CC BY
33
УДК 636.7:619:616(470.24)
МИКРОФЛОРА, ВЫДЕЛЕННАЯ ИЗ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА, ОТ СОБАК, БОЛЬНЫХ ДЕРМАТИТАМИ И ОТИТАМИ, В УСЛОВИЯХ ГОРОДА ВЕЛИКИЙ НОВГОРОД
Анна Юрьевна Козловская, к. биол. н., доцент Оксана Сергеевна Дмитриева, к. вет. н., ст. преподаватель Татьяна Михайловна Половинцева, к. биол. н., ст. преподаватель Софья Юрьевна Николаева, преподаватель
ФГБОУ ВО «Великолукская государственная сельскохозяйственная академия», Россия, г. Великие Луки
Сегодня дерматиты и отиты широко распространены и занимают одно из ведущих мест среди болезней собак. Болезни наносят значительный ущерб служебному, охотничьему, декоративному собаководству, владельцам животных, включая временные и экономические затраты на диагностику и лечение этих заболеваний. Также опасны для человека заболевания бактериальной этиологии.
Установлена зависимость частоты поступления патологического материала для исследования от сезона года. Так, поступление материала от собак, больных дерматитами, чаще наблюдалось осенью (39%) и весной (32%), реже - летом (17%) и зимой (12%).
Выявлено, что наиболее часто материал для исследования поступал от собак служебных пород - 39,5% (восточно-европейская овчарка, немецкая овчарка, среднеазиатская овчарка, кавказская овчарка, ротвейлер, ризеншнауцер, хаски, сенбернар), реже от собак декоративных пород - 25,8% (английский бульдог, той-терьер, мопс, стаффордширский терьер, бассет-хаунд, пекинес, шарпей, маламут, чихуахуа, чау-чау, бигль, американский бульдог, американский питбультерьер, шпиц, далматин, болонка, колли, китайская хохлатая), охотничьих пород - 22,5% (лайка, лабрадор, такса, гончая, русский спаниель, джек-рассел-терьер) и от беспородных собак - 12,2%.
Микробиоценозы кожи собак, больных дерматитами, представлены в основном микроорганизмами рода стафилококки. Наиболее часто выделяемым микроорганизмом является Staphylococcus aureus (58%), реже выделяется Staphylococcus intermedius, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus xylosus. В меньшей степени выделяли бактерии рода стрептококки, протей, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и ассоциации микроорганизмов.
Для выбора средств эффективной антимикробной терапии и профилактики важно определить чувствительность выделенных культур возбудителей к антимикробным препаратам. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам необходимо определять в каждом случае заболевания животных.
Ключевые слова: микрофлора, собаки, отиты, дерматиты.
Введение
Кожа - важнейший защитный барьер, без которого жизнь была бы невозможна. Этот барьер состоит из
трех компонентов: физического, химического и микробиологического. Резидентная микрофлора на коже способствует функционированию
эпидермального барьера. Бактерии, а иногда и дрожжевые и даже грибковые нити могут присутствовать не только на поверхности кожи, но и в поверхностных слоях эпидермиса (в частности, в межклеточных пространствах рогового слоя), и в воронке волосяного фолликула. «Нормальная» микрофлора, постоянно находящаяся на поверхности кожи, занимает экологическую нишу, препятствуя колонизации патогенных микроорганизмов, продуцируя антибиотики, ферменты и токсины, потребляя питательные вещества [5, 6].
Исследования также показывают, что на разных участках кожи одной собаки находится разная флора. На поверхности кожи здоровой собаки преобладают представители Proteobacteria, также присутствуют Firmicutes, Actinobacteria, Actinobacteria и Cyanobacteria. При этом у собак с аллергией представлено значительно более низкое видовое разнообразие по сравнению со здоровыми собаками. В период обострения аллергии и при хроническом воспалении кожи количество видов микроорганизмов на коже собаки значительно снижается, но при этом могут преобладать патогенные бактерии [2, 4].
Коагулазонегативные стафилококки, являющиеся частью резидентной флоры, при определенных условиях могут становиться патогенными. Дрожжи рода Malassezia также являются синантропными микроорганизмами, обнаруживаемыми на здоровой коже, особенно в местах с повышенной влажностью, таких как ушная раковина, морда,
перианальная и паховая области. Под воздействием ряда предрасполагающих факторов (обострение аллергии, повышенная секреция желез и др.) количество этих синантроп-ных бактерий и дрожжеподобных грибов может значительно возрастать, клинически имитируя воспалительную реакцию. Это явление называется «перерост» микрофлоры [1, 3].
