CC BY
46
©Хубутия Б.И., ЖеребятьеваС.Р.,Ухов Ю.И., 2001 УДК 616.833.58-001.5:615.849.19
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ НОВОЙ МЕТОДИКИ ЛАЗЕРНОЙ ОБРАБОТКИ КУЛЬТИ НЕРВА
«
Б.И.Хубутия, С.Р.Жеребятьева, Ю.И.Ухов
*
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павлова
Экспериметально обоснована новая методика профилактики постампутационных невром с применением лазерного луча.
К настоящему времени предложено множество разнообразных методов обработки нервных стволов [1, 4, 5], но ни один из них не лишен недостатков, и в дальнейшем могут развиваться постам-путационные невромы.
Полученные в настоящей работе факты и изучение относящихся к ним литературных данных позволили нам предложить новую методику пересечения периферического нервного ствола лучом высокоинтенсивного аргонового лазера при ампутации конечности. Данная методика была предложена и научно обоснована профессором Б.И.Хубутия и экспериментально подтверждена в настоящей работе.
Проведенные нами исследования позволили подтвердить ряд существенных достоинств новой методики.
В патогенетическом механизме действия высокоинтенсивного лазерного излучения на биологические ткани ведущим звеном является термический эффект, выражающийся в коагуляции, ожоге, обугливании и испарении ткани [2,6].
Известно, что морфофункциональные изменения кровеносных сосудов нерва являются весьма важным компонентом реакций, осуществляющихся в его тканях при различных повреждениях и оперативных вмешательствах. В ставших
классическими наблюдениях Б.СДойни-кова было показано, что кровеносные капилляры дегенерирующего нерва являются одним из основных путей, участвующих в рассасывании продуктов распада миелина и осевых цилиндров [3].
В результате воздействия лучом аргонового лазера на терминальные сосу- -« ды нерва создается биологическая преграда для роста осевых цилиндров, способствующая образованию нежного фиброзного вала вокруг культи нерва.
Материалы и методы
Для разработки оперативной техники и обоснования новой методики лазерной невротомии применительно к ампутации конечности нами были проведены экспериментальные исследования на животных с последующей морфологической характеристикой структурных элементов нервного ствола. Полученные результаты подвергались статистической обработке.
В эксперименте в качестве лазерно- *
го источника использовалась аргоновая установка “Престиж” с длиной волны 440 нм и плотностью потока мощности на 4
выходе световода 1,2 Вт/см. Одноразовая экспозиция не превышала трех секунд.
Методика операции состояла в проведении ампутации правого бедра в сред-
ней трети по классической методике.
Опытным животным (36 крыс) пересечение седалищного нерва производилось лучом аргонового лазера, а животным контрольной группы (36 крыс) нерв пересекался лезвием безопасной бритвы.
По окончании эксперимента животные в разные сроки (5-е, 10-е, 15-е, 30-е, 45-е, 60-е сутки) выводились из опыта путем кровопускания.
Для гистологического исследования иссекался центральный участок оперированного нерва с окружающими тканями. Материал фиксировался в 10% нейтральном формалине. Кусочки материала замораживались и затем готовились гистологические срезы толщиной 20-30 мк, которые импрегнировали азотнокислым серебром по Бильшовскому в модификации Рассказовой.
С целью количественного изучения восстановительного процесса в нерве определяли ряд параметров, характеризующих состояние нервных волокон.
Плотность расположения осевых цилиндров оценивали по методу Г.С.Стремина, В.И.Евсюкова в модификации Ю.Б.Чайковского.
Определение плотности расположения нервных волокон выполняли на продольных срезах нервного ствола. Подсчитывали количество нервных волокон, пересекающих отрезок известной длины одной из линий стандартной морфометрической сеточки.
Степень упорядоченности регенерации нервных волокон в области места перерезки нервного ствола оценивали путем определения среднего угла отклонения аксонов от продольной оси нерва с помощью стандартной окулярной сеточки. Последняя содержит вертикальные и горизонтальные линии. Первая вертикальная линия, принимаемая за ось ординат, совмещается с участком места перерезки нервного ствола, в котором
производится оценка упорядоченности аксонов.
После получения выборки в баллах цифровые данные можно перевести в градусы, получить среднюю, ошибку средней и другие параметры распределения
[7].
Морфометрическая оценка проводилась из расчета не менее 100 измерений на серию эксперимента и пяти гистологических полей зрения у каждого животного. Цифровые данные были обработаны программой “Статик” с целью выявления достоверности различий между опытной и контрольной группами животных.
Результаты и их обсуждение
У животных контрольной группы плотность расположения нервных волокон к 45-м суткам наблюдения за животными увеличивалась в среднем на 54,9% по сравнению с пятыми сутками после операции (табл. 1). К концу наблюдения за животными мы отметили некоторое уменьшение данного показателя в среднем на 0,2%). Данная динамика объясняется, по-видимому, преобладанием восходящей дегенерации над процессами регенерации нервных волокон к концу наблюдения за животными. При этом средний угол отклонения аксонов от продольной оси нерва постоянно нарастает в среднем на 44,1%о к концу наблюдений. У животных опытной группы мы отметили менее выраженное нарастание плотности нервных волокон к 30-м суткам после операции в среднем на 8,2% по сравнению с начальным сроком наблюдения за животными и плавное снижение этого показателя на 0,6% к 60-м суткам после ампутации. Увеличение угла отклонения аксонов от оси нерва составило в среднем к концу наблюдения 33,9%>.
