CC BY
68
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 615.276.2/.4.015.44.076.9
Стручко г.Ю., Москвичев Е.В., Меркулова Л.М., Кострова о.Ю., Михайлова М.Н.
морфологическая картина и иммуногистохимический фенотип тимуса после введения полиоксидония
ФгБОУ ВПО «чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова» Минобрнауки РФ, 428015, г чебоксары, Россия
С помощью гистологических методов изучена морфологическая и иммуногистохимическая характеристика тимуса после курсового введения полиоксидония (ПО). Установлено, что через 1 мес после введения ПО в тимусе крыс регистрируется увеличение количества CD3+-тимоцитов и усиление их пролиферации в корковом веществе. Кроме того, отмечается увеличение количества CD68+-макрофагов во внутренней кортикальной зоне, S-100+-дендритных клеток в мозговом веществе, а также повышение экспрессии антиапоптотического белка bcl-2. Изменения молекулярного фенотипа тимуса сопровождаются незначительным увеличением толщины коркового вещества, площади дольки, а также относительной массы железы. Однако эти явления носят временный характер и сохраняются в отдельных клеточных структурах дольки через 3 мес после воздействия. В более поздние сроки наблюдения морфология тимуса и его антигенный фенотип не имеют достоверных отличий от показателей у интактных животных.
Ключевые слова: тимус; полиоксидоний; иммуногистохимический фенотип.
Struchko G.Yu., Moskvichev E.V., Merkulova L.M., Kostrova O.Yu., MikhailovaM.N. MORPHOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL PHENOTYPE OF THE THYMUS AFTER POLYOXIDONIUM INTRODUCTION
I.N. Ul'yanov Chuvash State University
Using histological methods morphological and immunohistochemical characteristic of the thymus after Polyoxidonium injection course has been studied. It has been found that in one month after injection of Polyoxidonium an increase of CD3+- thymocyte and their proliferation in the cortex in the rat's thymus is recorded. In addition, there is an increase in CD68+- macrophages in the inner cortical zone, S-100+ dendritic cells in the medulla, and increase in an anti-apoptotic bcl-2 protein expression. The changes in the molecular phenotype of the thymus are accompanied by a slight increase in the thickness of the cortex, the area of the thymus lobule, and the relative weight of the gland. However, these effects are temporary and remain in separate cell structures during 3 months after course of injections. In later periods of observation morphology of the thymus and the antigenic phenotype do not have significant differences from that of intact animals.
Keywords: thymus; Polyoxidonium; immunohistochemical phenotype.
Введение. Тимус является важным звеном иммунной защиты, функция которого направлена на поддержание пула периферических Т-лимфоцитов. Однако он, как никакой другой орган иммунной системы, подвержен иволютивным процессам, причем атрофия тимуса может быть как острой, так и длительной, хронической. Вне зависимости от этиологии инволюции прослеживается общая закономерность патологических процессов, происходящих в вилочковой железе. Атрофия тимуса сопровождается перестройкой архитектуры долек, уменьшением количества тимической паренхимы, замещением ее жировой и фиброзной тканью, а также снижением способности тимуса к выработке периферических наивных CD4+- и CD8+-тимоцитов. В итоге это приводит к снижению иммунной реактивности организма и противоопухолевой защиты [1].
Обратимость инволюции тимуса открывает дополнительные возможности для поиска методов поддержания и стимуляции тимопоэза при возрастной и акцидентальной атрофии различной этиологии. В связи с этим особый интерес представляет исследование возможности регулировать продукцию внутритимических факторов роста и дифференцировки лимфоцитов клетками тимопоэтического микроокружения. Возможность модулирования цитокинового профиля тимо-поэтического компонента железы может лежать в основе корригирующей иммунотерапии и профилактики акциден-тальной атрофии тимуса. Одним из соединений, обладающих
Для корреспонденции: Стручко Глеб Юрьевич, e-mail: [email protected]
For correspondence: Struchko Gleb Yur'evich, e-mail: glebstr@ mail.ru
иммуномодулирующим действием на цитокиновый профиль, является отечественный синтетический препарат полиоксидоний (ПО) [2], представляющий собой сополимер №окси-1,4-этиленпиперазина и №карбоксиэтил-1,4-этиленпиперазиния бромида молекулярной массой 80 кД.
