CC BY
117
Russian clinical laboratory diagnostics. 2016; 61(10)
DOI 10.18821/0869-2084-2016-61-10-715-719
immunology
© бутина Е.в., Зайцева г.а., 2016
УДК 616.155.294-092.612.017.1]-053.31-078.33
Бутина Е.в., Зайцева Г.А.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ИММУННОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИИ ПЛОДА И НОВОРОЖДЕННОГО
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России», 610027, Киров
Тромбоцитопения встречается у 1—5% новорожденных. В зависимости от механизмов патогенеза тромбоцитопения условно подразделяется на иммунную и неиммунную. В основе иммунного разрушения тромбоцитов лежит реакция взаимодействия антител с антигенами поверхностных структур клеток. Во внутриутробном периоде и периоде новорож-денности могут наблюдаться ауто-, транс- и аллоиммунные варианты возникновения тромбоцитопении. Неонатальная аллоиммунная тромбоцитопения (НАИТ) регистрируется с частотой 1 случай на 800—1000 новорожденных. Цель работы заключалась в разработке алгоритма диагностики иммунной тромбоцитопении, определении основных диагностических критериев, изучении клинического значения результатов лабораторных тестов. Методы исследования включали типирование генов системы НРА с помощью ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени, определение совместимости НРА-генотипов матери и ребенка, исследование антитромбоцитарных ауто- и аллоантител в образцах крови матери и ребенка методом проточной цитометрии. Рассматривали следующие критерии диагностики НАИТ: 1) выявление несовместимых сочетаний генов НРА у матери и ребенка (НРА-1ЬЬ/НРА-1аЬ; НРА-5аа/НРА-5аЬ; НРА-15аа/ НРА-15аЬ); 2) выявление в сыворотке крови матери антител, адсорбирующихся более чем на 30% тромбоцитов ребенка; 3) отсутствие антитромбоцитарных аутоантител у матери и ребенка (коэффициент аутосенсибилизации менее 5%). Иммунный генез тромбоцитопении установлен у 40%% детей с низким числом тромбоцитов при рождении. В 50% случаев причиной стали антитромбоцитарные аллоантитела, поставлен диагноз НАИТ. Также в 50% случаев снижение числа тромбоцитов у детей произошло в результате действия материнских аутоантител, выставлен диагноз — «трансиммунная тромбоцитопения». Рассмотренные лабораторные методы обладают высокой специфичностью и чувствительностью и позволяют адекватно диагностировать иммунные причины тромбоцитопении у новорожденных.
Ключевые слова: неонатальная аллоиммунная тромбоцитопения; НРА; тромбоциты; антитела. Для цитирования: Бутина Е.В., Зайцева Г.А. Методы диагностики иммунной тромбоцитопении плода и новорожденного. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61 (10): 715-719. DOI: 10.18821/0869-2084-2016-61-10-715-719. Butina E.V., Zaitseva G.A.
the methods of diagnostic of immune thrombocytopenia of fetus and newborn
The Kirovskii research institute of hematology and blood transfusion of the Federal medical biological agency of Russia, 610027 Kirov, Russia
The thrombocytopenia is found in 1%-5% of newborns. Depending on mechanisms ofpathogenesis of thrombocytopenia is divided on immune and non-immune one. The reaction of of interaction between antibodies and antigens of superficial structures of cells are in the basis of immune destruction of thrombocytes. During intrauterine period and period of newborness auto-, trans- and alloimmune alternatives of development of thrombocytopenia can be observed. The neonatal alloimmune thrombocytopenia is registered with rate of 1 case per 800-1000 newborns. The study was targeted to developing algorithm ofdiagnostic of immune thrombocytopenia, detecting main diagnostic criteria, exploring clinical significance of results of laboratory tests. The methods of study included typing ofgenes of HPA system using polymerase chain reaction with detection of results in real-time mode, detection of compatibility of HPA-genotypes of mother and child using flow cytometry technique. The following criteria of diagnostic of neonatal alloimmune thrombocytopenia: 1. detection of incompatible combination of HPA genes in mother and child (HPA-1bb/HPA-1ab; HPA-5aa/HPA-5ab; HPA-15ab/HPA-15ab); 2. detection in blood serum of mother antibodies adsorbing more than on 3% of thrombocytes of child; 3. absence of anti-thrombocyte antibodies in mother and child (coefficient of auto-sensitization is less than 5%). The immune genesis of thrombocytopenia is established in 40%% 0f children with low number of thrombocytes at birth. In 50% of cases the cause was determined as anti-thrombocyte alloantibodies with diagnosis neonatal alloimmune thrombocytopenia. Also in 50% of cases decreasing of number of thrombocytes in children occurred as result of impact of autoantibodies of mother with diagnosis "transimmune thrombocytopenia". The considered laboratory methods have high specificity and permit to properly diagnose immune causes of thrombocytopenia in newborns.
