CC BY
53
торскую оздоровительную методику. На третьем этапе мы проводили контрольный срез: использовались аналогичные первому этапу опросники. Сравнительные результаты исследования образа жизни студентов на первом и третьем этапе исследования представлены в рис. 2.
140
120
100
80
60
40
□ очень здоровый образ жизни
□ очень плохой образ жизни
□ терпимый образ жизни
до проведения после
методики проведения
методики
Рис. 2. Количество подростков, ведущих определенных образ жизни, на различных этапах исследования
Следовательно, реализация оздоровительной методики, позволили улучшить образ жизни (рис. 2), появилось сознательное отношение к своему здоровью у большинства подростков. Так, если на первом этапе очень здорового образа жизни придерживались 6 (4,5%) студентов, то на третьем этапе данный показатель увеличился до 13 (9,7%) студентов. В то же время увеличилось общее количество студентов, ведущих очень плохой образ жизни с 6 (4,5%) до 9 (6,7%) подростков. Соответственно, уменьшилось общее количество студентов из имеющих резерв для улучшения образа жизни с 122 до 114 человек. Однако уменьшение произошло не только за счет того, что часть студентов ухудшила свой образ жизни, но и за счет того, что многие студенты улучшили свой образ жизни, причем по второму критерию показатель 9,7% несколько больше, чем по первому. Это свидетельствует о положительных результатах реализации авторской оздоровительной методики. В то же время, пополнение ряда студентов, ухудшивших образ жизни можно объяснить и тем фактом, что часть подростков живут в общежитии, самостоятельно, без присмотра родителей, а значит без особого контроля со стороны взрослых.
Качественные изменения в образе жизни отразились непосредственным образом на психоэмоциональном состоянии студентов. Данные изменения представлены на рис 3.
100
90
80
70
60
50
40
30
20
I—I 60
52 48 48 I
— \--32 -32 \-
:ІЕШІЕ
40
□ средний
□ высокий
□ очень высокий
уровень сф-ти ОУ и Спец, умений
способности к саморазвитию
Рис. 3. Результаты психологического исследования подростков после проведения оздоровительной методики
Сравнительный анализ показателей, представленных на рис. 2 и 3 показал, что после проведения оздоровительных мероприятий, психоэмоциональное состояние студентов улучшилось. Уменьшилось общее количество студентов с высоким уровнем тревожности с 76 до 48%, при этом вырос показатель уровня способности к саморазвитию с 72 до 92%, и уровень силы воли с 24 до 40%. Данный результаты свидетельствуют о то, что проведенный комплекс оздоровительных мероприятий позволил не только улучшить образ жизни, но и повысить такие психические свойства личности как целеустремленность, уверенность в себе.
Выводы: реализация авторской оздоровительной методики способствовала психоэмоциональной адаптации подростков к новым условиям жизнедеятельности, создавшихся в результате поступления в учебное заведение средней профессиональной школы.
Уменьшилось общее количество студентов с высоким
уровнем тревожности, при этом вырос показатель уровня способности к саморазвитию. Все это позволило повысить такие психические свойства личности как целеустремленность, уверенность в себе, что в подростковом возрасте это значимо.
Литература
1. Аршавский, И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития / И.А. Аршавский.- М.: Наука, 1992.- 269 с.
2. Барбараш, НА. Индивидуально-годичные изменения психофизиологических параметров лиц юношеского возраста / Н.А. Барбараш, В.И. Шапошникова, М.В. Чичиленко.- Спорт и здоровье: Мат. I межд. конгр. 9-11 сентября 2003.- СПб., 2003.-T.II.- С. 89-91.
3. Дубров, А.П. Лунные ритмы у человека.- М.: Медицина, 1990.- 159 с.
4. Жирмунский, А.В. Критические уровни в развитии природных систем / А.В. Жирмунский, В.И. Кузьмин.- Л.: Наука, 1990.- 222 с.