ПО оказывает широкий спектр воздействий на иммунную систему [3]. Он обладает свойствами истинного иммуномо-дулятора в виде повышения пониженных и, наоборот, понижения повышенных показателей иммунитета. Механизм системного действия ПО in vivo сложен и многоступенчат. Этот препарат считается универсальным стимулятором фагоцитоза, так как влияет на все звенья фагоцитарного процесса. Он повышает клиренс чужеродных антигенных частиц и усиливает миграцию и поглотительную способность фагоцитов [4]. Кроме того, ПО изменяет продукцию клетками моноцитарно-макрофагальной системы про- и противовоспалительных цитокинов и их соотношение. При взаимодействии с моноцитами препарат стимулирует выработку ими фактора некроза опухоли а и интерлейкина-ф, при этом следует отметить, что его стимулирующий эффект реализуется лишь при изначально сниженной или нормальной продукции провоспалительных цитокинов, но не при их избытке [2, 5].
Важным свойством ПО считается его способность усиливать in vivo гиперчувствительность замедленного типа и клеточный иммунный ответ [3], а также продукцию цитокинов Т-лимфоцитами [2]. ПО обладает детоксикационным и мембра-ностабилизирующим свойствами, он также способен усиливать выход из костного мозга клеток-предшественников [6-8].
Экспериментальные работы по изучению влияния ПО на морфологию тимуса ведутся сравнительно недавно. В предыдущих наших исследованиях продемонстрировано, что профилактическое курсовое введение ПО крысам перед
Таблица 1
Масса тимуса, морфометрические характеристики дольки и экспрессия CD3 в структурах тимуса интактных крыс и животных через 1, 3 и 5 мес после введения ПО
Показатель Интактные животные Животные после введения ПО
1 мес 3 мес 5 мес 1 мес 3 мес 5 мес
Масса тимуса, мг на 100 г 216±14,77 195±6,1 169±7,G1 251±2G,2 189±11,6 176±12,4
Площадь дольки, мм2 1,52±G,26 1,15±G,G5 G,97±G,G6 1,78±G,2 1,2±G,1 G,93±G,G7
Площадь мозгового вещества, мм2 G,61±G,G4 G,49±G,G3 G,46±G,G5 G,6±G,G5 G,51±G,G4 G,45±G,G4
Толщина коркового вещества, мм G,32±G,G5 G,25±G,G4 G,19±G,G3 G,43±G,G6 G,27±G,G3 G,2±G,G3
CD3+-тимоциты коркового вещества, % 12,82±1,2 21,53±2,5 28,76±2,3 2G,2±1,8* 23,84±3,4 31,55±2,9
CD3+-тимоциты мозгового вещества, % 53,1±4,4 47,G9±3,8 35,67±2,8 65,4±4,6 51,2±3,7 4G,3±3,2
Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: * - р < 0,01 по сравнению с показателями у интактных крыс соответствующего возраста.
спленэктомией уменьшает степень развития акциденталь-ной инволюции тимуса, способствует коррекции иммунных нарушении и анемии [9]. Кроме того, мы установили, что курсовое введение ПО приводит к незначительному изменению морфометрических показателей долек, увеличению в тимусе количества CD23+-клеток, CD68+-макрофагов и Т-лимфоцитов, экспрессирующих CD3 и CD5 [10]. Тем не менее данных по изучению влияния этого препарата на течение инволютивных процессов в тимусе в динамике недостаточно много, что не позволяет в полной мере оценить возможность его применения для профилактики возрастной или акцидентальной атрофии вилочковой железы.
Цель исследования - изучить морфологическую и имму-ногистохимическую характеристику тимуса после курсового введения ПО.
Материал и методы. Работа выполнена на 70 белых нелинейных крысах-самцах массой 180-220 г Животных содержали в виварии, уход за ними осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Крыс разделили на две группы: 1) интактные животные (n = 20); 2) крысы с курсовым введением ПО (n = 50). Инъекции ПО производили внутримышечно из расчета 0,1 мг на 1 кг массы крысы (соответствует средней терапевтической дозе для человека в пересчете на массу животного) 2 раза в неделю в течение 3 нед. Выведение из эксперимента проводили через 1, 3 и 5 мес после окончания курса введения ПО путем декапитации. Объектом исследования служил тимус. В работе использовали методы, перечисленные ниже.