Keywords: neonatal alloimmune thrombocytopenia; HPA; thrombocyte; antibody
For citation: Butina E.V., Zaitseva G.A. The methods of diagnostic of immune thrombocytopenia of fetus and newborn. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2016; 61 (10): 715-719. (in Russ.). DOI: 10.18821/0869-2084-2016-61-10-715-719.
For correspondence: ButinaE.V., candidate of medical sciences, senior research worker of laboratory of immunohema-tology. e-mail: butinalena@yandex.ru
Conflict of interests. The authors declare absence of conflict of interests. Financing. The study had no sponsor support
Received 12.04.2016 Accepted 15.05.2016
Для корреспонденции: Бутина Елена Владимировна, канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаб. иммуногематологии, e-mail: butinalena@ yandex.ru
ИММУНОЛОГИЯ
Тромбоцитопения — снижение числа тромбоцитов в периферической крови ниже 150* 109/л — встречается у 1—5% новорожденных [1, 2]. В зависимости от механизмов патогенеза тромбоцитопению условно подразделяют на иммунную и неиммунную. Неиммунные причины снижения числа тромбоцитов: внутриутробные инфекции (цитомегалови-русная инфекция, токсоплазмоз, краснуха); плацентарная недостаточность; сепсис; ДВС-синдром, тромбоз; гипер-спленизм; хромосомные нарушения (трисомия 18, 13, 21, триплодия); наследственные заболевания (анемия Фанкони, TAR-синдром); гемобластозы; аплазия мегакариоцитарного ростка кроветворения [3, 4]. В основе иммунного разрушения тромбоцитов лежит реакция взаимодействия антител с антигенами поверхностных структур клеток. Во внутриутробном периоде и периоде новорожденности могут наблюдаться ау-то-, транс- и аллоиммунные варианты возникновения тром-боцитопении [5—7].
1. Аутоиммунная тромбоцитопения развивается у ребенка при срыве иммунологической толерантности и образовании антител к собственным клеткам крови.
2. Трансиммунная тромбоцитопения наблюдается у детей, матери которых страдают иммунной тромбоцитопенией (ИТП) или системными заболеваниями, сопровождающимися аутосенсибилизацией, при этом тромбоциты плода разрушаются материнскими аутоантителами, проходящими через плацентарный барьер.
3. Аллоиммунная тромбоцитопения плода и новорожденного развивается вследствие сенсибилизации матери к специфическим тромбоцитарным антигенам системы НРА (Human Platelet Antigens), унаследованным ребенком от отца. Во время беременности материнские IgG антитела адсорбируются на тромбоцитах плода, вызывая их разрушение в клетках ретикуло-эндотелиальной системы печени и селезенки ребенка [8—10]. Кроме прямой деструкции тромбоцитов, происходит недостаточная их продукция мегакариоцитами [11— 13]. Характерная особенность неонатальной аллоиммунной тромбоцитопении (НАИТ) — изолированное снижение числа тромбоцитов у относительно здоровых детей, не имеющих клинических отягощающих факторов. Патогенез НАИТ сопоставим с патогенезом гемолитической болезни плода и новорожденного, однако клиника НАИТ может развиться уже при первой несовместимой беременности [14, 15].
Дифференциальная диагностика причин тромбоцитопе-нии служит основой для назначения терапии, определения прогноза для жизни и здоровья ребенка, установления риска развития подобной патологии у сибсов [16—18].