5. Попов, С.Н. Физическая реабилитация / Учебник для студентов высших учебных заведений /С.Н. Попов.- Ростов н/Д: Феникс, 2006.- 608 с.
6. Пустозеров, А.И. Методы доврачебного контроля состояния здоровья физкультурников и спортсменов: Учебно-методическое пособие / А.И. Пустозеров, В.К. Миловидов, Ю.И. Сазонов.- Челябинск: УралГАФК, 2004.- 92 с.
7. Степанова, С.И. Биоритмологические аспекты проблемы адаптации / С.И. Степанова.- М.: Наука, 1996.- 239 с.
8. Шапошникова, В.И. Хронобиология и спорт: монография / В.И. Шапошникова, В.А. Таймазов.- М.: Советский спорт, 2005.- 180 с.
THE AUTHORIAL HEALTH-IMPROVING METHODS THE WAY OF LIFE AND PSYCHOEMOTIONAL CONDITION IN TEENAGERS, DOING MASS SPORTS
A.V.CHECHETKINA Samara State Medical University, info@samsmu. ru
In the article physiological substantiation of the authorial health-improving methods in restoration in the teenagers doing mass sports, living in the mining area are represented.
Key words: teenagers, psychoemotional condition, mining area, health-improving methods, mass sports, adaptation.
УДК616.24-002
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ОСНОВНЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ВНЕБОЛЬНИЧНЫХ ПНЕВМОНИЙ
Несмотря на достигнутые успехи в диагностике и лечении, проблема внебольничных пневмоний, вызванных сложнокультивируемыми бактериальными возбудителями, такими как микоплазмы и хламидии, в последнее время приобрела все большую актуальность. В нашем исследовании мы изучили распространенность основных генетических детерминант в штаммах M.pneumoniae, C.pneumoniae, выделенных у пациентов с внебольничными пневмониями и у носителей, что позволило нам сделать прогноз относительно мониторирования антибиоти-коустойчивости у сложнокультивируемых микроорганизмов. Ключевые слова: атипичные пневмонии, М.рпеишошае,
С.рпеишотае, устойчивость к антибиотикам
Несмотря на достигнутые успехи в изучении микробиологии и молекулярной биологии микроорганизмов, такие возбудители как S.peumoniae, M.pneumoniae, C.pneumoniae, L.pneumophila являются актуальными возбудителями внебольничных пневмоний. При этом, три последних вообще относят к группе так называемых «атипичных» пневмоний [1-4]. До настоящего времени изучение микробиологических свойств данных патогенов представляется достаточно проблематичным прежде всего потому, что культивирование этих микроорганизмов на искусственных средах является достаточно сложным в практическом плане [5].
Главный Госпиталь ТОФ, ул. Ивановская, д. 4, Владивосток Владивостокский государственный медицинский университет, пр-т Острякова, д. 2, Владивосток, 690990
Дальневосточный Федеральный Университет, ул. Суханова, д. 8, Владивосток, 690950
20
0
ч* н* и* __ ** * * *
Е.С. НОСАЧ , С.В. СКРЫЛЬ , А.А. ШЕПАРЕВ , А.В. МАРТЫНОВА
68
уровень
Во многом это связано именно с молекулярно-биологическими, а точнее, с молекулярно-микробиологическими свойствами данных микроорганизмов. Действительно, практически невозможно в условиях практической микробиологической лаборатории исследовать устойчивость микоплазм, хламидий и легионелл к антибактериальным химиопрепаратам, а также вести молекулярнобиологический мониторинг по основным генетическим детерминантам факторов вирулентности [6,8]. Наличие определенного сходства в экологических условиях существования всех вышеперечисленных возбудителей предполагает определенное сходство и в приспособительных реакциях, что выражается в активации схожих биохимических путей, а следовательно, и индукции гомологичных генов [7,9,10].
Проведение молекулярно-генетического мониторинга в отношении антибиотикорезистентности и генетических детерминант, кодирующих выработку факторов вирулентности, позволяет охарактеризовать популяцию таких сложнокультивируемых возбудителей как M.pneumoniae, C.pneumoniae, L.pneumophila.
