CC BY
35
УДК: 615.451.3.262.015.44:616.348-002-092.9
© Я.Г. Разуваева, Н.В. Попова, Г.Ф. Жигаев, А.А. Маркарян, К.Ц. Цыбанов, 2008
Я.Г. Разуваева, Н.В. Попова, Г.Ф. Жигаев, А.А. Маркарян, К.Ц. Цыбанов МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ТИЗОЛЯ НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЭНТЕРОКОЛИТА
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН,
Бурятский государственный университет, г. Улан - Удэ Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, г. Москва
Установлено, что курсовое введение тизоля способствует нормализации структурно-функциональной целостности слизистой оболочки кишечника, ингибирует перекисное окисление липидов и активирует эндогенную антиоксидантную систему организма при экспериментальном энтероколите.
Ключевые слова: экспериментальный колит, гель тизоль.
Ya.G. Razuvaeva, N.V. Popova, G.F. Dgigaev, A.A. Markaryan, K.Ts. Tsybanov MORPHOFUNTIONAL ESTIMATION OF TIZOL® INFLUENCE ON COURSE OF EXPERIMENTAL ENTEROCOLITIS
It is established, that course introduction of tizol® promotes normalization of structurally-functional integrity of a mucous membrane of intestines, inhibits peroxidative oxidation of lipids and activates endogenic antioxidant system of an organism on a background of experimental enterocolitis.
Key words: experimental enterocolitis, tizol®.
Тизоль - аквакомплекс титана гли-церосольвата - является органическим титансодержащим соединением. Наличие связанных молекул глицерина и атома титана в молекуле тизоля обеспечивает дегидратирующее, противоотечное, местное анальгезирующее действие, способствует проницаемости через кожу и слизистые. Тизоль на сегодняшний день широко применяют в клинике для лечения дерматитов, ожогов, гнойных ран и язв кожи, используют при аллергических реакциях на лекарственные препараты и других заболеваниях [4, 7].
Установлено, что при парентеральном введении тизоль депонируется в клетках паренхиматозных органов, а также в клетках быстро обновляющихся тканей, в частности в эпителии кишечника [4]. При этом в клинической практике указанный препарат не используют вследствие недостаточных экспериментальных данных о его влиянии на органы и системы при патологических процессах.
В связи с этим целью исследования явилась морфофункциональная оценка влияния тизоля на течение экспериментального энтероколита.
Материал и методы Исследования проведены на 20 белых крысах линии '^Біаг обоего пола с исходной массой 160-180 г. Энтероколит
вызывали внутрижелудочным введением лабораторным животным касторового масла в объеме 1 мл/100г в течение 7 дней [6]. Животным опытной группы за 6 часов до введения касторового масла в течение 7 дней, а затем в течение 15 дней 1 раз в сутки вводили внутрижелудочно 5 % водный раствор геля тизоля в объеме 1 мл/100 г. Животные контрольной группы получали воду очищенную в эквивалентном объеме по аналогичной схеме.
На 21-е сутки наблюдения животных декапитировали под легким эфирным наркозом. Для проведения патоморфологических исследований материал фиксировали в 10 % нейтральном формалине, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в целлоидин-парафин. Срезы, приготовленные с помощью санного микротома МС-2, окрашивали гематоксилин-эозином, азур-эозином [8]. Морфометрические исследования проводили с помощью компьютерной программы «Motic Images 2000». В тонкой кишке определяли высоту и ширину ворсинок, высоту крипт; в толстой кишке -высоту складок и слизистой оболочки, объемную долю желез.
Состояние перекисного окисления липидов при экспериментальном энтероколите определяли по содержанию в крови животных малонового диальдегида
(МДА) [1] и диеновых конъюгатов (ДК) [3]. Состояние эндогенной антиоксидант-ной системы организма оценивали по активности каталазы в сыворотке крови [5] и содержанию восстановленного глута-тиона в крови [11].
Значимость различий между указанными параметрами среди опытной и контрольной групп оценивали с помощью непараметрического критерия Манна - Уитни. Различия считались существенными при Р < 0,05 [9].
Результаты и обсуждение
Результаты патоморфологических исследований показали, что при внутри-желудочном введении касторового масла в слизистой оболочке тонкой кишки наблюдаются выраженные структурные изменения, характеризующиеся отеком,
обильной клеточной инфильтрацией, истончением слизистой оболочки за счет укорочения ворсинок и криптального слоя. У большей части ворсинок апикальная поверхность была некротизирована и слущена в просвет кишки. Морфометрические исследования свидетельствовали (табл.1), что высота и ширина ворсинок у животных контрольной группы в 3,0 и 1,6 раза меньше таковых у животных интак-ной группы. Сохранившаяся базальная часть ворсинок при этом была значительно деформирована и инфильтрирована плазмоцитами, лимфоцитами и полиморфно-ядерными лейкоцитами. Были характерны глубокие изменения крипт: просвет их расширен, они содержат слизь и клетки отторгшегося эпителия. Глубина крипт и соотношение ее к высоте ворсинок в 1,8 раза ниже показателей у животных интактной группы.
В толстой кишке у животных контрольной группы наблюдали отек и умеренную воспалительную инфильтрацию слизистой оболочки, дистрофические и некротические изменения поверхностного эпителия и апикальных слоев крипт, деск-вамацию клеток в просвет кишечника с образованием эрозий. Отмечалось уменьшение объемной доли желез на 28 % по сравнению с данными у животных ин-тактной группы (табл.1).
