CC BY
51
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ
эффективность курса
РОТОВЫХ ВАННОЧЕК С ЭКСТРАКТОМ ИЗ СЕМЯН
грейпфрута
В настоящее время в комплексном лечении патологии полости рта наряду с использованием химических антибактериальных препаратов (антибиотики и сульфаниламиды) широко применяют средства природного происхождения [1, 2]. Они имеют ряд преимуществ: более мягкое действие, низкую токсичность и невысокий риск развития дисбактериоза [3]. Среди растительных экстрактов выраженной антимикробной активностью обладает экстракт из семян грейпфрута [4]. Его основными действующими началами являются биофлавоноиды и витамин С.
Целью исследования явилась оценка влияния экстракта из семян грейпфрута на микробиоценоз полости рта.
Задачи исследования
1) оценить антимикробную активность различных разведений экстракта из семян грейпфрута in vitro с использованием штаммов микроорганизмов - представителей нормальной флоры полости рта и условно-патогенных видов;
2) выявить оптимальную концентрацию экстракта в растворе для дальнейшего клинического исследования;
3) исследовать эффективность курсового применения экстракта in vivo.
Материалы и методы
Для проведения микробиологического исследования in vitro было проведено экспериментальное исследование. На основе стерильного физиологического раствора приготовлены растворы с различной концентрацией экстракта из семян грейпфрута: 0,04%, 0,008%, 0,004%, 0,002%, 0,0008% (100, 20, 10, 5, 1 капель экстракта на 100 мл физ. раствора соответственно). По 1 мл каждого образца помещали в стерильные пробирки и добавляли
0,1 мл взвеси культуры исследуемого штамма микроорганизма в концентрации 1 млн/мл, быстро перемешивая. В качестве тест-культур использо-
Токмакова С. И .
д.м.н., профессор, зав. кафедрой терапевтической стоматологии ГБОУ ВПО АГМУ, г. Барнаул
Луницына Ю.В .
к.м.н., ассистент кафедры терапевтической стоматологии ГБОУ ВПО АГМУ, г. Барнаул, lunizyna.julja@mail.ru
Протопопова Т.А.
член НОМУС АГМУ, г. Барнаул
Порсева Ю.Д.
член НОМУС АГМУ, г. Барнаул
Резюме
В результате экспериментального микробиологического исследования in vitro, а также клинического исследования in vivo с участием группы здоровых добровольцев доказано антибактериальное и противогрибковое действие экстракта из семян грейпфрута; определена оптимальная концентрация его в растворе; обосновано включение средства в комплекс лечения патологии полости рта.
Ключевые слова: экстракт из семян грейпфрута, антимикробное действие, полость рта.
MiCROBiOLOGiCAL EFFiCACY RATE MOUTH TRAYS WiTH THE EXTRACT OF GRAPEFRUiT SEED
Tokmakova S.i., Lunitsyna J.V., Protopopova T.A., Porseva J.D. The summary
As a result of experimental study of microbial in vitro, and in vivo clinical study involving a group of healthy volunteers demonstrated antibacterial and antifungal activity of grapefruit seed extract; determined optimal concentration in the solution, including means justified in the complex treatment of oral diseases.
Keywords: grapefruit seed extract, antimicrobial effect, the oral cavity.
Проблемы стоматологии / Actual моыш oí stoiatoloci
20I3. № E
вали: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Neisseria catarrhalis, Coryne-bacter sp., Citrobacter sp., Candida Albicans. В контрольные пробирки помещали 1 мл стерильного физиологического раствора и 0,1 мл взвеси исследуемой культуры микроорганизмов в известной концентрации - 1 млн/мл. После инкубации, через сутки, производили посев 1 мл полученного разведения в чашки Петри на мясо-пептонный агар. Затем посевы повторно инкубировали в термостате при 37°С. Результаты фиксировали через 24 часа, подсчитывая количество колоний микроорганизмов. При сплошном росте определяли процент занимаемой микроорганизмами площади чашки Петри. Положительным результат считали при количестве выросших колоний менее пяти.
Группу исследования in vivo составили 30 здоровых добровольцев. Определив оптимальную концентрацию экстракта, обладающую антибактериальным эффектом в ходе исследования in vitro, проводили курс ротовых ванночек (20 капель экстракта на 100 мл воды). Ванночки назначали 2 раза в день: утром и вечером после еды и чистки зубов. После процедуры в течение 1-2 часов исключали прием жидкой и твердой пищи. Курс составлял 14 дней. Микробиологическое исследование проводили дважды: до и после курса процедур. Мазок со слизистой оболочки рта брали утром натощак стерильным ватным тампоном. В лаборатории производили посев материала на стандартные микробиологические среды с последующим выделением чистой культуры микроорганизма. Морфологические и тинкториальные признаки штаммов определяли, окрашивая мазки по Граму, биохимическую активность оценивали общепринятыми способами. На основании морфологических, тинкториальных,
Рис . 1 . Процент встречаемости отдельных штаммов микроорганизмов в группе здоровых лиц до и после применения экстракта из семян грейпфрута
биохимических признаков проводили идентификацию по бинарной номенклатуре с определением количества выделенного штамма в материале.
Статистическую обработку проводили при помощи пакета прикладных статистических программ. Статистический анализ включал расчет средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (m) и вероятности различий (P). Достоверность различий определяли с помощью критерия Стьюдента (t) для независимых выборок. Различия оценивали как значимые при р<0,05.