НАИТ регистрируют с частотой 1 случай на 800—1000 новорожденных [19—21]. Наиболее опасным осложнением НАИТ становятся внутричерепные кровоизлияния во внутриутробном или раннем постнатальном периодах. Тяжелые нарушения, приводящие к инвалидности, регистрируют в 20% случаев НАИТ, смертность составляет 15%. Установлено, что в 75—80% зарегистрированных случаев НАИТ возникает при несовместимости по гену НРА-1а (генотип ребенка — НРА-lab, матери — НРА-lbb). Причиной НАИТ в 10—15% случаев оказываются антитела к антигену НРА-5Ь (генотип ребенка — НРА-5аЬ, матери — НРА-5аа) и в 3—5% случаев — анти-15Ь антитела (генотип ребенка — НРА-15аЬ, матери — НРА-15аа). Сочетание антител указанных специ-фичностей выявляют в 2—6% случаев НАИТ [22, 23].
Цель исследования — разработка алгоритма диагностики иммунной тромбоцитопении плода и новорожденного, оценка результатов внедрения генетических и иммуногематоло-гических методов в лабораторную практику, сопоставление полученных лабораторных данных с клинической картиной заболевания.
Материал и методы. Полиморфизм генов системы НРА
исследован у 320 доноров компонентов крови Кировского НИИ гематологии и переливания крови в 2013—2015 гг.
Диагностика иммунных причин тромбоцитопении проведена у 40 детей с числом тромбоцитов в периферической крови менее 150»109/л (от 39 до 133• 109/л, медиана — 70»109/л), родившихся в Кировском областном клиническом перинатальном центре в 2015 г. Генетические и иммунологические исследования проведены также у их матерей (40 женщин). При установлении диагноза НАИТ учитывали данные акушерского анамнеза, течение настоящей беременности, состояние здоровья женщины, клинической картины заболевания, динамики тромбоцитопении, результатов лабораторных исследований. Для решения вопроса об аллоиммунном характере разрушения тромбоцитов выявляли различия генотипов системы НРА у матери и ребенка, определяли в сыворотке крови матери антитромбоцитарные антитела, взаимодействующие с тромбоцитами ребенка (аллоантитела) и собственными тромбоцитами женщины (аутоантитела).
Ниже представлены этапы лабораторной диагностики иммунной тромбоцитопении.
1. Получение препаратов геномной ДНК из образцов периферической крови матери и ребенка с использованием автоматических станций для выделения и очистки нуклеиновых кислот.
2. Типирование генов системы НРА методом полиме-разной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени с использованием оборудования и реактивов отечественного производства (детектирующий ампли-фикатор ДТ-96 (ДНК-технология); наборы реагентов Тром-боГенТест (Россия)). Анализ заключается в определении а- и Ь-форм генов локусов НРА-1, -2, -3, -4, -5, -15.
3. Исследование антитромбоцитарных аутоантител в образцах крови матери и ребенка. Анализ проводится в соответствии со способом, описанным в Патенте на изобретение Российской Федерации № 2488114 [24, 25]. Методом проточной цитометрии определяют относительное количество тромбоцитов, адсорбировавших ^О антитела после инкубации с аутосывороткой. Коэффициент аутосенсибилизции >3% свидетельствует о наличии антитромбоцитарных ауто-антител и является одним из диагностических критериев аутоиммунной тромбоцитопении.
4. Определение антител к тромбоцитам ребенка в крови матери. Анализ осуществлялся методом проточной цитоме-трии аналогично с п. 3, но в качестве объекта исследования служили тромбоциты новорожденного, инкубированные с сывороткой крови матери. Выявление адсорбции антител более чем на 5% тромбоцитов свидетельствовало о наличии у женщины аллосенсибилизации.
Результаты. Результаты исследования генов НРА у 320 доноров компонентов крови представлены в табл. 1. Полученные данные согласуются со сведениями по НРА-типированию, проведенными в Москве [26] и Санкт-Петербурге [27].