Болезни кожи, обусловленные бактериями, принято называть пи-одермиями. Пиодермии занимают ведущее место в структуре патологии кожи у животных.
Материал и методы
Работа проводилась в период с 2016 по 2020 годы.
За этот период в лабораторию поступило 182 образца патологического материала от собак с дерматитом и средним отитом. Образцы брали ветеринары в ветеринарных клиниках г. Боровичи. Промывки осуществляли стерильными ватными тампонами, погруженными в стерильный физиологический раствор.
Исследования по выделению микрофлоры и определению чувствительности к антибактериальным препаратам у собак с дерматитами и средним отитом проводились в лаборатории ветеринарной клиники «Зоо-ветсервис» (г. Великий Новгород).
Первичные посевы патологического материала, доставленного в лабораторию, производили на твердые питательные среды: мясопеп-тонный агар, кровяной агар, энтерококк, агар Байрда-Паркера или мо-лочно-солевой агар, агар Эндо. Па-
раллельно проводили посевы на жидкие питательные среды: мясо-пептонный бульон, солевой бульон, мясопептонный бульон с 1% глюкозы и 10% инактивированной нормальной лошадиной сыворотки, бульон стрептококков [7].
Посевы инкубировались при температуре 37 0С в течение 18-24 часов. По истечении времени инкубации определялась интенсивность и характер роста микроорганизмов на плотных питательных средах. Интенсивность роста выражалась в крестах и соответствовала содержанию определенного количества микробных клеток в 1 мл патологического материала:
++++ обильный рост сливающихся
о
колоний (10 микробных клеток); +++ массивный рост изолированных
п
колоний (10 микробных клеток); ++ умеренный рост множества сосчитываемых колоний (не менее 50) (105-106 микробных клеток); + скудный рост единичных колоний (30-50) (104 микробных клеток).
Этиологически значимым содержанием бактерий признается 104 и выше.
Затем проводили микроскопию выросших на питательных средах колоний. Мазки окрашивали по Граму.
Результаты и обсуждение
Проведен анализ выделения микрофлоры из патологического материала от собак, больных дерматитами и отитами, по данным исследований ветеринарной лаборатории г. Боровичи за 2016-2020 гг.
Всего за пять лет в лабораторию доставлено 182 пробы патологического материала от собак. Из них 71% (129) проб от собак, больных дерматитами, 29% (53) проб от собак, больных отитами.
Установлена зависимость частоты поступления патологического материала для исследования от сезона года. Так, поступление материала от собак, больных дерматитами, чаще наблюдалось осенью (39%) и весной (32%), реже - летом (17%) и зимой (12%) (рисунок 1).
Поступление материала от собак, больных отитами, чаще наблюдалось летом (43%), реже - осенью (24%), весной (21%) и зимой (12%) (рисунок 2).
50 40 30
20
10
39
32
17
12
Осень
Весна
■ Количество
Лето
проо
Зима
Рисунок 1 - Сезонность поступления патологического материала от собак, больных дерматитами
Рисунок 2 - Сезонность поступления патологического материала от собак, больных отитами
Данные о поступлении патологического материала для исследований от собак разных возрастных групп представлены в таблице 1.
Как видно из данных, представленных в таблице 1, материал от собак с диагнозом дерматит чаще поступал от животных в возрасте от 0 до 2 лет (45 проб) и от 5 до 6 лет (32 пробы), реже - от животных в возрасте от 3 до 4 лет (26 проб) и от 7 лет и старше (26 проб).
Материал от собак с диагнозом отит чаще поступал от животных в возрасте от 0 до 2 лет (20 проб), реже - от животных других возрастов.
Патологический материал для исследования поступал от разных породных групп собак, больных отитами и дерматитами. Данные представлены в таблице 2.
Выявлено, что наиболее часто материал для исследования поступал
от собак служебных пород - 39,5% (восточно-европейская овчарка, немецкая овчарка, среднеазиатская овчарка, кавказская овчарка, ротвейлер, ризеншнауцер, хаски, сенбернар), реже от собак декоративных пород - 25,8% (английский бульдог, той-терьер, мопс, стаффордширский терьер, бассет-хаунд, пекинес, шарпей, маламут, чихуахуа, чау-чау, бигль, американский бульдог, американский питбультерьер, шпиц, далматин, болонка, колли, китайская хохлатая), охотничьих пород -22,5% (лайка, лабрадор, такса, гончая, русский спаниель, джек-рассел-терьер) и от беспородных собак -12,2%.