1. Иммуногистохимический метод с применением моно-клональных антител (МКАТ) и поликлональных антител (ПКАТ) фирмы Santa Cruze (США) и NovoCastra (Великобритания): 1) МКАТ к панцитокератину для неселективной идентификации эпителиальных клеток дольки тимуса; 2) МКАТ к кластеру дифференцировки лимфоцитов 3-го типа (CD3) для идентификации зрелых тимоцитов; 3) МКАТ к кластеру дифференцировки лимфоцитов 30-го типа (CD30) для идентификации активированных постфолликулярных B-лимфоцитов и моноцитов в структурах микроокружения мозгового вещества дольки, а также активированных Т-лимфоцитов коркового вещества; 4) ПКАТ к белку S-100 для идентификации клеток нейроэктодермального гистогенеза и дендритных клеток; 5) ПКАТ к Synaptophysin для идентификации клеток нейроэндокринного происхождения, к которым в тимусе относятся клетки APUD-серии; 6) МКАТ к кластеру дифференцировки 68-го типа (CD68) для идентификации макрофагов в структурах тимопоэтического и не-тимопоэтического микроокружения долек тимуса; 7) ПКАТ к белку p53 для идентификации апоптотически измененных клеток в структурах дольки тимуса; 8) ПКАТ к белку bcl-2 для идентификации долгоживущих клеток и определения направленности апоптотических реакций в структурах дольки тимуса; 9) МКАТ к IgM для идентификации В-лимфоцитов и плазматических клеток в структурах нетимопоэтическо-
го микроокружения; 1G) MKAT к IgG для идентификации В-лимфоцитов и плазматический клеток в структураx не-тимопоэтического микроокружения; 11) MKAT к маркеру клеточной пролиферации Ki-67 для идентификации клеток, наxодящиxся в митотической, G1-, S- и G2-фазаx клеточного цикла.
Исследования выполняли в соответствии со стандартными протоколами. ^агавые срезы толщиной 3 мкм наносили на высокоадгезивные стекла, обработанные L-polysine, высушивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Окраску проводили ручным и аппаратным способами с использованием иммуногистоxимическиx автостейнеров AUTOSTAINER-36G (Великобритания) и Leica BOND-MAX (Германия) с применением систем визуализации En-vision (DAKO, Дания) и NovoLink polymer (Великобритания).
2. Окраску гематоксилином и эозином использовали для исследования морфологии тимуса. Mатериал фиксировали в 1G% нейтральном забуференном формалине в течение 24 ч, промывали проточной водой, затем выполняли стандартную проводку на тканевом гистопроцессоре Leica ASP 2GG. После проводки кусочки ткани заливали в парафин. Парафиновые срезы материала толщиной З мкм наносили на отрицательно заряженные стекла Mentzel Glasses super frost и выполняли окраску гематоксилином и эозином по стандартной методике.
3. Компьютерная морфометрия. Цифровые снимки микропрепаратов получены с применением системы арxивиро-вания на базе микроскопа Leica DM4GGGB с использованием цветной фотокамеры Leica DFC 425 и лицензионной программы Leica Application Sute 3.6.G. Линейные морфометри-ческие измерения выполнены с использованием лицензионной программы Leica Application Sute 3.6.G. Интенсивность ядерной иммуногистоxимической реакции измеряли путем подсчета количества окрашенный ядер к количеству неокрашенный и переводом значений в проценты.
4. Статистическую обработку цифровык данный проводили с помощью лицензионного пакета MS Office 2GG3, а также программы "Биостатистика", достоверность определяли /-критерием Стьюдента.
результаты и обсуждение. Через 1 мес после курсового введения ПО тимус соxраняет дольчатое строение. Граница коркового и мозгового вещества четкая, междольковые септы не расширены. При определении морфометрическж показателей дольки на этом сроке определяется увеличение толщины коркового вещества на 34,4% и площади дольки на 17,1%, тогда как значения площади мозгового вещества не отличаются от таковык у интактнык животныи (табл. 1). Изменение морфометрическж показателей дольки сопровождается увеличением относительной массы железы на 16,2%. Следует отметить, что на другж срокаx наблюдения морфоме-трические показатели дольки и средняя масса железы мало отличались от значений у интактнык крыс соответствующего возраста.