Наибольшее клиническое значение имеет определение полиморфизма гена НРА-1Ь в гомозиготном состоянии (НРА-1ЬЬ). Выявление данного генетического сочетания у реципи-
Таблица 1
Частота встречаемости генов системы НРА у доноров компонентов крови, %
Аллельные сочетания Локусы системы НРА
НРА-1 НРА-2 НРА-3 НРА-4 НРА-5 НРА-15
aa 71,1 79,4 30,7 100,0 84,4 24,9
ab 26,0 20,0 50,0 0 15,0 49,2
bb 2,94 0,6 19,2 0 0,6 26,0
RussIAN CLINICAL LABORATORY DIAGNOsTICs. 2016; 61(10) DOI 10.18821/0869-2084-2016-61-10-715-719
ентов сопряжено с высоким риском образования анти-НРА-1а антител и, как следствие, рефрактерности к переливаниям тромбоцитов. Генотип НРА-lbb у беременных женщин служит показанием для углубленного обследования в связи с угрозой рождения ребенка с НАИТ. Развитие аллосенсибилизации возможно также у лиц с генотипами НРА-5аа и НРА-15аа.
При обследовании женщин, дети которых родились с тромбоцитопенией, «генотипы риска» выявлены у 18 из них: генотип НРА-lbb определен у 6 женщин, генотип НРА-5аа — у 8 и генотип НРА-15аа — у 4 женщин.
Аллосенсибилизация к антигенам тромбоцитов установлена у 8 матерей. Аллоантитела к тромбоцитам ребенка выявлены у всех женщин с генотипом НРА-lbb и у двух — с генотипом НРА-5аа.
Трансиммунный генез тромбоцитопении определен у 8 детей. Проведенный анализ выявил у матерей этих новорожденных наличие аутоантител к тромбоцитам и снижение у них числа тромбоцитов в периферической крови (от 44 до 105*109/л). В остальных случаях лабораторные данные, свидетельствующие об иммунном характере тромбоцитопении, получены не были.
Таким образом, иммунный генез тромбоцитопении установлен у 40% детей с низким числом тромбоцитов при рождении. В 50% случаев причиной стали антитромбоцитарные аллоантитела, был поставлен диагноз НАИТ. Также в 50% случаев снижение числа тромбоцитов у детей произошло в результате действия материнских аутоантител, был выставлен диагноз — «трансиммунная тромбоцитопения».
Клинические примеры диагностики иммунной тромбоцитопении представлены ниже.
Пример 1. Новорожденный С., 6-й день жизни, родился в сроке гестации 39 нед от второй беременности, первых родов. Масса тела при рождении 3440 г. Число тромбоцитов в периферической крови при рождении 100*109/л, на 3-й день жизни — 80*109/л, на 6-й день жизни — 50*109/л. Уровень гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в норме. Признаки инфекционного процесса отсутствуют. Наследственных заболеваний не выявлено. Геморрагических признаков тром-боцитопении не обнаружено. Число тромбоцитов в периферической крови матери — 250*109/л. Клинический диагноз: «тромбоцитопения неясной этиологии».
Образцы крови матери и ребенка направлены в лабораторию для проведения иммуногематологического и молекулярно-генетического анализа. Результаты исследований: НРА-генотип матери: НРА-lbb, 2aa, 3ab, 4aa, 5ab, 15ab. НРА-генотип ребенка: НРА-lab, 2ab, 3ab, 4aa, 5ab, 15aa.
Коэффициент аутосенсибилизации к тромбоцитам у матери — 2,6%, у ребенка — 0,8% (оба значения в пределах нормы).
Методом проточной цитометрии в сыворотке крови матери выявлены антитела, адсорбирующиеся на 58,8% тромбоцитов ребенка (в норме не более 3%).
Заключение. Установлен высокий генетически обусловленный риск развития НАИТ по антигену НРА-1а (генотип матери НРА-lbb). В сыворотке крови матери выявлены ал-лоантитела к тромбоцитам ребенка. Лабораторный диагноз: «аллоиммунная тромбоцитопения новорожденного».
Пример 2. Новорожденный М., 4-й день жизни, родился от третей беременности, вторых родов. Срок гестации 35 нед. Масса тела при рождении 2440 г. Число тромбоцитов в периферической крови при рождении 80* 109/л, на 4-й день жизни — 85*109/л. Уровень гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в норме. При объективном осмотре клинических проявлений тромбоцитопении нет, очагов инфекции не выявлено, стигмы дизэмбриогенеза отсутствуют. Число тромбоцитов в периферической крови матери 85* 109/л. Клинический диагноз: «тромбоцитопения неясной этиологии».