В ходе исследований выявлены микроорганизмы и их ассоциации, являющиеся причиной заболеваний собак дерматитами и отитами (таблицы 3, 4).
Таблица 1 - Поступление патологического материала от собак разных возрастных групп_
Диагноз Количество поступившего материала для исследований Возраст животных, лет
0-2 3-4 5-6 7-8 9 лет и старше
Дерматит 129 45 26 32 12 14
Отит 53 20 10 5 8 10
Таблица 2 - Поступление материала от собак различных породных групп
Породная Количество доставленного для исследования патологического
группа собак материала в различные годы, шт./%
2016 2017 2018 2019 2020 всего за ис-след. период
Служебные 5/38,5 17/42,5 23/41 8/36,4 19/37,3 72/39,5
Охотничьи 2/15,4 10/25 17/30,4 3/13,6 9/17,7 41/22,5
Декоративные 5/38,5 7/17,5 13/23,2 8/36,4 14/27,3 47/25,8
Беспородные 1/7,6 6/15 3/5,4 3/13,6 9/17,7 22/12,2
М+т 3,25+1,03 10+2,48 14+4,2 5,5+1,44 12,75+2,39 45,5+10,32
Итого 13 40 56 22 51 182
Таблица 3 - Видовой состав микроорганизмов, выделенных при дерматитах
Год Количество Из них выделено:
выделенных + + +
микроорганизмов Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Escherichia coli Proteus spp Pseudomonas aeru-ginosa Staphylococcus spp. Proteus spp. Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Staphylococcus spp. Escherichia coli
2016 6 2 - - - - 3 1 -
2017 32 12 8 2 3 2 3 1 1
2018 39 19 5 2 1 1 4 5 2
2019 13 6 3 1 1 - - - 2
2020 39 17 12 - 2 - 3 3 2
М+m 25,8+6,87 11,2 5,6 1,0 1,4 0,6 2,6 2,0 1,4
+3,22 +2,06 +0,45 +0,5 +0,4 +0,68 +0,89 +0,04
Итого 129 56 28 5 7 3 13 10 7
Таблица 4 - Видовой состав микроорганизмов, выделенных при отитах
Год Количество выделенных микроорганизмов Из них выделено:
Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Escherichia coli Pseudomonas aeru-ginosa Staphylococcus spp. + Proteus spp. Staphylococcus spp. + Streptococ- Staphylo coccus spp. + Escherichia Staphylococcus spp. + malassezia Streptococcus spp.+ malassezia cpp
2016 7 5 1 - - - 1 - - -
2017 8 5 - 1 1 - 1 - - -
2018 17 4 1 - 2 - - 3 7 -
2019 9 3 1 - - 2 - - 2 1
2020 12 5 2 - 1 - 1 - 3 -
М+m 10,6+ 1,8 4,4 +0,4 1,0 +0,32 - 0,8 +0,37 0,4 +0,4 0,6 +0,24 0,6 +0,6 2,4 +1,29 -
Итого 53 22 5 1 4 2 3 3 12 1
При бактериологическом исследовании патологического материала от собак, больных дерматитами, выделены следующие культуры микроорганизмов: Staphylococcus
spp. - 56, Streptococcus spp. - 28, Escherichia coli - 5, Proteus spp. - 7, Pseudomonas aeruginosa - 3. Наряду с монокультурами выделены следующие ассоциации микроорга-
низмов: Staphylococcus spp. + Proteus spp. - 13, Staphylococcus spp. + Streptococcus spp. - 10, Staphylococcus spp. + Escherichia coli - 7.
При бактериологическом исследовании патологического материала от собак, больных отитами, выделены следующие культуры микроорганизмов: Staphylococcus spp. - 22, Streptococcus spp. - 5, Escherichia coli - 1, Pseudomonas aeruginosa - 4, Staphylococcus spp. + Proteus spp. - 2, Staphylococcus spp. + Streptococcus spp. - 3, Staphylococcus spp. + Escherichia coli - 3, Staphylococcus spp. + malassezia spp. - 12,
Рисунок 5 - Виды стрептококков, выделенных от собак, больных дерматитами
Таким образом, наиболее часто выделяемыми микроорганизмами явились Staphylococcus spp. и Streptococcus spp. в монокультуре.