При микроскопическом исследовании тимуса через 1 мес после воздействия обращает внимание большая гетерогенность
иммунология № 5, 2014
Таблица 2
Количество эпителиальных клеток, экспрессия CD68, S-100, Synaptophysm, CD30 в структурах тимуса крыс интактных крыс и животных через 1, 3 и 5 мес после введения ПО
Показатель Интактные животные Животные после введения ПО
1 мес 3 мес 5 мес 1 мес 3 мес 5 мес
Кортикальные эпителиоциты, % 8,3±1,2 12,09±1,8 15,71±1,6 6,42±0,9 13,01±2,1 16,5±2,2
Медуллярные эпителиоциты, % 21,88±2,3 19,44±1,9 16,92±1,7 19,3±2,1 18,7±1,8 15,9±1,6
СЭ68+-клетки, ед. в поле зрения 24,9±4,37 41,97±3,1 48,36±3,82 37,2±4,03* 47,33±4,8 55,41±6,1
8-100+-клетки, ед. в поле зрения 18,41±2,98 21,87±3,28 34,29±5,3 28,3±2,9* 27,61±3,28* 31,35±4,7
8упарк>рЬу8ш+-клетки, ед. в поле зрения 12,82±3,05 18,84±1,09 22,47±3,45 14,05±2,05 19,05±1,1 25,75±3,39
СЭ30+-клетки, ед. в поле зрения 13,5±2,77 16,03±1,91 20,01±3,18 14,1±1,6 18,97±2,1 23,64±2,7
Таблица 3
Экспрессия Ш-67, IgG, ^М, Ьс1-2 и белка р53 в структурах тимуса интактных крыс и животных через 1, 3 и 5 мес после введения ПО
Показатель Интактные животные Животные после введения ПО
1 мес 3 мес 5 мес 1 мес 3 мес 5 мес
К-67 в корковом веществе, % 39,1±3,6 28,3±2,8 26,4±2,1 56,5±4,8* 32,7±3,5 24,8±2,4
К-67 в мозговом веществе, % 11,6±1,5 10,7±0,9 6,93±0,5 14,1±1,3 9,55±0,8 7,1±0,7
^м, % 0,56±0,05 0,95±0,08 0,98±0,06 0,62±0,05 1,14±0,09 1,24±0,09
ДО, % 1,13±0,11 1,44±0,13 1,93±0,16 1,13±0,08 1,39±0,12 1,88±0,11
Ьс1-2, ед. в поле зрения 2,5±0,12 4,7±0,25 3,95±0,4 4,8±0,3** 4,9±0,3 4,75±0,3
р53, ед. в поле зрения 6,54±0,7 16,32±1,15 26,82±2,78 6,3±0,4 14,6±1,2 24,7±2,2
Примечание. ** - p < 0,001 по сравнению с показателями у интактных крыс соответствующего возраста.
клеточного состава коркового вещества дольки по сравнению с таковой у интактных животных соответствующего возраста. Основная масса лимфоцитарной паренхимы коркового вещества дольки представлена двумя типами клеток: лимфоцитами с небольшим ядром и центрально расположенным ядрышком и более крупными клетками с большим ядром и несколькими мелкими ядрышками, которые и преобладают. Другой особенностью морфологии коркового вещества дольки на этом сроке является увеличение количества крупных оксифильных клеток с округлым эксцентрично расположенным ядром, количество которых значительно возрастает во внутренней кортикальной и кортико-медуллярной зонах. Морфология мозгового вещества в целом повторяет картину у интактных животных соответствующего возраста (рис. 1 на обложке).
При иммуногистохимическом исследовании тимуса только через 1 мес после окончания курсового введения ПО выявили достоверное повышение экспрессии CD3 в тимоци-тах коркового вещества, при этом количество зрелых лимфоцитов увеличивается на 57,6%. В мозговом веществе дольки повышение экспрессии этого антигена регистрировали лишь на 23,2% (см. табл. 1). При подсчете количества эпителиальных клеток, положительных к панцитокератину, отметили его снижение в корковом веществе на 29,3%, в мозговом -на 13,3% (табл. 2). На других сроках наблюдения количество CD3+- и панцитокератин+-клеток достоверно не отличается от такового у интактных животных соответствующего возраста (рис. 2 на обложке).
Количество CD68+-макрофагов достоверно увеличивается через 1 мес после введения ПО в 1,5 раза. Кроме того, установили, что макрофаги в основном располагаются в кортико-медуллярной и внутренней кортикальной зонах диф-фузно среди лимфоцитов (рис. 3, а на обложке). Подобное повышение количества CD68+-клеток сохраняется и через 3 мес после воздействия. В более поздние сроки наблюдения количество этих клеток достоверно не отличается от такового у интактных животных.
При окраске препаратов тимуса ПКАТ к белку S-100 выявили скопления клеток в кортико-медуллярной зоне и мозго-
вом веществе, при этом их количество через 1 и 3 мес после введения ПО достоверно выше, чем у интактных животных соответствующего возраста на 53,7 и 26,2% соответственно. При исследовании экспрессии Synaptophysin и CD30 достоверных отличий в распределении этих антигенов по сравнению с интактными животными на протяжении всего эксперимента не обнаружили (см. табл. 2).