IMMuNOLOGY
Образцы крови матери и ребенка направлены в лабораторию для проведения иммуногематологического и молекулярно-генетического анализа. Результаты исследований: НРА-генотип матери: НРА-laa, 2aa, 3bb, 4aa, 5ab, 15ab. НРА-генотип ребенка: НРА-laa, 2aa, 3bb, 4aa, 5aa, 15aa.
Коэффициент аутосенсибилизации к тромбоцитам у матери — 6,3%, у ребенка — 1,8% (в норме не более 5%).
Методом проточной цитометрии в сыворотке крови матери выявлены антитела, адсорбирующиеся на 10,3% тромбоцитов ребенка (в норме не более 3%).
Заключение. НРА-генотипы матери и ребенка иммуноло-гически совместимы. В сыворотке крови матери выявлены антитела, реагирующие как с собственными тромбоцитами, так и с тромбоцитами ребенка.
Лабораторный диагноз: «трансиммунная тромбоцитопе-ния новорожденного».
Пример 3. Новорожденный Н., 3-й день жизни, родился от первой беременности, первых родов. Срок гестации 34 нед. Масса тела при рождении 2020 г. Число тромбоцитов в периферической крови при рождении 70*109/л, на 4-й день жизни — 55*109/л. Уровень гемоглобина и эритроцитов ниже нормы, лейкоцитов — в норме. При объективном осмотре выявляется петехиальная сыпь на нижних конечностях, очагов инфекции не обнаружено. Число тромбоцитов в периферической крови матери 145* 109/л.
Клинический диагноз: «тромбоцитопения неясной этиологии».
Образцы крови матери и ребенка направлены в лабораторию для проведения иммуногематологического и молекулярно-генетического анализа. Результаты исследований: НРА-генотип матери: НРА-lab, 2aa, 3ab, 4aa, 5ab, l5ab. НРА-генотип ребенка: НРА-lab, 2aa, 3ab, 4aa, 5aa, l5aa.
Коэффициент аутосенсибилизации к тромбоцитам у матери — 0,3%, у ребенка — 0,8% (в норме не более 5%).
Методом проточной цитометрии в сыворотке крови матери антитела к тромбоцитам ребенка не выявлены — 0,3% (в норме не более 3%).
Заключение. НРА-генотипы матери и ребенка иммуноло-гически совместимы. Антитромбоцитарные ауто- и аллоан-титела не выявлены.
Лабораторный диагноз: «данных за иммунную тромбоци-топению не получено».
Таблица 2
Алгоритм диагностики иммунной тромбоцитопении новорожденного
Диагностический критерий Возможный диагноз в соответствии с полученными лабораторными данными
НРА-генотипы матери и ребенка несовместимы* Да Нет Нет Нет Да Нет
В крови матери присутствуют антитромбоци-тарные аутоантитела Нет Да Нет Да Нет Нет
В крови ребенка присутствуют антитромбо-цитарные аутоантитела Нет Нет Да Нет Нет Нет
В сыворотке крови матери выявлены аллоан-титела к тромбоцитам ребенка Да Да Нет Да/ нет Нет Нет
Заключение 1 2 3 4 5 6
Примечание. * — генотипы расцениваются как несовместимые при выявлении одного или нескольких сочетаний генов НРА у матери и ребенка: НРА-1ЬЬ/НРА-1аЬ; НРА-5аа/НРА-5аЬ; НРА-15аа/НРА-1аЬ.
ИММУНОЛОГИЯ
Обсуждение. Важность своевременной и правильной диагностики иммунной тромбоцитопении неоспорима. Анализ полученных результатов позволяет назначить ребенку адекватную медикаментозную терапию, выбрать совместимые компоненты крови для трансфузий, определить возможность грудного вскармливания, установить риск развития иммунной тромбоцитопении у следующих детей в семье.
Представленный в данной работе алгоритм диагностики включал:
1. Определение совместимости НРА-генотипов матери и ребенка.
2. Исследование аутосенсибилизации у матери для определения возможности влияния материнских аутоантител на число тромбоцитов у ребенка.
3. Диагностика аутоиммунной тромбоцитопении у ребенка.
4. Определение антител в сыворотке крови матери к тромбоцитам ребенка — диагностика НАИТ.