Выявляли различные виды бактерий рода стафилококки.
Наиболее часто, из патологического материала от собак, больных дерматитами, выделяли Staphylococcus aureus (58%), реже - Staphylococcus intermedius (23%), Staphylococcus epidermidis (12%), Staphylococcus xy-losus (7%) (рисунок 3).
Из патологического материала от собак, больных отитами, наиболее часто выделяли Staphylococcus aureus (43%), Staphylococcus epidermidis ( 4 1%), реже - Staphylococcus xylosus (16%) (рисунок 4).
■ Staphylococcus aureus
■ Staphylococcus epidermidis Staphylococcus xylosus
Рисунок 4 - Видовой состав бактерий рода стафилококки, выделенных от собак, больных дерматитами
■ Streptococcus faecalis
■ Streptococcus faecium
Рисунок 6 - Виды стрептококков, выделенных от собак, больных отитами
Streptococcus spp.
spp. -1.
+
malassezia
Рисунок 3 - Видовой состав бактерий рода стафилококки, выделенных от собак, больных дерматитами
25% ь
Л 1 ■ Streptococcus faecalis
1 ■ Streptococcus faecium
75%
При идентификации бактерий рода стрептококки, выделенных при исследовании материала от собак, больных дерматитами, наиболее часто выделяли Streptococcus faecalis (75%), реже - Streptococcus faecium (25%) (рисунок 5).
При идентификации бактерий рода стрептококки, выделенных при исследовании материала от собак, больных отитами, наиболее часто выделяли Streptococcus faecalis (80%), реже - Streptococcus faecium (20%) (рисунок 6).
Выводы
Таким образом, наши исследования позволяют сделать следующие выводы:
- патологический материал от собак, больных дерматитами, чаще поступал осенью (39%) и весной
(32%), а от больных отитами - летом (43%);
- материал от собак, больных дерматитами и отитами, чаще п о ступал от животных в возрасте до двух лет;
- наиболее часто материал для исследования поступал от собак служебных пород (39,5%);
- микробиоценозы кожи собак, больных дерматитами, представлены в основном микроорганизмами рода стафилококки. Наиболее часто выделяемым микроорганизмом является Staphylococcus aureus (58%), реже выделяются Staphylococcus intermedius, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus xylosus. В меньшей степени выделяли бактерии рода стрептококки, протей, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и ассоциации микроорганизмов.
Библиографический список
1. Воробьев, А. А. Медицинская и санитарная микробиология / А. А. Воробьев, Ю. С. Кривошеин, В. П. Широбоков. - Москва : Академия, 2003. - 464 с. - ISBN 5-76951292-Х. -Текст : непосредственный.
2. Герке, А. Н. Бактериальный фолликулит у собак / А. Н. Герке. - Текст : непосредственный // VetPharma. - 2015. - Выпуск 4(26). - С. 38-46.
3. Герке, А. Н. Кожный барьер и его дисфункция при болезнях кожи / А. Н. Герке. - Текст : непосредственный // VetPharma. - 2014. - Выпуск 6. - С. 44-50.
4. Горбунова, Н. А. Внутрилабораторный контроль качества питательных сред для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам / Н. А. Горбунова, М. С. Поляк. - Текст : непосредственный // Медицинский алфавит. - 2015. - Выпуск 4. -С.49-53.
5. Ермакова, Т. С. Видовая структура и антибиотикорезистентность возбудителей гнойно-септических инфекций / Т. С. Ермакова, В. А. Горбунов, Л. П. Титов. - Текст : непосредственный // Здравоохранение. - 2011. - Выпуск 10. - С. 16-25.
6. Забровская, А. В. Чувствительность к антимикробным препаратам микроорганизмов, выделенных от сельскохозяйственных животных и из продукции животноводства / А. В. Забровская. - Текст : непосредственный // Vetpharma. - 2013. - Выпуск 1. - С. 78-83.
7. Чувствительность штаммов staphylococcus intermedius, выделенных от собак, к антимикробным препаратам / А. А. Балбуцкая, Н. А. Сафонова, В. Н. Скворцов, А. В. Войтенко. - Текст : непосредственный // Ветеринарная патология. - 2009. - Выпуск 2. -С. 51-53.
E-mail: oksana.sergeevna85@mail.ru
182112 Псковская область, г. Великие Луки, пр. Ленина д. 2, ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА
Тел.: +7 (81153) 7-28-51
