CC BY
29
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
©Хубутия Б.И., Жеребятьева С.Р., Ухов Ю.И., 2001 УДК 616.833.58-001.5:615.849.19
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТРУКТУРНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КУЛЬТИ СЕДАЛИЩНОГО НЕРВА ПОСЛЕ ЛАЗЕРНОЙ НЕВРОТОМИИ ПРИ АМПУТАЦИИ КОНЕЧНОСТИ
Б.И.Хубутия, С.Р.Жеребятьева, Ю.И. Ухов
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павлова
В работе анализируются результаты экспериментальных исследований по использованию методики обработки культи седалищного нерва высокоинтенсивным лазерным излучением применительно к ампутации конечности.
Проблема профилактики постам-путационных и фантомных болей в последние годы приобрела исключительную актуальность в связи с возрастанием числа больных, перенесших ампутацию конечностей. Эта проблема в настоящее время занимает центральное место среди задач здравоохранения и социального обеспечения [1,5].
Поиск эффективных методов предупреждения постампутационных невром и дальнейшего возникновения фантомных болей остается одной из важных проблем современной хирургии [4].
Целью настоящего исследования явилось изучение процессов регенерации культи седалищного нерва у крыс, которым проводилась ампутация конечности с лазерной невротомией, и выяснение степени повреждения шванновских элементов для уточнения механизма ускорения процессов регенерации.
Материалы и методы
Для разработки оперативной техники и обоснования новой методики невротомии лучом аргонового лазера при-
менительно к ампутации конечности нами были проведены экспериментальные исследования на животных с последующей морфологической характеристикой структурных элементов нервного ствола.
Экспериментальная часть работы проводилась на 72 беспородных белых крысах весом 100-140 граммов.
В качестве лазерного источника использовалась аргоновая установка “Престиж” с длиной волны 440 нм и плотностью потока мощности на выходе световода 1,2 Вт/см. Одноразовая экспозиция не превышала трех секунд.
В данной серии опытов методика операции состояла в проведении ампутации бедра в средней трети по классической методике. Правая задняя конечность крысы отводилась в сторону. Выкраивались два кожно-фасциальных лоскута: передний более длинный и задний более короткий. Ниже основания кожных лоскутов мышцы пересекались круговым разрезом и оттягивались кверху. По краю оттянутых мышц перепиливалась кость. Сосуды перевязывались, а седалищный
нерв обрабатывался (см. ниже). Над костным опилом сшивались края мышц. Шелковыми швами соединялись передний и задний кожные лоскуты. Формировалась культя. Операция проводилась с соблюдением правил асептики и антисептики.
Животных в ходе опыта разделяли на две группы: опытную и контрольную. Опытным животным (36 крыс) пересечение седалищного нерва проводилось лучом аргонового лазера, а животным контрольной группы (36 крыс) - нерв пересекался лезвием безопасной бритвы, т.е. традиционным методом.
По окончании эксперимента животные в разные сроки (5-е, 10-е, 15-е, 30-е, 45-е, 60-е сутки) выводились из опыта путем кровопускания.
Для гистологического исследования иссекался участок нерва с окружающими тканями. Материал фиксировался в 10% нейтральном формалине, замороженные срезы толщиной 20-30 мк имп-регнировали азотнокислым серебром по Билыиовскому в модификации Рассказовой.
С целью изучения скорости пролиферации ядер шванновских клеток у контрольных и опытных животных производился подсчет их количества в поле зрения (ок. 15, об.90). Подсчет производился в 10 полях зрения на тех же препаратах. На один срок взято 6 животных.
Морфометрическая оценка проводилась из расчета не менее 100 измерений на серию эксперимента и пяти гистологических полей зрения у каждого животного. Цифровые данные были обработаны с помощью программы “Статик” с целью выявления достоверности различий между опытной и контрольной группами животных.
Результаты и их обсуждение
При травматических повреждениях нервного ствола нередко отмечается частичный или полный перерыв нервного ствола с некротическими изменениями нервных волокон с их шванновскими ,
клетками и соединительнотканных оболочек с их сосудистой сетью [2].
В области травмы развиваются реактивные воспалительные процессы, и довольно быстро образуется рубец за счет элементов соединительнотканных оболочек нерва.
От состояния и длины центрального отрезка культи после ампутации зависит скорость регенерации. Близкое расположение места перерыва по отношению к центру, грубое повреждение и надрывы центрального отрезка, кровоизлияния и гнойная инфильтрация в последнем, восходящий неврит затрудняют регенерацию и приводят или к полному прекращению ее, или к образованию невромы [3,6]. *
Для изучения процессов регенерации нервных волокон после пересечения седалищного нерва при ампутации ко- 1
нечности нами проведена данная серия экспериментов.
При макроскопическом исследовании у всех 36 контрольных животных наблюдалось формирование постампутаци-онных невром, у пяти - нагноение культи, у семи животных нерв был подпаян к рубцу.
Нами проведена количественная оценка процесса уоллеровской дегенерации с позиций учета степени клеточной пролиферации у опытных и контрольных животных. Сравнительные результаты подсчета плотности ядерной популяции шванновских клеток при ампутации конечности приведены в табл. 1.