Результаты исследования
Результаты исследования чувствительности микроорганизмов к экстракту из семян грейпфрута in vitro представлены в табл. 1. В контрольных чашках Петри повсеместно определяется сплошной рост микроорганизмов, в то время как в опытных - рост отдельных колоний. Более
Таблица 1
Количество колоний исследуемых штаммов микроорганизмов в чашке Петри через сутки после инкубации в термостате
Разведение экстракта из семян грейпфрута Lactobacillus casei Lactobacillus acidophilus Staphylococcus epidermidis Streptococcus mitis Streptococcus salivarius Corynebacter Neisseria catarrhalis Citrobacter Candida Albicans
0,04% 0 0 0 0 0 0 0 1 0
0,008% 0 0 143 1 0 0 0 3 3
0,004% 170 1 30%* 28 100 0 150 20%* 45
0,002% 47 5 102 900 23 0 250 50%* 26
0,0008% 20%* 292 330 400 14 814 187 50%* 291
Контроль 10%* 20%* 30%* 20%* 30%* 15%* 30%* 50%* 10%*
Примечание: * процент занимаемой микроорганизмами площади чашки Петри при сплошном росте.
WWW.DENTAL-PRESS.COM Проблемы стоматологии / Нош молш и помтоик!
2012. № Е
Таблица 2
Количество представителей микрофлоры полости рта до и после курса ротовых ванночек с экстрактом семян грейпфрута, л102 КОЕ
Рис . 2. Посев мазка со слизистой оболочки полости рта одного из добровольцев до и после курса ротовых ванночек с экстрактом из семян грейпфрута
низкую чувствительность к препарату показал Staphylococcus epidermidis. Напротив, высоко чувствительными оказались Lactobacillus acidophilus и Corynebacter sp. При увеличении концентрации препарата отмечено усиление антимикробной активности. Исходя из полученных результатов, целесообразно применять 0,008% раствор экстракта (20 капель на 100 мл).
«КРИСТАЛЛ-УРА/1» “ *■
www.kristallural.ru
ПРОДАЖА www.кpиcтaллypaл.pф СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ КРИСТАЛЛ УРАЛ
МАТЕРИАЛОВ И ИНСТРУМЕНТОВ
Ждем Вас познакомиться с нашим ассортиментом г. Екатеринбург, ул. 8 Марта, 80 Тел.: (343) 213-52-04, факс: 257-31-12,14 E-mail: cristall@k66.ru
Фирма •Крястам-Урзі» работает на стоматологическом рынке 9 лет. Компания предлагает широкий спектр расходных материалов к инструментов для терапия, хирургии, іидодоигии, ортопедии, а также средства гигиены к дезинфекции. Представлена продукции ведущих российских и зарубежных фирм-производителей:
VDWGmbH (Гсрмама) RHEIN83 Septodont (франция) Dentsply Maillefet
ЗМ ESPE (США) Mmi (Япония) KeirHawe
Renfert (Германия) Shofu (Япония) YETI (Германия) Kenda
Ivixlar Vivadent Zhermack
Omnident (Германия)
CC Вайт
V0C0 (Германия)
GC(Япония)
Bisico (Германия)
Schuler-Dental (Германия)
Целит
ВладМмВа
Омега
Штамм микроорганизма До курса После курса
Str. mitis 12,2±3,3 6,5± 4,7*
Str. mutans 6,2±3,2 1,9±1,4*
Str. salivarius 11,9±4,9 5,8± 2,5*
Str. sanguis 16,4±10,9 11,9±9,5
Lactobacillus casei 9,2±4,2 7,3±3,9
St. epidermidis 10,9±1,8 1,4±1,4*
St. saprophiticus 4,4±5,2 5,6±0,8
M. luteus 2,5±0,9 0,0*
N. mucosa 7,6±4,7 2,0±0,9*
Corynebacter 1,3±0,06 0,0
C. albicans 16,3±5,6 7,8±3,2*
Ждем Ваших заявок по тел.: (343) 213-52-04 E-mail: cristall@k66.ru
Работаем с клиниками из других городов
большой ассортимент!
Примечание: * различие статистически значимо по сравнению с показателями до курса применения, p < 0,05.
Штаммы микроорганизмов, выявленные в ходе исследования in vivo в группе здоровых добровольцев, представлены на рис. 1.
До применения экстракта количество микроорганизмов в полости рта у каждого добровольца в среднем составило 3,42±1,10 *103 КОЕ. После курса ротовых ванночек с препаратом показатель был равен в среднем 1,92±0,59 *103 КОЕ (р<0,05) - рис. 2.
Количество отдельных представителей микрофлоры полости рта снизилось в среднем в 2 раза (табл. 2). Исключение составил лишь St. saprophiticus. В ходе клинического исследования также отмечен противогрибковый эффект препарата (табл. 2).
Таким образом, экстракт из семян грейпфрута обладает высокой антибактериальной и противогрибковой активностью, что обосновывает включение его в комплекс лечения патологии полости рта. Исходя из исследования, с целью коррекции микробиоценоза полости рта целесообразно применять средство в разведении 20 капель на 100 мл воды.
ЛИТЕРАТУРА
1. Банченко Г. В. , Максимовский Ю. М. , Гринин В. М. Язык - «зеркало» организма / Клиническое руководство для врачей. - М.: ЗАО «Бизнес-Центр «Стоматология», 2000. - 408 с.
2. Боровский Е. В. , Машкиллейсон А.Л. Заболевания слизистой оболочки полости рта и губ. - М., Медпресс, 2001. - 320 с.
3. Максимовская Л. Н., Рощина П. И. Лекарственные средства в стоматологии: Справочник. - 2-е изд., перераб. и доп. - М: Медицина, 2000. - 240 с.
4. Сакс А. Экстракт из семян грепфрута / А.Сакс. Перевод А.И.Копий. - М., 2004. - 54 с.
14 Проблемы стоматологии / Actual моыш об ітоліашо«
2013. № Е
