИЧ-инфицированными женщинами [5, 7], поэтому изучение данной проблемы, на наш взгляд, является весьма актуальным.

Целью настоящего исследования явилось выявление морфологических особенностей аденогипофиза детей умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года от ВИЧ-инфицированных матерей.

Объект и методы исследования. Материал собирался в период с 1998 по 2011г.г. и предоставлен для изучения Одесским патологоанатомическим бюро. В исследуемую группу (группа Д-2) были отобраны 13 детей, умерших в возрасте от 6 месяцев

до 1 года, от матерей с серологически подтвержденной ВИЧ-инфекцией. Для получения достоверных данных материал подбирался тщательно. Причиной смерти детей нашей исследуемой группы явились легочно-сердечная недостаточность, отек головного мозга и полиорганная недостаточность. Группу сравнения (группу Д-1) составили 12 случаев детей умерших в возрасте до 6 месяцев, от ВИЧ-инфицированных матерей. Умершие дети группы сравнения погибли вследствие легочно-сердечной недостаточности, отека головного мозга и полиор-ганной недостаточности.

Аденогипофиз измерялся и взвешивался. Вырезались две партии кусочков, часть из которых после спиртовой проводки заливались в целлоидин-парафин и изготавливались срезы толщиной 5-6 мкм. Эти срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизон и по методу Маллори.

Другая партия кусочков помещалась в 2,5% за-буференный раствор глютарового альдегида для предварительной фиксации на 6-8 часов при температуре 4°С. Затем кусочки ткани промывали в буферном растворе и переносили в 1%-ный забу-ференный раствор четырехокиси осмия на 3-4 часа при температуре 4°С для окончательной фиксации. После этого проводили дегидратацию в спиртах возрастающей концентрации и ацетоне. Ткань пропитывали и заключали в смесь эпоксидных смол (эпон-аралдит) по общепринятым методикам. Полимеризацию блоков проводили в термостате при температуре 60°С в течение двух суток.

Из полученных блоков, на ультрамикротоме УМТП-ЗМ, изготавливали ультратонкие срезы, монтировали их на электролитические сеточки и, после контрастирования цитратов свинца, изучали под электронным микроскопом ЭМВ-100 БР при ускоряющем напряжении 75 кв.

Комплекс гистологических, морфометрических, исследований проводился на микроскопе Olympus BX-41 с использованием программ Olympus DP-Soft (Version 3:1) и Microsoft Excel [4]. Плотность клеточных элементов пересчитывалась при увеличении 400, в 10 ограниченных полях зрения. Все цифровые данные обрабатывались методами математической статистики с использованием вариационного и альтернативного анализа [4]. При использовании методов альтернативной и вариационной статистики вычисляли среднюю арифметическую степень дисперсии, среднеквадратическое отклонение,

среднюю ошибку разницы, вероятность различия. Вероятность различия между двумя средними при малых выборках определяли по таблице Стьюдента с соблюдением условия (п1+п2-2) [10]. При определении степени вероятности допускали точность р<0,05, что, как известно, соответствует Р>95,0%.

Результаты исследований и их обсуждение. У детей, умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей аденогипофиз, образующий переднюю долю гипофиза, имел красноватый цвет. Макроскопически визуализировались многочисленные перегородки, отходящие от капсулы и проникающие в глубь железы.

Микроскопически структурированность паренхимы нечеткая, с трудом удавалось визуализировать эпителиальные тяжи, в ряде случаев разделенные сетью синусоидных капилляров и рыхлой волокнистой соединительной тканью.

Обращало на себя внимание массивное разрастание периваскулярной соединительной ткани, которое проявилось достоверным (Р<0,05) увеличением относительного объема сосудисто-стро-мального компонента железы, по сравнению с группой Д-1 (табл.1).

Периферическая часть тяжей была заполнена преобладающей популяцией эндокриноцитов - хро-мофильными клетками, а срединное положение занимали клетки небольшого размера с нечеткими границами и слабо окрашиваемой цитоплазмой (хромофобные эндокриноциты).

Хромофильные клетки, по тропности их секреторных гранул к красителям, были разделены на ацидофильные и базофильные эндокриноциты, их соотношение составляло 4,3/1.