На пятые сутки после ампутации ко- *
нечности у контрольных животных в картине уоллеровской дегенерации отмечаются начальные признаки пролиферации.
Таблица 1
Плотность ядер шванновских клеток культи седалищного нерва при ампутации конечности
Сроки Контроль М±м Опыт М±м
5 сутки 15,6±0,5 18,4±0,6
10 сутки 30,1+0,44 42,7±0,4
15 сутки 43,6±0,21 54,4+0,72
30 сутки 58,1±0,35 60,2+0,55
45 сутки 46,7±0,65 38,5±0,21
60 сутки 37,2±0,45 32,1±0,4
Ядра швановских клеток находятся в состоянии митоза, увеличены в объеме. Среднее количество ядер в поле зрения 15,6±0,5. На 10-е сутки наблюдается картина отчетливой пролиферации, хорошо заметны вытянутые ядра шванновских клеток.
Среднее количество ядер увеличилось по сравнению с исходным в два раза. В шванновских клетках многих нервных волокон обнаруживаются явственные реактивно-прогрессивные явления. Можно отметить первое карио-кинетическое деление ядер шванновских клеток, ядра которых нередко занимают весь просвет перерождающегося волокна. К15-м суткам количество ядер увеличилось примерно в три раза.
На 30-е сутки наблюдения регистрируется наибольшее количество ядер -58,1+0,35 в поле зрения, а затем постепенно плавно снижается к 60-м суткам.
Изучение процессов регенерации в седалищном нерве, пересеченном лучом аргонового лазера, дало следующие результаты.
Макроскопически мы не наблюдали элементов невромы ни у одного опытного животного, за исключением четырех
крыс (в 11% случаев), у которых произошло инфицирование раны, и заживление культи проходило вторичным натяжением.
Выраженная пролиферация шванновских клеток наблюдается уже с первого срока наблюдения за животными. Патологические митозы встречаются редко или вообще отсутствуют. Ядра делящихся шванновских клеток несколько увеличены в объеме и округлены. Как видно из табл. 1, среднее количество клеток в поле зрения к пятым суткам у животных опытной группы увеличено в среднем на 4,3%> по сравнению с контрольными животными. К 30-м суткам темпы пролиферации шванновских клеток медленно нарастают, ядра становятся вытянутыми. Среднее количество ядер в поле зрения у опытных животных увеличивается по сравнению с контролем на 3,5%. К концу наблюдения за животными этот показатель уменьшался в среднем на 13,8%о.
Таким образом, морфометрическая оценка плотности шванновских клеток у животных опытной группы показывает, что процесс уоллеровской дегенерации,
сопровождающийся интенсивным размножением шванновских клеток, протекает по тем же закономерностям, что и у контрольных и несколько опережает его во времени.
В условиях сохранения процессов дегенерации отмечено более раннее течение регенеративных процессов в опытной группе животных по сравнению с контрольными, а также наблюдается усиление процессов рассасывания продуктов распада.
Выводы
1. Периферический нерв после пересечения его лучом аргонового лазера сохраняет способность к репаративной регенерации. Общие закономерности компенсаторно-восстановительных процессов остаются такими же, как и у животных, нерв которых пересечен классическим способом.
2. Увеличение плотности ядер шванновских клеток культи нерва, а также ускорение процессов рассасывания продуктов распада у опытных животных свидетельствуют о более благоприятном течении восстановительных процессов, чем у контрольных.
3. Развитие вторичных осложнений -инфицирование раны, ведет к образованию обширных рубцов вокруг и внутри нерва, резко нарушает внут-риствольное строение нерва и приводит к образованию постампутаци-онной невромы независимо от того, пересекался нерв лезвием безопасной бритвы или же лучом аргонового лазера.
ЛИТЕРАТУРА
1. Берглезов М. А., Решетняк В.К., Каменев Ю.Ф. Патогенез, профилактика и лечение фантомно-болевого синдрома // Вестн. травматологии и ортопедии им. Приоро- > ва. - 1995. -№1-2. - С.7-11.
2. Дойников Б.С. Избранныетруды по нейроморфологии и нейропатологии. - М.,
1955. -466 с.
3. Жаботинский Ю.М. Патологическая анатомия нервной системы. - М., 1962. -С.690-699.
4. Оглезнев К.Я., Славин К.В. Использование лазера в хирургии периферических нервов // Вопр. нейрохирургии Им. Бурденко. -1991.-№2.-С.31-32.
5. Пяшкур В.Г., Гайворонский Н.В. О медицинской реабилитации больных с фантомно-болевым синдромом после ампутации конечностей // Воен.-мед. журн. -1991. -№9. - С. 74.
6. Смирнов Л.И., Липчина Л.П. Опыт
Советской медицины в Великой Отечественной войне. - М., 1952. - С. 50-67. *
MORPHOLOGIC CHARACTERISTIC OF STRUCTURAL STUMP ELEMENTS OF *
ISCHIATIC NERVE AFTER LASER NEUROTOMY IN EXTREMITY AMPUTATION
B.I.Khubutiya, S.R.Gerebiatieva, Y.I.Uhov
The results of experimental studies of
highintensive laser radiation of used in stump nerve
treatment in extremity amputation were analysed.
