CC BY
120
УДК 619:616.98:578.828.11л
Значение серологических исследований в системе противолейкозных мероприятий
С.С.Абакин, Т.И.Чайка, ГНУ СНИИЖК
Среди злокачественных новообразований органов кроветворения особая роль отведена лейкозам. Связано это с тем, что лейкозы остаются пока фатальным заболеванием, поражающим во все большем масштабе человека и животных. Заболевание распространилось во всех странах с высокоразвитым молочным животноводством. По данным Департамента ветеринарии МСХ РФ, в структуре инфекционной патологии животных на территории России в последние годы лейкоз крупного рогатого скота занимает лидирующее положение.
По результатом многолетних диагностических исследований крупного рогатого скота на лейкоз в нашем регионе установлено, что вирус лейкоза крупного рогатого скота имеет широкое неравномерное распространение на всей территории Ставропольского края, среди животных общественного и личного пользования. При оценке интенсивности эпизоотического процесса по лейкозной инфекции на 1.12.05г. в крае выявлено в среднем 19% инфицированных ВЛ животных, в том числе в коллективных хозяйствах - 22,8% и индивидуальных - 17% от числа исследованных.
Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь, вызываемая вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), являющегося РНК- содержащим вирусом семейства РеІгоуШае, рода ОеКаге^омгив.
Вирус лейкоза КРС вызывает лейкоз у коров, быков, телят, реже, и в основном в эксперименте, - у других видов животных (овец, коз, свиней, лошадей, кроликов). Способность вызывать инфекционный процесс не только у естественного хозяина (крупный рогатый скот), но и у других видов животных является отличительным свойством вируса лейкоза КРС, так как для большинства ретровирусов характерна строгая специфичность.
ВЛКРС присутствует в организме инфицированных животных в форме ДНК - провируса, интегрированного в геном клетки хозяина. Несмотря на отсутствие свободных вирионов или антигенов, в организме хозяина происходит образование антител к структурным белкам вириона.
Характерной особенностью инфекции у крупного рогатого скота является пожизненная персистенция ВЛ и вирусспецифических антител у больного животного. Неспособность антител элиминировать ВЛКРС объясняется тем, что вирус обычно присутствует в лимфоцитах в непродуктивном состоянии и защищен от воздействия антител. Размножение его не является необходимым для распространения в популяции животных. Инфицированные лимфоидные клетки могут передавать вирусный геном потомству во время размножения клеток. От
клетки вирус может передаваться также без продукции вирусных частиц с помощью механизма Cellular Kissing (клеточного прикосновения).
С установлением этиологической роли ВЛ в возникновении заболевания были разработаны серологические методы выявления инфицированных животных. У зараженных животных в крови циркулируют антитела к нескольким структурным белкам вируса лейкоза. Однако диагностическое значение имеют антитела против р 24 и др 51, которые выявляются с помощью иммунологических реакций (Гулюкин М.И. и др., 2005). Самым распространенным серологическим методом прижизненной диагностики ВЛКРС - инфекции, имеющим широкое практическое применение, является реакция иммунодиффузии в геле агара - РИД. Животные, сыворотки которых при серологическом тестировании по РИД дали положительный результат, считаются зараженными вирусом лейкоза. С помощью этого метода инфицированные животные выделяются, как правило, через 2-3 месяца после заражения (инфекционная стадия заболевания) и повышения титра антител до уровня, определяемого по РИД. Реакция иммунодиффузии с гликопротеидным антигеном в геле агара является достаточно специфичной и достоверность её результатов не вызывает сомнений. Но с момента постановки реакции до учёта её результатов проходит много времени - 48 часов. Иногда, при повторных исследованиях, наблюдается выпадение РИД, что объясняется временным снижением титров антител или технической погрешностью, что крайне редко. Достоверность исследований по РИД возрастает при повторных или динамических исследованиях животных, что вполне может гарантировать эффективность противолейкозных мероприятий.
