CC BY
17
Аюшиева С.Ц., Ковалева Л.П., Балданов Б.В., Лоншакова К.С., Струбинова В.Н.
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ МИНЕРАЛЬНОЙ ВОДЫ «АРШАН» И ФИТОСБОРА
«БАЙКАЛЬСКИЙ-7» НА ТЕЧЕНИЕ ХРОНИЧЕСКОГО CCI4. ГЕПАТИТА У БЕЛЫХ КРЫС Бурятский научный центр СО РАН, г. Улан-Удэ
Цель исследования. Изучить влияние природных средств - нарзанового типа минеральной воды (МВ) «Аршан» курорта «Аршан» Бурятской республики и фитосбора (ФС) «Байкальский-7» (рег. удост. № 005462. Р.643. 07. 2003) следующего состава: цветки ноготков и бессмертника, плоды шиповника и боярышника, корневища девясила, корни солодки, листья мяты, приготовленного по Государственной Фармакопее XI издания, на течение хронического CCI4 гепатита у белых крыс линии Wistar с массой 180-200г. подкожным введением 50% масляного раствора в объеме 0,2 мл/100т массы животного 2 раза в неделю в течение 3 месяцев.
Испытуемые средства вводили ежедневно 1 раз в сутки в течение 2 месяцев: МВ «Аршан» в дозе 1,68 мл на 100 гр. массы, ФС в дозе 0,3 г/кг массы животного (в пересчете на воздушно-сухое сырье). Животные контрольной группы получали питьевую воду.
Печень лабораторных животных фиксировали в 10 % растворе нейтрального форма-лина. Кусочки органов заливали в парафин. Гистологические срезы окрашивали гематокси-линэозином и по Ван Гизону. Репаративную регенерацию оценивали по морфологическим показателям: митотическая активность, ми-
тотический индекс (%о0/00). Подсчет митозов в печеночных клетках осуществляли под иммерсионным увеличением, на микроскопе марки «Motic» (Германия). Использован ряд гистохимических методов: содержание гликогена ШИК-реакцией, нейтральный жир окраской суданом черным «Б» по Беренбауму, активность сукцинат дегидрогенацы (СДГ-аза) и лактат-дегидрогеназы (ЛДГ-азы) по Нахласу. Однов-ремен-но проводили измерения содержания гликогена в печени животных по Соколовскому.
Полученные данные подверглись статистической обработке при помощи пакетов программ Microsoft Excel 97, «Биостатистика для «Windows». Для оценки достоверности различий использовался ранговый непараметрический критерий Мана-Уитни.
В печени крыс, получавших раствор CCl4 в течение 2-х месяцев, портальные тракты увеличены в размерах, отмечалась интенсивная инфильтрация портальных полей и идущих от них довольно широкой лентой клеточных инфильтратов, смыкающихся между собой и тем самым ограничивающих печеночные доли друг от друга. Непосредственно в триадах и вокруг них просматривается значительные повреждения паренхимы печени с фокальными некрозами. Явления клеточной инфильтрации сочетались с выраженными и умеренно выраженными дистрофическими изменениями гепатоцитов.
В первые сроки исследования в контроле определялись гемодинамические нарушения в виде мелких кровоизлияний и полнокровия перипортальных вен и внутридольковых капилляров, инфильтрации портальных трактов. Печеночная ткань вокруг триады инфильтрирована макрофагами и фибробластами. Эндотелиальные клетки, выстилающие сосуды не просматриваются. Гепатоциты подвержены некротическим изменениям, разной степени баллонной дистрофии. В контроле наблюдали появление тяжиков соединительной ткани между дольками и внутри долек на месте очагов некрозов.
Развитие соединительной ткани по ходу портальных трактов и на месте очагов некроза приводило к метаболическим расстройствам, в частности дис-протеинемии, гипер-ферментемии, гипербилирубине-мии.
При гистохимическом исследовании гликоген выявлялся в клетках печени частично в виде зерен продолговатой или округлой формы или конгломератов из слипшихся зерен. В крнтроле большая часть печеночной дольки вокруг центральной вены не содержала гликоген. Жировая инфильтрация представлялась мелкокапельной, а в ряде случаев - пылевидной. Редко у отдельных крыс в клетках печени выявлялись желто-коричневые гранулы липофусцина, а также в просветах желчных протоков некоторых из них обнаруживались клетки слущенного эпителия.