Цель исследования — провести мониторинг распространенности детерминант устойчивости к фторхинолонам и макролидам в ДНК штаммов M.pneumoniae, C.pneumoniae, L.pneumophila, выделенных у пациентов с внебольничной пневмонией.
Материалы и методы исследования. Нами было обследовано 200 пациентов с клинико-рентгенологическим и лабораторным подтверждением внебольничной пневмонии, поступивших в госпиталь в период с 2008 по 2010 гг из закрытых коллективов. Все больные мужского пола, средний возраст составил 19+1,9 лет. В качестве материала для обнаружения данных микроорганизмов методом ПЦР использовалась мокрота больных, полученная из нижних дыхательных путей после глубокого откашливания. В дальнейшее исследование нами было взято ДНК от 25 штаммов M.pneumoniae и C.pneumoniae, выделенных от пациентов с вне-больничной пневмонией, а также 15 образцов ДНК M.pneumoniae и C.pneumoniae, полученных от носителей. Праймеры, с которыми проводилось исследование были синтезированы в компании «Ли-Тех» (Россия), и могут быть представлены следующим образом. Для идентификации применялись праймеры M. pneumoniae (F-5'TGCCATCAACCCGCGCTTAAC-3',R-5'- CCTTTGCAACTGCTA TAGTA -3’-), C. pneumoniae(F-5-TGA CAA CTG TAG AAA TAC AGC-3’, R-5’-CGC CTC TCT CCT ATA AAT-3’), L.pneumophila (F-5'-ACCGAACAGCAAATGAAAGA-3', R-5’-AACGCCTGGCTTG TTTTTGT-3’-). Для исследования генетических детерминант анти-биотикорезистентности использовались праймеры к 23S РНК (M.pneumoniae F 5"-CGTGCGTTTTGAAGTATGAG-3, R-5’-TGGCGCCATCATACATTCAG-3’, C.pneumoniae F 5’-TCATAGTCT CCTGGCTATCC-3’, R-5'-GACCTGCACGAATGGTGTAA-3'), L4 (M.pneumoniae F 5"-5'-GAACCAGTGAAACTAAGCCC-3', R-5’-TTTGTCCAAGAGCTTGGCAC-3’ ), C.pneumoniae ( F-5’-CGCTCAA CAAGTTCCTGCAAAG-3’, R-5’-AATGCCCGTCAGGGATGTTTAG -3’), L22 (M.pneumoniae F 5'-CCGTGTGAGAATCTCACCCC-3',R-5'-CTGCTTTTTGACGTGCCATC-3’, C.pneumoniae (F-5’-CTTTCTGA CCCATGATCC-3’, R- 5'-GCCATCCTGTGAAGAAAG-3'). Другие параметры полимерзаной цепной реакции были стандартными [11,12].
Результаты и их обсуждение. Основной проблемой при изучении устойчивости к антимикробным химиопрепаратам возбудителей, вызывающих так называемые атипичные пневмонии, является рациональная антибиотикотерапия, или, в ее современном понимании, эмпирическая рациональная антимикробная химиотерапии. Микоплазмы устойчивы ко всем препаратам, действие которых связано с биосинтезом белков клеточной стенки. К этой группе в первую очередь относятся пенициллины. Чувствительны же микоплазмы к ингибиторам синтеза мембранных и внутрицитоплазматических белков. Устойчи-
вость хламидий и микоплазм к макролидам определяется генами, детерминирующими синтез метилтрансфераз, которые способны изменять сайты распознавания антибиотиков - 23S рибосомаль-ную РНК. Перенос генов резистентности возбудителям также осуществляют мобильные генетические элементы - транспозоны.
Применение фторхинолонов также приводит к образованию устойчивых штаммов, но эти препараты пока высокоэффективны у большой категории больных [2]. Большинство из микоплазм чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда, многим макролидам, линкозамидам, противогрибковым и противопрото-зойным препаратам. Также они проявляют чувствительность к группе фторхинолонов (синтетических препаратов, действие
которых направлено на подавление активности топоизомераз микроорганизмов).
