CC BY
13
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XII, № 2, 2016
лейкин-4 (IL-4), напротив, блокирует рост и развитие опухолевого клона за счет ингибирования активности IL-6.
Целью данной работы явилось определение одиночных нуклеотидных вариантов (SNP) в ре-гуляторных областях генов цитокинов TNF-a -238 G/A, IL-6 nt565 G/A и IL-4-590 T/C, которые могут в значительной мере определять продукцию цитокинов, что в свою очередь может повлиять на развитие заболевания.
Материалы и методы. Обследовано 50 пациентов с множественной миеломой; средний возраст 69,6 ± 8,6 лет. Диагноз симптоматической ММ был верифицирован на основании критериев Международной рабочей группы по изучению миеломы. У подавляющего большинства больных (75 %) наблюдалась миелома G. Пациенты были разделены на две группы: 1-я группа — 26 больных с III стадией по классификации Durie-Salmon; 2-я группа — 24 пациента со II стадией по классификации Durie-Salmon. Контрольную группу составили 50 здоровых волонтеров, средний возраст 51,2 ± 6,9 лет. Все обследованные лица являлись жителями Санкт-Петербурга. Геномную ДНК выделяли из периферической крови. Определение SNP генов TNF-a, IL-6, IL-4 проводили с помощью PCR-SSP. Сравнение частот генотипов оценивали методом %2, при p<0,05 различия считали достоверными.
Результаты. На основании результатов анализа SNP генов цитокинов, генотип TNF-a -238 AA был обнаружен только в группе больных (0,02), но не был обнаружен в контрольной группе. Частота генотипа IL-4-590 TC у пациентов была ниже, чем в группе здоровых лиц (0,37 против 0,53; р>0,05). Частота встречаемости гомо- и ге-
терозигот гена IL-6 nt565 G/A отличалась у пациентов и здоровых лиц: гомозиготы достоверно чаще выявлялись у пациентов (0,13 к 0,49 для GG и 0,08 к 0,14 для AA; p<0,05), а гетерозиго-та GA была более распространена у здоровых людей в сравнении с пациентами (0,80 к 0,37 соответственно; p<0,05). Частота TNF-a -238 GA была несколько выше у пациентов с III стадией болезни (1-я группа), чем у больных со II стадией заболевания (2-я группа): 0,11 против 0,04 соответственно, р>0,05. Генотип TNF-a -238 АА был обнаружен только в 1-й группе пациентов. В группе здоровых жителей Санкт-Петербурга генотип IL-6 nt565 G A встречался чаще (0,80), чем в двух группах пациентов: 0,26 для больных с III стадией ММ и 0,42 — для пациентов с II стадией ММ (p<0,05). Частота встречаемости генотипа IL-6 nt565 GG была достоверно выше в 1-й группе пациентов по сравнению со 2-й и контрольной группами (0,53 против 0,46 и 0,13 соответственно, p<0,05). В 1-й группе пациентов частота встречаемости IL-4-590 TC была сходной со здоровыми лицами (0,53) и отличалась от 2-й группы больных (0,25; p<0,05). Тогда как генотип IL-4-590 TT вообще не был обнаружен у пациентов с III стадией болезни по классификации Durie-Salmon, но был представлен во 2-й группе больных со II стадией заболевания (0,17; p<0,05).
Выводы. Полученные результаты позволяют расценивать генотипы IL-6 nt565 GG и IL-6 nt565 AA как маркеры, предрасполагающие к развитию ММ, тогда как генотипы IL-6 nt565 GA, IL-4-590TC, вероятно, можно рассматривать как протектор развития заболевания, кроме того, генотип IL-6 nt565 GG ассоциирован с более тяжелым течением ММ.
Петрова Е. В., Мартынкевич И. С., Полушкина Л. Б., Мартыненко Л. С., Иванова М. П., Цыбакова Н. Ю., Клеина Е. В., Шабанова Е. С., Чечеткин А. В., Абдулкадыров К. М.
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ОСТРЫХ МИЕЛОИДНЫХ ЛЕЙКОЗОВ С ПОЛИМОРФИЗМОМ RS11554137 В ГЕНЕ ГОШ
Однонуклеотидный полиморфизм представляет собой наиболее распространенную форму генетического разнообразия видов. При синонимичной замене нуклеотида не происходит изменение кодируемой аминокислоты. Однако исследования показали, что однонуклеотидные замены в смысловых участках гена в большинстве
случаев влияют на экспрессию, изменяют такие характеристики белка, как третичную структуру, стабильность связывания с субстратом и промежуточными метаболитами, посттрансляционную модификацию. Мутации в 132 кодоне гена IDH1 являются достаточно частым событием при острых миелоидны лейкозах (ОМЛ). Также
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»
Санкт-Петербург 23-24 июня 2016 г.