Активность окислительно-восстановительных ферментов в печени была значительно сниженной по сравнению с таковой у животных, получавших другие средства терапии.
При получении животными МВ «Аршан» выявлялись очаговые расширения синусоидов и умеренная дискомплексация печеночных балок. В центре долек вокруг центральных вен гепатоциты выглядели несколько увеличенными в размерах в результате умеренно выраженной зернистой дистрофии. В одиноч-
2 1
ных гепатоцитах выявлялся кариолизис. По ходу синусоидных капилляров расположены набухшие клетки Купфера, вдающиеся в просвет капилляров. В области триад и междольковых сосудов можно проследить начало образования гистиоцитарной и фиброб-ластической инфильтрации. Структурно-метаболические нарушения в печени животных, получавших «Аршан», незначительны по сравнению с контролем, где просматривались в этот срок очаги некрозов, выраженные обширные инфильтраты, фиброз тканей.
Через 3 месяца с начала эксперимента появляются небольшие очаги некротического гепатита, при котором наблюдалось круглоклеточная инфильтрация с расширением и полнокровием капилляров с разрыхлением и деструкцией стенок сосудов, повреждение паренхимы в виде белковой мелко - и среднекапельной жировой дистрофии. В этой группе животных в печени площади инфильтрированных участков с измененными гепатоцитами представлялись значительно меньше по сравнению с контролем.
МВ «Аршан» улучшала обмен окислительновосстановительных процессов, повышая уровень активности специфического маркерного фермента митохондрий СДГ-азы и органоспецифического фермента ЛДГ-азы, участвующих в начальном цикле Кребса, выявляемых в свежезамороженных средах печени крыс с CCI 4- гепатитом.
На фоне введения испытуемого средства повышалась содержание гликогена по сравнению с контролем. Исследование митотической активности ге-патоцитов выявило, что МВ «Аршан» способствовала нарастанию митотического индекса, который равнялся 3,7 ± 0,07%. Подсчет числа гипертрофированных ге-патоцитов, являющихся наиболее характер-ными признаками внутриклеточной регенерации в печени подтверждал достоверно по сравнению с контролем повышение регенераторных процессов. Также отмечено достоверно со всеми группами крыс повышение числа двуядерных печеночных клеток.
Морфологические исследования печени позволили выявить при введении ФС незначительную клеточную инфильтрацию в печеночных дольках и портальных трактах. Через 2 месяца с начала введения ФС клеточная инфильтрация носила мелкоочаговый характер, очажки только начинали формироваться. Наблюдалось полнокровие центральных вен, немногочисленные диапедезные кровоизлияния. Через 3 месяца очаги инфильтрации клеток увеличивались, начинали соединяться между собой. В очажках появились дистрофически измененные клетки, клетки в состоянии баллонной дистрофии и некроза.
На 3-м месяце исследования при патологии печени нарушается липидный обмен, представленный глицеридами, фофатидами. Введение ФС обуславливало снижение мелкокапельной жировой инфильтрации, она встречалась преимущественно в очажках дистрофически измененных гепатоцитов. В то время как в контроле жировая инфильтрация обнаруживалась по всей паренхиме печени. ФС оказывал нормализующее влияние на содержание гликогена в печени. Оценка содержания гликогена позволила выявить достоверное повышение его по сравнению с контролем во все сроки исследования.
С первых сроков наблюдения, т.е. 2-х месяцев эксперимента наблюдали при введении ФС фигуры
2 2
митозов, гипертрофированные гепатоциты с увеличенными гиперхромными ядрами, которые рассматривались как признаки регенерации.
Таким образом, МВ «Аршан» и ФС способствовали нормализации белкового и липидного обменов, корригировали активность цитоплазматических ферментов, ускоряли восстановление гистохимических показателей и в целом структуры печени после хронического повреждения. Обнаруженный фармакоте-рапевтический эффект изучаемых средств обусловлен противовоспалительной и стимулирующей регенерацию печени активностью.