При определении экспрессии белка клеточной пролиферации Кт-67 отметили повышение количества позитивных клеток в корковом веществе дольки тимуса через 1 мес после применения ПО на 44,5%, а в мозговом веществе на 21,6% (рис. 3, б, табл. 3). При исследовании индекса клеточной пролиферации в более поздние сроки наблюдения не выявили достоверных отличий в структурах дольки по сравнению с аналогичным показателем у интактных крыс соответствующего возраста (см. табл. 3).
При определении содержания белков-регуляторов апоп-тоза в структурах дольки тимуса животных с введением ПО через 1 и 5 мес установили повышение экспрессии Ьс1-2 на 92 и 20% (рис. 3, в), а также снижение уровня белка р53 на 4 и 8,5% соответственно. Кроме того, выявляемость ^М+-клеток через 1, 3 и 5 мес повышается на 11, 20 и 27% соответственно. Экспрессия IgG не выявила достоверных отличий от ин-тактных животных соответствующего возраста (см. табл. 3).
Таким образом, курсовое введение ПО в дозе, адекватной средней терапевтической для человека, оказывает на тимус значимое, но кратковременное иммуностимулирующее действие. Мы установили, что через 1 мес после введения ПО в железе наблюдаются признаки повышения тимопоэза, которые проявляются достоверным повышением клеточной пролиферации и увеличением количества зрелых тимоцитов в корковом веществе. Это, по-видимому, является следствием усиления дифференцировки тимоцитов в зрелые формы, так как известно, что ПО способствует усиленному выходу из костного мозга клеток-предшественников [7].
Другой эффект ПО на тимус реализован влиянием на клеточное звено иммунитета через активацию макрофагов и дендритных клеток. Мы установили, что через 1 мес по-
сле введения ПО в тимусе повышается количество CD68+-макрофагов и $-100+-дендритных клеток по сравнению с таковым у интактных крыс соответствующего возраста. Ранее в наших работах показано, что введение ПО сопровождается дисбалансом содержания биогенных аминов в структурах дольки тимуса и увеличением количества тучных клеток [11]. Все эти признаки в совокупности с повышением клеточной пролиферации и усилением дифференцировки тимоцитов позволяют с уверенностью утверждать, что ПО оказывает достаточно мощное стимулирующее влияние на центральный орган иммуногенеза тимус. Тем не менее, как показали результаты наших исследований, иммуностимулирующий эффект курсового введения ПО имеет достаточно кратковременный характер, который сохраняется в отдельных клеточных структурах железы через 3 мес после воздействия и не оказывает значимого влияния на морфологию и иммунофе-нотип тимуса при дальнейшем наблюдении.
литература
1. Gress R.E., Deeks S.G. Reduced thymus activity and infection prematurely age the immune system. J. Clin. Invest. 2009; 119 (10): 2884-7.
2. Пинегин Б.В., Некрасов А.В., Хаитов Р.М. Иммуномодуля-тор полиоксидоний: механизмы действия и аспекты клинического применения. Цитокины и воспаление. 2004; 3: 41-7.
3. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Некрасов А.В Полиоксидоний -иммуномодулятор последнего поколения: итоги трехлетнего клинического применения. Аллергология и иммунология. 1999; 3: 3-6.
4. Пинегин Б.В. Полиоксидоний - новое поколение иммуномо-дуляторов с известной структурой и механизмом действия. Аллергология, астма и клиническая иммунология. 2000; 1: 27-8.
5. Дьяконова В.А., Дамбаева С.В. Изучение механизма действия иммуномодулятора Полиоксидония на клеточном и молекулярном уровнях на клетках периферической крови человека в условиях in vitro. Физиология и патология иммунной системы. 2004; 8 (2): 32-6.
6. Варфоломеева М.И., Пинегин Б.В. Обоснование назначения и применения Полиоксидония в лечение и профилактике ОРВИ. Трудный пациент. 2011; 6: 26-35.
7. Пинегин Б.В., Некрасов А.В. Полиоксидоний: новые данные о клиническом применении. Аллергология и иммунология. 2006; 3: 434.
8. Стеценко О.Н., Борзова Н.В., Линднер Д.П., Иванова А.С. Влияние иммуномодулятора полиоксидония на восстановление костного мозга, поврежденного действием гидрокортизона и циклофосфана. Иммунология. 2005; 26 (6): 365-7.