Оценка результатов исследования представлена в табл. 2. Выводы
1. Диагностирована аллоиммунная тромбоцитопения новорожденного.
2. Диагностирована трансиммунная тромбоцитопения новорожденного.
3. Диагностирована аутоиммунная тромбоцитопения у ребенка.
4. Диагностирована аутосенсибилизация к антигенам тромбоцитов у матери.
5. Диагностирован генетически обусловленный риск развития АИТН без выявленных антитромбоцитарных антител. Исследование антител следует повторить через 2—6 нед.
6. Данных за иммунную тромбоцитопению новорожденного не получено.
Представленный алгоритм исследований апробирован в лаборатории иммуногематологии Кировского НИИ гематологии и переливания крови при диагностике причин тромбо-цитопении. Полученные лабораторные данные соответствуют клинической картине заболевания.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
ЛИТЕРАТУРА (п.п. 2, 4, 6—10, 12—23 см. REFERENCES)
1. Масчан А.А., Румянцев А.Г. Иммуно-опосредованные тромбоцитопении новорожденных: дифференциальный диагноз и принципы терапии. Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2010; 9(3): 13—8. 3. Закиров И.И., Сафина А.И. Тромбоцитопении новорожденных. Вестник современной клинической медицины. 2013; 6(6): 102—7.
5. Головкина Л.Л., Кутьина Р.М. Влияние различий донора и реципиента по тромбоцитспецифическим антигенам на длительность нейтропении и тромбоцитопении у больных после алломиелотрансплантации. Онкогематология. 2009; (1): 39—43.
11. Масчан А.А., Румянцев А.Г. Иммунная тромбоцитопения у детей: от консенсуса в терминологии к консенсусу в лечении. Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2010; 9(1): 5—13.
24. Бутина Е.В., Зайцева Г.А., Исаева Н.В., Васкина Е.А., Докшина И.А. Способ определения аутоантител к тромбоцитам. Патент РФ № 2488114; 2013.
25. Бутина Е.В., Зайцева Г.А., Исаева Н.В. Определение IgG, связанного с тромбоцитами, у пациентов с тромбоцитопенией. Клиническая лабораторная диагностика. 2014; 59(10): 23—5.
26. Головкина Л.Л. Антигены тромбоцитов и их значение в медицине (обзор литературы). Гематология и трансфузиология. 2010; (4): 24—31.
27. Минеева Н.В., Кробинец И.И., Блинов М.Н., Капустин С.И. Антигены и антитела к тромбоцитам (обзор литературы). Онкогематология. 2013; 8(3): 60—8.
Поступила 12.04.16
REFERENCES
1. Maschan A.A., Rumyantsev A.G. Immune-mediated thrombocytopenia newborns: differential diagnosis and treatment principles. Voprosy gematologii, onkologii i immunopatologii v pediatrii. 2010; 9(3): 13—8. (in Russian)
2. Skogen В., Killie M.K., Kjeldsen-Kragh J., Ahlen M.T., Tiller H., Stuge T.B. et al. Reconsidering fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia with a focus on screening and prevention. Expert Rev. Hematol. 2010; 3(5): 559—66.
3. Zakirov I.I., Safina A.I. Neonatal thrombocytopenia. Vestnik sovre-mennoy klinicheskoy meditsiny. 2013; 6(6): 102—7. (in Russian)
4. Bassler D., Greinacher A., Okascharoen C., Klenner A., Ditomasso J., Kiefel V. et al. A systematic review and survey of the management of unexpected neonatal alloimmune thrombocytopenia. Transfusion. 2008; 48(1): 92—8.
5. Golovkina L.L., Kut'ina R.M. Effect of donor and recipient differences in platelet specific antigens on the duration of neutropenia and thrombocytopenia in patients after allomyelotransplantation. Onkogematologiya. 2009; (1): 39—43. (in Russian)
6. Arnold D.M., Smith J.W., Kelton J.G. Diagnosis and management of neonatal alloimmune thrombocytopenia. Transfus. Med. Rev. 2008; 22(4): 255—67.
7. Kjeldsen-Kragh J., Skogen B. Mechanisms and prevention of alloimmunization in pregnancy. Obstet. Gynecol. Surv. 2013; 68(7): 526—32.