Однако некоторые препараты обладают различной активностью по отношению к разным видам микоплазм, поэтому требуется информация об антибиотикоустойчивости штаммов.
Особенностями таких возбудителей как M.pneumoniae является то, что антимикробная резистентность у этих микроорганизмов обусловлена мутацией или переносом генов через транспозо-ны. Молекулярная диагностика антимикробной устойчивости в данном случае может быть связана с выявлением мутаций в генах, кодирующих синтез рибосом, а также в генах, кодирующих топоизомеразу 2 типа (в отношении фторхинолонов). Так как все вышесказанное справедливо и для C.pneumoniae , мы исследовали распространенность тех или иных генетических детерминант в ДНК идентифицированных нами штаммов. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Распространенность детерминант устойчивости к антибактериальным химиопрепаратам в штаммах, выделенных у пациентов с атипичными ВП и у носителей
23S rRNA\ L4 | L22 | gyrA | gyrB | parC | parE
Пациенты с ВП (всего 25 )
M.pneumoniae (15) 6 (40%) 2 (13,3%) 1(6,6%) 100% 100% 100% 100%
C.pneumoniae, (10) 5(50%) 2(20%) 1(10%) 0 100% 100% 100%
T=4,4; 7,04, p=0,04, 0,018 p>0,05
Носители (всего 15)
M.pneumoniae (10) 5(50%) 0(0%) 0 100% 100% 100% 100%
C.pneumoniae (5) 2(20%) 1(10%) 1(10%) 0 100% 100% 100%
F=0,4, p=0,02 p>0,05
Таким образом, нами выявлено, что ген, кодирующий синтез метилтрансфераз, которые способны изменять сайты распознавания антибиотиков - 23S рибосомальную РНК, является определяющим в развитии устойчивости к макролидам, что снижает, в свою очередь аффинность к макролидам,и ухудшает, соответственно, терапевтическую эффективность схем лечения микоплазмен-ных и хламидийных пневмоний. У исследованных 25 образцов ДНК штаммов бактерий, вызвавших атипичные пневмонии у пациентов с внебольничными пневмониями данный ген был выделен в 40% ДНК микоплазм и 50% хламидий. Это же нашло и подтверждение и в ДНК штаммов, идентфиицированных у носителей - у
микоплазм он был выделен у 50%, у C.pneumoniae - в 20%. В целом, можно ожидать распространенность данной генетической детерминанты антибиотикорезистентности в 61,7±13,1%.
Выводы. Таким образом, проведенный скрининг генетических детерминант устойчивости к антимикробным химиопрепаратам и факторов патогенности показал, что наиболее приемлемым маркером устойчивости к макролидам для штаммов микоплазм будет являться ген 23SРНК. При этом, написание дегенеративного праймера к последовательности данного гена является перспективным и в плане мониторинга устойчивости к макроли-дам и штаммов C.pneumoniae, что значительно оптимизирует процесс молекулярно-эпидемиологического мониторинга в плане атипичных пневмоний без выделения чистой культуры. В отношении мониторинга патогенности штаммов микоплазм и хлами-дий, данный подход так же нашел применение в отношении анализа распространенности генов, кодирующих факторы адгезии: в данном случае оптимальным маркером адгезивности штаммов M.pneumoniae и С. pneumoniae может служить последовательность, кодирующая белок адгезии P1.
Литература
1. Авдеев, С.Н. Тяжелая внебольничная пневмония / С.Н. Авдеев // РМЖ.- 2001.- Т. 9.- №5.- С.177-182
2. Атипичная пневмония - эпидемия 21 века // Поликлиника: профессиональный журнал для руководителей и врачей всех специальностей ЛПУ России.- М.: Медицинская пресса, 2003.-№2.-. С 16-18
3. Бачинская, Е.Н. Возбудители внебольничных пневмоний на пороге нового тысячелетия / Е.Н. Бачинская // Антибиотики и химиотерапия.- 2000.- Т.45- №11.- С.21-28.