Большая часть переднецентральной и боковой зон были заселены ацидофильными клетками, представленными двумя разновидностями: сома-тотропоцитами и маммотропоцитами

Эндокриноциты, составляющие большую часть клеточной популяции аденогипофиза и отнесенные нами к соматотропоцитам, имели, как правило,

Рис. 1. Ультраструктура соматотропоцитов аденогипофиза группы Д-2 Ч 19000.

округлую форму и округлое, занимающее центральное положение, ядро (рис.1). Электронная микроскопия позволила оценить состояние внутриклеточных структур, представляющих для нас особый интерес, в частности размер секреторных гранул (табл.2).

Маммотропоциты, в отличие от соматотропоцитов, напоминали слегка вытянутый овал с округлым, эксцентрично расположенным ядром. В цитоплазме, окрашенной в коричневый цвет, определялись овальной формы секреторные гранулы.

Другая популяция клеток, секреторные гранулы которых окрашивались основными красителями (базофильные эндокриноциты), встречались преимущественно в передмедиальной и переднелатеральной зонах.

Одним из представителей этой группы явились тиреотропоциты - полигональной формы с центрально расположенным овальным ядром. Секреторные гранулы данной популяции клеток чаще выявлялись вдоль клеточной мембраны (рис. 2).

Гонадотропоциты, представляющие собой базофильные эндокриноцитов, были округлой формы со смещенным к периферии ядром. В цитоплазме определялись базофильные секреторные гранулы. Как и в группе Д-1, среди гонадотропоцитов выделить фолликулостимулирующие и лютеинизирую-щие клетки не представилось возможным, поскольку различия между ними были незначительны.

Адренокортикоциты определялись зачастую в переднемедиальной области аденогипофиза и имели, как правило, полигональную форму. Дольчатое ядро, занимало центральное положение в клетке. Цитоплазма окрашивалась в голубоватый цвет. Благодаря электронной микроскопии в цитоплазме этих клеток удалось выявить умеренно развитый эндоплазматический шероховатый ретикулум, аппарат Гольджи, микроворсинки и секреторные гранулы различной плотности.

Все морфометрические данные эндокриноцитов аденогипофиза представлены в таблицах 2 - 7.

Рис. 2. Ультраструктура тиреотропоцитов аденогипофиза группы Д-2 Ч 55000.

Таблица 1

Относительные объемы основных структурных компонентов аденогипофиза, детей умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года от ВИЧ-инфицированных матерей

(М±т) (%)

Группы сравнения Относительный объем стромы с сосудами Относительный объем паренхимы

Д-1 15,97+0,25 84,03+1,14

Д-2 80,36+1,12* 19,64+0,27*

Примечание: * Р<0,05 по сравнению с Д-1.

В аденогипофизе детей, умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей выявлено: прогрессивное, достоверное (Р<0,05) уменьшение диаметра клеток, размера их секреторных гранул и увеличение ядерно-цитоплазматического соотношения в следующей популяции хромофильных клеток: соматотропоциты, тиреотропоциты и адренокортикоциты, по сравнению с группой Д-1 (табл. 1, 3, 5). Подобная морфологическая картина указывает на глубокое функциональное истощение аденогипофиза детей данной исследуемой группы [3].

Как свидетельствуют данные литературы, увеличение относительного объема хромофильных клеток, за счет уменьшения хромофобных, выявленное в данной исследуемой группе, является еще одним подтверждением напряжения компенсаторных возможностей аденогипофиза. (табл. 6, 7) [1, 8].

По-видимому, в нашем случае дети, умершие в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей не были подвержены нарушению развития аденогипофиза в эмбриогенезе, но испытывали высокое функциональное напряжение длительный период времени, включая и внутриутробный период, что привело к напряжению, а в последующем и к срыву адаптационно-компенсаторных возможностей аденогипофиза, так как известно, что длительное действие повреждающего фактора (длительно текущий поздний токсикоз, сердечно-сосудистая патология, профвредности и др.) может привести к угнетению (иногда резкому) функционального состояния аденогипофиза [2, 9, 11, 12].

Таким образом, в аденогипофизе детей, умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года, от ВИЧ-инфицированных матерей мы выявили глубокое функциональное истощение проявившееся: уменьшением диаметра клеток, размера их секреторных гранул, увеличением ядерно-цитоплазматического соотношения, увеличением относительного объема хромофильных клеток, за счет уменьшения

Таблица 2

Морфометрические данные соматотропоцитов аденогипофиза детей умерших в возрасте от 6 месяцев до 1 года от ВИЧ-инфицированных матерей (М±т)