8. Sainio S., Javela K., Tuimala J., Koskinen S. Usefulness of maternal an-ti-HPA-1a antibody quantitation in predicting severity of foetomaternal alloimmune thrombocytopenia. Transfus. Med. 2013; 23(2): 114—20.
9. Kjeldsen-Kragh J., Ni H., Skogen B. Towards a prophylactic treatment of HpA-related foetal and neonatal alloimmune thrombocy-topenia. Curr. Opin. Hematol. 2012; 19(6): 469—74.
10. Porcelijn L., Van den Akker E.S., Oepkes D. Fetal thrombocytopenia. Semin. Fetal. Neonatal. Med. 2008; 13: 223—30.
11. Maschan A.A., Rumyantsev A.G. Immune thrombocytopenia in children: from consensus on the terminology to the consensus in the treatment. Voprosy gematologii, onkologii i immunopatologii v pediatrii. 2010; 9(1): 5—13. (in Russian)
12. Kjeldsen-Kragh J., Kim M., Killie M.K., Husebekk A., Freedman J. In HpA 1a-immunized women the decrease in anti-HpA 1a antibody level during pregnancy is not associated with anti-idiotypic antibodies. Haematologica. 2009; 94(3): 441—3.
13. Wu G.G., Kaplan C., Curtis B.R., Pearson H.A. Report of the 14th international society of blood transfusion platelet immunology workshop. Vox Sang. 2010; 99(4): 375—81.
14. Kamphuis M.M., Paridaans N., Porcelijn L., De Haas M., Van Der Schoot C.E., Brand A. et al. Screening in pregnancy for fetal or neonatal alloimmune thrombocytopenia: systematic review. BJOG. 2010; 117(11): 1335—43.
15. Killie M.K., Husebekk A., Kjeldsen-Kragh J., Skogen B. A prospective study of maternal anti-HPA 1a antibody level as a potential predictor of alloimmune thrombocytopenia in the newborn. Haemato-logica. 2008; 93: 870—7.
16. Ghevaert C., Campbell K., Walton J. Management and outcome of 200 cases of fetomaternal alloimmune thrombocytopenia. Transfusion. 2007; 47: 901—10.
17. Serrarens-Janssen V.M., Semmekrot B.A., Novotny V.M. Fetal/neonatal alloimmune thrombocytopenia (FMAIT): past, present and future. Obstet. Gynecol. Surv. 2008; 63: 239—52.
18. Vinograd C.A., Bussel J.B. Antenatal treatment of fetal alloimmune thrombocytopenia: a current perspective. Haematologica. 2010; 95: 1807—11.
19. Espinoza J.P., Caradeux J., Norwitz E.R., Illanes S.E. Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Rev. Obstet. Gynecol. 2013; 6(1): 15—21.
20. Kaplan C. Neonatal alloimmune thrombocytopenia. Haematologica. 2008; 93: 805—7.
Russian clinical laboratory diagnostics. 2016; 61(10)
DOI 10.18821/0869-2084-2016-61-10-719-722
microbiology
21. Bakchoul T., Bertrand G., Krautwurst A., Kroll H., Bein G., Sachs 25. U.J. et al. The implementation of surface plasmon resonance technique in monitoring pregnancies with expected fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Transfusion. 2013; 53(9): 2078—85.
22. Knight M., Pierce M., Allen D. The incidence and outcomes of feto- 26. maternal alloimmune thrombocytopenia: a uK national study using
three data sources. Br. J. Haematol. 2011; 52: 460—8.
23. Scheffer P., Soussan A., Verhagen O. Noninvasive fetal genotyping 27. of human platelet antigen-1a. BJOG. 2011; 118: 1392—5.