9. Стручко Г.Ю. Морфофункциональное исследование тимуса и иммунобиохимических показателей крови после спленэк-томии и иммунокоррекции: Дисс. ... д-ра мед. наук. Саранск; 2003.
10. Стручко Г.Ю., Меркулова Л.М., Москвичев Е.В., Захид Му-
хаммад. Морфологическое и иммуногистохимическое исследование тимуса в норме и после применения полиоксидония (обзор литературы). Вестник Чувашского университета. 2012; 3: 525-31.
11. Стручко Г.Ю., Меркулова Л.М., Москвичев Е.В., Захид Му-хаммад. Морфологические изменения тимуса после применения полиоксидония. Фундаментальные исследования. 2012; 5 (часть 1): 197-202.
Поступила 16.01.14
references
1. Gress R.E., Deeks S.G. Reduced thymus activity and infection prematurely age the immune system. J. Clin. Invest. 2009; 119 (10): 2884-7.
2. Pinegin B.V., Nekrasov A.V., Khaitov R.M. Immunomodulator polyoxidonium: mechanisms of action and aspects of clinical application. Citokiny i vospaleniye. 2004; 3: 41-7. (in Russian)
3. Petrov R.V., Haitov R.M., Nekrasov A.V. Polyoxidonium-immu-nomodulator of the last generation: results of three clinical application. Allergologiya i immunologiya. 1999; 3: 3-6. (in Russian)
4. Pinegin B.V. Polyoxidonium - a new generation of immunomodulators with a known structure and mechanism of action. Allergologiya, astma i klinicheskaya immunologiya. 2000; 1: 27-8. (in Russian)
5. D'yakonova V.A., Dambaeva S.V. Study of the mechanism of action of immunomodulator Polyoxidonium at the cellular and molecular levels in the cells of peripheral blood in vitro. Fiziologiya ipatologiya immunnoy sistemy. 2004; 8 (2): 32-6. (in Russian)
6. Varfolomeeva M.I., Pinegin B.V. Rationale for assignment and use of Polyoxidonium in the treatment and prevention of SARS. Trudnyy patsient. 2011; 6: 26-35. (in Russian)
7. Pinegin B.V., Nekrasov A.V. Polyoxidonium: new data on the clinical use. Allergologiya i immunologiya. 2006; 3: 434. (in Russian)
8. Stetsenko O.N., Borzova N.V., Lindner D.P., Ivanova A.S. Effect of immunomodulator polyoxidonium on the bone marrow recover damaged by the effect of hydrocortisone and platinum. Immunologiya. 2005; 26 (6): 365-7. (in Russian)
9. Struchko G.Yu. Morphofunctional Study of the Thymus and Im-munologicheskikh Blood Counts after Splenectomy and Immune Correction. [Morfofunktsional'noe issledovanie timusa i immu-nobiokhimicheskikh pokazateley krovi posle splenektomii i im-munokorrektsii]: Diss. Saransk; 2003. (in Russian)
10. Struchko G.Yu., Merkulova L.M., Moskvichev E.V., Zahid Muhammad. Morphological and immunohistochemical study of the thymus in the norm and after application of polyoxidonium (literature review). Vestnik Chuvashskogo universiteta. 2012; 3: 525-3. (in Russian)
11. Struchko G.Yu., Merkulova L.M., Moskvichev E.V., Zahid Muhammad. Morphological changes of the thymus after applying polyoxidonium. Fundamental'nye issledovaniya. 2012; 5 (chast' 1): 197-202. (in Russian)
Received 16.01.14
К ст. Стручко
Рис.1. Тимус крысы через 1 мес после введения ПО. 1 - тельце Гассаля (концентрическое скопление эпителиальных клеток) в мозговом веществе дольки. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 1000.
и соавт.
Рис. 2. Тимус интактной крысы. Медуллярные эпителиоциты. 1 - скопления эпителиальных клеток. Иммуногистохимическая реакция к панцитокератину. Ув. 400.
рут:
зга (ж
в» ш'^-.
ЕЪ
Рис. 3. Тимус крысы через 1 мес после введения ПО. а - увеличение количества CD68+-клеток в кортико-медуллярной зоне и среди лимфоцитов коркового вещества; иммуногистохимическая реакция к CD68; Ув. 200; б - увеличение количества Ю-67+-клеток в корковом веществе дольки; иммуногистохимическая реакция к Ю-67; ув. 400; в - увеличение количества Ьс1-2+-клеток в дольке тимуса; иммуногистохимическая реакция к Ьс1-2; ув. 400.
