CC BY
39
М.Д. Канаева, С.А. Смирнова, Е.А. Котелевская, А.Б. Смолянинов
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ тА-ТИПИРОВАНИЕ ОБРАЗЦОВ
ПУПОВИННОЙ КРОВИ ОБЩЕСТВЕННОГО РЕГИСТРА ПУПОВИННОЙ
КРОВИ В САНКТ-ПЕТЕРБУРГЕ
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; ООО «Покровский банк стволовых клеток» Санкт-Петербург, kanaeva.masha@yandex.ru
При ряде злокачественных гематологических заболеваний, таких как лейкемия, лимфома, множественная миелома, а также при лечении некоторых доброкачественных заболеваний - аплазии костного мозга, врожденных дефектов кроветворения и иммунитета, эффективным методом лечения является трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ГСК). Источниками ГСК считаются костный мозг, мобилизованная периферическая кровь и пуповинная кровь (ПК). Пуповинная кровь, как источник ГСК, обладает рядом преимуществ: повышенный потенциал роста и пролиферации клеток, неограниченные ресурсы по заготовке образцов, возможность подбора редких ИЬЛ-гаплотипов, обязательный контроль инфекционной безопасности перед заготовкой, а также меньшая частота реакции «трансплантат против хозяина» и выраженный эффект «трансплантат против лейкоза» при сниженном риске рецидива онкологического заболевания. Поэтому создание общественных банков ПК и объединение баз данных образцов ПК значительно ускоряет процесс поиска донорского образца ГСК для трансплантации.
Определение ИЬЛ-специфичности образцов пуповинной крови - одно из основных направлений при создании общественного банка ПК, так как гистосовместимость между донором и реципиентом является главным критерием при трансплантации ГСК. Благодаря иммунологическим особенностям стволовых клеток ПК, для их трансплантации достаточно совпадения как минимум 4 из 6 аллелей локусов ИЬЛ-Л, -В, -ОЯВ1, в отличие от клеток костного мозга, пересадка которых требует совпадения 8 из 10 аллелей локусов ИЬЛ-Л, -В, -С, -БЯВ1, -Б0В1.
Целью работы является определение антигенов главного комплекса гистосовместимости образцов ПК общественного хранения, созданного на базе ООО «Покровский банк стволовых клеток», молекулярно-генетическим методом для создания регистра образцов ПК и анализ полиморфности локусов ИЬЛ-Л, -В, -БЯВ1 и частоты гаплотипов у жителей Северо-Западного региона РФ.
В процессе работы было проведено HLA-типирование 580 образцов пуповинной крови методом SSP (sequence-specific priming). ДНК выделяли из 0,20,7 мл цельной крови, применяя наборы для выделения Protrans DNA Box 500 (Protrans, Германия) и AxyPrep Blood Genomic DNA Miniprep Kit (Axygen, США). Анализировали локусы HLA-A, HLA-B и HLA-DRB1, используя циклерплатную систему Protrans HLA-A*,-B*,-DRB1* (Protrans, Германия) и BAG Healthcare HISTO TYPE ABDR (BAG Health care, Германия).
В процессе исследования были выявлены следующие наиболее часто встречающиеся аллели: HLA-A*02 - 29,2%, *03 - 16,1%, *01 - 13,1%; HLA-B*07 -13,0%, *35 - 11,8%, *44 - 8,8%, HLA-DRB1*07 - 15,0%, *15 - 14,0%, *01 - 13,9%. Частота часто встречающихся гаплотипов составляет: HLA-A*01-B*08-DRB1*03 -1,0%, HLA-A*03-B*07-DRB1*15- 1,0%, HLA-A*02-B*07-DRB1*15- 0,84%.
Полученные результаты распределения генетического полиморфизма HLA-A, -В, -DRB1 локусов у жителей Северо-Западного региона Российской Федерации могут дополнить имеющиеся информационные базы данных по популяционной генетике и по ассоциированным заболеваниям. В связи с этническим разнообразием на территории Российской Федерации необходимо создавать общественные банки ПК в каждом крупном региональном центре. Главным преимуществом наличия собственного регистра доноров ПК в регионе помимо доступности и уменьшения стоимости материала для трансплантации является то, что вероятность совпадения HLA-генотипа среди одной популяции гораздо выше, чем при поиске в мировом регистре.
М.В. Новицкий, А.Б. Смолянинов
РЕГЕНЕРАТИВНАЯ ТЕРАПИЯ АУТОЛОГИЧНЫМИ СТВОЛОВЫМИ КЛЕТКАМИ ПРИ РАССЕЯННОМ СКЛЕРОЗЕ
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; ООО «Покровский банк стволовых клеток»
Санкт-Петербург, maxim.novitskiy@yandex.ru
Рассеянный склероз (РС) - хроническое прогрессирующее заболевание центральной нервной системы (ЦНС), проявляющееся мультисистемной неврологической симптоматикой и образованием множества очагов демиелинизации в белом веществе головного и спинного мозга. Основным механизмом, приводящим к повреждению миелина, является опосредованная Т-лимфоцитами реакция гиперчувствительности замедленного типа, а непосредственными клетками-эффекторами иммунопатологического процесса -