4. Белоусов, Ю.Б. Применение фторхинолонов в лечении внебольничных и внутрибольничных пневмоний / Ю.Б. Белоусов, Ж.А. Танеева, О.В. Ефременкова // Пульмонология.- 1999.-№1.-
С.13-17
5. Бородин, А.М. Роль атипичных возбудителей в этиологии внебольничной пневмонии у лиц молодого возраста / А.М. Бородин // Казанский медицинский журнал.- 2004.-Том 85.- № 3.-С. 175-176.
6. Бородин, А.М. ПЦР диагностика внебольничной пневмонии микоплазменной и хламидийной этиологии / А.М. Бородин, Е.В. Королева, С. В. Хватова // Клиническая лабораторная диагностика.- 2005.- №2.- С. 51-52.
7. Бородин, А.М. Диагностика M.pneumoniae и
C.pneumophilla у пациентов с внебольничной пневмонией / А.М. Бородин, Е.В. Королева, С.В. Хватова // ЖМЭИ.- 2005.-№1.- С.65-67.
8. Новиков, В.Е. Легочный хламидиоз: диагностика и лечение / В.Е. Новиков // Consilium medicum: журнал доказательной медицины для практикующих врачей.- М.: Медиа Медика, 2007.-Т.9.- №10.- С. 46-48
9. Новиков, Ю.К. Диагностика и лечение внебольничных пневмоний / Ю.К. Новиков // РМЖ.- 2001.- Т.3.- №1.- С.11-16
10. Новиков Ю.К. Атипичные пневмонии / Ю.К. Новиков // Русский медицинский журнал: независимое издание для практикующих врачей.- 2002.- Т.10.- №20.- С. 915-918.
11. Gaydos, C.A. T C Quinn, and J J Eiden Identification of Chlamydia pneumoniae by DNA amplification of the 16S rRNA gene. / C. A. Gaydos //J. Clin. Microbiol. 1992 30: 796-800.
12. Brenner Legionella anisa: a new species of Legionella isolated from potable waters and a cooling tower / G.W. Gorman [et al]//Appl. Envir. Microbiol. 1985 49: 305-309.
MOLECULAR GENETIC MONITORING OF THE MAIN CAUSATIVE AGENTS OF COMMUNITY-ACQUIRED PNEUMONIAS
E.S. NOSUCH, S.V. SKRYL, A.A. SHEPARYOV, A.V.MARTYNOVA
Principal Hospital TOF Vladivostok State Medical University Far Eastern Federal University, Chair of Biochemistry, Micribiology and Biotechnology
Despite of the gained results in diagnosis and treatment, the study of community-acquired pneumonias, caused by fastidious microorganisms, is still the problem of the modern medicine. In this research the authors have studied the spread of the main genetic determinants in strains of M.pneumoniae, C.pneumoniae isolated in patients with community-acquired pneumonias and in carriers what allows him to plan monitoring of antimicrobial agents reistance in fastidious microorgansisms.
Key words: atypical pneumonia, M.pneumoniae,
C.pneumoniae, resistance to antibiotics.
УДК 616.717.4:611-018.4:612.014.5-055.1
УРОВЕНЬ МИНЕРАЛИЗАЦИИ ОСТЕОННЫХ СТРУКТУР КОСТНОЙ ТКАНИ ДЛИННЫХ ТРУБЧАТЫХ КОСТЕЙ МУЖЧИН РАЗНЫХ СОМАТОТИПОВ
П.А. ЛЕМКЕ, Н. Н. МЕДВЕДЕВА*
Проведено изучение уровня минерализации костной ткани плечевых костей мужчин разных соматотипов. В ходе исследования установлено, что по классификации В.В. Бунака-В.В. Чтецова (1979) самый высокий уровень минерализации костей у лиц грудного соматотипа, самый низкий - у представителей мускульного типа телосложения. По схеме L. Rees-H.J. Eisenk (1945) самая высокоминерализованная костная ткань плечевых костей у мужчин нормостенического сома-тотипа, самая низкая - у лиц пикнического типа телосложения. Ключевые слова: соматотип, пластинчатая костная ткань, плечевые кости, остеонные структуры, уровень минерализации.