Реакция иммуннодиффузии является основным методом серологического исследования животных в государственной программе по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота. Выпускаемые диагностические наборы для постановки РИД имеют несколько вариантов. Для нас представляет интерес набор в первой комплектации, так как в нём присутствуют контрольные сыворотки к белку р24. Ранее проведённые серологические исследования в РИД с р24 выявили зависимость между клиническим и гематологическим проявлением заболевания у животных старше 4-х лет и наличием у них антител к р24. Такая картина наблюдалась при лимфоидной форме лейкоза (диагноз подтверждён гистологическими исследованиями) - наиболее распространённой форме заболевания. Существует ряд объяснений установленного факта: у коров с лимфолейкозом частота выявления в РИД анти-р24 антител повышается. Прогрессирование заболевания происходит в результате подавления генеза лимфоцитов р24 антигеном вируса лейкоза, что приводит к угнетению иммунитета и, как следствие, - у таких животных происходит усиление опухолевого процесса. В связи с установленной зависимостью между лейкозом и р24 антителами возможно использование РИД с р24 антигеном (отличающимся высокой
специфичностью и максимальной чувствительностью), как дополнение к основному (др 51) методу.
В настоящее время заслуживает особого внимания иммуноферментный анализ (ИФА) как ещё один серологический метод прижизненной диагностики лейкоза. Благодаря высокому уровню чувствительности и специфичности, он принимает наступательный характер и широко используется в ветеринарной практике многих стран мира при реализации программы ликвидации лейкоза крупного рогатого скота.
Это сравнительно более удобный метод, отличающийся не только специфичностью, но и гибкостью работы (анализ может быть проведен вручную и автоматически). С помощью ИФА раньше и больше выявляют инфицированных животных, так как он регистрирует более низкие величины титров антител.
Для сравнения эффективности двух методов серологической диагностики нами проведено параллельное тестирование животных в РИД и ИФА. Результаты исследований показали, что иммуноферментный анализ позволяет выделять дополнительно до 10 -12 % инфицированных ВЛ животных, что является существенным при искоренении вирусной инфекции. Аналогичные результаты были получены и другими авторами (Симонян Г.А., 1999; Шайнуров Р.В., 1999; Мальцева Н.А. и соавт.,2002 и др.).
При проведении оздоровительных мероприятий от лейкоза крупного рогатого скота в выборе метода серологических диагностических исследований следует учитывать эпизоотическую напряженность по лейкозу в данном хозяйстве.
Так, в стадах с относительно невысоким уровнем инфицированности животных (до 10%) применение иммуноферментного анализа желательно и оправданно. Этот метод позволяет в короткий срок более тщательно диагностировать контаминированных ВЛ животных, а единовременное удаление их из стада устраняет источник инфекции. Использование иммуноферментного метода в стадах с напряжённой эпизоотической ситуацией, при уровне инфицированности животных вирусом лейкоза выше 10-20 и более процентов, нецелесообразно и экономически не выгодно. В такой эпизоотической обстановке правильным выбором будет исследование животных в реакции иммунодиффузии, так как оздоровление хозяйства потребует более длительного времени и большего числа исследований, чем в первом случае. И только на завершающем этапе оздоровления целесообразно переходить на иммуноферментный анализ.
Разработанные системы противолейкозных мероприятий в РФ (Ленинград, Екатеринбург, Смоленск, Новосибирск и др.) основаны на выявлении и удалении из стада инфицированных животных.
Сотрудники лаборатории инфекционных болезней разработали «оптимизированную систему противоэпизоотических мероприятий по
лейкозу крупного рогатого скота для хозяйств Ставропольского края», в которой представлена поэтапная схема оздоровления животных. Для каждого этапа выбрана тактическая линия проведения серологических исследований, рекомендуются один или два метода (РИД, ИФА) с учётом хозяйственной целесообразности.
Серологические методы диагностики являются
основополагающими как для профилактики, так и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота. Выявление инфицированных животных должно быть сигналом для проведения противолейкозных мероприятий даже при отсутствии клинических или гематологических признаков болезни. Несвоевременное удаление инфицированных ВЛКРС животных приводит к ещё большему распространению инфекции, развитию заболевания у значительной части животных и увеличению доли молодняка, инфицированного внутриутробно. Это значительно
затрудняет проведение оздоровительных мероприятий.
Раннее выявление инфицированных животных имеет большое значение для успешной реализации системы противолейкозных мероприятий, конечной целью которой является создание безвирусных стад крупного рогатого скота, профилактика и ликвидация болезни, обеспечение стойкого благополучия по лейкозу.