У животных, получавших тизоль, изменения в слизистой оболочке тонкой кишки характеризовались отеком собственной пластинки, ее обильной клеточной инфильтрацией, кровенаполнением капилляров и некрозом апикальной части ворсинок. Наблюдали дистрофические изменения клеток каемчатого эпителия, расположенного в нижних отделах ворсинок: вакуолизацию цитоплазмы, пикноз и лизис ядер, отсутствие щеточной каймы. Обнаруживали отек, воспалительную инфильтрацию лейкоцитами и кровенаполнение капилляров стромы сохранившейся базальной части ворсинок.
Таблица 1
Влияние тизоля на морфометрические показатели тонкой и толстой кишки у белых крыс при энтероколите, вызванном внутрижелудочным введением касторового масла
Показатели Группы животных
Интактная Контроль- ная Опытная
Тонкая кишка
Высота ворсинки, мм 1,56±0,11 0,52±0,04 0,92±0,03*
Толщина ворсинки, мм 0,16±0,02 0,10±0,01 0,12±0,06
Глубина крипт, мм 0,45±0,02 0,25±0,003 0,30±0,009*
Соотношение высоты ворсинок к высоте крипт 3,5: 1 2: 1 3: 1
Толстая кишка
Высота складки, мм 3,20±0,12 3,03±0,24 3,20±0,31
Высота слизистой оболочки, мм 0,90±0,04 0,61 ±0,03 0,82±0,05*
Объем желез, % 79,1±2,34 57,3±3,26 68,4±2,71*
Примечание: здесь и далее. * Значение значимо по сравнению с данными у животных контрольной группы при Р<0,05.
Слой крипт был затронут в меньшей степени, в его строме наблюдали усиление клеточной инфильтрации и дистрофические изменения эпителиоцитов. На фоне введения животным тизоля высота ворсинок увеличивалась в 1,8 раза, глубина крипт - в 1,2 раза по сравнению с данными у животных контрольной группы (р<0,05). Соотношение высоты ворсинок и глубины крипт было выше у животных контрольной группы в 1,5 раза.
При патоморфологическом исследовании в толстой кишке животных, получавших гель тизоль, наблюдали менее выраженный отек слизистой оболочки, умеренную клеточную инфильтрацию, полнокровие капилляров. Обнаруживали некроз и десквамацию поверхностного эпителия. На поверхности слизистой оболочки находили экссудат, содержащий полиморфно-ядерные лейкоциты и клетки де-сквамированного эпителия. Морфометри-
ческие исследования показали, что на фоне введения животным геля наблюдается увеличение высоты слизистой оболочки и объемной доли желез на 34 и 19 % соответственно по сравнению с таковыми показателями у животных контрольной группы. Высота ворсинок толстой кишки животных опытной группы не имела значимых отличий от таковой в контроле.
Таблица 2
Влияние тизоля на показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы организма при экспериментальном энтероколите у белых крыс
Показатели Группы животных
Интактная Контрольная Опытная
МДА, нмоль/г 0,9±0,01 2,72±0,15 2,24±0,18
ДК, ед. оп. 1,5±0,03 4,6±0,39 3,5±0,24*
Каталаза, мкат/л 12,5±0,38 7,2±0,43 11,0±0,29*
Восстановленный глутатион, мкмоль/мл 627,3±19,8 393,2±18,02 448,6±21,02
Учитывая, что одним из механизмов повреждения клеточных мембран при патологических состояниях является инициация процессов перекисного окисления липидов [2], а также наличие у тизоля антиоксидантной активности [4], представляет интерес исследование его влияния на
процессы перекисного окисления липидов при экспериментальном энтероколите.
Результаты исследований показали, что курсовое введение животным тизоля при экспериментальном энтероколите сопровождается снижением в сыворотке крови содержания МДА и концентрации ДК в 1,2 и 1,6 раза соответственно с повышением активности каталазы на 28 %, содержания восстановленного глутатиона - на 14 % по сравнению с таковыми показателями у животных контрольной группы.
Таким образом, курсовое перораль-ное введение тизоля способствует нормализации структурно-функциональной целостности слизистой оболочки кишечника, благодаря, очевидно, способности ингибировать перекисное окисление липидов и активации эндогенной антиокси-дантной системы организма на фоне экспериментального энтероколита. Полу-
ченные данные аргументируют возможность и целесообразность применения ти-золя в клинической практике с лечебной и профилактической целью при заболеваниях кишечника.
ЛИТЕРАТУРА
1. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. - М., 1972 . - 115 с.
2. Воробьев Г.И., Ачкасов С.И., Благодарный Л.А. Основы колопроктологии. - М., 2006. - 432с.
3. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лаб.дело. - 1983. - № 3. - С. 33-35.
4. Гребнев Д.Ю. Влияние цитопротективной терапии тизолем на процессы регенерации миелоидной ткани и эпителия тощей кишки при воздействии ионизирующего излучения: Автореф. дисс....канд.мед.наук. - Екатеринбург, 2006. -22 с.
5. Королюк М. А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Методы определения активности каталазы // Лаб. дело. - 1998. - № 6. - С. 16-19.
6. Лоншакова К.С., Матафонов О.И. Морфологическая характеристика фармакотера-певтического влияния средств природного происхождения при энтероколите // Тибетская медицина. Состояние и перспективы исследований. - Улан-Удэ, 1994. - С. 139 -142.
7. Ларионов Л.П., Бенциан Д.Л., Ивашкевич Г.А. и др. Фармакодинамические и фармакокинетические свойства тизоля // Сборник научных статей Уральской государственной академии. - Екатеринбург, 2003. - С. 19 - 27.
8. Микроскопическая техника: руководство /Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова. -М., 1996. - 544 с.
9. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. - М., 2001. - 256 с.
10. Anderson T. Omeprazole drug interaction studies // Clin. Pharmacokinet. - 1991. -Vol.21. - № 38. - Р. 1603.