Костная ткань - это особый вид соединительной ткани, имеющая особенности строения, которые не встречаются в других видах соединительной ткани. В ней преобладает межклеточное вещество, содержащее большое количество минеральных компонентов, главным образом - солей кальция, которые обеспечивают такие свойства кости как твердость, упругость, механическую прочность.
Прочность кости обеспечивается физико-химическим единством неорганических, органических веществ и особенностями ее
* ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, ул. Партизана Железняка,1, г. Красноярск, е-таП:1еткеро1та@таП.ги
конструкции. Преобладание органических веществ обеспечивает значительную упругость, эластичность кости. При увеличении доли неорганических соединений (в старческом возрасте, при некоторых заболеваниях) кость становится ломкой, хрупкой. Соотношение неорганических веществ в составе кости у разных людей неодинаково. Даже у одного и того же человека оно изменяется на протяжении жизни, зависит от особенностей питания, профессиональной деятельности, наследственности, экологических условий и др.
В 2004 году на основе биохимических показателей были охарактеризованы возрастные изменения и половые отличия химического состава межклеточного вещества компактной и губчатой костной ткани человека [5]. Кроме того, изучена взаимосвязь между типом телосложения и минеральным составом костной ткани с учетом вектора времени [4]. Также был исследован уровень минерализации костной ткани методом клин-эталонной рентгенденситометрии в зависимости от типа телосложения мужчин первого периода зрелого возраста [1].
Кроме того, минерализация костной ткани является также и расовым признаком, жестко генетически детерминированным. М.В. Козловская подтверждает: «Высокий уровень минерализации не необходим функционально, но воспроизводится генетически определенными механизмами. Концентрации микроэлементов в костной ткани - комплекс различных индикативных признаков» [3].
Цель исследования — изучить уровень минерализации ос-теонных структур пластинчатой компактной костной ткани плечевых костей мужчин первого периода зрелого возраста в зависимости от соматотипа.
Материалы и методы исследования. Плечевые кости от 100 трупов мужчин первого периода зрелого возраста. Тип телосложения определялся по антропометрической методике [2,7]. Из диафизов плечевых костей электрофрезой выпиливался образец, который зашлифовывался на сепарационном диске до толщины 500 мкм. После этого костный препарат укладывался на металлическую пластину, которая устанавливалась на разогретую поверхность электроплитки. Образец прокаливался до коричневого или красного цвета. Доведя цвет изучаемой поверхности до желаемого при постоянном визуальном контроле, препарат оставлялся до полного его остывания [6].
Исследование микроскопической структуры шлифов костей проводилось с использованием микроскопа «OLYMPUS ВХ 45». При изучении прокаленных шлифов изучались следующие параметры: общее количество остеонов в поле зрения, количество молодых, промежуточных и старых остеонов в поле зрения. Оценка количественных параметров проводилась при использовании сетки-планшета с ценой деления 1 мм.
Механизм «проявления» контуров микроскопических структур костной ткани связан с тем, что при прокаливании органический компонент кости, сгорая и уплотняясь под действием концентрических сил сжатия, изменяет свой цвет и оптические свойства (прозрачность). В стадии коричневого каления создаются условия для определения степени минерального насыщения остеонных структур. Молодые, маломинерализованные формы остеонов выглядят на общем фоне более темными, остеоны большей степени плотности - старые - имеют одинаковый с фоном цвет, а остеоны средней плотности занимают промежуточное положение (рис.1).
Рис. 1. Микрофотография прокаленного шлифа диафиза плечевой кости. Увеличение х10. 1 - молодой остеон, 2 - промежуточный, 3 - старый
Статистическая обработка результатов проводилась с по-