24. Butina E.V., Zaytseva G.A., Isaeva N.V., Vaskina E.A., Dokshina I.A. Method for Detection of Platelet Autoantibodies. Patent RF № 2488114; 2013. (in Russian)
Butina E.V., Zaytseva G.A., Isaeva N.V. The detection of throm-bocytebound IgG in patients with thrombocytopenia. Kliniches-kaya laboratornaya diagnostika. 2014; 59(10): 23—5. (in Russian)
Golovkina L.L. Platelet antigens and their importance in medicine (literature review). Gematologiya i transfuziologiya. 2010; (4): 24— 31. (in Russian)
Mineeva N.V., Krobinets I.I., Blinov M.N., Kapustin S.I. Platelet antigens and antibodies (literature review). Onkogematologiya. 2013; 8(3): 60—8. (in Russian)
Received 12.04.16
МИКРОБИОЛОГИЯ
© коллектив авторов, 2016
УДК 616.313-006.04-07:616.31-022
Червинец в.М.1, Червинец Ю.в.1, Лебедев С.Н.1, Беляева Е.А.1, Трошин А.в.1, Червинец А.в.1, Миронов А.Ю.2
АДГЕЗИВНАЯ И АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МИКРОФЛОРЫ ПОЛОСТИ РТА БОЛЬНЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ ЯЗЫКА
ТБОУ вПО «Тверской государственный медицинский университет» Минздрава РФ, г. Тверь;
2ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора, г. Москва, Российская Федерация
Представлены данные о степени адгезии и антагонизма микроорганизмов полости рта больных злокачественными новообразованиями языка. Установлено, что патогенная иусловнопатогенная микрофлора обладает в основном высокой и реже средней степенью адгезии, нормальная — средней и низкой; 90% лактобацилл полости рта не проявляют антагонизма в отношении патогенных и условнопатогенных микроорганизмов. Антагонизм энтеробактерий, стафилококков к лактобациллам отсутствует. Стафилококки, в том числе продуцирующие в-лактамазы и метициллинрезистентные, в 95% случаев являются антагонистами стрептококков. Клинические изоляты Candida albicans оказывают антагонистическую активность в отношении 90% лактобацилл, 20% стрептококков.
К л ю ч е в ы е с л о в а: полость рта; рак языка; микрофлора; адгезия; антагонизм.
Для цитирования: Червинец В.М., Червинец Ю.В., Лебедев С.Н., Беляева Е.А., Трошин А.В, Червинец А.В., Миронов А.Ю. Адгезивная и антагонистическая активность микрофлоры полости рта больных злокачественными новообразованиями языка. Клиническая лабораторная диагностика. 2016; 61 (10): 719-722. DOI: 10.18821/0869-2084-201661-10-719-722
Tchervinets V.M.1, Tchervinets Yu.V.1, LebedevS.N.1, BelyaevaE.A.1, TroshinA.V.1, TchervinetsA.V.1, MironovA.Yu.2 THE adhesive AND ANTAGONISTIC activity of microflora OF ORAL cavity IN PATIENTS with malignant neoplasms of tongue
1The Tverskoii state medical university of Minzdrav of Russia, Tver, Russia;
2The G.N. Gabrichevskii Moscow research institute of epidemiology and microbiology of Rospotrebnadzor, 125212 Moscow, Russia
The data concerning the degree of adhesion and antagonism ofmicroorganisms of oral cavity in patients with malignant neoplasms of tongue is presented. it is established that pathogenic and conditionally pathogenic microflora has more mainly high and less infrequent degree of adhesion. the normal microflora has average and low degree of adhesion. About 90% of lactobacilla of oral cavity manifest no antagonism concerning pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms. The antagonism of enterobacteria, staphylococcii and lactobacilla is absent. The staphylococci, including producing в-lactamase and methicillin-resistant ones, in 95% of cases are antagonists to streptococcii. The clinical isolates Candida albicans show antagonistic activity related to 90% of lactobacilli and 20%% of streptococci.
Keywords: oral cavity; cancer of tongue; microflora; adhesion; antaganism
For citation: Tchervinets V.M., Tchervinets Yu.V., Lebedev s.N., Belyaeva E.A., Troshin A.V., Tchervinets A.V., Mironov A.Yu. The adhesive and antagonistic activity of microflora of oral cavity in patients with malignant neoplasms of tongue. Kliniches-kaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2016; 61 (10):719-722 (in Russ.)
DOI: 10.18821/0869-2084-2016-61-10-719-722
Д л я к о р р е с п о н д е н ц и и: Червинец Вячеслав Михайлович, д-р мед.наук, проф., зав. каф. микробиологии и вирусологии с курсом иммунологии ГБОУ ВПО Тверской ГМУ Минздрава России, 170100, Тверь, e-mail: chervinets@mail.ru