примерно у 10 % больных ОМЛ детектируют полиморфизм rsl 1554137 в 4-м экзоне гена IDH1, при котором происходит замена GGC на GGT в 105 кодоне. Данные о влиянии полиморфизма на прогноз течения заболевания у пациентов с ОМЛ противоречивы.
Цель. Исследовать частоту встречаемости и прогностический потенциал полиморфизма rs11554137 в гене IDH1, а также его сочетание с клинико-гематологическими особенностями и вариантом кариотипа у больных ОМЛ.
Материалы и методы. В исследование включено 112 пациентов с ОМЛ. Возраст больных составил от 18 до 86 лет (медиана 55 лет). Среди них — 51 (45,5 %) мужчина и 61 (54,5 %) женщина. У 103 больных (92,0 %) верифицирован de novo ОМЛ и у 9 (8,0 %) — вторичный ОМЛ из предшествующих миелодиспластического синдрома (МДС) или лимфомы. Цитогенетиче-ский анализ выполняли на G-дифференциально окрашенных хромосомах. В каждом исследовании было проанализировано не менее 20 ме-тафазных пластин. По результатам цитогенети-ческого исследования больные были разделены на 4 группы: с нормальным кариотипом — 52 (46,4 %) пациента, с благоприятным кариоти-пом — 9 (8,0 %) больных, с неблагоприятным кариотипом — 16 (14,3 %) пациентов, с прочими хромосомными аномалиями — 35 (31,3 %) больных. Скрининг аберраций в гене IDH1 проводили методом ПЦР в реальном времени с дальнейшим анализом кривых плавления.
Результаты. Полиморфизм в гене IDH1 (rs 11554137) был обнаружен у 7,1 % (8 из 112) пациентов с ОМЛ. Распределение больных ОМЛ в зависимости от морфологического варианта показало, что полиморфизм rs 11554137 в гене IDH1 чаще встречался у больных с М4 вариантом ОМЛ (у 5 из 20, p = 0,005). Все пациенты с полиморфизмом rs 11554137 были с de novo ОМЛ. Медиана возраста больных с полиморфизмом rs11554137 составила 58 лет и была статистически значимо выше в сравнении с медианой возраста пациентов без полиморфизма в гене
ЮИ1 (55 лет) (р = 0,005). При сравнении таких показателей, как количество лейкоцитов и тромбоцитов в ПК, бластов в КМ в дебюте заболевания у больных с полиморфизмом в гене ЮИ1 и без, значимых отличий не выявили. Чаще полиморфизм ге 11554137 в гене ЮИ1 встречался у пациентов с нормальным кариотипом — у 5 из 8 больных (р = 0,334), у 3-х пациентов с полиморфизмом найден неблагоприятный кариотип (р = 0,052). Ни у одного больного с благоприятным кариотипом не был обнаружен полиморфизм ге11554137. Все пациенты с полиморфизмом ге 11554137 в гене ЮИ1 также обследованы на наличие мутаций в генах FLT3, ЫРМ1, ЫКЛБ, СК1Т и БЫМТЗЛ. Только у 2-х больных полиморфизм в гене ЮИ1 встречался одиночно. У остальных пациентов (у 6 из 8) полиморфизм ге11554137 сочетался с мутациями в генах: ВЫМТ3Л+, FLT3-TKD+, ЫРМ1+, FLT3-ITD+/ ВЫМТ3Л+, FLT3-ITD +/FLT3-TKD +ЮЫМТ3Л + и у 2-х больных полиморфизм ге11554137 детектирован сочетанно с FLT3-ITD. Вместе с этим исследована прогностическая значимость полиморфизма 1554137 в гене ЮИ1. Сравнительный анализ медианы общей и безрецидивной выживаемости пациентов с полиморфизмом и без него показал значимые отличия: 5,8 месяцев и 12,8 месяцев (р = 0,046) и 4,2 месяца и 9,5 месяцев (р = 0,004).
Выводы. Полиморфизм ге 11554137 в гене ЮИ1 является достаточно частым событием у больных ОМЛ. Ассоциируется как правило с М4 вариантом заболевания и более высокой медианой возраста пациентов в сравнении с больными без полиморфизма. Значительный прогностический потенциал полиморфизма ге11554137 в гене ЮИ1 позволяет рассматривать его как неблагоприятный маркер, коррелирующий с высоким риском рецидива заболевания и низкой выживаемостью. Синонимичные полиморфизмы представляют собой отдельную категорию молекулярных аберраций, которые следует учитывать при диагностике и прогнозировании течения ОМЛ.
