CC BY
12
II научно-практическая конференция молодых ученых «Актуальные проблемы гематологии и трансфузиологии»
Санкт-Петербург 18-19 ноября 2021 г.
II НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ «АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ» Санкт-Петербург, 18-19 ноября 2021 г.
И.А. Булдаков1, С.В.Волошин1, В.А. Шуваев1,2, С.В.Петров1, О.Д. Муштакова1, Л.С. Мартыненко1, М.П. Бакай1, Ю.С. Руженкова1, Е.В. Клеина1, Ю.С. Вокуева1, С.С. Бессмельцев1, С.В. Сидоркевич1, И.С. Мартынкевич1
1Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург 2Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница имени В.В. Вересаева» Департамента здравоохранения г. Москвы, г. Москва
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ТЕРАПИИ ИНГИБИТОРАМИ ТИРОЗИНКИНАЗ У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКОЙ
ФАЗОЙ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА
Введение. С каждым годом накапливается все больше данных о механизмах развития первичной и вторичной резистентности к терапии ингибиторами тирозинкиназ (ИТК) у пациентов с ХМЛ. Технология секвенирования следующего поколения (NGS) позволяет обнаруживать мутации в киназном домене BCR-ABL химерного гена у значительной части пациентов с резистентностью к терапии ИТК. Но по-прежнему остаются неясными причины резистентности у пациентов без мутаций в киназном домене BCR-ABL.
Цель. Определить BCR-ABL-независимые молеку-лярно-генетические маркеры резистентности к терапии ИТК у пациентов с ХМЛ с применением NGS.
Материалы и методы. Мы исследовали образцы крови 15 пациентов с резистентным течением ХФ ХМЛ (8 мужчин и 7 женщин) в возрасте от 32 до 59 лет (Me=44 года). Резистентность к терапии ИТК определяли по критериям ELN 2013. 2 пациента получали терапию двумя ИТК, 8 пациентов - тремя ИТК, 3 пациента - 4 ИТК и 2 пациента получали - 5 ИТК (Me=3 ИТК). У 3 пациентов при цитогенетическом исследовании выявлялась дополнительная 8 хромосома. У 1 пациента однократно обнаружена мутация T315I. Пациентам было выполнено NGS исследование миелоидной панели, включающей 55 генов, со средней глубиной прочтения 1000х на приборе MiSeq (Illumina). При анализе полученных данных применялся 2% порог частоты встречаемости аллеля (VAF). Клиническая значимость мутаций устанавливалась по базам данных COSMIC, ClinVar и OMIM.
Результаты. Использование NGS позволило выявить генетические аберрации у всех исследуемых пациентов: в среднем по 5 мутаций (от 1 до 10 у одного больного). Всего было выявлено 77 мутаций с неясной клинической значимостью: из них 54 миссенс-мутации, 22 - синонимичных мутации и 1 вариант со сдвигом рамки считывания. Наиболее часто аномалии обнаруживались в генах NF1 (10), TET2 (8), ATRX (7) и STAG2 (6). У 2 пациентов обнаружено сочетание мутаций в генах ATRX и NF1, у них наблюдалось первично-резистентное течение заболевания, БМО не был достигнут даже на 3 и 4-й линиях таргетной терапии. У 3 пациентов выявлено одновременное наличие мутаций в генах NF1 и STAG2, у двух из них также отме-
чалось первично-резистентное течение заболевания и у одного из них зарегистрирована резистентность ко всем 5 ИТК. У 2 пациентов с одновременным наличием мутаций в генах ATRX и TET2 зарегистрирована резистентность к 2 ИТК, ПЦО без БМО достигнут только при применении Понатиниба. У 3 пациентов с одиночными мутациями в STAG2 БМО достигнут на третьей линии ИТК. У 1 пациента с 3 мутациями в TET2 БМО также достигнут только на третьей линии ИТК.
Мутации в TET2 довольно часто встречаются при Ph-негативных МПН. В нашем исследовании чаще других мутации выявлялись в генах NF1, ATRX и STAG2. Хотя мутации в генах NF1 и ATRX были описаны ранее у ответивших на лечение пациентов с ХФ ХМЛ. В нашем исследовании мутации в этих генах были обнаружены у резистентных к терапии пациентов с неблагоприятным течением заболевания. Ген NF1 кодирует активирующий ГТФазу белок (GAP, GTPase activating protein), который участвует в ингибировании RAS/MAPK пути передачи сигнала в клетку, и является супрессором опухолей. Мутации в данном гене часто ассоциированы с развитием ХММЛ и ЮММЛ, резистентностью к терапии и ухудшением общей выживаемости. Ген ATRX кодирует белок, участвующий в ремоделировании хроматина, регуляции транскрипции, репликации и поддержании структуры теломер. Ген STAG2 кодирует белок, входящий в состав когезинового комплекса.
Возможно, аномалии в данных генах могут принадлежать клону лейкемических стволовых клеток, обуславливать их резистентность к ИТК, BCR-ABL-независимый пролиферативный потенциал и их генетическую нестабильность. Это позволило нам предположить прогностическую и терапевтическую ценность мутаций в гене NF1, ATRX и STAG2 у пациентов с ХФ ХМЛ с резистентностью к терапии ИТК.
Выводы. Полученные результаты пилотного исследования применения NGS для прогнозирования BCR-ABL-независимой резистентности к терапии ИТК у пациентов с ХМЛ могут служить основой для дальнейших исследований с целью разработки прогностических моделей и выбора метода лечения при резистентности к таргетной терапии.