Таким образом, проследив динамику процессов регенерации нерва, пересе-
17. Зак. 2095
129
Таблица 1
Данные о количественных показателях регенерации седалищного нерва при
ампутации конечности
Сроки/показатели Плотность расположения нервных волокон 1/мм (М±ш) контроль опыт Средний угол (в градусах) отклонения аксонов от продольной оси нерва (М±т) контроль опыт
5 сутки 5231±295 4748±187х 25,3+1,7 13,9±1,2х
10 сутки 9112±135 5095±210х 31,7±1,3 14,3±1,8х
15 сутки 10582±441 5123±197х 35,1±3,1 15,6±2,7х
30 сутки 11242±213 5171+203 х 39,9+2,1 17,6±3,0х
45 сутки 11596±249 5145±177х 43,0±3,1 19,3±1,9х
60 сутки 11584±355 5138±111х 45,1±3,2 21,0+3,1х
х - достоверность (р<0,05) по отношению к контролю значения изученных параметров
ченного лучом аргонового лазера, мы отметили некоторое ускорение процессов восстановления, при этом плотность расположения нервных волокон на миллиметр площади меньше на 9,3% к пятым суткам после ампутации по сравнению с контролем. Средний угол отклонения аксонов от продольной оси нерва уменьшался соответственно на 45,1%. К 30-м суткам наблюдения за опытными и контрольными животными эти показатели изменялись на 54,1% и 55,9% соответственно. К 60-м суткам после ампутации плотность расположения нервных волокон в опытной группе животных была меньше в среднем на 55,7%, а средний угол отклонения аксонов от продольной оси нерва уменьшался на 53,5%.
У животных с ампутированной конечностью отмечается неравномерность созревания соединительной ткани невромы. Наряду с участками, включающими в свой состав многочисленные клетки и сосуды, определяются участки, бедные клеточными элементами и капиллярами,
но содержащие толстые пучки коллагеновых волокон. Как правило, именно в этих местах обнаруживаются регенерирующие аксоны, снабженные на концах колбами роста либо формирующимися спиралями Перрончито.
Это свидетельствует о том, что развивающаяся соединительная ткань, являясь проводником регенерирующих нервных волокон, оказывает задерживающее влияние на рост новообразованных аксонов.
Анализ результатов проведенных наблюдений позволяет придти к заключению, что применение предложенной нами новой методики обработки нервного ствола лучом высокоинтенсивного аргонового лазера при ампутации конечности способствует более полной регенерации нервных волокон за счет снижения степени рубцовых превращений соединительной ткани нейрального рубца.
Таким образом, в экспериментах на животных удалось подтвердить эффективность новой методики лазерной обра-
ботки нервного ствола в профилактике
постампутационной невромы.
Выводы
1. Разработана и экспериментально обоснована новая методика обработки нервного ствола лучом высокоинтенсивного аргонового лазера при ампутации конечности.
2. Лазерная невротомия, вызывая коагуляцию сосудов культи седалищного нерва, создает биологическую преграду для роста осевых цилиндров и способствует формированию нежного фиброзного рубца вокруг культи нерва, тем самым предотвращая условия для формирования постампутационной невромы.
3. Уменьшение плотности расположения нервных волокон и снижение среднего угла отклонения аксонов от продольной оси нерва у опытных животных свидетельствует о более благоприятном течении восстановительных процессов, чем у контрольных.
4. Пересечение нервного ствола лучом аргонового лазера является достаточно эффективным средством хирургического вмешательства на периферической нервной системе. Отсутствие элементов невромы в культе нерва дает основание рекомендовать его к применению в клинической практике.
ЛИТЕРАТУРА
1. Волобуев Н.Н, Волобуев А.Н. Способ профилактики фантомного синдрома при ампутации конечности // Вестн. хирургии им. Грекова. -1991. - Т. 146, №3. - С. 127.
2. Гамалея Н.Ф. Лазеры в эксперименте и клинике. - М.: Медицина, 1972. - 232 с.
3. Дойников Б.С. Опыт Советской медицины в Великой Отечественной войне 1941-1945 гг. - М., 1952. - Т.20, ra.IV. - С.68-83.
4. Ермолова З.С. Перевязка нерва в борьбе с ампутационной невромой: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Рязань,1959. -18 с.
5. Морозов Ю.И., Кривцов В.В., Пляшке-вич A.B. Наш опыт применения плазменного скальпеля при ампутации конечности // Медико-биологические аспекты действия на организм высокой температуры. - Смоленск, 1989. - С.88-89.
6. Пальцев Е.К., Желтов Г.И., Комарова
A. А. Биологические эффекты и критерии оценки опасности лазерного излучения // Вестн. АМН. - 1992. - №1. - С.32-37.
7. Чайковский Ю.Б. Регенерация периферического нерва в условиях его ауто- и аллопластики: Автореф. дис.... д-ра мед. наук. - Киев, 1988. - 20 с.
EXPERIMENTAL OF THE NEW METHODS OF NERVE STAMP LASER TREATMENT
B.I.Khubutiya, S.R.Gerebiatieva, Yu.I.Uhov
A new prophylactic method of postamputated neuroma with the use of laser is experimentaly
graunded.
17*
131
